焦点解决模式对胚胎植入前遗传学诊断/筛查患者负性情绪及希望水平的影响

目的:研究焦点解决模式对胚胎植入前遗传学诊断/筛查患者负性情绪及希望水平的影响。方法:选取2019年11月至2020年11月在本院胚胎植入前拟行遗传学诊断/筛查的80例患者作为研究对象,按照随机抽签方式将其分为观察组和对照组,每组40例,对照组采取常规护理方案,观察组在对照组基础上采用焦点解决模式,比较两组护理满意度,比较两组护理前后负性情绪[焦虑自评量表(SAS)、抑郁自评量表(SDS)、心理弹性量表(CD-RISC)]、Herth希望量表(HHI)评分,另比较两组妊娠结局。结果:观察组护理满意度为92.50%,显著高于对照组的72.50%,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组护理后SAS、SDS评分显著低于护理前及对照组,CD-RISC水平显著高于护理前及对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组护理后积极行为、行为态度、亲密关系得分显著高于护理前及对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。比较两组妊娠成功率、流产率、活产率,观察组成功率、活产率比对照组高,观察组流产率比对照组低。结论:焦点解决模式对胚胎植入前遗传学诊断/筛查患者负性情绪及希望水平的改善有较高价值,建议后期加大样本数量,再行统计。

应用二代测序技术进行胚胎植入前遗传学筛查及诊断的基本原理

辅助生殖技术的发展已帮助越来越多不孕不育的夫妇解决生育难题,而胚胎植入前遗传学筛查(PGS)及胚胎植入前遗传学诊断(PGD)进一步排除了存在遗传缺陷的胚胎,并选择健康胚胎进行植入,从而极大降低了新生儿患遗传性疾病的概率。这两项技术最初采用基于分子杂交或聚合酶链式反应(PCR)的检测方法,随后微阵列技术也被应用其中。随着人类基因组计划的完成,DNA测序技术进入高速发展的阶段,二代测序(NGS)采用鸟枪法为基本测序策略,结合生物信息学工具,以高通量、较低成本、检测项目覆盖面广、自动化程度高、可检测未知片段等优势,正不断扩大在PGS/PGD中的应用,同时也对辅助生殖技术产生了深远的影响。

基于“医患共享决策”的护理干预在胚胎植入前遗传学诊断/筛查患者中的应用

目的探讨基于“医患共享决策(SDM)”的护理干预在胚胎植入前遗传学诊断/筛查(PGD/PGS)患者中的应用效果。方法回顾性选取2020年1月至2021年6月广东省中山市博爱医院收治的82例行PGD/PGS的患者作为研究对象,根据护理干预方法的不同分为对照组与研究组,每组各41例。对照组行常规护理干预,研究组行基于“SDM”护理干预。比较两组患者干预前、PGD/PGS结束时心理状况[采用抑郁自评量表(SDS)和焦虑自评量表(SAS)评估];比较两组决策参与满意度(采用医院自制决策参与满意度调查表评估)。结果干预前,两组的SDS、SAS评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);PGD/PGS结束时研究组SDS、SAS评分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组决策参与满意度调查表评分高于对照组,差异有统计学意义(t=7.020,P<0.001)。结论基于“SDM”的护理干预可有效改善PGD/PGS患者心理状况,提高其决策参与满意度。

胚胎植入前遗传学筛查在复发性流产及高龄患者中的应用

目的探讨胚胎植入前遗传学筛查(PGS)在高龄和复发性流产(RSA)患者中的应用价值。方法选择91例行PGS治疗的高龄和RSA患者作为研究对象,用单细胞全基因组扩增(WGA)结合二代测序技术(NGS)对胚胎23对染色体进行筛查,选择染色体正常的胚胎进行移植,观察其临床结局。结果行PGS检测的526枚胚胎,染色体异常率为67. 49%(355/526),其中RSA患者染色体异常率为65. 96%(217/329),临床妊娠率(CPR)为56. 00%(28/50);高龄患者染色体异常率为72. 84%(177/243),CPR为57. 14%(16/28)。结论高龄和RSA患者胚胎异常率较高,通过PGS可改善其妊娠结局。

