人胚胎细胞移植的临床应用研究

人胚胎细胞移植,包括胰岛组织移植、胎脑细胞移植、胎肝细胞移植、胎胸腺细胞移植及胎脾细胞移植等,一般来讲是指将取自人胚胎有活性细胞群制备成悬液移植到另一个人体内,以恢复其功能而达到治疗目的的方法。近年来细胞移植在国内外临床应用的意义日趋重要。尤其是人胚胎细胞移植的应用是我国器官移植工作近年主要特点之一。本文就近年国内外几种人胚胎细胞移值的临床应用研究的进展作一扼要综述。 1.胎胰岛组织移植目前认为人胎胰腺是胰岛移植理想的供体组织。

胚胎肝细胞肌肉及腹腔移植病理形态学观察

胚胎细胞移植研究近年来得到青睐,并广泛被临床应用于治疗各种恶性肿瘤及免疫性疾病,但对选择何种移植途径以便植入的细胞群发挥最大作用,有利于其长期健康生存和繁殖,尚缺少研究,为此我们设计本实验,目的在于探讨肌肉及腹腔移植后胚胎细胞形态学演变过程,为选择最佳移植途径提供理论依据。

家兔胚胎细胞核移植的研究

研究改进了兔胚胎细胞核移植的技术体系 ,并对核移植胚胎的体外培养以及克隆胚胎的体内发育进行了试验。结果表明 :卵母细胞去核率为 88.9% (8/ 9) ,重组胚融合率为 76 .7% (176 / 2 2 9) ,将融合的重组胚与兔胎儿成纤维细胞共同培养 ,其 2～ 4细胞发育率、8～ 16细胞发育率以及桑椹胚和囊胚的发育率分别为 6 5 .7% (2 3/35 )、2 8.6 % (10 / 35 )、2 2 .9% (8/ 35 ) ,显著高于“TCM - 199+10 %FCS”系统培养的 43.3% (13/ 30 )、2 6 .7% (8/30 )、16 .7% (5 / 30 )。 16及 32细胞期卵裂球的重组胚可发育到产仔 ,将 111枚重组胚移植给 9只同期处理的受体母兔 ,2只妊娠 ,其中 1只产出 2只足月克隆仔兔 ,1只在产前 1周 (妊娠 2 2d)

不同激活方法对牛体细胞核移植胚胎体外发育的影响(简报)

哺乳动物体细胞核移植在家畜品种改良、濒危珍稀动物保护以及生物学、医学等基础科学研究和应用中越来越显示出其重要的作用。自Wilmut等首次用成年动物体细胞作供体,获得第一只成年体细胞克隆绵羊“Dolly”以来,世界各国科学家进行了大量深入的研究,已在小鼠、牛、猪、山羊等家畜上获得了成功。而且。

转NGF基因雪旺细胞和胚胎脊髓细胞悬液移植治疗脊髓损伤的实验研究

目的 :探讨胚胎脊髓细胞悬液 (FSCS)、雪旺细胞 (SC)和神经生长因子 (NGF)修复脊髓损伤的疗效。方法 :用改良Allen法制成4组脊髓损伤动物模型(80只) ,1周后分别行空白对照组 (DMEM ) ,FSCS ,FSCS +SC和FSCS +NGFSC移植入脊髓损伤部位 ,脊髓移植1个月和3个月后分别采用免疫组化染色法观察神经丝蛋白(NF)、髓基质蛋白 (MBP)、5羟色胺(5_HT)的表达情况 ,并根据图像分析各实验组脊髓移植物的免疫阳性反应变化 ;通过改良的Tarlov评分方法观察行为变化。结果 :FSCS +NGFSC联合移植治疗脊髓损伤能够明显促进脊髓再生和修复 ,改善脊髓功能 ,4组疗效之间有显著性差异 (P<0.01)。结论 :转NGF基因雪旺细胞和胚胎脊髓细胞悬液移植治疗脊髓损伤时NGF基因修饰的SC局部释放的NGF能够刺激受损轴突再生 ,促进FSCS移植物与受损脊髓的整合 。

供体细胞和去核卵母细胞的不同预激活对体细胞核移植胚胎体外发育的影响

研究用细胞质内注射法构建重组胚,比较了离子霉素和乙醇预激活供体细胞和去核卵母细胞对重组胚卵裂和体外发育的影响。结果表明:与未经处理的对照组相比,离子霉素预激活供体细胞时重组胚的卵裂率和囊胚发育率有所提高;而供体细胞和去核卵母细胞同时用离子霉素预激活,重组胚的卵裂率无明显提高,囊胚发育率下降;用离子霉素或乙醇预激活去核卵母细胞,对重组胚的卵裂和发育无明显影响。

