Y染色体AZFc(全部)微缺失对体外受精胚胎整倍体的影响

目的:分析Y染色体AZFc微缺失患者行胚胎植入前遗传学检测(PGT)囊胚整倍体情况。方法:回顾性分析2013年1月至2021年12月期间南京医科大学第一附属医院生殖医学中心因AZFc微缺失行胚胎植入前整倍体遗传学检测的临床资料,并设同期行PGT助孕的单基因病患者为对照组。比较两组患者的基本特征、受精率、D3优质胚胎率、囊胚形成率、胚胎整倍体率、45,X胚胎比例等。结果:共纳入患者220例,其中AZFc微缺失组91例,单基因病组129例。两组患者的年龄差异均无统计学意义。在精液参数方面,AZFc微缺失组精子浓度、精子总数及前向运动比例均低于单基因病组,差异具有统计学意义(P=0.001)。除了中AZFc微缺失组受精率低于单基因病组(P=0.012),获卵数、Day 3优胚率、囊胚形成率差异无统计学意义。总共有933枚囊胚成功进行了遗传学检测,其中AZFc微缺失组496枚囊胚,单基因病组437枚囊胚。AZFc微缺失组胚胎整倍体率、非整倍体率及嵌合体率分别为:57.26%,24.60%,18.14%,而单基因病组分别为:66.13%,23.80%,10.07%,两组差异具有统计学意义(P=0.001)。对两组非整倍体胚胎进一步分析发现,AZFc微缺失组异常频率最高的染色体分别为16(3.87%)、X(3.46%)、13(2.44%)、22(2.24%)和19(2.03%),而单基因病分别为22(4.35%)、16(2.97%)、7(2.74%)、15(1.60%)和2(1.60%)。AZFc微缺失组性染色体异常比例高于单基因病组(P=0.039),而两组胚胎中出现45,X比例差异无统计学意义。结论:与单基因病组相比,AZFc微缺失胚胎整倍体率下降,45,X胚胎比例无明显上升。通过PGT选择整倍体女性胚胎,不仅可以避免AZFc微缺失的垂直传播,还可以降低因非整倍体胚胎导致的流产风险。

低分子肝素及胚胎植入前非整倍体检测对不明原因复发性流产患者妊娠结局的影响

目的:比较行胚胎植入前非整倍体检测(PGT-A)助孕和未行PGT-A助孕的不明原因复发性流产(URSA)患者应用低分子肝素(LMWH)后临床结局的差异。方法:回顾分析2016年1月1日至2022年5月17日URSA患者于郑州大学第三附属医院生殖医学科首次移植冷冻囊胚共1158个周期的临床资料,按移植前是否行PGT-A分为PGT-A组(行PGT-A+ICSI,315例)和非PGT-A组(行IVF/ICSI,843例),再根据移植日是否使用LMWH分为肝素组和非肝素组,为调整混杂因素进行1∶5倾向性评分匹配(PSM),对PSM后患者数据进行分析,比较两组患者种植率、临床妊娠率、流产率、早期流产率、活产率及单胎活产围产结局的差异。对非PGT-A组和PGT-A组PSM前数据、肝素PGT-A组和肝素非PGT-A组临床妊娠结局进行多因素logistic回归分析。结果:非PGT-A组中,肝素组和非肝素组的不孕年限差异有统计学意义(P<0.05),种植率(33.8%vs 32.1%,P=0.610)、临床妊娠率(45.4%vs 43.8%,P=0.733)、流产率(28.0%vs 28.4%,P=0.958)、早期流产率(23.8%vs 25.4%,P=0.797)、活产率(31.9%vs 30.1%,P=0.671)比较差异无统计学意义(P>0.05)。PGT-A组中,肝素组和非肝素组的女方体质量指数(BMI)比较差异有统计学意义(P<0.05),种植率(59.8%vs 57.6%,P=0.763)、临床妊娠率(59.4%vs 57.6%,P=0.806)、流产率(20.4%vs 14.7%,P=0.448)、早期流产率(16.4%vs 14.7%,P=0.803)、活产率(46.9%vs 49.2%,P=0.752)比较差异无统计学意义(P>0.05)。非PGT-A组中,肝素组和非肝素组内获得单胎活产患者的围产期结局比较差异均无统计学意义(P>0.05);PGT-A组中,肝素组较非肝素组小于胎龄儿(10.3%vs 0.8%,P=0.023),差异有统计学意义(P<0.05),余获得单胎活产患者的围产期结局差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:行PGT-A助孕和未行PGT-A助孕的URSA患者应用LMWH并不能改善其妊娠结局,且行PGT-A助孕应用LMWH患者的围产期小于胎龄儿发生风险显著升高。

