胞内型磷脂酶A2基因亚克隆与基因表达

目的 研究花生四稀酸在细胞中的释放及前列腺素的合成，构建与花生四稀酸释放相关的表达系统。即胞内型磷脂酶Ａ２（ｃｙｔｏｓｏｌｉｃ ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅ ｃＰＬＡ２）ｃＤＮＡ－ｐＲＣ／ＣＭＶ。方法 从克隆载体ｐＭＴ２用Ｓａｌ１制备ｃＰＡＬ２ｃＤＮＡ；平末端连接ｃＰＡＬ２－ｐＲＣ／ＣＭＶ；转染鼠巨噬细胞及筛选正向阳性克隆；ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ检测ｃＰＬＡ２ ｃＤＮＡ基因表达。结果

勃起功能障碍患者血清胞质型磷脂酶A2、F2-异前列腺素表达变化及其意义

目的观察勃起功能障碍患者血清胞质型磷脂酶A2(cPLA2)、F2-异前列腺素的水平变化,探讨其临床意义。方法选取勃起功能障碍患者60例(观察组)、同期体检的健康男性60例(对照组),采集两组外周静脉血5 mL,采用ELISA法检测血清cPLA2、F2-异前列腺素,采用二元Logistic回归分析法分析勃起功能障碍发生的影响因素。结果观察组、对照组血清cPLA2分别为(79.00±11.19)、(72.34±6.82)pg/mL,二者相比,P<0.05;观察组、对照组血清F2-异前列腺素分别为(23.22±2.99)、(19.35±3.32)ng/mL,二者相比,P<0.05。血清cPLA2、F2-异前列腺素水平升高均是勃起功能障碍发生的危险因素(OR=1.093、1.527,P均<0.05)。结论勃起功能障碍患者血清cPLA2、F2-异前列腺素水平升高。血清cPLA2、F2-异前列腺素水平升高是勃起功能障碍发生的危险因素。血清cPLA2、F2-异前列腺素水平升高可能参与了勃起功能障碍的发生。

胞浆型磷脂酶A_2基因多态性与精神分裂症的关系

目的 :分析印度人群钙依赖性胞浆型磷脂酶 A2 (c PL A2 ) Ban I限制性内切酶基因多态性与精神分裂症的相互关系。 方法 :应用聚合酶链式反应 (PCR)限制性片段长度多态性 (RFL P)方法 ,在 89例精神分裂症患者和 78例健康人群中观察比较 c PL A2 等位基因和基因型频数分布。 结果 :PCR产物的 Ban I限制性酶切片段于 c PL A2 基因第一非编码区显示多态性位点 ,命名为位点 A;患者组和健康对照组 c PL A2 等位基因频数呈显著差异 (P<0 .0 2 ) ;精神分裂症患者显示 A2 / A2 纯合基因型显著增加 (P<0 .0 2 )。 结论 :c PL A2 基因多态性与印度人群精神分裂症相关联 ;c PL A2 基因可能为精神分裂症候选基因之一 ,或与其他致病基因呈连锁不平衡。

胞液型磷脂酶A2抑制剂上调自噬通量改善脊髓损伤后神经功能的作用及机制研究

目的:探讨胞液型磷脂酶A2(cytosolic phospholipase A 2,cPLA 2)抑制剂改善脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后神经功能的机制。方法:36只雌性SD大鼠,体质量(280±20)g,3月龄,分为3组(n=12):假模型组、SCI组、SCI+花生四烯酸三氟甲基酮(arachidonyl trifluoromethyl ketone,AACOCF3)组。3组均建立球囊压迫SCI模型。假模型组置入球囊后不做加压处理,余两组球囊加压持续48 h造脊髓压迫模型。造模成功后,对SCI+AACOCF3组大鼠腹腔注射cPLA2的特异性抑制剂AACOCF3。余两组大鼠腹腔注射生理盐水。分别于造模后7、14 d分批处死动物,于受损脊髓组织取材,行组织形态学观察,检测cPLA2和多种自噬通量相关分子的表达,测试运动功能的恢复情况。结果:脊髓组织形态检测显示:假模型组脊髓组织结构完整,神经元和胶质细胞数量和形态正常。在SCI组可见脊髓组织断裂,有大而突出的脊髓空洞。在SCI+AACOCF3组,脊髓组织比SCI组更完整,可见脊髓空洞融合,有更多存活的神经元,胶质细胞增生较少。Western blot检测显示:同SCI组和SCI+AACOCF3组相比,假模型组的LC3-Ⅱ、Beclin 1、p62和cPLA2的蛋白表达量最低(P<0.05),LC3-Ⅰ的蛋白表达最高(P<0.05)。SCI组的p62和cPLA2表达高于SCI+AACOCF3组(P<0.05)。行为学观察显示:SCI组和SCI+AACOCF3组BBB法(basso,beattie,bresnahan)运动评分对应时间均明显低于假模型组(P<0.05);SCI+AACOCF3组在加压后3、7、14 d的运动评分均高于SCI组(P<0.05)。结论:cPLA2抑制剂可通过改善溶酶体膜通透性,调节自噬通量,减轻SCI继发性损伤对神经元损害,促进神经功能恢复,改善运动功能。

