鸡胚胎期肌纤维形成相关miRNAs的筛选与分析

研究旨在挖掘鸡胚胎期肌纤维形成相关miRNAs,为进一步探究miRNA在肌肉发育过程中的调控机制提供理论基础。研究采集玫瑰冠鸡、科宝鸡胚胎期第8天(E8)和第14天(E14)腿肌组织进行HE染色和small RNA测序,通过生物信息学分析差异表达miRNAs,随机选择14个差异表达的miRNAs进行荧光定量PCR(qRT-PCR)验证结果的准确性。结果显示,玫瑰冠鸡、科宝鸡E8的肌纤维直径和横截面积极显著小于E14(P<0.01),E8的肌纤维密度极显著高于E14(P<0.01)。通过生物信息学分析,在12个测序文库中共鉴定出2455个已知miRNAs和329个新的miRNAs,其中在E8和E14(C8TvsC14T_R8TvsR14T)中筛选出499个差异表达miR-NAs。GO富集结果显示,差异miRNA靶基因在细胞迁移、代谢过程、细胞增殖、细胞发育和小分子结合等GO条目中显著富集。KEGG富集分析发现,大量的靶基因富集到与细胞周转和代谢相关的信号通路中,同时富集到TGF-β、Notch、Hedgehog、Wnt、FoxO等与肌肉发育相关的信号通路。miRNA-mRNA联合分析结果表明,miR-3594-3p-APOBEC2、miR-1635-FHL3/MEF2D、miR-193-3p-HDAC3、miR-1724-PRKAG3、miR-1698-PRKAG3等互作对可能是调控鸡胚胎期肌纤维形成和肌肉发育的重要因子。研究表明,鸡胚胎期肌纤维形成受到多种miRNAs和信号通路的调控,筛选出miR-3594-3p、miR-1635、miR-193-3p、miR-1724、miR-1698等miRNAs可能在肌纤维形成过程中发挥重要作用。

公猪胚胎期和成年期睾丸组织转录组差异分析

睾丸是雄性动物的生殖器官,具有产生雄激素和雄性生殖细胞的功能。因此,睾丸的发育形态对猪养殖生产具有重大影响。本实验选取DLY公猪胚胎期(妊娠105 d)和成年期(日龄200 d)睾丸为研究对象,对睾丸组织进行形态学观察和高通量转录组测序,并对差异表达基因进行功能富集分析。形态学观察结果表明:相较于雄性胎猪,成年公猪生精小管直径更大,生精上皮更厚,已有完整的生精结构,并可见各发育阶段精子细胞。转录组测序结果表明,共鉴定出6296个差异表达基因。差异基因显著富集在精子发生、多细胞生物发育和细胞分化等生物过程,可能在代谢、细胞黏附、细胞周期和AMPK等通路发挥作用。本研究结果揭示了公猪胚胎期和成年期睾丸组织的形态学和转录组学的差异,为后期猪睾丸发育研究提供参考。

鸡胚胎期肌纤维的发育特征及相关基因表达研究

为探讨玫瑰冠鸡胚胎期肌纤维发育特性及肌肉发育相关基因(Myod、Myf5、MyoG、Pax3、MYH1B等)对肌纤维特性的影响,采集第7胚龄(E7D)、第14胚龄(E14D)腿肌和胸肌组织,通过组织化学法分析胚胎期肌纤维的发育变化,同时测定肌肉发育相关基因表达量。结果表明:E7D的腿肌肌纤维直径极显著小于E14D(2.682μm<5.825μm),E7D的腿肌肌纤维横截面积极显著小于E14D(5.680μm^(2)<26.687μm^(2)),E7D的腿肌肌纤维密度极显著高于E14D(41567.084根/mm^(2)>27460.647根/mm^(2));胸肌测定结果与腿肌一致,但同一胚龄腿肌肌纤维直径、横截面积均大于胸肌,密度小于胸肌;E7D的腿肌和胸肌中慢肌纤维比例极显著高于快肌纤维,E14D的快肌纤维比例极显著高于慢肌纤维;相关性分析表明,Myod、Myf5、Pax3与肌纤维直径、横截面积、密度密切相关,MyoG、MYH1B与快肌纤维形成显著正相关,Pax3与慢肌纤维形成密切相关。综上,随着胚龄的增长,肌纤维直径、面积逐渐增大,E7D的腿肌和胸肌中肌纤维类型主要为慢肌纤维,而E14D时以快肌纤维为主。本研究揭示了影响肌肉发育相关基因与胚胎期腿肌、胸肌纤维发育的关系,为玫瑰冠鸡的开发利用提供理论依据。