生长激素预处理在胚胎植入前染色体非整倍体检测中的应用研究

目的研究生长激素(GH)预处理对整倍体的改善及妊娠结局的影响。方法前瞻性分析行胚胎植入前染色体非整倍体检测(PGT-A)助孕的134例患者,其中30例行自身对照,104例行组间对照。根据是否添加GH分为GH预处理组和GH非预处理组,GH预处理为促性腺激素(Gn)启动前行4~6周的GH 2 U/d皮下注射,Gn启动日剂量加倍直至扳机日,GH非预处理为未用过GH处理。前次PGT-A周期失败后一年内再次行PGT-A时予GH预处理构成自身对照组。组间对照和自身对照分别比较各组间的基本情况、囊胚情况及助孕结局。结果无论组间对照还是自身对照,GH预处理后的HCG日子宫内膜厚度、卵巢敏感指数(OSI)、获卵数、MII卵数、2PN数、2PN受精率、可利用卵母细胞率、活检囊胚数、整倍体囊胚数、整倍体囊胚率、至少一个整倍体率均明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05),GH预处理后的Gn总量、Gn天数、嵌合体囊胚数、嵌合体囊胚率无明显变化,差异均无统计学意义,GH预处理后的种植率、临床妊娠率均有提高,但差异均无统计学意义。结论GH预处理可以明显增加行PGT-A患者的整倍体数和整倍体率,并有改善妊娠结局的趋势。

激动剂长方案与拮抗剂方案对胚胎整倍体率的影响

目的探讨促性腺激素释放激素类似物(GnRH-a)的选择对胚胎植入前非整倍体遗传学检测(PGT-A)周期胚胎整倍体率以及临床妊娠率的影响。方法选取2017年1月—2020年10月于山东大学生殖医学研究中心进行PGT-A周期的卵巢储备良好的年轻女性为研究对象(共359个周期、1475个囊胚),根据促排卵方案分为拮抗剂组(n=157)、激动剂组(n=202)。应用单因素分析比较两组的基线参数、促排卵及取卵周期参数,并将差异有统计学意义的参数纳入Logistic回归模型进行多因素分析。其中主要观察指标为胚胎整倍体率,次要指标为临床妊娠率。结果单因素分析结果显示,激动剂组与拮抗剂组比较,优质囊胚率(41.4%vs 42.9%,P=0.335)、囊胚整倍体率(56.1%vs 52.6%,P=0.171)、冻融胚胎移植(CET)临床妊娠率(69.2%vs 63.2%,P=0.289)差异均无统计学意义。平衡女方年龄、BMI、MⅡ卵子数、多囊卵巢综合征(PCOS)诊断、促性腺激素(Gn)用量、人体毛绒膜促性腺激素(HCG)用量等参数后,选择GnRH激动剂或拮抗剂进行垂体抑制与胚胎整倍体率及临床妊娠率差异均无统计学意义(P>0.05)。对卵巢储备好的年轻患者而言,其获卵数与胚胎整倍体率差异有统计学意义(P=0.04,OR=1.02,95%CI:1.00~1.04)。结论GnRH激动剂长方案和拮抗剂方案的选择不会影响胚胎整倍体率及临床妊娠率。因此在全胚冷冻周期中,对卵巢储备功能正常及卵巢高反应的年轻女性进行卵巢刺激可灵活选用拮抗剂方案和激动剂长方案。

