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利用胚胎干细胞试验模型评价矮壮素的发育毒性 被引量:6
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作者 孔丹 郝卫东 +3 位作者 蒋建军 尚兰琴 魏雪涛 时褔礼 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2015年第4期260-265,271,共7页
目的:利用胚胎干细胞试验模型评价矮壮素的发育毒性。方法:以DMSO为阴性对照,使用不同剂量(7.8125、15.625、31.25、62.5、125、250、500、1 000μg/m L)的矮壮素染毒小鼠胚胎干细胞D3(ES-D3)和3T3成纤维细胞,观察矮壮素对ES-D3细胞向... 目的:利用胚胎干细胞试验模型评价矮壮素的发育毒性。方法:以DMSO为阴性对照,使用不同剂量(7.8125、15.625、31.25、62.5、125、250、500、1 000μg/m L)的矮壮素染毒小鼠胚胎干细胞D3(ES-D3)和3T3成纤维细胞,观察矮壮素对ES-D3细胞向心肌细胞分化的影响,以及对ES-D3和3T3细胞的细胞毒性,在此基础上,根据发育毒性判别公式对矮壮素致畸性进行判定。提取ES-D3分化抑制试验中的拟胚体总RNA,进行real-time PCR,在基因水平检测矮壮素对ES-D3向各胚层分化的影响。结果:1 000μg/m L矮壮素染毒可明显促进体外培养ES-D3、3T3细胞增殖;250μg/m L的矮壮素作用下,观察到具有心肌细胞收缩的拟胚体数仅占接种拟胚体总数的69.4%;1 000μg/m L矮壮素能够影响ES-D3向心肌细胞分化的基因标志物(Nkx2.5,α-MHC)的表达。结论:无法利用判别公式对矮壮素进行发育毒性评价;矮壮素在不引起3T3、ES-D3细胞毒性的水平下,影响ES-D3向心肌细胞的分化,有产生胚胎毒性的可能。 展开更多
关键词 矮壮素 植物生长调节剂 发育毒性 胚胎干细胞试验模型
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胚胎干细胞试验预测胚胎毒性替代方法进展 被引量:3
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作者 程树军 秦瑶 +1 位作者 喻欢 陈彧 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第1期81-85,共5页
小鼠胚胎干细胞试验(EST)是通过ECVAM正式验证的胚胎和发育毒性的动物试验替代方法。在新技术的推动下,多项优化的EST方法通过基因转染、利用人来源的干细胞、增加检测通量、组合检测终点、量化检测指标等方式,提高了EST方法预测胚胎毒... 小鼠胚胎干细胞试验(EST)是通过ECVAM正式验证的胚胎和发育毒性的动物试验替代方法。在新技术的推动下,多项优化的EST方法通过基因转染、利用人来源的干细胞、增加检测通量、组合检测终点、量化检测指标等方式,提高了EST方法预测胚胎毒性的科学相关性和检测效率。在整合测试策略的原则之下,经过大规模化学物质的前验证和标准化试验,新的EST方法可单独或作为组合试验的一部分可以应用于先导药物的研发和化学品的胚胎毒性预测及机制研究。 展开更多
关键词 胚胎干细胞试验 胚胎和发育毒性 替代方法 预测
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应用胚胎干细胞试验模型对碱性成纤维细胞生长因子发育毒性的初步评价 被引量:1
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作者 许华 邓淑琴 +3 位作者 何清 苏本金 江海香 黄亚东 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期347-351,共5页
目的利用小鼠胚胎干细胞试验(EST)模型,初步评价bFGF的发育毒性。方法体外培养小鼠胚胎干细胞(ESC),通过形态学观察、碱性磷酸酶染色和RT-PCR方法进行ESC未分化鉴定;MTT法检测不同浓度bFGF对ESC和3T3细胞的毒性,RT-PCR半定量分析法检测b... 目的利用小鼠胚胎干细胞试验(EST)模型,初步评价bFGF的发育毒性。方法体外培养小鼠胚胎干细胞(ESC),通过形态学观察、碱性磷酸酶染色和RT-PCR方法进行ESC未分化鉴定;MTT法检测不同浓度bFGF对ESC和3T3细胞的毒性,RT-PCR半定量分析法检测bFGF对未分化基因Sox-2表达的影响。结果 bFGF对ESC和3T3的半数抑制浓度和ESC的半数抑制分化浓度分别为IC50ESC=15.2 mg.L-1,IC50 3T3=24.2 mg.L-1,ID50 ESC=1.7 mg.L-1。结论 bFGF发育毒性的判定为弱胚胎毒性。 展开更多
关键词 小鼠胚胎干细胞 胚胎干细胞试验模型 碱性成纤维细胞生长因子 Sox-2胚胎毒性 发育毒性
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胚胎干细胞试验评价化妆品化合物的胚胎毒性
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作者 陈蕊’ 陈静 +1 位作者 程树军 项鹏 《北京日化》 2011年第2期15-20,共6页