WNT信号通路关键基因WNT5a和WNT10b在猪胚胎期毛囊的表达规律

毛发是人和动物的重要生理特征,研究表明,猪可以作为人类毛发研究的良好模式动物。本实验通过采集猪胚胎期毛囊发育重要时期的皮肤样本,利用实时荧光定量PCR技术,检测WNT(Wingless-Type MMTVIntegrationSiteFamily)信号通路中关键基因WNT5a和WNT10b在猪胚胎期毛囊发育关键时间节点的mRNA表达量,探究WNT信号通路在猪胚胎期毛囊发生发育中的作用。结果显示,WNT5a基因在猪毛囊发育诱导期高表达,其中在胚胎期39 d表达量极显著升高,在胚胎期41 d(基板形成时期)表达量极显著降低;在器官形成期和细胞分化期表达量均低于诱导期。WNT10b基因在诱导期表达量较低,在胚胎期41 d表达量极显著升高,在器官形成期和细胞分化期的临界点胚胎期85 d表达量极显著升高,之后又极显著降低。本研究结论表明,WNT5a,WNT10b参与了猪毛囊早期发育的调控过程,其中WNT5a、WNT10b均促进毛囊基板形成,WNT10b促进毛囊细胞分化。

彩色多普勒超声对胚胎期胎盘位置判定的效果分析

目的探讨彩色多普勒超声对胚胎期胎盘位置判定的效果。方法回顾性分析我院接收的胚胎期孕妇162例,所有孕妇均接受彩色多普勒超声检查,记录多普勒超声检查结果,对孕妇进行随访直至分娩,比较多普勒超声对胚胎期胎盘位置判定结果与实际胎盘位置的差异。结果彩色多普勒超声检查孕囊囊壁最厚处位置、孕囊血流最丰富处位置对胎盘位置的判定结果与实际胎盘位置对比差异无统计学意义(P>0.05),而胚芽位置、卵黄囊位置与实际胎盘位置对比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论利用彩色多普勒超声检查孕妇孕囊囊壁最厚处与血流最丰富处可实现对胚胎期胎盘位置的准确判定,能帮助医师尽早明确胎盘异常情况并积极进行干预,以实现母婴结局的改善。

母鸡限饲对子代胚胎期脂类代谢相关血液指标的影响

【目的】研究肉种鸡产蛋期限饲对子代胚胎期脂肪代谢相关血清生化指标和激素水平的影响。【方法】分别选用东北农业大学自繁高、低脂系肉种母鸡各384只,分为两个处理组。产蛋期:处理组一饲喂正常日粮,处理组二饲喂量是正常组的75%,产蛋高峰期收集种蛋并进行孵化。子代按照母代分组收集种蛋,每组150枚,分别于13、15、17和19胚龄取血。【结果】母代限饲显著降低了血清中13胚龄总胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)和4个胚龄低脂系低密度脂蛋白含量(P<0.05);显著提高了19胚龄高密度脂蛋白(HDL)和低脂系13、15胚龄血清中葡萄糖(G)的含量(P<0.05)。母代限饲显著降低血清中15胚龄高脂系和19胚龄胰高血糖素(GLU)的含量、13、15和19胚龄胰岛素(INS)含量、13和15胚龄的瘦素(LEP)含量(P<0.05);4个胚龄中,限饲组血清生长激素(GH)水平总体低于正常饲喂组。【结论】肉种母鸡产蛋期限饲能够直接影响子代胚胎期的血液生化和激素水平,这种影响在13胚龄就已经产生;胚胎期血液生化指标在品系间表现出了不同的趋势。

电磁场对几种淡水鱼鱼苗胚胎期的出苗率、抗温变能力和后期生长速度的影响

对蟾蜍、鱼类胚胎的质子核磁弛豫的研究发现,在胚胎发育期中的神经胚期出现质子纵向核磁弛豫时间T_1值为一极大值。几年来,我们用各种物理手段对蟾蜍和几种淡水鱼胚胎在不同发育期进行物理刺激,发现在鱼类胚胎早期和神经期接受较强电场或磁场刺激后,不仅其后期生长速度显著加快,而且胚胎发育期抗温变能力有明显提高,孵化出苗率也有较大幅度增加。1989年5月,我们在上海嘉定县望新鱼苗场对团头鲂早期胚胎进行了中等规模(10公斤受精卵)电场刺激试验,取得了令人满意的后期结果。