胚胎植入前单基因遗传学检测患者胚胎整倍体率的影响因素分析

目的探讨胚胎植入前单基因遗传学检测(preimplantation genetic testing for monogenic diseases,PGT-M)患者中胚胎整倍体率的影响因素。方法回顾性纳入北京大学第三医院生殖医学中心行PGT-M的患者599例,按女方年龄分为3个亚组:<35岁、35~37岁和38~40岁。采用Spearman相关分析患者各临床特征与胚胎整倍体率的相关性,并采用广义线性回归分析两个或以上临床特征对胚胎整倍体率的影响。结果Spearman相关分析结果显示,在年龄<35岁组,胚胎整倍体率与获卵数呈负相关(r=-0.080,P=0.048);38~40岁组中胚胎整倍体率与获卵数呈正相关(r=0.279,P=0.011)。线性回归分析结果显示,在调整年龄因素后,<35岁组胚胎整倍体率与获卵数的相关性无统计学意义(P=0.865);而38~40岁亚组中胚胎整倍体率与获卵数呈正相关(β=0.234,P=0.037)。结论在PGT-M患者中未发现胚胎整倍体率的危险因素。在高龄(38~40岁)患者中,获卵数增加或可提高胚胎整倍体率。

胚胎植入前染色体非整倍体检测在不同适应证中的助孕结局分析

目的 分析胚胎植入前染色体非整倍体检测(PGT-A)在不同适应证中的助孕结局。方法 回顾性分析PGT-A助孕的549对夫妻,按PGT-A适应证分6组,反复妊娠丢失(304例)、反复种植失败(57例)、高龄(38岁及以上,80例)、不良妊娠史(绒毛染色体三体或不良妊娠,24例)、男性因素不育(67例)、性染色体数目异常(17例),比较基本情况、获卵及胚胎活检情况、妊娠结局。结果 各组之间平均年龄、促性腺激素(Gn)使用天数差异有统计学意义(P<0.001)。各组之间平均获卵数、优质胚胎率、嵌合胚胎率、异常胚胎率、胚胎活检正常率及平均卵巢敏感性指数(OSI)差异有统计学意义(P=0.03、P<0.001、P=0.03、P<0.001、P<0.001、P<0.001);高龄组异常胚胎率在6组中最高,平均获卵数、平均OSI及胚胎活检正常率最低。6组每取卵周期临床妊娠率及持续妊娠率、累积妊娠率差异有统计学意义(P<0.001),6组每移植周期临床妊娠率及持续妊娠率、除男性因素不育组外其余5组之间累积妊娠率差异无统计学意义。结论 PGT-A可检出整倍体胚胎移植,提高妊娠效率;高龄人群有正常胚胎移植,也可获得较好的妊娠率,可能缩短其“抱婴回家”时间。同时,PGT-A可大幅提高因男性因素不育人群的妊娠结局。

既往自然流产次数对不明原因反复妊娠丢失患者胚胎整倍体率及累积妊娠结局的影响

目的研究既往自然流产次数对不明原因反复妊娠丢失(uRPL)患者胚胎整倍体率和胚胎植入前非整倍体检测(PGT-A)后妊娠结局的影响。方法回顾性选取2015—2021年于山东大学附属生殖医院第1次行PGT-A治疗的不明原因uRPL的女性患者共799例,根据既往自然流产次数分为3组:既往自然流产次数2次(445例)、3次(251例)和≥4次(103例),并按照年龄(≤37岁、>37岁)进行分层分析,在不同年龄组中分别比较3组的胚胎整倍体率、优质囊胚形成率、累积活产率和累积临床妊娠丢失率。采用多因素logistic回归模型分析累积活产率、临床妊娠丢失率和胚胎整倍体率的相关因素。结果患者年龄为(34.7±5.1)岁。≤37岁患者[分别为48.9%(539/1103)、50.6%(354/700)和52.1%(152/292),P=0.567]和>37岁患者[分别为26.2%(103/393)、28.8%(55/191)和20.5%(16/78),P=0.377]既往自然流产次数2、3和≥4次组间胚胎整倍体率差异均无统计学意义。≤37岁患者中,与既往自然流产次数2和3次组相比,≥4次组累积活产率较低[分别为52.6%(153/291)、52.8%(93/176)和34.3%(25/73),P=0.014],累积临床妊娠丢失率较高[分别为15.8%(31/196)、15.3%(18/118)和46.9%(23/49),P<0.001]。校正年龄、体质指数、抗苗勒管激素、人绒毛膜促性腺激素日子宫内膜厚度和窦卵泡数后,在≤37岁的患者中,既往流产次数≥4次是累积活产率(OR=0.461,95%CI:0.263~0.807,P=0.007)和累积临床妊娠丢失率(OR=4.382,95%CI:2.165~8.873,P<0.001)的相关因素;在>37岁的患者中,既往流产次数与累积活产率、临床妊娠丢失率和胚胎整倍体率无相关性。结论在uRPL人群中,≥4次自然流产会降低≤37岁患者的累积活产率,增加累积临床妊娠丢失率。

