无创胚胎植入前非整倍体筛查的诊断有效性分析

【目的】探讨无创胚胎植入前非整倍体筛查(niPGT-A)的诊断有效性。【方法】收集并再次分析了2018年7月到2019年7月期间,在中山大学附属第六医院生殖医学中心因染色体相互易位,或罗氏易位经首次滋养层细胞(TE)活检(TE1)行植入前,遗传学检测被诊断为非整倍体或嵌合的患者捐献胚胎24枚。解冻捐赠胚胎行滋养层细胞活检(TE2)、内细胞团活检(ICM)并收集囊胚培养液/囊胚腔液(BCM/BF)通过高通量测序技术获得遗传信息。以ICM的结果为胚胎真实染色体结果,比较TE1、TE2及BCM/BF的核型一致性。【结果】TE1、TE2及BCM/BF与相应的ICM的核型一致性分别为66.7%,87.5%和79.2%(P>0.05),任意两组之间的差异没有统计学意义(P>0.05)。【结论】利用囊胚培养液/囊胚腔液中的游离DNA行无创胚胎植入前非整倍体筛查可以获得与同期活检的TE2和ICM相似的诊断有效性。

胚胎植入前非整倍体筛查的研究进展

胚胎植入前非整倍体筛查是选择染色体数目正常的胚胎用于体外受精/单精子卵胞浆内显微注射周期的移植,目前采用荧光原位杂交方法可以分析5条或9条染色体。本文主要概述胚胎植入前非整倍体筛查在高龄待孕妇女、早期不明原因习惯性流产、反复植入失败者中应用,在这些情况中发生非整倍体的概率较高,正常胚胎鉴定和非整倍体的排除有利于提高体外受精-胚胎移植的胚胎植入率和妊娠率。其外简明介绍其他的新方法在胚胎植入前非整倍体筛查中研究进展。

宁夏首例胚胎植入前非整倍体筛查妊娠成功1例

1病例介绍 患者25岁,2015年8月因“胚胎停育4次,未避孕未孕3月”就诊我院,诊断:复发性流产.患者结婚4年,G5P1,自2012年至2015年期间于孕2月胚胎停育3次、孕3月胚胎停育1次,在我院完善各项检查后无异常.男方精液检查示:精子浓度200x106/mL,前向运动30％,正常形态率6％.

胚胎植入前非整倍体筛查

染色体非整倍体改变在体外受精胚胎中十分多见 ,是导致人类辅助生殖失败的常见原因。胚胎细胞染色体的非整倍体筛查 ,已成为胚胎植入前遗传学诊断的主要内容。体外受精后胚胎活检 ,进行荧光原位杂交 ,避免非整倍体胚胎移入母体宫腔 ,能起到显著提高着床率和改善受孕率的效果。

不同指征患者胚胎植入前非整倍体筛查的比较

目的通过对进行植入前遗传学筛查(PGS)患者的胚胎和染色体结果分析,比较不同PGS指征在胚胎染色体非整倍体的差异。方法收集2018年6月1日至2018年11月30日在西北妇女儿童医院生殖中心行PGS患者288例,胚胎培养囊胚期活检,PGS检测采用多次退火环状循环扩增技术-二代测序技术(MALBAC-NGS),比较不同年龄段、不同性别患者和不同PGS指征胚胎染色体非整倍体率。结果①PGS共活检288枚胚胎,最终有效检出结果的胚胎数为275枚。其中整倍体胚胎数目为141(51.27%),非整倍体胚胎数目为134(48.73%)。②在染色体异常的胚胎中以异常染色体数目为1条(42.54%)和2条(37.31%)最为常见。染色体异常的女性患者产生非整倍体胚胎数目为43个(59.72%),染色体异常的男性患者产生非整倍体胚胎数目为59个(49.17%),不同性别患者的整倍体率与非整倍体率比较无统计学差异(χ^2=2.01,P>0.05)。③随着女方年龄的增长,胚胎非整倍体率逐渐升高,≤27岁、28~30岁、31~33岁、34~36岁和≥37岁患者非整倍体胚胎数目分别为34个(43.04%)、43个(52.44%)、37个(59.68%)、10个(32.26%)、12个(57.14%)。然而,不同年龄女性患者的胚胎整倍体率与非整倍体率比较无统计学差异(χ^2=8.35,P>0.05)。④在不同PGS指征中,以相互易位(36.84%)和复发性流产(RSA,占18.60%)最为常见。相互易位、罗氏易位、倒位、非整倍体及衍生染色体患者产生的非整倍体胚胎数目分别为71个(67.72%)、8个(40.00%)、2个(66.67%)、11个(42.31%)和7个(77.78%);不良孕产史、反复种植失败、RSA患者产生的非整倍体胚胎数目分别为11个(39.29%)、2个(22.22%)、24个(45.28%);不同PGS指征患者的整倍体率与非整倍体率比较具有统计学差异(χ^2=23.94,P<0.05)。⑤胚胎染色体异常中11、13、14、22号染色体及性染色体异常发生率较高(分别占9.19%、10.95%、6.71%、6.01%、8.83%)。结论通过对PGS患者的染色体结果分析得出,随着年龄的增长,胚胎非整倍体率逐渐升高。在不同PGS指征中,以相互易位和RSA最为常见。平衡易位、倒位、衍生染色体等双亲染色体异常可能更易导致胚胎染色体非整倍体。染色体异常的胚胎中以异常染色体数目为1条和2条最为常见。染色体异常的女性患者胚胎非整倍体率较高。

