卵裂球数量及胚胎碎片对人冻胚卵裂球存活状况的影响

目的:探讨卵裂球数量及胚胎碎片对人冻胚卵裂球存活状况的影响。方法:取110例FET(frozen embryo transfer)周期的冻融胚胎,根据卵裂球数量及胚胎碎片分为5组:6～8细胞无碎片组(A组,n=102),4～5细胞无碎片组(B组,n=54),6～8细胞<10%碎片组(C组,n=75),4～5细胞<10%碎片组(D组,n=57),6～8细胞10%～25%碎片组(E组,n=28)。计算各组的胚胎存活率、卵裂球全存活率及卵裂球全死亡率。结果:110个FET周期共解冻胚胎316枚,复苏率68.7%。相同胚胎碎片条件下,6～8细胞与4～5细胞两组间胚胎存活率、卵裂球全存活率、卵裂球全死亡率均无显著差异(P>0.05)。6～8细胞胚胎中,碎片越多,胚胎存活率越低,卵裂球全死亡率越高(P<0.01),而卵裂球全存活率无差异(P>0.05);4～5细胞胚胎中,碎片越多,胚胎存活率(P<0.05)、卵裂球全存活率越低(P<0.01),而卵裂球全死亡率无差异(P>0.05)。结论:胚胎碎片是影响人冷冻胚胎中卵裂球存活状态的重要因素,而卵裂球数量对卵裂球存活无明显影响。

Beclin1调控的自噬在胚胎碎片形成中的作用及机制研究

目的:Beclin1调控的自噬在胚胎碎片形成中的作用及可能机制。方法:选择2016年7月至2019年10月我院行取卵体外受精的患者240例,选取胚胎(3PN)后根据碎片含量不同,细分为如下四组:低碎片组(碎片比例<10%)、中低碎片组(25%>碎片比例≥10%)、中高碎片组(50%>碎片比例≥25%)、高碎片组(碎片比例≥50%),每组均60例。使用G2囊胚培养液对所选胚胎进行培养,使用干扰素(浓度40ng/mL)干扰36h。采用免疫印迹法定量检测Beclin1蛋白、PI3K蛋白、LC3B蛋白、mTOR蛋白、AKT蛋白含量。结果:干扰前后比较,四组患者Beclin1蛋白、PI3K蛋白、LC3B蛋白、mTOR蛋白、AKT蛋白含量均显著增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。干扰前比较6项蛋白含量,从高到低依次为:低碎片组、中低碎片组、中高碎片组、高碎片组,差异均有统计学意义(P<0.05)。干扰后比较,四组患者Beclin1蛋白、PI3K蛋白、LC3B蛋白含量的差异均有统计学意义(P<0.05)。Beclin1与PI3K、LC3B、mTOR、AKT相关性均有统计学意义(P<0.05)。结论:高比例胚胎碎片将抑制Beclin1、PI3K、LC3B、mTOR、AKT蛋白含量,Beclin1调控自噬过程可能产生干扰素类似效应,从而影响相关通道蛋白的表达。

胚胎碎片的形成机制和影响因素

胚胎碎片的产生是体外胚胎发育过程中常见的现象,碎片的多少、大小和分布是胚胎评级的主要条件之一,与辅助生殖(artificial reproductive technology,ART)的着床率和临床妊娠率密切相关。碎片的生成是细胞凋亡的征象,当胚胎受到自身原因或体外环境压力时,会产生DNA修复机制,排出对机体有害的细胞成分,导致碎片的生成。本文就胚胎碎片的形成机制和影响碎片生成的因素进行综述。

添加胚胎碎片提高奶牛胚胎移植效果试验

采用胚胎移植时在胚胎中加入冷冻的雄性胚胎碎片,以观察是否可提高奶牛胚胎移植效果。结果表明,添加胚胎碎片后的移植妊娠率达69．23％(9/13),与对照组的52％(13/25)比较,差异极显著 (P<0．01)。