不同鸭种胚胎期和岀雏早期肌肉组织中IGF-Ⅰ基因mRNA的差异表达分析

【目的】研究不同品种鸭胚胎期和出雏早期胸肌、腿肌中IGF-Ⅰ基因mRNA表达水平的发育性变化。【方法】采用实时荧光定量PCR方法,研究生长速度不同的"高邮鸭"和"金定鸭"13,17,21,25,27胚龄和出雏后7日龄胸肌、腿肌中IGF-Ⅰ基因mRNA的表达规律。【结果】IGF-ⅠmRNA的表达规律在2个品种鸭的早期肌肉发育过程中较为一致,胸肌和腿肌IGF-ⅠmRNA表达量都是在13胚龄时最高,公鸭和母鸭同一肌肉组织IGF-ⅠmR-NA表达没有显著差异(P>0.05);不同品种间,IGF-ⅠmRNA在"高邮鸭"胸肌中的表达量除27胚龄外,其他发育时期均高于"金定鸭",且在13和21胚龄及7日龄时呈显著(P<0.05)或极显著差异(P<0.01),而"高邮鸭"腿肌IGF-ⅠmRNA的表达量在不同发育时期均高于"金定鸭",但差异不显著(P>0.05);同一品种内IGF-ⅠmRNA在胸肌中的表达量高于腿肌,且除13胚龄外,其他发育时期都显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)高于其在腿肌中的表达量。【结论】鸭肌肉中IGF-Ⅰ基因mRNA表达水平具有显著的年龄依赖性和明显的品种特征及组织差异,肌肉中IGF-Ⅰ基因mRNA表达对鸭早期生长发育有重要影响,且对胸肌生长发育的启动要早于腿肌。

家蚕胚胎期对高温干燥催青耐受性的遗传分析

本文运用完全双列杂交的方法 ,估测了家蚕在胚胎期对高温干燥催青条件耐受性的有关遗传参数。家蚕种对高温干燥催青的耐受性 ,在原种间和杂交组合间有明显差异。耐受性是一种遗传性性状 ,由遗传基因控制。经估算的广义遗传力大于狭义遗传力。有超显性现象。控制家蚕对高温干燥催青的耐受性的基因数目不少于两个。显性效应大于加性效应。显性效应为非单向性的。显性位点上的基因分布为不对称性。

金定鸭胚胎期骨骼肌发育模式及MRFs家族基因表达变化研究

MRFs(Myogenic regulatory factors,MRFs)家族包括肌分化因子Myo D、肌细胞生成素(myogenin)、生肌决定因子Myf5和Myf6,它们参与肌肉发生发育的各个环节。研究采用Real-time PCR方法研究了金定鸭胚胎期13、17、21、25和27日胚龄MRFs家族基因在骨骼肌中的表达变化,并分析其表达变化与胚重、骨骼肌发育的相关性。金定鸭胚重及骨骼肌重发育模式显示胚重在胚胎期呈持续增加趋势,但胸肌在胚胎中后期显示出较腿肌滞后的增重变化。MRFs家族基因在胚胎期骨骼肌中均能检测到表达,Myo D m RNA在21日胚龄前腿肌中的表达量高于胸肌,而在胚胎发育后期(25及27日胚龄)胸肌中表达量渐渐高于腿肌。胸、腿肌中myogenin m RNA的表达与胚重、胸、腿肌发育重量变化均呈强的负线性相关。上述研究结果首次揭示了鸭胚胎期骨骼肌中MRFs家族基因表达具有显著的时空性,推测Myo D m RNA在胸、腿肌中的表达变化可能与胸、腿肌增重表型差异有关,研究结果为进一步深入研究MRFs家族基因在胚胎期骨骼肌发生过程及其调控机理中的功能提供一定的理论依据。