植入前胚胎遗传学筛查对复发性流产患者妊娠结局的影响

目的:探讨胚胎植入前遗传学筛查技术对复发性流产患者妊娠结局的影响。方法:对复发性流产患者随机分组,对照组进行常规的体外受精胚胎移植,筛查组进行胚胎植入前遗传学筛查,比较两组妊娠结局。结果:筛查组40个治疗周期共活检212枚胚胎,其中整倍体胚胎115枚(54.2%),非整倍体胚胎97枚(45.8%);筛查组胚胎种植率和临床妊娠率(68.6%、35.3%)高于对照组(68.6%、52.8%),早期流产率(12.5%)低于对照组(26.3%)(P<0.05)。结论:对复发性流产患者行胚胎植入前遗传学筛查,选择整倍体胚胎移植,可提高种植率和临床妊娠率,降低早期流产率。

胚胎植入前遗传学诊断/筛查的应用研究进展

胚胎植入前遗传学诊断(PGD)/筛查(PGS)是目前临床上较为常用的新型胚胎植入前遗传学检查方法。PGD主要用于在胚胎移植前检测特定的突变以及非平衡染色体异常是否传递到卵子或胚胎。PGS主要用于检测胚胎染色体的非整倍性。本文主要综述PGD和PGS目前在临床上的应用情况,为胚胎植入前遗传学检查方法的选取提供理论依据。

高龄、复发性流产和反复种植失败患者胚胎植入前遗传学筛查结果分析

目的探讨胚胎植入前遗传学非整倍体检测(PGT-A)技术是否能改善女方高龄、复发性流产及反复种植失败患者的临床结局。方法通过二代测序(NGS)平台检测不同指征下患者胚胎染色体非整倍体情况,选择基因组拷贝数正常胚胎进行解冻移植,比较各组人群妊娠率和活产率的差异。结果共纳入PGT-A移植周期311个,其中高龄组18个周期,复发性流产组108个周期,反复种植失败组24个周期及对照组161个周期[均为地中海贫血PGT-M周期患者,平均年龄(32.1±4.3)岁]。另外还纳入同一时间段内1508个周期未做PGT-A的女方高龄患者进行比较分析。高龄组、复发性流产组、反复种植失败组及对照组临床妊娠率分别为50.0%、55.6%、58.3%、66.5%,差异无统计学意义(P>0.05),各组间活产率比较差异无统计学意义(P>0.05)。PGT-A高龄组中临床妊娠率为50.0%,高于女方高龄且未做PGT-A人群的28.4%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PGT-A可避免染色体非整倍体的胚胎植入,改善高龄、复发性流产和反复种植失败患者的临床结局,特别是对高龄女性可以有效提高临床妊娠率。

单细胞微阵列比较基因组杂交技术在胚胎植入前遗传学筛查中的应用

目的建立利用单细胞微阵列比较基因组杂交(array CGH,aCGH)技术进行胚胎植入前遗传学筛查(PGS)技术平台,并应用aCGH技术进行PGS获得持续妊娠。方法采集废弃胚胎来源卵裂球10个,核型正常男性(46,XY)淋巴细胞3个,通过单细胞全基因组扩增后,利用aCGH技术进行染色体非整倍体分析;在此基础上,将aCGH技术应用于临床一例反复流产患者。结果 3个淋巴细胞及9个废胚来源卵裂球的全基因组扩增成功,1个废胚来源卵裂球扩增失败,扩增成功的样本通过aCGH检测后均获得明确的诊断,3个淋巴细胞分析结果与已知核型一致;临床病例5个胚胎活检的单卵裂球均得到明确诊断,移植1枚正常整倍体胚胎后获得临床持续妊娠。结论在胚胎植入前遗传学筛查中,单细胞aCGH技术能全面地评估胚胎染色体组情况,可应用于临床PGS。