生长激素预处理在胚胎植入前染色体非整倍体检测中的应用研究

目的研究生长激素(GH)预处理对整倍体的改善及妊娠结局的影响。方法前瞻性分析行胚胎植入前染色体非整倍体检测(PGT-A)助孕的134例患者,其中30例行自身对照,104例行组间对照。根据是否添加GH分为GH预处理组和GH非预处理组,GH预处理为促性腺激素(Gn)启动前行4~6周的GH 2 U/d皮下注射,Gn启动日剂量加倍直至扳机日,GH非预处理为未用过GH处理。前次PGT-A周期失败后一年内再次行PGT-A时予GH预处理构成自身对照组。组间对照和自身对照分别比较各组间的基本情况、囊胚情况及助孕结局。结果无论组间对照还是自身对照,GH预处理后的HCG日子宫内膜厚度、卵巢敏感指数(OSI)、获卵数、MII卵数、2PN数、2PN受精率、可利用卵母细胞率、活检囊胚数、整倍体囊胚数、整倍体囊胚率、至少一个整倍体率均明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05),GH预处理后的Gn总量、Gn天数、嵌合体囊胚数、嵌合体囊胚率无明显变化,差异均无统计学意义,GH预处理后的种植率、临床妊娠率均有提高,但差异均无统计学意义。结论GH预处理可以明显增加行PGT-A患者的整倍体数和整倍体率,并有改善妊娠结局的趋势。

低分子肝素及胚胎植入前非整倍体检测对不明原因复发性流产患者妊娠结局的影响

目的:比较行胚胎植入前非整倍体检测(PGT-A)助孕和未行PGT-A助孕的不明原因复发性流产(URSA)患者应用低分子肝素(LMWH)后临床结局的差异。方法:回顾分析2016年1月1日至2022年5月17日URSA患者于郑州大学第三附属医院生殖医学科首次移植冷冻囊胚共1158个周期的临床资料,按移植前是否行PGT-A分为PGT-A组(行PGT-A+ICSI,315例)和非PGT-A组(行IVF/ICSI,843例),再根据移植日是否使用LMWH分为肝素组和非肝素组,为调整混杂因素进行1∶5倾向性评分匹配(PSM),对PSM后患者数据进行分析,比较两组患者种植率、临床妊娠率、流产率、早期流产率、活产率及单胎活产围产结局的差异。对非PGT-A组和PGT-A组PSM前数据、肝素PGT-A组和肝素非PGT-A组临床妊娠结局进行多因素logistic回归分析。结果:非PGT-A组中,肝素组和非肝素组的不孕年限差异有统计学意义(P<0.05),种植率(33.8%vs 32.1%,P=0.610)、临床妊娠率(45.4%vs 43.8%,P=0.733)、流产率(28.0%vs 28.4%,P=0.958)、早期流产率(23.8%vs 25.4%,P=0.797)、活产率(31.9%vs 30.1%,P=0.671)比较差异无统计学意义(P>0.05)。PGT-A组中,肝素组和非肝素组的女方体质量指数(BMI)比较差异有统计学意义(P<0.05),种植率(59.8%vs 57.6%,P=0.763)、临床妊娠率(59.4%vs 57.6%,P=0.806)、流产率(20.4%vs 14.7%,P=0.448)、早期流产率(16.4%vs 14.7%,P=0.803)、活产率(46.9%vs 49.2%,P=0.752)比较差异无统计学意义(P>0.05)。非PGT-A组中,肝素组和非肝素组内获得单胎活产患者的围产期结局比较差异均无统计学意义(P>0.05);PGT-A组中,肝素组较非肝素组小于胎龄儿(10.3%vs 0.8%,P=0.023),差异有统计学意义(P<0.05),余获得单胎活产患者的围产期结局差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:行PGT-A助孕和未行PGT-A助孕的URSA患者应用LMWH并不能改善其妊娠结局,且行PGT-A助孕应用LMWH患者的围产期小于胎龄儿发生风险显著升高。