人胚胎期前庭水管生长发育模式分析

目的 探讨人胚胎期前庭水管生长发育特征 ,以便更好地理解前庭水管扩大的起源。方法 应用 3DMed医学图像分析软件对 6～ 3 8周 (每隔 1周 2例 )的 3 2具人胎儿颞骨连续组织病理切片进行观察分析 ,测量不同胎龄前庭水管内口、外口、中点直径和管长度 ,经曲线拟合描述其生长发育模式。结果 胚胎 6周时 ,前庭水管内口已发育形成。胚胎 10周 ,前庭水管生长延伸至后颅窝的岩锥后壁。到胚胎 3 8周 ,管径各参数均值小于成人前庭水管直径平均值。统计分析显示 ,随胎龄变化前庭水管内口、外口、中点直径呈非线性生长 ,生长曲线无稳定走向趋势 ,仅长度随胎龄增大而增长。结论 整个胚胎期前庭水管处在不断发育过程中 ,出生时横向直径均值无一达成人水平 ,提示 。

牛磺酸对大鼠胚胎期海马发育的影响

目的 :探讨牛磺酸对大鼠胚胎期海马发育的影响。 方法 :大鼠自受孕开始喂以实验饲料 ,分为对照组和 0 .6 %牛磺酸组。观察新生仔鼠海马中蛋白质、DNA和 RNA的含量及海马超微结构的变化。 结果 :0 .6 %牛磺酸组新生仔鼠海马蛋白质、DNA和 RNA的含量显著高于对照组 (P<0 .0 1)。电镜下见 0 .6 %牛磺酸组新生仔鼠海马神经元核仁明显 ,有丰富的粗面内质网、核糖体和线粒体等细胞器 ,线粒体嵴清晰可见。 结论 :母体在妊娠期间补充牛磺酸 。

胚胎期高温处理对家蚕生长发育及部分经济性状的影响

用 3 4℃、RH80 %的环境处理 2 0余个家蚕品种的己 + 2 期胚胎 ,结果表明 :高温处理对某些品种的幼虫经过、幼虫体重、全茧量、茧层量等有明显影响 ,对健康性、茧层率无明显影响 ,对丝质无实质影响 ;高温处理对家蚕生长发育和经济性状的影响纯种间存在差异 ,杂交种受影响比纯种小。因此认为 ,高温处理对家蚕生长发育、经济性状的影响不会成为伴性温敏基因和雄蚕品种利用的限制因素 。

胚胎期、新生儿和儿童期HBV感染后免疫耐受研究进展

乙型肝炎病毒(HBV)可导致急性和慢性肝炎,急性乙型肝炎可以自愈,而慢性HBV感染进一步可发展为肝硬化或肝癌。这些临床和病毒学特征不仅与不同个体的遗传背景有关,也与患者的年龄有关。HBV感染后HBV复制水平高而肝脏无明显炎症,这一时期称为免疫耐受期。导致免疫耐受的原因是多方面的,免疫耐受主要与Th1/Th2细胞因子的不平衡应答、树突状细胞的抗原提呈功能缺陷以及细胞毒性T淋巴细胞的功能不足和耗竭等有关。从出生至儿童时期免疫耐受机制尚未明确,本文总结了这一时期HBV感染后机体免疫和免疫耐受变化的研究进展。

胚胎期豚鼠前庭终器细胞凋亡的检测

目的 研究豚鼠胚胎正常发育期前庭终器形态变化及细胞凋亡 ,探讨细胞凋亡在前庭终器发育中的作用 .方法 选用胚胎 40和 50 d正常豚鼠 ,光镜观察其前庭终器发育形态变化 ,末端脱氧核苷酸转移酶介导的生物 d UTP缺口末端标记技术 (TUNEL)测定毛细胞和支持细胞凋亡 ,并以电镜观察凋亡细胞胞核变化 .结果 胚胎 40 d,豚鼠前庭壶腹、椭圆囊斑及球囊斑已分化 ,前庭上皮出现一层毛细胞及多层支持细胞 ;胚胎 50 d,支持细胞层数减少 ,毛细胞数目增加 ,伴有神经纤维出现 . TUNEL检测提示大量毛细胞和支持细胞发生凋亡 .电镜下前庭上皮细胞发生分化 ,凋亡的毛细胞和支持细胞胞核染色质浓缩边集 .凋亡细胞与新生细胞相邻 .结论 细胞凋亡是豚鼠内耳前庭终发育的必然现象 。

