胚胎嗅鞘细胞移植治疗肌萎缩侧索硬化症的近期疗效(英文)

目的探讨人胚胎嗅鞘细胞（olfactory ensheathing cells，OECs）移植治疗肌萎缩侧索硬化症（amyotrophic lateral sclerosis，ALS）患者的近期安全性和有效性。方法回顾性分析2003年2月～2006年4月，采用OECs移植手术治疗的327例ALS患者的临床资料。男241例，女86例。年龄20～84岁（51．6±11．1岁）。病程4．8个月～13年（2．9±2．0年）。根据细胞植入部位分为3组：A组29例，细胞植入脊髓内；B组（6例），细胞分别植入脊髓及双额叶放射冠；c组292例，细胞植入双额叶放射冠。脊髓移植方法，病变处分两点共注入50μlOECs悬液，细胞数约1×10^5个。脑部移植方法，双侧大脑放射冠处各注射50μlOECs悬液，细胞数约2×10^6个。结果随访4周，比较术前和随访肌萎缩侧索硬化症功能量表分数变化。A组17．2±8．6增至20．1±9．7（P〈o．05），B组24．2±6．8增至25．7±6．6（P〉0．05），C组20．3±8．6增至22．0±9．4（P〈0．001），3组间改善程度差异无统计学意义（P〉0．05）。4周神经功能总改善252例（77．1％）。术后4周行肌电图检查的患者261例（79．8％）显示术后自发电位减少或消失，收缩时肌电波幅较术前明显降低，电位密度明显增加。16例（4．9％）术后出现不良反应，包括头痛、短期发热、癫痫大发作、中枢神经系统感染、肺炎、呼吸衰竭、泌尿系感染、心力衰竭及肺栓塞，其中4例（1．2％）死亡。结论OECs移植术后4周能阻止或逆转ALS的病情恶化。

人胚胎嗅鞘细胞与神经干细胞联合移植修复大鼠脊髓全横断损伤的研究

目的:探索人胚胎嗅鞘细胞(hOECs)与神经干细胞(hNSCs)联合移植修复大鼠脊髓全横断损伤的可行性。方法:制作Wistar大鼠脊髓全横断模型,9—10d后,分别将取材自人胎脑的hOECs和hNSCs移植到脊髓损伤处(联合移植组),并设hOECs移植组、hNSCs移植组和对照组,移植术后第1、2、4、6、8、10周进行BBB运动功能评分,取材行荧光化学(Hoechst33342)和免疫组织化学染色(P75、NF-200、GFAP、Synaptophysin)观察。结果:术后4—10周,hNSCs组、hOECs组和联合移植组的BBB评分较对照组明显提高(P<0.05),其中,联合移植组的运动功能改善更显著。免疫组化染色显示,hNSCs可以在损伤脊髓内存活10周以上,并分化为神经元或星形胶质细胞,联合移植组和hOECs组P75染色呈阳性反应,hOECs与hNSCs联合移植可促进神经突触的形成,恢复神经元之间的联系。结论:hOECs和hNSCs联合移植可促进脊髓全横断损伤大鼠神经突触的再生,改善其肢体运动功能。

人胚胎嗅鞘细胞移植修复大鼠脊髓全横断损伤

[目的]探索人胚胎嗅鞘细胞（hOECs）移植修复大鼠脊髓全横断损伤的可行性。[方法]分离、培养并鉴定人胚嗅鞘细胞，24只Wistar大鼠，随机分为实验组和对照组，均行T10节段脊髓全横断。术后第9～10d，实验组、对照组分别移植Hoechst33342标记的hOECs 5μl（2．5×10^5个细胞）、DMEM—F12培养基5μl。移植术后第1、2、4、6、8、10周进行BBB运动功能评分，取材行荧光化学（Hoechsd3342）和免疫组织化学染色（P75、NF-200、Synaptophysin）。双盲条件下进行数据统计。[结果]移植的hOECs可以在损伤脊髓内存活10周以上，可向损伤脊髓头尾两端迁移；术后4～10周实验组的BBB运动功能评分明显高于对照组（P〈0．01）；P75染色实验组呈阳性反应；NF-200和Synaptophysin免疫组化染色，实验组神经纤维、突触数目和密度都较对照组高。[结论]hOECs移植对脊髓全横断损伤大鼠运动功能恢复具有促进作用。

用于临床移植的不同时期人胚胎嗅鞘细胞的形态学变化

目的:建立体外培养纯化人胚嗅鞘细胞的模型,观察不同时期人胚嗅鞘细胞形态学变化。方法:采用无血清培养技术,差速贴壁+免疫吸附的纯化方法,培养并纯化取自3～7个月人胚嗅球的嗅鞘细胞。根据GFAP免疫组化染色结果统计培养所得嗅鞘细胞纯度。结果:此培养方法可获得大量、高纯度的嗅鞘细胞。结论:成功培养了人胚嗅鞘细胞,为进一步临床移植应用研究提供纯度较高的人胚嗅鞘细胞。

人胚胎嗅鞘细胞植入鼠半横断脊髓的初步观察(英文)

目的观察人胚胎嗅鞘细胞(olfactoryensheathingcells,OECs)移植对成鼠脊髓轴突再生的影响。方法将分离、纯化、培养2周的人胚胎OECs,移植于10只成年SD大鼠半横断胸髓(T10)的两端;对照组10只同样方法给予等量的DMEM培养液。6周后组织切片,行HE染色、嗜银染色以及髓鞘碱性蛋白(MBP)和抗神经生长因子受体抗体(NGFR)免疫组化检查。结果OECs移植组6周后脊髓大体标本显示初步愈合现象;组织学观察,OECs呈NGFR阳性表达,显示OECs仍然存活,且与宿主组织整和良好;部分再生轴突长入断端间组织,呈MBP阳性表达。结论人胚胎OECs对成鼠胸髓损伤后的轴突再生有促进作用。