欧盟化妆品法规(第7次修正)提出了替代化妆品动物实验的时问表,这一法规促使化妆品成分胚胎毒性体外测试体外方法获得认可。胚胎干细胞试验(EST)是目前经欧洲替代方法验证中心(ECVAM)验证的最理想的预测化合物胚胎毒性的体外方... 欧盟化妆品法规(第7次修正)提出了替代化妆品动物实验的时问表,这一法规促使化妆品成分胚胎毒性体外测试体外方法获得认可。胚胎干细胞试验(EST)是目前经欧洲替代方法验证中心(ECVAM)验证的最理想的预测化合物胚胎毒性的体外方法。本研究选择化妆品相关的6种化合物,氢醌、丁子香酚、肽酸酯、三氧化二锑(III)、硝酸钕(III)和三聚氰胺,用EST法研究其潜在胚胎毒性,以5-氟尿嘧啶和青霉素G分别为阳性和阴性对照。通过计算三个终点IC503T3、IC50ES和ID50,由预测模型(PM)判断胚胎毒性。氢醌、丁子香酚和三氧化二锑(III)是强胚胎毒性物,肽酸酯、硝酸钕(III)和三聚氰胺是弱胚胎毒性物。本研究结果为EST方法应用到化妆品领域以外的领域提供有用的参考。 展开更多
关键词 化妆品 胚胎毒性 胚胎干细胞试验
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应用胚胎干细胞试验(EST)评价邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)的胚胎毒性 被引量:4
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作者 崔栋 杨淋清 +9 位作者 罗凌凤 黄海燕 吴德生 夏菠 周丽 黄新凤 刘建军 徐新云 庄志雄 何云 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期123-126,共4页
目的利用小鼠胚胎干细胞试验(EST)模型,初步评价邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)的胚胎毒性。方法采用悬滴悬浮法培养小鼠胚胎干细胞(m ESCs),观察受试物对m ESCs分化能力的影响,结合CCK-8法判断受试物对m ESCs及小鼠胚胎成纤维细胞(3T3... 目的利用小鼠胚胎干细胞试验(EST)模型,初步评价邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)的胚胎毒性。方法采用悬滴悬浮法培养小鼠胚胎干细胞(m ESCs),观察受试物对m ESCs分化能力的影响,结合CCK-8法判断受试物对m ESCs及小鼠胚胎成纤维细胞(3T3)的细胞毒性结果,预测受试物的胚胎毒性。用已知强胚胎毒性化合物5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-FU)、无胚胎毒性化合物青霉素-G(P-G)对模型进行有效性验证,并将经过验证的EST模型用于评价受试物DEHP的胚胎毒性。结果利用建立的EST模型对5-FU、P-G胚胎毒性进行评价,结果表明5-FU为强胚胎毒性,P-G为无胚胎毒性,与文献报道一致;DEHP对m ESCs和3T3的半数抑制浓度分别为IC50m ESCs=315μmol/L(126μg/ml),IC503T3=307μmol/L(122.8μg/ml),m ESCs的半数抑制分化浓度为ID50m ESCs=323μmol/L(129.2μg/ml),经EST模型判断公式计算得出该化合物为弱胚胎毒性化合物。结论建立的EST模型的有效性验证结果与ECVAM的结论一致,可用于胚胎毒性的筛选和评价;经EST模型评价DEHP的胚胎毒性为弱胚胎毒性。 展开更多
关键词 小鼠胚胎干细胞(m ESCs) 胚胎干细胞试验(EST) 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP) 胚胎毒性
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应用胚胎干细胞试验对多菌灵胚胎毒性的初步评价 被引量:2
6
作者 周韧 程薇 +1 位作者 冯艳 王艳 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期128-131,共4页
目的应用胚胎干细胞(ESC)和胚胎干细胞试验(EST),初步评价多菌灵的胚胎毒性,并探讨可能的毒性机制。方法应用Alarma Blue法检测多菌灵对ESC和3T3成纤维细胞活性的影响;未分化的ESC体外经悬滴、悬浮培养后用10-4mol/L抗坏血酸诱导分化为... 目的应用胚胎干细胞(ESC)和胚胎干细胞试验(EST),初步评价多菌灵的胚胎毒性,并探讨可能的毒性机制。方法应用Alarma Blue法检测多菌灵对ESC和3T3成纤维细胞活性的影响;未分化的ESC体外经悬滴、悬浮培养后用10-4mol/L抗坏血酸诱导分化为具搏动能力的心肌细胞,暴露于不同浓度的多菌灵(0、1、2.5、5、10和20 nmol/L),在分化终点即第10天时获取分化细胞的RNA,并检测细胞多能性基因Oct4和心肌特异性基因α-MHC的相对表达量,计算多菌灵对ESC分化的半数抑制剂量。根据EST的评价标准,对多菌灵的胚胎毒性进行评价。结果多菌灵对3T3细胞和ESC细胞的存活率随着多菌灵浓度的增加而显著降低,ESC对多菌灵毒性更敏感;1 nmol/L多菌灵使Oct4的表达量显著升高,而2.5、5、10和20 nmol/L多菌灵使Oct4的表达量显著降低;随着多菌灵浓度的增加,α-MHC基因表达量逐渐降低,呈剂量-效应关系。多菌灵经EST评价为强胚胎毒性化合物。结论多菌灵具强胚胎毒性,其对ESC细胞活性及多能性基因影响显著可能是其作用的机制之一。 展开更多