女性体质量指数与胚胎倍性及临床结局的相关性

目的:分析女性的体质量指数(BMI)是否影响胚胎倍性,并探讨其与整倍体胚胎移植临床结局的相关性。方法:共纳入随机分配至胚胎植入前非整倍体遗传学检测(PGT-A)组的606例不孕症女性,根据BMI将PGT-A患者分为4组:体重过低(<18.5 kg/m^(2),45例)、正常(18.5~24.9kg/m^(2),407例)、超重(25~29.9kg/m^(2),130例)和肥胖(≥30kg/m^(2),24例)。分析四组患者基于二代测序(NGS)技术的PGT-A检测结果、整倍体胚胎移植妊娠结局、新生儿结局及妊娠期并发症。结果:BMI<18.5kg/m^(2)、18.5~24.9 kg/m^(2)、25~29.9kg/m^(2)和≥30kg/m^(2)组的整倍体率分别为70.37%、69.63%、70.00%和69.44%,累积活产率分别为82.22%、77.39%、75.38%和75.00%,差异均无统计学意义(P>0.05)。调整潜在混杂因素后,各组间的胚胎倍性及临床结局各项指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在预后良好人群中,女性BMI与胚胎倍性和临床结局无明显相关性。

无创胚胎植入前非整倍体筛查的诊断有效性分析

【目的】探讨无创胚胎植入前非整倍体筛查(niPGT-A)的诊断有效性。【方法】收集并再次分析了2018年7月到2019年7月期间,在中山大学附属第六医院生殖医学中心因染色体相互易位,或罗氏易位经首次滋养层细胞(TE)活检(TE1)行植入前,遗传学检测被诊断为非整倍体或嵌合的患者捐献胚胎24枚。解冻捐赠胚胎行滋养层细胞活检(TE2)、内细胞团活检(ICM)并收集囊胚培养液/囊胚腔液(BCM/BF)通过高通量测序技术获得遗传信息。以ICM的结果为胚胎真实染色体结果,比较TE1、TE2及BCM/BF的核型一致性。【结果】TE1、TE2及BCM/BF与相应的ICM的核型一致性分别为66.7%,87.5%和79.2%(P>0.05),任意两组之间的差异没有统计学意义(P>0.05)。【结论】利用囊胚培养液/囊胚腔液中的游离DNA行无创胚胎植入前非整倍体筛查可以获得与同期活检的TE2和ICM相似的诊断有效性。

胚胎植入前染色体非整倍体检测试剂盒评价

目的 使用胚胎植入前染色体非整倍体国家参考品,评价胚胎植入前染色体非整倍体检测试剂盒(半导体测序法)的性能。方法 取国家参考品进行细胞裂解及片段化,制备文库,进行文库的扩增和单细胞扩增后纯化。将纯化的单细胞扩增DNA片段化和纯化后,进行末端修复、加上接头以及PCR扩增等步骤,构建文库。将文库纯化后进行定量。使用基因测序仪BioelectronSeq 4000进行测序。使用试剂盒配套的全自动分析软件对测序数据进行信息分析,报告样本的染色体异常情况。结果 对于65个异常片段大于4 Mb的国家阳性参考品,试剂盒均能检出对应的染色体异常,检出率为100%;国家阳性参考品19-del(7)-25.3 M在7号染色体100.5 Mb-125.8 Mb位置存在片段大小约25.3 Mb的拷贝数缺失,Z-score为-28.6,其他国家阳性参考品的相应异常区域对应的染色体Z-score均>3或<-3。对于15个异常片段小于等于4 Mb的国家阳性参考品,对应的染色体异常检出率为86.7%(13/15);国家阳性参考品22-del(7)-1.5 M在7号染色体72.1 Mb-73.6 Mb位置存在片段大小约1.5 Mb的拷贝数缺失,其Z-score为-8.1。国家阳性参考品30-dup(17)-1.9M的17号染色体Z-score为2.0,未检测到相应异常区域,国家阳性参考品100-NC4-dup(Xq12)-1.4M的X染色体Z-score为1.1,未检测到相应异常区域,其他13个国家阳性参考品的相应异常区域对应的染色体Z-score均>3或<-3。10个国家阴性参考品均未检出试剂盒范围内的染色体异常,其Z-score均小于3且大于0,显著性水平P-value>0.0001;如国家阴性参考品97-NC1在1-22号染色体和性染色体区域内均未检测出异常区域。对30%嵌合的嵌合体样本检出率为50%(3/6),相对应的70%嵌合体样本检出率为83.3%(5/6);国家嵌合体参考品110-0.3-del(4)-37.7M中,30%嵌合比例细胞在4号染色体153.1 Mb-190.8 Mb位置存在大小约37.7 Mb拷贝数缺失,其Z-score为-16.5;70%嵌合比例细胞的在15号染色体23.6 Mb-28.5 Mb位置存在大小约4.9 Mb拷贝数缺失,其Z-score为-10.5,结果显示30%嵌合和70%嵌合的细胞均正确检出。结论 胚胎植入前染色体非整倍体检测试剂盒能够符合胚胎植入前染色体非整倍体国家参考品的要求。