胚胎植入前染色体非整倍体检测在不同适应证中的助孕结局分析

目的 分析胚胎植入前染色体非整倍体检测(PGT-A)在不同适应证中的助孕结局。方法 回顾性分析PGT-A助孕的549对夫妻,按PGT-A适应证分6组,反复妊娠丢失(304例)、反复种植失败(57例)、高龄(38岁及以上,80例)、不良妊娠史(绒毛染色体三体或不良妊娠,24例)、男性因素不育(67例)、性染色体数目异常(17例),比较基本情况、获卵及胚胎活检情况、妊娠结局。结果 各组之间平均年龄、促性腺激素(Gn)使用天数差异有统计学意义(P<0.001)。各组之间平均获卵数、优质胚胎率、嵌合胚胎率、异常胚胎率、胚胎活检正常率及平均卵巢敏感性指数(OSI)差异有统计学意义(P=0.03、P<0.001、P=0.03、P<0.001、P<0.001、P<0.001);高龄组异常胚胎率在6组中最高,平均获卵数、平均OSI及胚胎活检正常率最低。6组每取卵周期临床妊娠率及持续妊娠率、累积妊娠率差异有统计学意义(P<0.001),6组每移植周期临床妊娠率及持续妊娠率、除男性因素不育组外其余5组之间累积妊娠率差异无统计学意义。结论 PGT-A可检出整倍体胚胎移植,提高妊娠效率;高龄人群有正常胚胎移植,也可获得较好的妊娠率,可能缩短其“抱婴回家”时间。同时,PGT-A可大幅提高因男性因素不育人群的妊娠结局。

微阵列比较基因组杂交技术用于植入前胚胎非整倍体筛查的初步观察

目的：探讨微阵列比较基因组杂交（aCGH）技术在植入前胚胎非整倍体筛查中的应用.方法：选取就诊于天津医科大学总医院生殖中心行体外受精-胚胎移植患者冻存的正常8细胞胚胎4枚,患者夫妇均自愿捐献冻存胚胎用于科研并签订知情同意书.分别从4枚冻融胚胎中获取卵裂球进行多重置换扩增,扩增产物经过酶切、荧光标记、纯化、定量后与处理后的正常女性单个淋巴细胞扩增产物共同杂交（采用aCGH芯片）,利用Agilent扫描仪扫描芯片、获取图像并通过软件读取和分析数据,将重复/缺失区域在染色体上定位.结果：胚胎1的1～4号样本中1号样本的aCGH结果为47,XX,del（5）（p15.33-p12）,del（9）（q13-q34.13）,＋21;2～4号样本均为46,XX.胚胎2的5、6号样本结果均为47,XX,＋19.胚胎3的7、8号样本结果均为46,XX.胚胎4的9、10号样本结果均为46,XY.结论：aCGH能够用于检测植入前胚胎单个卵裂球细胞全基因组的非整倍体筛查.