胚胎碎片去除后对妊娠结局的影响

目的:探讨胚胎碎片去除后对临床妊娠结局的影响。方法:回顾性分析2016年1月至2017年12月新鲜胚胎移植187个周期,移植胚胎碎片含量均为21%~50%,其中A组(n=79)在胚胎移植前,采用激光辅助孵化结合显微机械操作去除胚胎碎片,B组(n=108)采用激光辅助孵化,未去除胚胎碎片。比较两组胚胎移植后的临床妊娠结局。结果:A组临床妊娠率、种植率显著高于B组(P<0.05);两组的多胎率、流产率、早产率、活产率及出生缺陷率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:胚胎移植前,采用激光辅助孵化结合显微机械操作去除胚胎碎片,能够有效提高临床妊娠率和种植率。

胚胎碎片出现时间对IVF/ICSI-ET妊娠结局的预测价值

目的探讨胚胎碎片出现时间对体外受精-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)妊娠结局的预测价值。方法回顾性分析225个黄体期长方案促排225个周期中1 658枚胚胎碎片出现时间,分为3组,即A组受精后24～25 h胚胎有早期卵裂伴有碎片,B组受精后24～25 h有早期卵裂不伴胚胎碎片,C组受精后48 h出现分裂。比较各组在第3天的优胚率、囊胚形成率、着床率及临床妊娠率。结果 A组的优胚率、临床妊娠率、均明显低于B、C2组(34.00%与79.18%及55.14%,31.15%与64.94%及56.58%,P<0.05)。A组囊胚形成率和着床率低于其他2组,但差异无统计学意义;B组第3天的优胚率、囊胚形成率、着床率、临床妊娠率均高于C组,但差异无统计学意义。结论胚胎碎片出现的时间是一项对胚胎质量进行评估的有效补充,对选择优质胚胎进行移植、提高IVF/ICSI-ET治疗的临床妊娠率有一定的帮助。

辅助生殖技术中胚胎碎片形成原因及其处理

在体外受精-胚胎移植（IVF-ET）技术中，如何提高临床妊娠率而又不增加多胎妊娠的危险是辅助生殖领域一直关注的问题，其关键在于如何在胚胎发育早期采用非侵人性手段选择具有发育潜能的胚胎进行移植，从而减少胚胎移植数目。目前评价胚胎质量及发育潜能的指标主要有：胚胎生长速度、卵裂球发育的同步性、卵裂球形态、碎片比例等。胚胎碎片是胚胎形态评估中的一项重要参数，是目前作为评估胚胎质量的重要依据之一。本文就胚胎碎片形成的原因及处理做一综述。

胚胎碎片对妊娠临床结局及去除后对胚胎发育的影响

目的观察胚胎碎片对胚胎移植后的临床结局的影响，以及去除碎片对含碎片的胚胎发育影响。方法回顾性分析2012年新鲜IVF周期移植至少一个≥10％碎片的胚胎与移植完全无碎片胚胎临床结局，及2012年3月～5月IVF周期患者O／1PN优质胚胎，观察胚胎碎片去除组、胚胎碎片组及无碎片组的胚胎发育情况。结果含胚胎碎片组的临床妊娠率及种植率显著低于无碎片组，差异有显著性意义；去除碎片组与未去除碎片组的囊胚形成率与无碎片组，差异无显著性意义。结论胚胎碎片影响胚胎的种植；去除胚胎碎片不能显著改善胚胎的发育潜能。

胚胎发育对囊胚移植妊娠结局影响的临床研究

目的研究胚胎发育对囊胚移植妊娠结局的影响。方法回顾性分析IVF-ET助孕中囊胚培养和移植的60例病例,根据是否妊娠分为2组,妊娠组34例,未妊娠组26例,比较并分析2组正常受精率、第2d卵裂球数量、第3d卵裂球碎片率、第4d紧密化程度和第5d天胚胎发育阶段的差异。结果妊娠组和未妊娠组正常受精率、第2d卵裂球数量、第4d紧密化程度无明显差异,但第3d卵裂球碎片率妊娠组明显低于未妊娠组,而第5d优质囊胚移植率妊娠组也高于未妊娠组,两者比较有显著性差异(P<0.05)。结论第5d天胚胎发育阶段和第3d卵裂球碎片率影响囊胚的植入率,同时通过观察第5d天胚胎发育阶段和第3d卵裂球碎片率来选择优质胚胎移植将有助于提高妊娠率。