不同指征患者胚胎植入前遗传学筛查结果分析

目的通过对高龄、复发性流产及反复种植失败患者进行胚胎植入前非整倍体遗传学检测,分析各指征下胚胎染色体情况。方法收集2018年1月至2019年12月间在柳州市妇幼保健院生殖中心行胚胎植入前遗传学筛查患者131例,胚胎培养至囊胚期进行活检。根据女方年龄将胚胎分为高龄组(≥38岁,n=69)和非高龄组(<38岁,n=62),按患者不同指征分为复发性流产组(n=86)和反复种植失败组(n=22)。通过二代测序平台分析,比较不同年龄段和不同指征下患者胚胎染色体非整倍体情况。结果女方年龄<38岁组胚胎染色体非整倍体率(63.78%)显著低于女方年龄≥38岁组(79.55%),差异具有统计学意义(χ^(2)=20.237,P<0.001)。在不同指征下,复发性流产和反复种植失败患者胚胎染色体非整倍体率分别为67.49%和73.55%,两组间胚胎异常率比较差异无统计学意义(χ^(2)=1.657,P=0.198)。胚胎的异常染色体数目(1条染色体异常、2条染色体异常和≥3条染色体异常)在复发性流产组中频率(40.85%、20.12%和39.02%)与反复种植失败组(37.08%、21.35%和41.57%)比较差异无统计学意义(χ^(2)=7.185,P=0.126)。将染色体异常的类型分为单体、三体、微缺失微重复和嵌合四种,反复种植失败组染色体单体比率(38.05%)显著高于复发性流产组(24.79%),差异具有统计学意义(χ^(2)=7.504,P=0.006)。结论高龄、复发性流产及反复种植失败的女性,胚胎染色体异常具有较高的比例,应用PGT-A可有效地避免染色体非整倍体的胚胎植入,改善临床结局。

植入前遗传学筛查在高精子DNA碎片指数不育夫妇行ICSI中的应用

目的:探讨植入前遗传学筛查(PGS)对高精子DNA碎片指数(DFI)不育夫妇的辅助生殖妊娠结局的应用价值。方法:选取2015年4月至2016年10月精子DFI≥15%行ICSI治疗的男性不育患者60例作为病例组,其中行PGS-ICSI治疗的患者30例作为高DFI-PGS组,未行PGS检测的患者30例作为高DFI-ICSI组;另选取DFI<15%行ICSI治疗的30例患者作为低DFI-ICSI组。比较高DFI-ICSI组与低DFI-ICSI组正常受精率、优质胚胎率、囊胚形成率、胚胎种植率的差异;比较高DFI-PGS组与高DFI-ICSI组女方年龄,男方年龄、精子浓度、前向运动精子百分率、正常形态精子百分率、FSH、LH、T、精子DFI、核蛋白不成熟精子百分率,正常受精率、优质胚胎率、囊胚形成率、胚胎种植率差异。结果:高DFI-ICSI组与低DFI-ICSI组相比,正常受精率[(65.38±24.62)%vs(73.00±17.00)%]、优质胚胎率[(62.41±25.97)%vs(73.00±22.10%)]、囊胚形成率[(62.55±25.21)%vs(64.30±18.60)%]均无统计学差异(P均>0.05),胚胎种植率[31.25%vs 52.50%]有统计学差异(P<0.01)。高DFI-PGS组与高DFI-ICSI组相比,女方年龄,男方年龄、精子浓度、前向运动精子百分率、正常形态精子百分率、FSH、LH、T、精子DFI、核蛋白不成熟精子百分率,正常受精率[(69.76±15.82)%vs(65.38±24.62)%]、优质胚胎率[(64.42±30.75)%vs(62.41±25.97)%]、囊胚形成率[(67.53±19.24)%vs(62.55±25.21)%]均无统计学差异(P均>0.05),两组间胚胎种植率(60.97%vs 31.25%)差异有统计学意义(P<0.01)。结论:对于精子DFI≥15%的不育患者,行单纯ICSI治疗并不能提高其胚胎种植率;而行PGS可以显著提高患者胚胎种植率。

