人胚胎海马神经干细胞体外培养方法的建立

为建立人胚胎海马神经干细胞的体外培养方法 ,防止神经干细胞在培养过程中的分化 ,确立最佳的传代时机和方法 ,分离 1 6周人胚海马组织 ,采用无血清培养基对所分离的神经干细胞进行体外培养 ,比较不同培养条件与方法所获得的神经球数量的差异。结果 :建立了人胚胎海马神经干细胞体外培养的优化条件 ,确立了最佳传代方法与时机。提示 :人胚胎海马神经干细胞在体外抑制分化的条件下可以长期处于未分化状态增生 ,并且可多次传代。

大鼠胚胎海马移植物治疗^（137）Csγ射线所致的脑机能障碍

用条件饮水反应实验方法检测大鼠的学习能力。应用外科手术将大鼠胚胎海马组织移植物植人３５日龄受照大鼠海马。结果表明，大鼠条件饮水测验成绩具有波动性；手术前后对照大鼠条件饮水测验成绩无显著差异（ｐ＞０．０５），而移植组大鼠手术后的条件饮水测验成绩显著高于手术前（ｐ＜０．０１）；手术前两组大鼠的条件饮水测验成绩无显著差异（Ｐ＞０．０５），手术后移植组大鼠条件饮水测验成绩显著高于对照组（Ｐ＜０．０１）。这提示移植手术确实能治疗大鼠出生前１３７ＣＳγ射线照射所致的脑机能障碍。

胚胎海马源与上丘源神经干细胞体外增殖能力的比较

神经干细胞（NSCs）在体内外环境作用下的分化已有大量研究，并已成功用于大鼠的中枢神经修复。我们分别从脑发育过程中较为原始的海马脑区以及视觉中枢上丘中分离、培养出NSCs．并进行细胞体外增殖能力的比较。

人胚胎神经干细胞体外培养及其增殖与分化的研究

目的 建立神经干细胞分离、培养及分化的鉴定技术 ,观察神经干细胞增殖、分化的特点。方法 从人胚胎海马区分离神经干细胞 ,采用无血清培养基 ,进行体外扩增培养、传代。采用免疫细胞化学法鉴定神经干细胞和分化的神经细胞 ;利用流式细胞仪和细胞生长曲线检测神经干细胞的增殖能力。结果 从人胚胎脑海马区分离的细胞具有增殖和多向分化潜能 ,可进行传代培养 ,获得的细胞团中大部分为nestin表达阳性细胞。贴壁分化后可以出现NSE、GFAP表达阳性的细胞。结论 用上述方法分离培养的细胞能表达nestin蛋白 ,具有自我更新和增殖能力 ,并具有向神经元、星形胶质细胞分化的潜能 ,具备神经干细胞的特征 。

人胎海马Nestin免疫阳性细胞的形态学观察

目的探讨不同胎龄海马nestin免疫阳性细胞的分布、形态变化。方法采用ABC免疫细胞化学法结合DAB显色技术研究人胎儿海马内nestin神经元的定位和分布。结果7例胎儿海马内都有nestin免疫阳性细胞的表达,免疫阳性细胞呈现3种形态,3种形态的细胞在不同胎龄胎儿海马内分布形式、数量有明显不同。结论人胎海马Nestin免疫阳性细胞呈3种不同的形态,其分布形式和表达数量随胎龄的变化而变化。

人胚海马神经干细胞体外培养及分化研究

目的研究人胚胎海马神经干细胞体外长期培养的条件和其在自主分化条件下的分化能力和分化特点。方法从人胚胎海马分离神经干细胞。采用无血清培养法,进行体外培养、扩增,形成神经球。使神经球贴壁分化,分化培养基不含有任何细胞有丝分裂促进剂。使用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记分裂增生的细胞,观察细胞的分裂增殖情况。使用免疫细胞化学法鉴定神经干细胞及其在不加诱导剂下的自主分化能力。结果从人胚胎海马分离的神经干细胞具有增殖能力,细胞倍增时间为3.2d。BrdU检测有正在分裂、增殖的细胞。细胞贴壁分化后可以出现Nestin、GFAP、Tuj-1表达阳性的细胞。神经干细胞共培养6个月,传代14代。结论分离培养的海马神经干细胞具有自我更新和增殖能力,可以长期培养。在不加任何诱导剂的自主分化条件下可以向神经元、胶质细胞分化。少突胶质细胞的培养需要不同的培养条件。分离培养的干细胞具有神经干细胞的特征。可用于基础和临床的相关研究。

癫痫的细胞移植现状

癫痫,尤其是难治性癫痫的治疗一直是世界性难题之一。近年来,神经细胞移植为癫痫的治疗带来了新的希望。移植的释放抑制性神经递质的细胞、胚胎海马细胞及神经干细胞等可能与宿主形成了功能上的联系、整合,并在癫痫宿主体内建立新的神经环路,从而抑制癫痫的发生。这些证明神经细胞移植可能将在癫痫治疗的研究中发挥巨大的作用。