授精第3日胚胎的囊胚培养结果及影响因素探讨

目的探讨授精第3日(D3)胚胎继续培养发育成囊胚的能力及其影响因素。方法回顾性分析138个周期共计424个D3胚胎继续培养至第6天的囊胚形成情况。分别按照卵裂球数、胚胎碎片率、年龄、扳机日(HCG日)雌二醇(E_2)水平分为:卵裂球数≤5个组(272个)、卵裂球数≥6个组(152个);胚胎碎片率<10%组(103个)、胚胎碎片率≥10%且≤25%组(321个);年龄<35岁组(298个)、年龄≥35岁组(126个);扳机日E_2≤3000 pg/ml组(182个)、扳机日E_2>3000 pg/ml组(242个)。分析囊胚形成与年龄、卵裂球数量和胚胎碎片率以及扳机日E_2的关系。结果卵裂球数≥6个组的胚胎可利用囊胚形成率高于卵裂球数≤5个组,差异有显著性(P<0.05);胚胎碎片率<10%组胚胎的可利用囊胚形成率高于胚胎碎片率≥10%且≤25%组,差异有显著性(P<0.05);年龄<35岁组的可利用囊胚形成率高于年龄≥35岁(36.51%),但差异无显著性(P>0.05);扳机日E_2>3000pg/ml组的可利用囊胚形成率高于扳机日E2≤3000pg/ml(38.46%),但差异无显著性(P>0.05)。结论胚胎卵裂球数和胚胎碎片率是影响胚胎发育能力的重要因素,能否形成囊胚与卵裂球数及碎片率有关,与年龄和扳机日E_2水平关联不大。

冷冻复苏胚胎卵裂球损伤因素分析

目的探讨冷冻复苏胚胎移植(FET)周期中影响胚胎卵裂球完整性的相关因素。方法回顾性分析98例移植两个胚胎的FET周期临床资料,移植的两个胚胎其中一个复苏后所有卵裂球完整,另一个胚胎部分卵裂球完整或全部卵裂球死亡。采用多因素1∶1配对资料条件Logistic回归分析胚胎胞质颗粒化、胞质空泡、胚胎碎片、卵裂球数目、卵裂球均一度对冷冻复苏胚胎卵裂球完整性的影响。结果胞质空泡(OR=13.413)、胚胎碎片(OR=1.101)增加了冷冻复苏胚胎卵裂球损伤的危险性,而卵裂球数目增加(OR=0.569)降低了冷冻复苏胚胎卵裂球损伤的可能(P<0.05)。结论胞质空泡、胚胎碎片及卵裂球数目是影响冷冻复苏胚胎卵裂球损伤的重要因素。

全胚胎体外发育阻滞成功妊娠及分娩1例

本文介绍1例2015年3月来自浙江省台州医院原因不明的不孕症患者。患者曾先后进行2个周期的辅助生殖治疗,均无可移植胚胎。于本院行体外受精(IVF)助孕,受精后获得8个正常受精卵,第3天胚胎评分见正常受精发育的胚胎碎片异常增多,形态评分Ⅳ或Ⅴ级,属于不可移植胚胎。沟通后移植受精后第3天的3枚胚胎,最终足月分娩1名正常女婴。

植入前遗传学筛查中不同形态特征的胚胎整倍体率比较

目的通过植入前遗传学筛查患者的胚胎和染色体结果分析,比较不同发育形态参数胚胎的整倍体和非整倍体率。方法收集2015年1月1日至2017年4月30日西北妇女儿童医院生殖中心行植入前遗传学筛查(PGS)患者,胚胎培养至卵裂期和囊胚期活检,PGS检测采用array-CGH(BlueGnome 24SureV3),卵裂期评价主要参数为D3天胚胎卵裂球数目、碎片体积比例和不均卵裂球数目。囊胚评价采用Garnder囊胚分级法。比较胚胎的形态参数与整倍体的发生率。结果 PGS共活检348枚胚胎,成功检测322枚胚胎,其中整倍体胚胎数目为123(38.2%),非整倍体胚胎数目为199(61.80%)。卵裂期胚胎碎片体积比例在整倍体与非整倍体组中具有统计学差异(t=-2.60,P<0.05),D 3天胚胎卵裂球数目和不均卵裂球数目未检验出统计学差异。活检时囊胚扩张期别在整倍体与非整倍体发生率具有统计学差异(χ2=2.00,P<0.05),活检时间(D4~D5,D6)、内细胞团形态(A/B,C)和外胚层形态(A/B,C)无统计学差异(χ2值分别为0、0、1.69,均P<0.05)。结论通过PGS患者的染色体结果分析得出,卵裂期胚胎评价参数中胚胎的碎片体积比例低的胚胎整倍体率较高,囊胚形态参数中活检时的囊胚扩张期别较高的囊胚整倍体率较高。