耳聋基因的胚胎植入前诊断

耳聋是人类最常见的遗传疾病之一,世界不同国家地区报告新生儿耳聋的发病率在1~3‰。在我国大概有2780万聋人,每年有3万多先天性耳聋的新生儿出生,之前有调查显示耳聋新生儿中有54.93%是由遗传因素造成。如此庞大的耳聋及突变基因携带者家庭很大一部分具有强烈的生育正常听力下一代的意愿。目前对于阻断耳聋向子代遗传,产前诊断技术是唯一的预防手段。但由于其有创、可能面临大月份引产等带来一定的伦理争议。对于耳聋这种非致死性遗传病,胚胎植入前诊断(preimplantation genetic diagnosis,PGD)是目前国际上主流的预防手段。因此我们亟需建立一种针对中国人群耳聋遗传病特点的,简便易行、可靠性高、成功率高的胚胎植入前诊断方法。成为耳聋三级预防体系的第一道关卡。本文系统回顾了单基因遗传病尤其是遗传性耳聋胚胎植入前诊断方法的发展历史和最新进展,阐述了胚胎活检、全基因组扩增、连锁分析、染色体扫描四个胚胎植入前诊断关键技术步骤的方法及新进展。

胚胎植入前染色体非整倍体检测试剂盒评价

目的 使用胚胎植入前染色体非整倍体国家参考品,评价胚胎植入前染色体非整倍体检测试剂盒(半导体测序法)的性能。方法 取国家参考品进行细胞裂解及片段化,制备文库,进行文库的扩增和单细胞扩增后纯化。将纯化的单细胞扩增DNA片段化和纯化后,进行末端修复、加上接头以及PCR扩增等步骤,构建文库。将文库纯化后进行定量。使用基因测序仪BioelectronSeq 4000进行测序。使用试剂盒配套的全自动分析软件对测序数据进行信息分析,报告样本的染色体异常情况。结果 对于65个异常片段大于4 Mb的国家阳性参考品,试剂盒均能检出对应的染色体异常,检出率为100%;国家阳性参考品19-del(7)-25.3 M在7号染色体100.5 Mb-125.8 Mb位置存在片段大小约25.3 Mb的拷贝数缺失,Z-score为-28.6,其他国家阳性参考品的相应异常区域对应的染色体Z-score均>3或<-3。对于15个异常片段小于等于4 Mb的国家阳性参考品,对应的染色体异常检出率为86.7%(13/15);国家阳性参考品22-del(7)-1.5 M在7号染色体72.1 Mb-73.6 Mb位置存在片段大小约1.5 Mb的拷贝数缺失,其Z-score为-8.1。国家阳性参考品30-dup(17)-1.9M的17号染色体Z-score为2.0,未检测到相应异常区域,国家阳性参考品100-NC4-dup(Xq12)-1.4M的X染色体Z-score为1.1,未检测到相应异常区域,其他13个国家阳性参考品的相应异常区域对应的染色体Z-score均>3或<-3。10个国家阴性参考品均未检出试剂盒范围内的染色体异常,其Z-score均小于3且大于0,显著性水平P-value>0.0001;如国家阴性参考品97-NC1在1-22号染色体和性染色体区域内均未检测出异常区域。对30%嵌合的嵌合体样本检出率为50%(3/6),相对应的70%嵌合体样本检出率为83.3%(5/6);国家嵌合体参考品110-0.3-del(4)-37.7M中,30%嵌合比例细胞在4号染色体153.1 Mb-190.8 Mb位置存在大小约37.7 Mb拷贝数缺失,其Z-score为-16.5;70%嵌合比例细胞的在15号染色体23.6 Mb-28.5 Mb位置存在大小约4.9 Mb拷贝数缺失,其Z-score为-10.5,结果显示30%嵌合和70%嵌合的细胞均正确检出。结论 胚胎植入前染色体非整倍体检测试剂盒能够符合胚胎植入前染色体非整倍体国家参考品的要求。