胚胎植入前染色体非整倍体检测试剂盒评价

目的 使用胚胎植入前染色体非整倍体国家参考品,评价胚胎植入前染色体非整倍体检测试剂盒(半导体测序法)的性能。方法 取国家参考品进行细胞裂解及片段化,制备文库,进行文库的扩增和单细胞扩增后纯化。将纯化的单细胞扩增DNA片段化和纯化后,进行末端修复、加上接头以及PCR扩增等步骤,构建文库。将文库纯化后进行定量。使用基因测序仪BioelectronSeq 4000进行测序。使用试剂盒配套的全自动分析软件对测序数据进行信息分析,报告样本的染色体异常情况。结果 对于65个异常片段大于4 Mb的国家阳性参考品,试剂盒均能检出对应的染色体异常,检出率为100%;国家阳性参考品19-del(7)-25.3 M在7号染色体100.5 Mb-125.8 Mb位置存在片段大小约25.3 Mb的拷贝数缺失,Z-score为-28.6,其他国家阳性参考品的相应异常区域对应的染色体Z-score均>3或<-3。对于15个异常片段小于等于4 Mb的国家阳性参考品,对应的染色体异常检出率为86.7%(13/15);国家阳性参考品22-del(7)-1.5 M在7号染色体72.1 Mb-73.6 Mb位置存在片段大小约1.5 Mb的拷贝数缺失,其Z-score为-8.1。国家阳性参考品30-dup(17)-1.9M的17号染色体Z-score为2.0,未检测到相应异常区域,国家阳性参考品100-NC4-dup(Xq12)-1.4M的X染色体Z-score为1.1,未检测到相应异常区域,其他13个国家阳性参考品的相应异常区域对应的染色体Z-score均>3或<-3。10个国家阴性参考品均未检出试剂盒范围内的染色体异常,其Z-score均小于3且大于0,显著性水平P-value>0.0001;如国家阴性参考品97-NC1在1-22号染色体和性染色体区域内均未检测出异常区域。对30%嵌合的嵌合体样本检出率为50%(3/6),相对应的70%嵌合体样本检出率为83.3%(5/6);国家嵌合体参考品110-0.3-del(4)-37.7M中,30%嵌合比例细胞在4号染色体153.1 Mb-190.8 Mb位置存在大小约37.7 Mb拷贝数缺失,其Z-score为-16.5;70%嵌合比例细胞的在15号染色体23.6 Mb-28.5 Mb位置存在大小约4.9 Mb拷贝数缺失,其Z-score为-10.5,结果显示30%嵌合和70%嵌合的细胞均正确检出。结论 胚胎植入前染色体非整倍体检测试剂盒能够符合胚胎植入前染色体非整倍体国家参考品的要求。

焦点解决模式对胚胎植入前遗传学诊断/筛查患者负性情绪及希望水平的影响

目的:研究焦点解决模式对胚胎植入前遗传学诊断/筛查患者负性情绪及希望水平的影响。方法:选取2019年11月至2020年11月在本院胚胎植入前拟行遗传学诊断/筛查的80例患者作为研究对象,按照随机抽签方式将其分为观察组和对照组,每组40例,对照组采取常规护理方案,观察组在对照组基础上采用焦点解决模式,比较两组护理满意度,比较两组护理前后负性情绪[焦虑自评量表(SAS)、抑郁自评量表(SDS)、心理弹性量表(CD-RISC)]、Herth希望量表(HHI)评分,另比较两组妊娠结局。结果:观察组护理满意度为92.50%,显著高于对照组的72.50%,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组护理后SAS、SDS评分显著低于护理前及对照组,CD-RISC水平显著高于护理前及对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组护理后积极行为、行为态度、亲密关系得分显著高于护理前及对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。比较两组妊娠成功率、流产率、活产率,观察组成功率、活产率比对照组高,观察组流产率比对照组低。结论:焦点解决模式对胚胎植入前遗传学诊断/筛查患者负性情绪及希望水平的改善有较高价值,建议后期加大样本数量,再行统计。