甲状腺激素与胚胎期脑发育

脑是甲状腺激素(TH)作用的主要靶器官之一,尤其是在脑的发育阶段。胚胎期是脑发育的关键阶段,在这一阶段,胎儿脑的发育在不同阶段分别受母体与胎儿TH的单独及双重作用,其机制较为复杂,到目前为止,仍有很多问题尚未解决。近十几年,在这一领域的研究取得了巨大进展,对很多以前存在争议的问题提出了新解释。本文主要基于这些近展,对甲状腺的组织学来源、TH的分泌调控,特别是TH在胚胎期脑内的变化及其对脑发育的影响作简单阐述。

番鸭胚胎期法氏囊的组织发育

法氏囊是家禽体内最早形成的中枢淋巴器官之一，法氏囊的主要作用是培育和选择B细胞、参与机体体液免疫。本实验利用常规法对不同日龄鸭胚法氏囊进行组织学检查，为家禽免疫学和胚胎发育相关领域的研究提供组织学依据。

鸭IGF-IR基因部分序列克隆、鉴定及在胚胎期胸肌组织中的差异表达分析

为了克隆分析鸭IGF-IR基因部分的cDNA序列,并研究该基因的组织表达规律。通过同源性比对,克隆了IGF-IR基因cDNA部分片段,并运用生物信息学方法分析了不同物种序列进化关系,运用荧光绝对定量PCR技术检测了IGF-IR mRNA在肉用型品种高邮鸭和蛋用型品种金定鸭胚胎期不同发育时期胸肌中的表达。序列分析结果表明:克隆得到的鸭IGF-IR基因cDNA270bp片段长度,其核苷酸序列与鸡、人、小鼠、大鼠、猪、牛的IGF-IR基因相应核苷酸序列的同源性分别为95%、79%、78%、77%、78%、76%;荧光绝对定量结果表明:IGF-IR基因在胸肌中呈"波浪形"表达,在21胚龄表达量最高,与17、25、27胚龄和7日龄差异显著(P<0.05);IGF-IR基因在品种间表达量除21胚龄时差异显著外(P<0.05),其余各胚龄差异均不显著(P>0.05),表明IGF-IRmRNA的表达在所研究品种胚胎期的胸肌中相对稳定。

人胚胎期心脏蒲肯野细胞结构的光镜和电镜研究

为了揭示人胚胎期蒲肯野细胞的形态学构筑 ,本实验选用医院水囊引产发育正常胎儿 6例 ,固定后取包含有心内膜的左心室心肌组织 ,分别采用普通光镜、扫描电镜化学消化法和镀银染色方法对心脏传导系统蒲肯野细胞的形态及立体构筑进行研究。结果表明人胚胎期蒲肯野细胞为椭圆形 ,直径较普通心肌细胞大 2倍左右 ,闰盘复杂 ,细胞周围有明显的网状纤维鞘。蒲肯野细胞的上述构象有利于冲动沿细胞单一方向快速传导。

鸭胚胎期成肌细胞IGF-IR基因mRNA的表达与分析

类胰岛素生长因子(Insulin-like grow factor,IGFs)与动物生长发育呈强正相关,为了填补鸭胚胎期类胰岛素生长因子受体(Insulin-like growth factor-I receptors,IGF-IR)在骨骼肌发育变化的研究空白,实验采用qRT-PCR研究生长速度差异较大的高邮鸭和金定鸭胚胎期(13、15、17、19、21和23胚龄)骨骼肌(胸肌和腿肌)成肌细胞IGF-IR基因发育性表达的差异。研究显示,成肌细胞IGF-IR mRNA在2个品种的各发育时间都表达,种间同一组织表达量变化趋势较一致,总体均呈现先升后降的趋势。胸肌中,基因表达量在17胚龄时达到最高峰,显著高于其他胚龄(P<0.05);腿肌中13胚龄与17胚龄都显著高于其他胚龄(P<0.05);品种间除了金定鸭17胚龄时胸肌IGF-IR mRNA的表达量极显著高于高邮鸭(P<0.01),其他各胚龄差异均不显著。不同肌肉组织的IGF-IR mRNA表达变化存在种间和空间差异性。不同肌肉组织成肌细胞中的IGF-IR基因表达具有显著差异,与对应组织中的表达不一致,揭示在研究转录分析时应从不同层次进行比较研究,以期获得比较系统的科学支撑。