植入前遗传学诊断新进展

植入前遗传学诊断是辅助生殖技术的一个重要方面,其发展日新月异。新方法、新技术不断出现并应用于临床植入前遗传学诊断中,如微阵列比较基因组杂交、微测序技术、多重置换扩增等。这些方法及两个或两个以上方法的综合应用大大增加了诊断的准确性,减小误诊风险。同时,也有一些关于植入前遗传学诊断的争议,如胚胎植入前遗传学筛查,以及对植入前遗传学诊断远期安全性的担忧。就该领域一些新方法及其原理和争议等进行综述。

反复胚胎种植失败行PGT-A妇女的临床特点分析

目的分析反复胚胎种植失败妇女行植入前遗传学筛查(PGT-A)技术的临床特点。方法选取498例体外受精-胚胎移植治疗的不孕症妇女,其中反复种植失败(RIF)行PGT-A妇女79例(RIF组),对照组419例。根据是否获得整倍体胚胎将79例RIF患者分为获得整倍体胚胎组51例(RIF-S)和未获得组28例(RIF-F)。观察其临床特点。结果RIF组年龄大于对照组,基础卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E_(2))水平均高于对照组,基础窦卵泡计数(AFC)少于对照组,外源性促性腺激素(Gn)用量、人绒毛膜促性腺激素(HCG)日E2水平、获卵数、MII卵数、2PN数均低于对照组(P<0.05)。RIF-S组年龄小于RIF-F组,活检胚胎数、D3优胚数、囊胚数、优囊数均多于RIF-F组(P<0.05)。结论高龄及卵巢储备功能差的女性容易发生RIF。

微阵列比较基因组杂交胚胎植入前遗传学筛查技术在复发性流产患者中的应用研究

目的：探讨微阵列比较基因组杂交胚胎植入前遗传学筛查（aCGH—PGS）技术对复发性流产（RM）患者辅助生殖临床结局的影响。方法：54例RM患者分为aCGH-PGS组（n=25）与非PGS组（n=29）。aCGH-PGS组胚胎行aCGH筛查，选择染色体整倍性胚胎植入，其临床结局与非PGS组相比较。结果：aCGH—PGS组中染色体整倍性胚胎占26．93％（42／156）；平均移植胚胎1．3±0．8个，低于非PGS组2．6±0．6个（P〈0．01）；胚胎着床率（57．58％）与临床妊娠率（61．90％）高于非PGS组（27．03％，P〈0．01；46．43％，P〉0．05），早期流产率（7．69％）低于非PGS组（38．46％，P〈O．01）。结论：经aCGH—PGS，植入1-2个染色体整倍性胚胎，可使RM患者获得更高的胚胎着床率及较低的早期流产率，是RM患者临床治疗的有效途径。

植入前胚胎遗传学诊断及筛查技术与规范

近年来,随着分子生物学和辅助生殖技术的进步,植入前胚胎遗传学诊断(PGD)和植入前胚胎遗传学筛查(PGS)技术以前所未有的速度在全球快速发展。文章从适应证、取材、遗传诊断技术以及伦理学等多方面对PGD和PGS进行阐述。

Y染色体异常男性不育症患者胚胎植入前性染色体遗传学筛查分析(英文)

