苯妥英钠诱导鼠胚腭突间充质细胞凋亡与Satb2表达变化的关系

目的:探讨苯妥英钠是否能诱导鼠胚腭突间充质细胞凋亡,以及与Satb2基因表达间的关系。方法:取妊娠15 d C57BL/6J鼠胚腭突,原代培养腭突间充质细胞。用细胞免疫荧光鉴定细胞的特性,流式细胞仪检测细胞的纯度和CCK-8法测定苯妥英钠处理细胞的最佳作用浓度和时间;用Annexin-V FITC PI双标法检测细胞早期凋亡情况及用TUNEL法检测细胞晚期凋亡情况;用实时定量PCR及Western blot分析及检测处理后细胞的Satb2的表达变化。结果:原代培养的细胞纯度可达90%左右。与对照组比,苯妥英钠浓度在200μg/mL以下作用24 h可使致死率达50%左右。苯妥英钠可诱导鼠胚腭突间充质细胞显著凋亡。苯妥英钠能显著抑制鼠胚腭突间充质细胞中Satb2 mRNA(下调至58%)和蛋白表达(P<0.01)。结论:苯妥英钠诱导腭裂可能与鼠胚腭突间充质细胞凋亡相关,可能是通过下调细胞中Satb2的表达来实现。

在胚胎发育期腭突中嵴上皮细胞和腭间充质细胞与腭裂畸形

胚胎期腭突中嵴上皮细胞和腭间充质细胞的正常分化与否在腭裂的发生机制中起着重要的作用。近年来,国外学者对这两种细胞与腭裂发生的关系进行了较为深入的研究,结果证明致畸因子干扰其正常分化与腭裂发生有密切关系。