“三通针法”电针调控Rho/ROCK(Rho kinase)及MEK/ERK信号通路对脊髓损伤大鼠胞浆型磷脂酶A2的影响

背景:胞浆型磷脂酶A2(cytosolic phospholipase A2,cPLA2)是治疗脊髓损伤的新型策略和靶标,其受RhoA/Rho kinase及MEK/ERK信号通路的调控。而电针可通过调控RhoA/Rho kinase和MEK/ERK信号通路治疗脊髓损伤。目的:探讨电针调控Rho/ROCK(Rho kinase)及MEK/ERK信号通路对脊髓损伤后cPLA2的影响。方法:90只雌性SD大鼠,随机取72只制备脊髓损伤模型,BBB评分后随机分为脊髓损伤组、电针治疗组、U0126治疗组(ERK阻断剂)和Y27632治疗组(ROCK阻断剂),另18只设为假手术组(只进行椎板咬除,但不进行脊髓撞击)。电针治疗组大鼠取大椎、腰阳关以及双侧次髎、足三里进行电针治疗,每天1次,每次20 min,共14次;U0126治疗组和Y27632治疗组分别予以U0126和Y27362隔天1次硬膜下腔注射。治疗结束经BBB评分后处死大鼠,收集脊髓组织,ELISA检测脊髓组织前列腺素E2、血小板活化因子的水平;TUNEL法检测脊髓神经细胞凋亡率;Western blot检测脊髓RhoA、ROCKⅡ、MEK、ERK1/2、p-ERK1/2、cPLA2、p-cPLA2蛋白的表达;qRT-PCR检测脊髓RhoA、ROCKⅡ、MEK、ERK1/2与cPLA2的基因表达。结果与结论:(1)与假手术组比较,脊髓损伤组大鼠BBB评分明显下降(P<0.01),脊髓组织细胞凋亡阳性细胞数、前列腺素E2和血小板活化因子水平、p-cPLA2蛋白和cPLA2基因的表达均明显升高(P<0.01);除电针治疗组大鼠cPLA2基因表达降低差异无显著性意义外,各治疗组大鼠上述指标均明显逆转(P<0.01);(2)与假手术组比较,脊髓损伤组大鼠脊髓组织RhoA及ROCKⅡ蛋白和基因的表达、MEK和ERK1/2基因的表达、MEK和p-ERK1/2蛋白的表达均明显升高(P<0.01),电针治疗组及其他两治疗组大鼠上述指标均明显降低(P<0.01或P<0.05);(3)结果说明,电针能下调Rho/ROCK和MEK/ERK信号通路相关因子表达,抑制cPLA2的活性,减少神经细胞凋亡、减轻炎症反应,最终达到治疗脊髓损伤的作用。

七氟醚对单肺通气致肺损伤兔肺组织胞质型磷脂酶A_2和clara细胞分泌蛋白表达的影响(英文)

目的探讨七氟醚对单肺通气(OLV)兔肺组织胞质型磷脂酶A2(C-PLA2)及clara细胞分泌蛋白(CCSP)表达的影响。方法36只健康日本大耳白兔随机分为假手术组(S组)、OLV组(O组)和OLV+七氟醚组(OS组)。OS组据所给七氟醚浓度(体积分数)不同分为1%、2%、3%和4%亚组。Western blotting和定量PCR分别用于检测肺组织中CCSP和C-PLA2蛋白及mRNA的表达水平。ELISA检测肺组织花生四烯酸(AA)含量。通过观察肺湿/干(W/D)和肺组织的形态学改变评价肺损伤的严重程度。结果 OLV后兔肺组织CCSP蛋白和mRNA表达水平明显降低(P<0.05),而C-PLA2蛋白和mRNA表达水平、肺组织AA含量和肺损伤程度均明显增加(P<0.05);OLV+七氟醚组中肺组织CCSP蛋白和mRNA表达增加(P<0.05),而C-PLA2蛋白和mRNA表达水平和肺组织AA含量降低(P<0.05),肺损伤减轻(P<0.05);OLV+不同浓度七氟醚组中肺组织CCSP蛋白和mRNA表达水平无显著性差异,但肺组织C-PLA2蛋白和mRNA表达水平、肺组织AA含量和肺损伤程度随浓度的增加而逐渐降低(P<0.05)。结论 OLV可使兔肺组织中CCSP蛋白和mRNA表达水平降低,肺组织C-PLA2蛋白和mRNA表达水平和AA含量增加,引起急性肺损伤。七氟醚可通过逆转OLV的上述效应而发挥抗急性肺损伤作用。