胚胎心肌细胞移植到急性梗死心肌区的实验研究

目的 观察移植的胚胎心肌细胞在成年兔急性梗死心肌组织内的生长发育过程和其与宿主心肌组织的相互作用 ,以及对周围心肌血运的影响 .方法 将培养的兔胚胎心肌细胞 ,经 DAPI标记后 ,直接注入成年兔的急性梗死心肌组织内 (通过结扎左冠状动脉前降支建立急性心肌梗死模型 ) ,同时设立对照组 .4 wk后处死动物 ,进行组织学和电镜观察 .结果 4 wk后的心肌组织切片中 ,移植心肌细胞与宿主心肌细胞之间形成闰盘 ,其排列方向与宿主心肌肌纤维方向平行 ,同时 ,与对照组相比 ,心肌梗死区面积减少及移植区血管密度增高 (P<0 .0 5 ) .结论 移植的胚胎心肌细胞在受体急性梗死心肌内可以继续生长发育 ,逐渐分化成熟 ,从而稳定病损的心肌结构 ,改善心脏的收缩功能 ,同时 。

核移植胚胎干细胞的研究及其应用前景

随着核移植技术和干细胞技术的逐渐成熟,目前已获得牛、小鼠核移植胚胎干细胞,以及人-兔异种间核移植胚胎干细胞,这些细胞在体外可分化成多种细胞形态. 已经进行的实验性动物克隆性治疗,显示了诱人的潜力,但人核移植胚胎干细胞研究还面临着许多问题,如建系效率低、卵母细胞来源有限以及伦理学和安全性问题等. 长远地看,随着克隆效率的提高,在道德与法律之间达成共识,核移植胚胎干细胞必将造福人类.

干细胞核移植效率及核移植胚胎干细胞

干细胞为一类具有无限的或者永生的自我更新能力的细胞,包括胚胎性干细胞和成体干细胞。胚胎性干细胞有胚胎干细胞、畸胎瘤细胞和原始生殖细胞。成体干细胞主要有骨髓间充质干细胞、造血干细胞、神经干细胞、表皮干细胞、脂肪干细胞等。随着体细胞核移植技术与干细胞培养技术的成熟,两者相结合便产生了核移植来源胚胎干细胞(embryonic stem cells via nuclear transfer,ntES细胞),其不仅用于基础的研究,而且也用于临床医学的组织修复和移植的研究。现就干细胞作为核供体时的核移植效率,ntES细胞系的建立、其性质及诱导分化等的研究进展进行综述。

胚胎心肌细胞移植于大鼠急性心肌梗死周边区可行性的初步研究

目的 初步观察胚胎心肌细胞移植于大鼠急性心肌梗死周边区后第 72小时内的存活情况。方法 移植组结扎成年大鼠冠状动脉的同时在预测的梗死周边区注射培养的胚胎心肌细胞 ,对照组在正常大鼠的心肌内注射培养的胚胎心肌细胞 ,空白组结扎冠状动脉的同时在与移植组相同的部位注射等量的培养液。在移植后第 72小时采集标本 ,进行普通H -E染色及免疫组化染色 ,显微镜观察。结果 在移植组和对照组都可以看到移植的胚胎心肌细胞的存在 ,空白组未发现有移植的胚胎心肌细胞。结论 移植后

奶山羊转基因供核细胞的再饥饿对核移植胚胎发育的影响

为提高转基因奶山羊体细胞核移植胚胎早期发育率,将经转染外源基因的山羊胎儿成纤维细胞经饥饿培养(含0.5%FCS的DMEM)5天后分成两部分:第一部分细胞-80℃或液氮冻存,试验前复苏后直接用作供核细胞(试验组Ⅰ),或复苏后恢复培养(含10% FCS的DMEM)2-5天后再饥饿5天用作供核细胞(试验组Ⅱ);第二部分细胞作传代培养(含10% FCS的DMEM)2天后再饥饿5 天用作供核细胞(试验组Ⅲ)。将上述不同处理的供核细胞进行细胞周期与存活率的检测,并将该供核细胞移入去除遗传物质的山羊MⅡ期卵母细胞的卵周隙内,经电融合、化学激活后,将核移植(NT)胚胎经0.8%琼脂糖包理后移入临时寄母输卵管内,培养6天后回收并观察NT胚胎的早期发育。结果,试验组Ⅱ所用供核细胞中G_0/G_1期细胞所占比例及其存活率分别为95.68%、99.9%,均显著地高于试验组Ⅰ(88.66%、80%);试验组Ⅱ的桑椹及囊胚期NT胚胎的发育率(66.09%)显著地高于试验组Ⅰ(22.00%)与试验组Ⅲ(50.51%)。将以上发育的NT胚胎分别移入同步发情的受体后,35 天作B超妊娠诊断,试验组Ⅱ的受体妊娠率为45.83%,显著地高于试验组Ⅰ(20.00%)与试验组Ⅲ(9.58%)。流式细胞仪分析结果表明,饥饿后的供核细胞经冷冻,复苏后恢复培养2-5天,再经饥饿处理,能显著地提高G_0/G_1期细胞的比例及细胞存活率;应用该细胞所组建的NT胚不仅具有较高的桑椹与囊胚期发育率,而且具有较高的受体妊娠率。

