转化生长因子β_1对A系小鼠胚腭突细胞增殖代谢的影响

目的 研究不同剂量转化生长因子 β1(TGFβ1)对A系小鼠胚腭突细胞增殖和DNA、蛋白质及PGE2合成的影响。方法 实验分为 9组 ,每组设平行 4孔 (瓶 ) ,每组分别加入TGFβ1使其终浓度为 0 .0 0 5ng/ml,0 .0 1ng/ml,0 .0 5ng/ml,0 .1ng/ml,0 .5ng/ml,1ng/ml,5ng/ml,10ng/ml,5 0ng/ml,每组均设空白对照 ,在实验后第 1、3、5天分别检测细胞的OD值、DNA、蛋白质和PGE2 的含量。结果 在高浓度血清条件下 ,TGFβ1可显著刺激腭突细胞的增殖 ,但在低浓度血清条件下 ,TGFβ1对A系小鼠胚腭突细胞具有双重效应 ,即在其 0 .0 0 5～ 0 .0 1ng/ml时促进腭突细胞增殖 ,而随着TGFβ1浓度的增大 ,逐渐抑制腭突细胞的增殖。TGFβ1使腭突细胞PGE2 及蛋白质合成增加。结论 TGFβ1对A系小鼠胚腭突细胞的增殖具有双重作用 ,可能是腭突正常发育的重要调节因子。

转化生长因子α对A系小鼠胚腭突细胞增殖代谢的影响

目的 研究不同剂量转化生长因子α(TGFα)对A系小鼠胚腭突细胞增殖和DNA、蛋白质及PGE2合成的影响。方法 实验分为 9组 ,每组设平行 4孔 (瓶 ) ,分别加入TGFα使其终浓度为 0 .0 0 5ng/ml,0 .0 1ng/ml,0 .0 5ng/ml,0 .1ng/ml,0 .5ng/ml,1ng/ml,5ng/ml,10ng/ml,5 0ng/ml。每组均设空白对照。在实验后第 1、3、5天分别检测细胞的OD值、DNA、蛋白质和PGE2 的含量。结果 TGFα可显著增加腭突细胞的OD值 ,促进DNA及蛋白质合成 ,在培养早期TGFα促进腭突细胞PGE2 的合成 ,而在培养后期则表现为抑制作用。在含量 0 .0 0 5～ 10ng/ml,TGFα促细胞增殖作用呈剂量依赖性 ,10ng/ml时TGFα的作用最强。 结论 TGFα显著促进腭突细胞的增殖代谢 ,其作用与表皮生长因子 (EGF)相类似 ,可能与EGF及其他生长因子共同调节腭发育。

苯妥英钠诱导鼠胚腭突间充质细胞凋亡与Satb2表达变化的关系

目的:探讨苯妥英钠是否能诱导鼠胚腭突间充质细胞凋亡,以及与Satb2基因表达间的关系。方法:取妊娠15 d C57BL/6J鼠胚腭突,原代培养腭突间充质细胞。用细胞免疫荧光鉴定细胞的特性,流式细胞仪检测细胞的纯度和CCK-8法测定苯妥英钠处理细胞的最佳作用浓度和时间;用Annexin-V FITC PI双标法检测细胞早期凋亡情况及用TUNEL法检测细胞晚期凋亡情况;用实时定量PCR及Western blot分析及检测处理后细胞的Satb2的表达变化。结果:原代培养的细胞纯度可达90%左右。与对照组比,苯妥英钠浓度在200μg/mL以下作用24 h可使致死率达50%左右。苯妥英钠可诱导鼠胚腭突间充质细胞显著凋亡。苯妥英钠能显著抑制鼠胚腭突间充质细胞中Satb2 mRNA(下调至58%)和蛋白表达(P<0.01)。结论:苯妥英钠诱导腭裂可能与鼠胚腭突间充质细胞凋亡相关,可能是通过下调细胞中Satb2的表达来实现。