胚胎植入前非整倍体筛查的研究进展

胚胎植入前非整倍体筛查是选择染色体数目正常的胚胎用于体外受精/单精子卵胞浆内显微注射周期的移植,目前采用荧光原位杂交方法可以分析5条或9条染色体。本文主要概述胚胎植入前非整倍体筛查在高龄待孕妇女、早期不明原因习惯性流产、反复植入失败者中应用,在这些情况中发生非整倍体的概率较高,正常胚胎鉴定和非整倍体的排除有利于提高体外受精-胚胎移植的胚胎植入率和妊娠率。其外简明介绍其他的新方法在胚胎植入前非整倍体筛查中研究进展。

胚胎植入前非整倍体检测:囊胚形态学评分有指导作用吗?

目的评价囊胚形态学评分在PGT-A周期中的指导作用。方法回顾性分析2019年1~12月在本中心行PGT-A检查的474枚囊胚的形态学评分及相关临床资料,按照活检时间不同分为D5组(204枚)和D6组(270枚),比较不同囊胚评级与整倍体率及活产率的关系;又将244枚BB级囊胚按照不同囊胚扩张程度分为<4期、4期和>4期3组,比较D5或D6活检时不同囊胚扩张程度对整倍体率和活产率的影响。结果474枚囊胚中,D5活检囊胚中,一般囊胚的整倍体率显著高于较差囊胚(56.59%vs.37.50%,P=0.025);D6活检囊胚中,一般囊胚的整倍体率亦显著高于较差囊胚(58.26%vs.37.24%,P=0.005)。通过PGT-A获得233枚整倍体胚胎,移植126枚,移植D5、D6各不同评级囊胚的活产率均无显著性差异(P>0.05)。244枚BB级囊胚中,D5活检的各扩张程度囊胚整倍体率无显著性差异(P>0.05);D6活检的扩张程度<4期囊胚整倍体率显著低于4期囊胚(25.00%vs.62.20%,P=0.026)。移植的72枚BB级整倍体囊胚中,移植D5、D6不同扩张程度囊胚亚组间活产率均无显著性差异(P>0.05)。结论对发育速度较慢(D6囊胚)、扩张程度<4期的较差囊胚[内细胞团(ICM)和滋养外胚层细胞(TE)评级低于BB级]进行PGT-A检测更具意义。经PGT-A筛查获得的整倍体胚胎,建议优先选择发育速度较快(D5囊胚)的整倍体胚胎进行移植。

