牙鲆胚胎玻璃化冷冻技术研究

对名优经济鱼类牙鲆(Paralichthys olivaceus)胚胎的玻璃化冷冻技术方法进行了研究.筛选出了适合于牙鲆胚胎平衡和培养的基础液BS2,对牙鲆不同时期胚胎在玻璃化液VS2中的耐受能力进行了研究,随着平衡时间的延长,胚胎成活率逐渐降低,4-5对肌节期、16-20对肌节期、尾芽期表现出对玻璃化液较强的适应能力.对洗脱液的种类和浓度进行了筛选,结果显示0.125mol/L蔗糖洗脱成活率最高.在室温(21～22℃)和6℃下分别对牙鲆不同时期胚胎在VS1中的成活率进行了比较研究,结果显示出15-20对肌节期在室温下的成活率高于低温,其它时期胚胎低温下的成活率高于室温.利用VS4、VS2、VS3分别对牙鲆尾芽期、肌效应期、出膜前期胚胎进行玻璃化冷冻保存,取得了5粒成活胚,4粒孵化出膜,成活时间为14～67h.

胚胎玻璃化冷冻技术的临床应用(附成功分娩1例报道)

目的 探讨胚胎玻璃化冷冻技术的临床应用效果。方法 运用玻璃化冷冻技术保存75例患者的397个胚胎,复苏13例69个胚胎,并根据患者的情况进行胚胎移植。结果 69个胚胎中,丢失3个,存活26个,存活率为39.4%。复苏后8例患者因胚胎质量差未移植,另外5例患者共移植了14个胚胎,其中1例获得单胎妊娠,分娩1名健康女婴。结论 玻璃化冷冻技术简便、经济,并能够有效地冻存人类早期胚胎,可成为胚胎冷冻方法的另一个选择。

近交系小鼠胚胎玻璃化冷冻技术研究

目的 对近交系小鼠体内受精的胚胎在三种不同处理温度 (2 0℃、2 5℃、2 8℃ )进行玻璃化冷冻保存。方法 不同温度下 ,胚胎在 10 %EG溶液中预处理 5min ,再投入EFS40玻璃化溶液中 1min ,平衡后冷冻。结果 与2 0℃和 2 8℃相比 ,三个品系小鼠的胚胎都在 2 5℃冷冻时获得最佳效果 ,解冻后培养观察发育率分别是 87.77%、90 0 0 %、87 18%。结论 该结果对近交系小鼠胚胎保存具有重要意义。