不同授精方式的冷冻囊胚行植入前遗传学筛查的临床结局比较

目的:比较IVF和ICSI两种授精方式产生的冻胚活检结果、妊娠结局及其对后代的影响。方法:根据冷冻囊胚授精方式将患者分为IVF组和ICSI组,比较两组囊胚冷冻复苏后的存活率、遗传学检测结果、妊娠及子代出生结局。结果:IVF组的平均年龄显著高于ICSI组,差异有统计学意义[(35.53±4.23)岁vs(33.95±3.75)岁,P=0.003]。IVF组和ICSI组的解冻后囊胚存活率(第一次解冻存活率:98.86%vs 98.74%,P=0.77;第二次解冻存活率:99.18%vs 100%,P=1.000)、囊胚整倍体率(46.45%vs 47.01%,P=0.874)、移植后临床妊娠率(63.07%vs 56.25%,P=0.246)以及活产率(47.87%vs 40.91%,P=0.271)等比较,差异均无统计学意义。IVF组和ICSI组的妊娠期并发症(17.82%vs 27.78%,P=0.203)、围产期并发症(1.98%vs 2.78%,P=0.779)以及新生儿合并症(0.99%vs 5.56%,P=0.108)发生率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:在冻胚活检中,无论是IVF来源的囊胚还是ICSI来源的囊胚,均显示出相似的临床结局。

用11色探针检测植入前胚胎非整倍体的实验研究

目的建立用11种不同的染色体探针进行三轮FISH杂交检测单卵裂球的技术,同时探讨胚胎中的嵌合体现象及1PN胚胎的整倍性。方法收集IVF/ICSI治疗周期中,受精后第3天的废弃胚胎31枚,包括15枚2PN胚胎和16枚1PN胚胎用于研究。蛋白酶消化透明带,每个胚胎中吸取2、3个卵裂球,用0.2%Tween-20/0.01N HCl+甲醇/冰醋酸(3∶1)法固定,用11种染色体探针进行FISH杂交分析。结果共获72个卵裂球,成功固定核69个,成功率为95.8%;FISH杂交后,66个核信号完整,杂交成功率为95.6%;9个胚胎为嵌合型,嵌合体率为29.0%;16个1PN胚胎中6个正常,正常率为37.5%。结论建立了较稳定的应用11色探针进行FISH杂交诊断单卵裂球技术;第3天胚胎中嵌合体率较高,会增加PGS的误诊率;部分1PN胚胎染色体正常,在无2PN胚胎移植的情况下,1PN胚胎也可作为选择。

高育龄妇女胚胎植入前21号染色体非整倍体检测

目的运用荧光原位杂交技术(fluorescentinsituhybridization,FISH)对生育过21三体患儿的高育龄妇女的胚胎进行植入前遗传学诊断,达到优生目的。方法应用FITC标记的21号着丝粒探针对生育过21三体患儿的高育龄妇女的胚胎活检后单个卵裂球进行遗传学检测,选择正常信号或携带者信号核型胚胎进行移植。结果常规单精子显微注射-胚胎移植(intracytoplasmicsperminjection,ICSI)后获取胚胎4个,活检优质胚胎3个,杂交后每个卵裂球均出现3个21号染色体完整信号,认为3个胚胎均为21三体异常胚胎,故建议放弃移植,从而成功避免了21三体患儿的出生。结论运用21号染色体着丝粒探针荧光原位杂交技术对生育过21三体患儿的高育龄妇女的胚胎进行植入前遗传学诊断是可行的,同时也是必要的,是避免非整倍体患儿出生的重要途径。