关键词 胚胎干细胞试验 胚胎毒性 多菌灵
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中药生殖毒性体外实验研究进展 被引量:2
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作者 张志伟 汪受传 +1 位作者 徐建亚 单进军 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2016年第4期89-91,共3页
生殖毒性作为中药学重要研究内容之一,是中药安全性研究的重要组成部分。目前对中药生殖毒性研究评价主要采用国内外新药临床前安全性评价指南所推荐的三阶段试验,然而存在费用高、实验周期长等缺点。欧洲替代方法研究中心(ECVAM)所推... 生殖毒性作为中药学重要研究内容之一,是中药安全性研究的重要组成部分。目前对中药生殖毒性研究评价主要采用国内外新药临床前安全性评价指南所推荐的三阶段试验,然而存在费用高、实验周期长等缺点。欧洲替代方法研究中心(ECVAM)所推荐的胚胎干细胞试验、胚胎细胞微团培养试验及全胚胎培养试验等体外替代试验已应用于中药生殖、胚胎毒性的研究。该文就中药单体或复方生殖毒性体外试验评价的现状,对体外替代试验方法及其优缺点、必要性等进行了讨论。 展开更多
关键词 中药 生殖毒性 胚胎干细胞试验 胚胎细胞微团培养试验 胚胎培养试验
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中药生殖毒性研究思路和方法 被引量:18
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作者 韩佳寅 易艳 +6 位作者 梁爱华 张宇实 李春英 赵雍 卢禹婷 崔宏玉 李桂琴 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1498-1503,共6页
中药生殖毒性研究是中药安全性研究的重要组成部分。与传统中医理论中妊娠禁忌不同,现代所说的中药生殖毒性不仅包括药物致流产、胎儿死亡,还包括药物对受胎能力、生殖系统、胚胎发育及胎仔出生后发育的潜在不良影响,以及药物诱导畸胎... 中药生殖毒性研究是中药安全性研究的重要组成部分。与传统中医理论中妊娠禁忌不同,现代所说的中药生殖毒性不仅包括药物致流产、胎儿死亡,还包括药物对受胎能力、生殖系统、胚胎发育及胎仔出生后发育的潜在不良影响,以及药物诱导畸胎产生的可能性。目前的中药生殖毒性评价主要采用国内外新药临床前安全性评价指南推荐的三阶段生殖毒性试验。此外,全胚胎培养、胚胎干细胞试验等体外替代胚胎毒性评价方法也用于在中药胚胎毒性评价。本文结合传统中医药特点就现代中药生殖毒性研究进展和中药新药生殖毒性评价方法等内容进行综述。 展开更多
关键词 中药 三阶段生殖毒性试验 胚胎培养试验 胚胎细胞微团培养试验 胚胎干细胞试验
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ECVAM验证的生殖发育毒性测试替代方法及其改进 被引量:3
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作者 张丽 张利军 +1 位作者 郭家彬 彭双清 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期458-461,共4页
生殖发育毒性试验可用来评估化学物的暴露对生殖和发育过程的危害和风险,对其进行优选、筛查和标记。现有生殖发育毒性评价方法是根据大剂量动物毒性的阳性结果推断风险。随着动物福利3R原则的推进以及大量新化合物的涌现和待筛选。
关键词 生殖发育毒性 胚胎干细胞试验 微团试验 胚胎培养
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Effect of electroacupuncture on oocyte quality and pregnancy of patients with PCOS undergoing in vitro fertilization and embryo transfer 被引量:6
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作者 崔薇 李静 +1 位作者 孙伟 闻姬 《World Journal of Acupuncture-Moxibustion》 2012年第1期23-29,共7页
Objective To observe the impacts of electroacupuncture (EA) on oocyte quality and pregnant outcome for the patients with polycystic ovary syndrome (PCOS) undergoing in vitro fertilization and embryo transfer (IVF... Objective To observe the impacts of electroacupuncture (EA) on oocyte quality and pregnant outcome for the patients with polycystic ovary syndrome (PCOS) undergoing in vitro fertilization and embryo transfer (IVF-ET) and explore its potential mechanism. Methods Sixty-six patients with PCOS and undergoing IVF-ET were divided into two groups randomly, including an observation group (34 cases) and a control group (32 cases). Ethinylestradiol and cyproterone acetate tablets and gonadotropin-releasing hormone agonist were administered for long-program superovulation in either group. In the observation group, the intervention of EA was applied to Guānyuán (关元 CV 4), Zhōngjí (中极 CV 3), Sānyīnjiāo (三阴交 SP 6), Zǐgōng (子宫 EX-CA 1) and Tàixī (太溪 KI 3) additionally for 30 min, once daily, 1 menstrual cycle before controlled ovarian hyperstimulation (COH) and during COH. The pregnant outcome, evaluation of kidney deficiency syndrome, blood hormone level on the day of human chorionic gonadotropin injection and the concentrations of stem cell factor (SCF) in the serum and follicular fluid on the day of oocyte collection were compared between the two groups. Results The score of kidney deficiency symptoms was reduced remarkably after treatment in either group and the improvement in the observation group was superior to that in the control group (P0.01). The fertilization rate [(76.25?±?20.33)% vs (66.34?±?15.44)%], cleavage rate [(98.66?±?3.70)% vs (94.47?±?9.45)%] and the rate of high-quality embryos [(60.20?±?22.20)% vs (50.55?±?16.15)%] in the observation group were all superior to those in the control group separately (all P0.05). Clinical pregnancy rate (46.67%, 14/30) in the observation group was higher than that (37.93%, 11/29) in the control group, but without statistical difference (P0.05). SCF concentrations in the serum and follicular fluid on the day of oocyte collection in the observation group were higher obviously than those in the control group (both P0.05). Conclusion Electroacupuncture plays an active role in the pregnant outcomes of PCOS patients undergoing IVF-ET and it can relieve the symptoms of kidney deficiency in terms of TCM and improve clinical pregnant rate. The mechanism is relevant to the overall adjustment of organic endocrinal system and the local micro-environment of ovary and the improvement of oocyte quality through the up-regulation of SCF concentration. 展开更多
关键词 polycystic ovary syndrome ELECTROACUPUNCTURE in vitro fertilization and embryo transfer (IVF-ET) stem cell factor randomized controlled trial
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