胚胎干细胞移植心肌再生的研究进展

由心肌梗死、心力衰竭、心肌病等造成心肌细胞数量缺失,进而破坏心脏结构与功能,心肌细胞的不可再生性以及现有治疗手段均不能促使缺失心肌细胞数量恢复。而利用胚胎干细胞自我复制与全能分化特点,将其移植至宿主心脏以恢复心脏结构与功能,实验证实是可行的,但也存在一些问题,本文就这一研究领域的研究进展作一综述。

体外受精卵母细胞浆内单精子注射-胚胎移植患者血清和卵泡液中25-羟维生素D表达水平及与妊娠结局相关性研究

目的:分析体外受精卵母细胞浆内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)患者血清和卵泡液中25-羟维生素D水平及与妊娠结局的相关性。方法:回顾性分析接受IVF/ICSI-ET的500例患者资料,根据患者血清和卵泡液中25-羟维生素D[25(OH)D]水平将全部患者划分为血清正常组(n=346)与血清缺乏组(n=154)、卵泡液正常组(n=253)与卵泡液缺乏组(n=247),对比两组患者一般资料与妊娠结局,分析血清25(OH)D与卵泡液25(OH)D水平的相关性,血清、卵泡液25(OH)D水平与患者妊娠结局的相关性,Logistic分析血清、卵泡液25(OH)D水平与患者妊娠结局的关系,计算血清、卵泡液25(OH)D水平对于不良妊娠结局的预测Cut-off值。结果:血清缺乏组着床率、成功妊娠率、成功分娩率、血清25(OH)D水平均低于正常组(均P<0.05),卵泡液缺乏组着床率、成功妊娠率、成功分娩率、血清25(OH)D水平均低于正常组,早期流产率高于正常组(均P<0.05);血清与卵泡液25(OH)D水平呈高度正相关(P<0.05);血清25(OH)D水平和卵泡液25(OH)D水平均与妊娠结局分级呈中度负相关(P<0.05);Logistic分析可见,血清25(OH)D水平、卵泡液25(OH)D水平均为妊娠结局的保护因素(OR<1,P<0.01);血清25(OH)D水平与卵泡液25(OH)D水平对于IVF/ICSI-ET患者不良妊娠结局均具有中等预警价值,血清25(OH)D<24.305 ng/ml、卵泡液25(OH)D<22.855 ng/ml提示IVF/ICSI-ET患者不良妊娠结局。结论:IVF/ICSI-ET患者血清和卵泡液中25(OH)D水平及与妊娠结局的具有相关性,血清与卵泡液中25-羟维生素D表达水平具有明确相关性,血清与卵泡液中25-羟维生素D表达水平较高为理想妊娠结局的保护因素,对于IVF/ICSI-ET患者应注意检测25-羟维生素D的表达水平,低于预警值时应及时补充,以为理想妊娠结局提供必要保障。

大鼠心肌冷冻疤痕中胚胎心肌细胞移植物的观察

目的:观察胚胎心肌细胞移植物在大鼠冷冻心肌疤痕中存活的可行性。方法:以冷冻损伤造成16只大鼠左室游离壁心肌疤痕。于损伤后10天,将培养的胚胎心肌细胞或培养基注入心肌疤痕组织,5只动物冷冻后20天处死(疤痕对照组),细胞移植组7只,培养基对照组4只,移植后10天处死动物,取出心脏。结果:疤痕组和培养基对照组动物左室壁损伤局部组织变薄,细胞移植组室壁依然厚实。横纹肌α-肌动蛋白免疫组化染色证实,细胞移植组3只动物被证实有移植物存活。HE染色示移植物呈球形生长,移植细胞体积小,呈梭形,胞核数目多,核/质比例高,横纹不明显,排列不规则。移植物中及其周围未见淋巴细胞浸润。培养基对照组未见任何移植物生长征象。结论:胚胎心肌细胞移植在异体心肌疤痕中能够存活,该实验方法为修复心肌梗死疤痕,改善心脏功能提供了新的治疗策略。

大脑损伤与移植胚胎大脑细胞后细胞分裂的流式细胞计数研究

大脑损伤与移植胚胎大脑细胞后细胞分裂的流式细胞计数研究王传松，蔡文琴第三军医大学６３００３８实验用Ｗｉｓｔａｒ正常成年大鼠１５只、１６天的胚胎大鼠５只。１５只成年大鼠中，５只做正常对照，１０只做左侧纹状皮质及深部背海马的损伤，其中５只伤后立即向损伤灶...

胚胎心肌细胞移植治疗心脏病的研究近况

胚胎心肌细胞具有分化和增殖的能力，植入受损心肌组织后可形成功能性心肌细胞，与宿主心肌细胞成为合胞体，从而改善心脏功能，是根治心脏病的一条最有效的途径，具有广泛的临床应用前景。本文主要介绍其研究方法、观察内容、功能评价、影响因素及现存问题等方面的研究进展。