目的分析Y染色体异常男性不育症患者胚胎性染色体组成,探讨辅助生殖治疗中对此类患者胚胎行植入前遗传学筛查(PGS)的必要性与可行性。方法对Y染色体异常(Y染色体AZFc区缺失、Yqh+、Yqh-)男性不育症患者经ICSI技术形成胚胎。同意进行PGS的患者,对其胚胎进行单卵裂球活检,采用Vysis CEP X/Y DNA探针检测胚胎的性染色体组成,选择女性胚胎(XX)植入。不同意进行PGS的患者,选择形态学发育正常的胚胎植入。植入后观察胚胎的着床率、临床妊娠率及流产率。结果共对25例此类患者的281个胚胎进行了PGS筛查。在Y染色体AZFc区缺失患者、Yqh+患者、Yqh-患者胚胎中男性(XY)及性染色体非整倍性胚胎的比例分别为34.21%、68.75%和45.00%。PGS组患者胚胎着床率(33.93%)和临床妊娠率(44.00%)与非PGS组(30.42%和44.95%)相近,PGS组胚胎流产率(9.09%)低于非PGS组(14.29%),但均无统计学差异(P>0.05)。结论 Y染色体异常男性不育症患者的胚胎中,男性与性染色体非整倍性胚胎占有较高比例,因此有必要对此类患者胚胎行PGS筛查以避免带有性染色体基因缺陷的胚胎被盲目植入。PGS技术对胚胎的着床、发育及辅助生殖治疗无负面影响,其临床应用是可行的。

高通量测序胚胎植入前遗传学筛查在复发性流产患者中的应用

目的探讨高能量测序胚胎植入前遗传学筛查技术对复发性流产患者辅助生殖临床结局的影响。方法 32例复发性流产患者分为NGS-PGS组(n=15)与非PGS组(n=17)。NGS-PGS组胚胎行NGS筛查,选择染色体正常胚胎植入,进而对两组临床结局进行比较。结果 NGS-PGS组中平均每个周期活检囊胚2.8±2.04个,染色体整倍囊胚20枚,占47.62%,非整倍体囊胚22枚,占52.38%,胎着床率(61.54%)高于非PGS组(45.24%),但差异无统计学意义(P>0.05),NGS-PGS组早期流产率(9.09%)显著低于非PGS组(29.41%)(P<0.05)。结论经NGS-PGS,植入染色体整倍性胚胎,可使复发性流产患者获得更高的胚胎着床率及较低的早期流产率,是复发性流产患者临床治疗的有效途径。

高通量测序技术在妇产与遗传学科方面的应用

高通量测序技术的发展,为临床医学的进步带来革命性的意义。该技术在诸如产前遗传筛查与产前诊断、流产查因、体外辅助生殖和妇科肿瘤等妇产与遗传学科领域的应用已受到广泛认可。产前遗传筛查是预防出生缺陷的重要手段,以无创产前基因筛查为代表的高通量测序技术具有高灵敏度和高特异度等特点,现广泛应用于染色体非整倍体如21、18和13三体综合征筛查。随着该技术的发展,染色体微缺失/微重复及单基因病的产前遗传筛查无疑是无创产前基因筛查的下一个临床应用热点。此外,高通量测序技术既可精确排查流产的遗传学因素;又可用于胚胎植入前筛查与诊断,极大提高试管婴儿的移植率、妊娠率;还可为妇科肿瘤的早期筛查、分型诊断、复发监测和个体化治疗等方面提供合适的临床方案。总之,高通量测序技术具有高通量、高准确度等优点,在妇产与遗传学科领域具有重要的临床应用价值。

胚胎植入前遗传学筛查技术在高龄妇女助孕中的应用

高龄妇女(≥35岁)的生育力下降,卵母细胞和胚胎的非整倍体发生率高,流产风险大,出生缺陷发生率高,一直是生殖领域的难题。胚胎植入前遗传学筛查技术(preimplantation genetic screening,PGS)是指在体外受精及胚胎培养过程中,对卵母细胞的第一、第二极体及早期胚胎行染色体结构和数目的检测,选择染色体整倍体的胚胎移植入宫腔,以期改善体外受精-胚胎移植的临床结局。随着辅助生殖技术及现代分子遗传学的发展,新的活检方法及遗传学分析技术不断出现,如囊胚期滋养外胚层细胞活检、微阵列技术、二代测序技术等,使得胚胎植入前PGS的诊断效率和精确度不断提高。本文就胚胎植入前PGS在高龄妇女助孕中的应用及进展进行综述,探讨其在改善高龄妇女妊娠结局中的临床价值。