移植整倍体胚胎的女性年龄与妊娠结局的关系

目的探讨移植了经胚胎植入前遗传学检测(PGT)技术筛选出的整倍体胚胎的女性年龄与妊娠结局的关系。方法回顾性分析2015年1月至2019年10月于西北妇女儿童医院生殖中心接受第一周期PGT筛选的344个周期及对应的首次冻融胚胎移植周期患者资料,根据胚胎移植时女方年龄分为4组:A组(<30岁,n=155)、B组(30~34岁,n=145)、C组(35~37岁,n=31)和D组(≥38岁,n=13)。比较分析各组间临床妊娠率、流产率以及活产率的差异。结果4组患者间体重指数(BMI)、月经第2~4天基础激素水平(FSH、LH、E 2)、窦卵泡数(AFC)、正常受精率、第3天胚胎形成率、整倍体胚胎检出率均无统计学差异(P>0.05)。随着女性患者年龄增加,囊胚形成率逐渐降低(P<0.05)。4组间临床妊娠率、流产率、活产率均无统计学差异(P>0.05)。结论不同年龄组女性患者移植整倍体胚胎后,其妊娠结局没有显著差异;间接推测高龄孕妇妊娠率下降、流产率增高的主要原因可能是胚胎非整倍体率增加。

外源性促性腺激素用量对胚胎非整倍体率的影响

目的探讨外源性促性腺激素(Gn)用量对胚胎非整倍体率的影响。方法回顾性分析2016年1月至2019年6月在本中心基于二代测序技术的植入前非整倍体检测(PGT-A)周期患者的临床资料。根据年龄分为<37岁组、37~40岁组和>40岁组,并根据Gn累积使用量分为Gn<1500 U组(A组)、1500 U≤Gn≤3000 U组(B组)和Gn>3000 U组(C组),比较不同年龄组间以及同年龄组内三种Gn用量间的胚胎非整倍体率。结果三个年龄组胚胎非整倍体率分别为43.6%、61.0%、73.7%,组间有显著性差异(P<0.01);三个年龄组内,不同Gn用量组间的囊胚非整倍体率均无显著差异(P均>0.05)。结论在PGT-A周期中,年龄越大胚胎非整倍率越高;外源性Gn用量对胚胎非整倍体率无明显影响。

胚胎植入前非整倍体遗传学检测对高龄女性活产率的影响及相关因素分析

目的探讨胚胎植入前非整倍体遗传学检测(preimplantation genetic testing for aneuploidies,PGT-A)对高龄(≥38岁)女性妊娠结局的影响,并分析影响高龄女性PGT-A活产率的相关因素。方法采用回顾性队列研究纳入2019年1月–2023年6月行PGT-A助孕的高龄女性患者首次取卵周期,采用倾向性评分匹配同期行体外受精/卵母细胞浆单精子注射(in vitro fertilization/intracytoplasmic sperm injection,IVF/ICSI)助孕的高龄患者首次取卵周期作为对照组(非PGT-A组),PGT-A组与非PGT-A组各纳入193周期,随访至2024年1月,其中2019年1月–2022年10月间进行的取卵周期均完成活产随访。比较两组间临床妊娠结局,主要结局指标为每取卵周期累积活产率,次要结局指标为每取卵周期累积临床妊娠率、自然流产率。纳入PGT-A组完成活产随访的145周期,采用二元logistic回归分析和受试者工作特征(ROC)曲线分析影响其活产率的相关因素。结果两组完成活产随访周期分别为:PGT-A组145周期、非PGT-A组161周期,PGT-A组每取卵周期累积活产率为25.52%(37/145),非PGT-A组为28.50%(46/161),两组差异无统计学意义。两组各193取卵周期中,PGT-A组有53周期、非PGT-A组有72周期获得临床妊娠,每取卵周期累积临床妊娠率差异有统计学意义(27.46%vs.37.31%,P<0.05)。临床妊娠中,PGT-A组自然流产率低于非PGT-A组,差异有统计学意义(7.55%vs.25.00%,P<0.05)。接受PGT-A助孕的高龄女性,女性年龄[比值比(OR)=0.786,95%置信区间(CI):0.635~0.973]、窦卵泡数量(antral follicle count,AFC)(OR=1.110,95%CI:1.013~1.216)与活产结局相关,随女性年龄增加及AFC减少,获得活产的概率下降,当女性年龄≥42岁或AFC≤8个,行PGT-A助孕预期活产结局差。结论PGT-A不影响高龄女性每取卵周期累积活产率,但可有效减少由于非整倍体胚胎所致植入失败及自然流产风险。对接受PGT-A助孕的高龄女性,年龄及AFC是影响活产结局的重要因素。