囊胚培养的相关因素分析

目的探讨体外受精(IVF)和精子卵胞浆内注射技术(ICSI)治疗周期中体外培养囊胚形成的影响因素。方法将卵裂期第3d(D3)冷冻后剩余胚胎进行体外延长培养至囊胚期,观察囊胚形成情况。结果共收集7438个冷冻后剩余胚胎,经序贯培养,形成1382个优质囊胚(18.58%)。D3胚胎中6个细胞的优质囊胚形成率(10.34%)显著高于4-5个细胞的优质囊胚形成率(5.45%),差异有统计学意义(P=0.011);7-9个细胞的优质囊胚形成率(19.95%)显著高于6个细胞的优质囊胚形成率(10.34%),≥10个细胞的优质囊胚形成率(27.47%)显著高于7-9个细胞的优质囊胚形成率(19.95%),差异均有统计学意义(P<0.001)。D2胚胎中4个细胞的优质囊胚形成率(25.40%)显著高于3个细胞、5个细胞的优质囊胚形成率(10.26%,15.41%),差异有统计学意义(P<0.001)。碎片评级I-II级D2、D3胚胎的囊胚形成率均显著高于III-IV级的胚胎,差异有统计学意义(P<0.001)。结论体外延长培养能有效筛选具有发育潜力的胚胎,优质囊胚形成与D2、D3胚胎的卵裂球数及碎片评级密切相关。

形态学评分对胚胎发育潜能预测价值的探讨

目的探讨形态学评分对胚胎发育潜能预测价值。方法比较不同原核评分、不同卵裂球数及不同胚胎碎片的胚胎D5或D6囊胚形成情况。结果 D1天原核评分各组囊胚形成率及优质囊胚率无显著差异(P均>0.05)。D3天不同碎片含量胚胎囊胚形成率有显著差异(P<0.001)。S1组(碎片10-25%)、S2组(碎片25-50%)优质囊胚形成率显著高于S3组(碎片>50%),P均<0.001,S1与S2组相比,优质囊胚形成率则无显著差异(P>0.05)。D3天C2组(7-9-cells)的胚胎囊胚形成率和优质囊胚率最高,与C1组(≤6-cells)相比差异有统计学意义(P<0.001),但与C3组(≥10-cells)相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 D1天原核形态学评分不能有效预测胚胎发育潜能,D3天胚胎碎片少于50%,细胞数大于6的胚胎具有较高的发育潜能。

人卵泡液脂肪酸谱评估卵母细胞发育潜能的初步研究

目的：分析体外受精（IVF）患者单卵泡液脂肪酸谱表达差异与卵母细胞发育潜能的相关性。方法：利用气相色谱分析技术检测卵泡液脂肪酸谱,以第3日胚胎碎片评分（EFS）及胚胎细胞数目（ECN）为卵母细胞发育结局的评价指标,行相关性分析。结果：单卵泡液中普遍存在6种脂肪酸：十一烷酸、肉蔻豆酸、棕榈酸、硬脂酸、油酸和亚油酸。Spearman分析显示油酸与EFS呈正相关（r=0.357,P=0.014）,各种脂肪酸与ECN无明显相关性。Logistic回归进一步分析显示油酸浓度为EFS阳性预测因子（OR=1.035,95%CI 1.007~1.064）。结论：人卵泡液油酸含量在一定程度上可预测卵母细胞发育潜能。