胚胎形态动力学参数在胚胎整倍体预测模型构建中的应用研究

目的:基于胚胎形态动力学参数建立整倍体预测模型,为辅助生殖技术中胚胎发育潜能的评估提供参考。方法:回顾性分析2020年12月至2023年6月接受胚胎植入前遗传学检测患者的临床资料,共纳入364个周期的1383个可利用囊胚。根据囊胚整倍性分为整倍体组(442个囊胚)和非整倍体组(941个囊胚)。比较两组胚胎形态动力学参数,并进行多因素logistic回归分析,构建整倍体预测模型,采用ROC曲线分析整倍体预测模型的灵敏度和特异度。另选取2023年7月至2024年4月纳入的215个周期的658个可利用囊胚的形态动力学参数资料进行临床验证,分析预测模型与临床实际的一致性。结果:整倍体组的t4、t5、s2、形成囊胚时间(tSB)、囊胚孵出时间(tHB)、tHB-tSB均小于非整倍体组(P<0.05)。logistic回归分析显示,t4、t5、s2、tSB、tHB、tHB-tSB为囊胚整倍性的影响因素(P<0.05)。整倍体预测模型:P=e x/(1+e x),X=-3.299-0.026×t4-0.018×t5-0.264×s2-0.009×tSB-0.007×tHB-0.153×tHB-tSB。Hosmer-Lemeshow拟合优度检验显示整倍体预测模型的拟合水平较好(χ^(2)=8.700,P=0.368)。整倍体预测模型的ROC曲线下面积为0.871(95%CI=0.852~0.889,P<0.001),灵敏度为75.86%,特异度为82.11%。临床验证整倍体预测模型的准确率为79.94%,预测模型与临床实际的一致性中等(kappa=0.561)。结论:胚胎形态动力学参数t4、t5、s2、tSB、tHB、tHB-tSB与整倍体形成具有相关性。本研究基于胚胎形态动力学参数构建的整倍体预测模型对胚胎整倍性具有较高的预测价值,可为胚胎发育潜能的评估提供参考。

胚胎植入前遗传学非整倍体检测在高龄和复发性流产患者中的应用

目的探究体外受精胚胎行植入前遗传学非整倍体检测(PGT-A)是否有助于改善高龄和复发性流产(RPL)患者的临床结局。方法本研究回顾性分析总结2017年1月至2019年6月来解放军总医院第六医学中心妇产科辅助生殖中心行PGT-A和未行PGT-A的相关病例。行PGT-A的116例患者共132个单囊胚冻融移植周期,其中高龄(≥35岁)患者74例,共完成85个冻融移植周期;RPL患者66例,共完成78个冻融移植周期。未行PGT-A的202例患者共216个单囊胚冻融移植周期,其中高龄(≥35岁)患者119例,共完成124个冻融移植周期;PRL患者23例,共完成32个冻融移植周期。根据女方年龄分为年龄≥38岁,年龄35~37岁,年龄<35岁3组。结果在年龄≥38岁组中,PGT-A可显著提高患者的临床妊娠率(P<0.01)和活产率(P<0.01),流产率有所下降但无统计学差异(P>0.05)。PGT-A并不能改善35~37岁和年龄<35岁组的临床结局。在RPL患者中,行PGT-A可降低早期流产率(P<0.05)和生化妊娠损失率(P<0.05),临床妊娠率和活产率有所升高但差异无统计学意义(P>0.05)。结论辅助生殖技术中,PGT-A有改善年龄大于38岁高龄患者妊娠结局的潜力,并能够降低RPL患者的早期流产率,减少妊娠损失。

胚胎植入前非整倍体检测:囊胚形态学评分有指导作用吗?

目的评价囊胚形态学评分在PGT-A周期中的指导作用。方法回顾性分析2019年1~12月在本中心行PGT-A检查的474枚囊胚的形态学评分及相关临床资料,按照活检时间不同分为D5组(204枚)和D6组(270枚),比较不同囊胚评级与整倍体率及活产率的关系;又将244枚BB级囊胚按照不同囊胚扩张程度分为<4期、4期和>4期3组,比较D5或D6活检时不同囊胚扩张程度对整倍体率和活产率的影响。结果474枚囊胚中,D5活检囊胚中,一般囊胚的整倍体率显著高于较差囊胚(56.59%vs.37.50%,P=0.025);D6活检囊胚中,一般囊胚的整倍体率亦显著高于较差囊胚(58.26%vs.37.24%,P=0.005)。通过PGT-A获得233枚整倍体胚胎,移植126枚,移植D5、D6各不同评级囊胚的活产率均无显著性差异(P>0.05)。244枚BB级囊胚中,D5活检的各扩张程度囊胚整倍体率无显著性差异(P>0.05);D6活检的扩张程度<4期囊胚整倍体率显著低于4期囊胚(25.00%vs.62.20%,P=0.026)。移植的72枚BB级整倍体囊胚中,移植D5、D6不同扩张程度囊胚亚组间活产率均无显著性差异(P>0.05)。结论对发育速度较慢(D6囊胚)、扩张程度<4期的较差囊胚[内细胞团(ICM)和滋养外胚层细胞(TE)评级低于BB级]进行PGT-A检测更具意义。经PGT-A筛查获得的整倍体胚胎,建议优先选择发育速度较快(D5囊胚)的整倍体胚胎进行移植。