基于Array-CGH技术的胚胎植入前遗传学诊断在XYY综合征患者中的应用

目的评估基于Array-CGH技术的植入前遗传学诊断(PGD)对超雄综合征(XYY综合征)患者胚胎染色体进行分析的应用效果。方法研究选取行PGD助孕的5例XYY患者及15例染色体易位患者,对两组的女方年龄、精子浓度、前向运动精子比例、获卵数、第二次减数分裂中期(MII)卵子数、优质胚胎数、染色体异常率进行比较。结果 XYY组和染色体易位组在女方年龄、精子浓度、PR、获卵数、MII卵子数、优质胚胎数均差异无统计学意义,PGD检测结果中,两组的染色体异常率差异无统计学意义。XYY组活检21枚胚胎,其中10枚胚胎为常染色体异常,1枚为性染色体异常。非整倍体率为52.38%,常染色体异常为47.62%,性染色异常为4.80%。结论 XYY综合征患者行体外受精时有和男性染色体易位患者类似的胚胎染色体异常率,Array-CGH可同时检测XYY综合征患者全部染色体情况,避免大量异常胚胎植入女方体内,有利于降低子代出生缺陷,值得临床应用。

基于波塞冬标准的卵巢低反应人群胚胎非整倍体率分析

目的基于波塞冬标准分析卵巢低反应(poor ovarian response,POR)人群的胚胎非整倍体率,探究卵巢储备评估指标对卵子质量的预测价值。方法基于2017年1月至2020年12月期间于山东大学附属生殖医院生殖遗传科行胚胎移植前非整倍体筛查(preimplantation genetic testing for aneuploidies,PGT-A)助孕的患者临床资料,进行回顾性病例对照研究。根据年龄和卵巢储备水平参照波塞冬标准分为POR 1组,即非高龄非预期POR组[年龄<35岁,抗苗勒管激素(anti-Müllerian hormone,AMH)≥1.2μg/L,获卵数≤9枚,258个周期];POR 2组,即高龄非预期POR组(年龄≥35岁,AMH≥1.2μg/L,获卵数≤9枚,397个周期);POR 3组,即非高龄低储备组(年龄<35岁,AMH<1.2μg/L,获卵数≤9枚,99个周期);POR 4组,即高龄低储备组(年龄≥35岁,AMH<1.2μg/L,获卵数≤9枚,377个周期)。以年龄为匹配因素,选取卵巢储备及卵巢反应均正常女性设立非POR组作为对照(非POR 1组、非POR 2组、非POR 3组和非POR 4组,AMH≥1.2μg/L,获卵数>9枚)。根据各组样本量差异,对非高龄组进行1∶2倾向性评分匹配(propensity score matching,PSM;POR 1组比非POR 1组;POR 3组比非POR 3组),高龄组进行1∶1 PSM(POR 2组比非POR 2组;POR 4组比非POR 4组)。胚胎整倍体率和非整倍体率作为主要观察指标,获卵数、MⅡ(成熟卵子)数、双原核(two pronuclei,2PN)数、检测囊胚数、胚胎整倍体数、非整倍体数、嵌合体胚胎数/率作为次要观察指标。结果POR 1~4组的获卵数[7.0(6.0,9.0)枚、7.0(5.0,8.0)枚、6.0(4.0,9.0)枚和5.0(3.0,7.0)枚]和检测囊胚数[3.0(2.0,4.0)枚、2.0(1.0,3.0)枚、3.0(2.0,4.0)枚和2.0(1.0,3.0)枚]均显著少于同龄非POR 1~4组[获卵数:16.0(13.0,20.0)枚、14.0(11.0,17.0)枚、16.0(13.0,20.0)枚、13.0(11.0,17.0)枚,均P<0.001;检测囊胚数:4.0(3.0,6.0)枚、3.0(2.0,5.0)枚、4.0(3.0,6.0)枚、3.0(2.0,5.0)枚,均P<0.001]。非POR 4组在校正重复取卵周期、PGT-A指征、促排卵方案和促性腺激素用量后,POR 4组胚胎非整倍体率显著高于非POR 4组(OR=1.252,95%CI:1.053~1.488,P=0.011),POR 1组、2组、3组患者与相应的非POR 1、2、3组相比,胚胎非整倍体率差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论高龄(≥35岁)女性卵巢储备异常降低不仅减少了获卵数,而且因影响卵子质量进而导致胚胎整倍体率下降、非整倍体率上升;而非高龄(<35岁)女性卵巢储备降低主要影响获卵数。

不同授精方式的冷冻囊胚行植入前遗传学筛查的临床结局比较

目的:比较IVF和ICSI两种授精方式产生的冻胚活检结果、妊娠结局及其对后代的影响。方法:根据冷冻囊胚授精方式将患者分为IVF组和ICSI组,比较两组囊胚冷冻复苏后的存活率、遗传学检测结果、妊娠及子代出生结局。结果:IVF组的平均年龄显著高于ICSI组,差异有统计学意义[(35.53±4.23)岁vs(33.95±3.75)岁,P=0.003]。IVF组和ICSI组的解冻后囊胚存活率(第一次解冻存活率:98.86%vs 98.74%,P=0.77;第二次解冻存活率:99.18%vs 100%,P=1.000)、囊胚整倍体率(46.45%vs 47.01%,P=0.874)、移植后临床妊娠率(63.07%vs 56.25%,P=0.246)以及活产率(47.87%vs 40.91%,P=0.271)等比较,差异均无统计学意义。IVF组和ICSI组的妊娠期并发症(17.82%vs 27.78%,P=0.203)、围产期并发症(1.98%vs 2.78%,P=0.779)以及新生儿合并症(0.99%vs 5.56%,P=0.108)发生率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:在冻胚活检中,无论是IVF来源的囊胚还是ICSI来源的囊胚,均显示出相似的临床结局。

小鼠囊胚培养液用于染色体筛查的研究

目的:利用小鼠囊胚培养液探讨无创胚胎植入前非整倍体筛查(niPGT-A)的可行性,为优化和发展无创胚胎植入前遗传学筛查技术提供理论依据和数据支持。方法:本研究共收集11枚小鼠囊胚,同一囊胚分别取少量滋养外胚层细胞(TE)作为金标准、内细胞团(ICM)细胞作为阳性对照、胚胎培养液(BCM)作为待验证样本。所有胚胎样本基于全基因组测序数据进行染色体状态分析,并比较同一胚胎不同样本间染色体倍性一致性。结果:在11枚小鼠囊胚中,BCM、TE和ICM的PGT-A检出率分别为82.8%(9/11)、72.7%(8/11)和100%(11/11)。BCM与TE、BCM与ICM及TE与ICM的染色体一致性分别为85.7%(6/7),88.9%(8/9),87.5%(7/9),任意两组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在小鼠模型中,相比于同期活检的滋养外胚层细胞,利用囊胚培养液中的游离DNA行无创胚胎植入前非整倍体检测可获得更高的检出率和更为准确的染色体检测结果。

控制性促排期间使用促性腺激素累计用剂量对囊胚整倍体率的影响

目的分析胚胎植入前非整倍体遗传学检测(PGT-A)患者行控制性促排期间使用外源性促性腺激素累计用量对于囊胚染色体整倍体率的影响。方法选取2018年10月至2020年7月武汉大学人民医院生殖医学中心诊治的63例PGT-A患者共计69个周期的临床资料进行回顾性分析。统计患者及配偶年龄、促性腺激素累计用量、不孕年限、不良妊娠次数等因素,比较不同因素组间获取囊胚整倍体率是否存在差异。采用二元Logistic回归分析年龄、不良妊娠次数、促性腺激素累计用量等因素与获得囊胚整倍体率的相关性。结果①不同患者年龄组间囊胚整倍体率比较,差异具有统计学意义(χ^(2)=12.031,P=0.001);不同配偶年龄组间囊胚整倍体率比较,差异无统计学意义(χ^(2)=3.552,P=0.059)。②不同不孕年限组间囊胚整倍体率比较,差异无统计学意义(χ^(2)=0.950,P=0.330)。③不同不良妊娠次数组间囊胚整倍体率比较,差异具有统计学意义(χ^(2)=4.986,P=0.026)。将上述相关因素纳入二元Logistic回归分析,结果显示,外源性促性腺激素累计用量与囊胚整倍体呈负性相关(P=0.020,OR=0.999,95%CI为0.998~1.000)。结论大剂量使用促性腺激素是获得胚胎整倍体率偏低的危险因素。