植入前遗传学筛查中不同形态特征的胚胎整倍体率比较

目的通过植入前遗传学筛查患者的胚胎和染色体结果分析,比较不同发育形态参数胚胎的整倍体和非整倍体率。方法收集2015年1月1日至2017年4月30日西北妇女儿童医院生殖中心行植入前遗传学筛查(PGS)患者,胚胎培养至卵裂期和囊胚期活检,PGS检测采用array-CGH(BlueGnome 24SureV3),卵裂期评价主要参数为D3天胚胎卵裂球数目、碎片体积比例和不均卵裂球数目。囊胚评价采用Garnder囊胚分级法。比较胚胎的形态参数与整倍体的发生率。结果 PGS共活检348枚胚胎,成功检测322枚胚胎,其中整倍体胚胎数目为123(38.2%),非整倍体胚胎数目为199(61.80%)。卵裂期胚胎碎片体积比例在整倍体与非整倍体组中具有统计学差异(t=-2.60,P<0.05),D 3天胚胎卵裂球数目和不均卵裂球数目未检验出统计学差异。活检时囊胚扩张期别在整倍体与非整倍体发生率具有统计学差异(χ2=2.00,P<0.05),活检时间(D4~D5,D6)、内细胞团形态(A/B,C)和外胚层形态(A/B,C)无统计学差异(χ2值分别为0、0、1.69,均P<0.05)。结论通过PGS患者的染色体结果分析得出,卵裂期胚胎评价参数中胚胎的碎片体积比例低的胚胎整倍体率较高,囊胚形态参数中活检时的囊胚扩张期别较高的囊胚整倍体率较高。

胚胎植入前遗传学诊断和筛查的研究进展

胚胎植入前遗传学诊断(PGD)和筛查(PGS)是近20余年发展的一种具有较低危险度的植入前遗传学检测方法。该方法对卵母细胞或者植入前胚胎进行活检,利用分子生物学技术进行检测,对遗传物质进行分析,选择遗传信息正常的胚胎植入女方子宫,以避免妊娠有"病"的胎儿,同时提高妊娠率和活产率,降低流产率和多胎率。其主要适用于高龄、反复流产、反复植入失败和有遗传病史的夫妇等。综述在PGD和PGS中所应用的荧光原位杂交(FISH)、聚合酶链反应(PCR)、比较基因组杂交(CGH)、微阵列CGH(arrayCGH)、单核苷酸多态性-微阵列(SNP-array)和高通量测序等方法。各种技术方法均有其优缺点和适用范围,单细胞高通量测序技术以其高度的敏感性、准确性、灵活性等特点显示出巨大的优势,随着该技术的进一步完善和成熟,将成为PGD/PGS的一个强有力的检测手段。

胚胎冻融对卵裂期行植入前遗传学诊断或筛查后可移植胚胎临床结局的影响

目的:探讨胚胎冻融对卵裂期胚胎行植入前遗传学诊断或筛查后可移植胚胎临床结局的影响。方法:回顾2011年1月至2016年12月在浙江大学医学院附属妇产科医院行植入前遗传学诊断或筛查的302个周期,分析其病例组成,比较其中新鲜胚胎组(n=184)与冻融胚胎组(n=118)的移植妊娠率、着床率、活产率和流产率,并分析妊娠结局的影响因素。结果:新鲜胚胎组正常或平衡易位胚胎检出率高于冻融胚胎组,平均移植胚胎个数多于冻融胚胎组,差异有统计学意义(均P<0.05);新鲜胚胎组的妊娠率、着床率和活产率低于冻融胚胎组,而流产率高于冻融胚胎组,但差异均无统计学意义(均P>0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,女方年龄、男方年龄、胚胎类型、植入前遗传学诊断或筛查方式和病因对妊娠结局均无影响(均P>0.05)。结论:卵裂期胚胎冷冻复苏对植入前遗传学诊断或筛查后可移植胚胎的临床结局无显著影响。