体外循环中心肌组织胞浆型磷脂酶A_2-γ亚型激活与心肌细胞损伤关系的研究

目的探讨先天性心脏病室间隔缺损修补术后心肌组织胞浆型磷脂酶A2γ亚型(cPLA2γ)的激活与心肌细胞超微结构改变的关系。方法取12例室间隔缺损手术患儿体外循环(CPB)前后右心耳处心肌组织,通过逆转录聚合酶链反应(RTPCR)方法测定心肌组织cPLA2γ基因表达水平;应用凝胶图像分析系统对CPB前后心肌组织cPLA2γ基因表达强度进行半定量分析;通过透射电镜观察心肌细胞超微结构的改变。结果CPB后心肌组织cPLA2γ基因表达明显上调(P<0.05)。心肌组织超微结构的改变包括心肌细胞质膜下水肿,核异染色质边集、肌浆网扩张,线粒体代偿性增生并伴有中到重度内室肿胀、肌丝灶性溶解等。结论体外循环后心肌组织cPLA2γ激活可能导致了心肌细胞及细胞器膜完整性破坏、能量代谢及收缩功能障碍。

严重烫伤大鼠胞浆型磷脂酶A_2表达变化及与心肌损害的关系

目的 :研究烫伤后心肌组织胞浆型磷脂酶 A2 (c PL A2 ) m RNA变化 ,探讨其与心肌细胞膜损伤的关系及意义。方法 :采用大鼠 4 0 %体表面积 度烫伤模型 ,伤后 0 (正常组 )、1、3、6、12、2 4小时不同时间点测定组织及血浆中肌酸激酶同工酶 (CK MB)活性及组织膜磷脂含量 ;采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术检测c PL A2 m RNA水平的变化。结果 :与正常组比较 ,烫伤后大鼠血浆 CK MB活性明显升高的同时 ,伴组织 CKMB活性下降 ,以 6和 12小时最为明显 (P均 <0 .0 1) ;组织膜磷脂含量伤后 3小时显著降低 (P<0 .0 1) ,6小时降至最低 ;c PL A2 伤后 1小时表达明显增强 ,2 4小时仍维持高表达水平。膜磷脂含量变化与 c PL A2 m RNA、CK MB变化存在显著相关 (P<0 .0 5和 P<0 .0 1)。结论 :上调表达的 c PL A2 加剧细胞膜磷脂降解可能是烫伤后心肌损害的重要原因之一。

骨髓间充质干细胞来源外泌体对大鼠脊髓损伤的改善作用及对脊髓组织胞浆型磷脂酶A2、水通道蛋白4和水通道蛋白9的影响实验研究

目的:探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)来源外泌体对大鼠脊髓损伤(SCI)的改善作用及对脊髓组织胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)、水通道蛋白4(AQP4)和AQP9的影响。方法:培养BMSCs,提取外泌体并进行鉴定。选择成年雄性SD大鼠30只,分为假手术组、模型组和外泌体组,各10只。采用Allen法制作大鼠脊髓损伤模型,外泌体组经尾静脉注射外泌体,假手术组和模型组大鼠尾静脉注射等体积PBS缓冲液。各组大鼠每隔2 d注射1次,共注射3次。采用脊髓损伤行为学(BBB)评分评估干预前后各组大鼠四肢运动功能。采用HE染色观察脊髓组织结构。采用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法(TUNEL)检测神经细胞凋亡情况。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测脊髓组织PLA2、AQP4、AQP9 mRNA及蛋白表达。结果:BMSCs生长状态良好,外泌体表面标志蛋白CD63、Alix呈阳性表达。干预后3、7 d,外泌体组BBB评分高于模型组(均P<0.05)。假手术组脊髓组织无损伤坏死及出血,结构完整,灰质白质边界清晰,细胞排列有序,细胞核形态正常;模型组大鼠脊髓结构紊乱,大量炎性细胞浸润,伴有囊性腔和空泡,神经元和细胞水肿,神经元数量明显减少;外泌体组脊髓损伤区组织结构紊乱、炎性细胞浸润减轻,脊髓空洞小,损伤恢复较好。假手术组脊髓组织中凋亡细胞较少。模型组细胞凋亡率高于假手术组,而外泌体组细胞凋亡率低于模型组(均P<0.05)。模型组脊髓组织cPLA2、AQP4、AQP9 mRNA及蛋白表达高于假手术组,而外泌体组脊髓组织cPLA2、AQP4、AQP9 mRNA及蛋白表达低于模型组(均P<0.05)。结论:BMSCs来源外泌体对脊髓损伤有一定改善作用,可下调cPLA2、AQP4、AQP9 mRNA及蛋白的表达。

“三通针法”电针调控胞浆型磷脂酶A2介导脊髓损伤大鼠炎性反应的研究

目的探讨电针调控胞浆型磷脂酶A2(cytosolic phospholipase A2,cPLA2)的表达对脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)大鼠炎性反应的影响。方法72只清洁级雌性健康SD大鼠制备SCI模型,Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分后随机分为模型组、电针组、阻断剂组和电针+阻断剂组,另设立假手术组,每组18只。电针组取腰阳关、大椎以及双侧足三里、次髎进行电针治疗;阻断剂组予以花生甙三氟甲基酮(arachidonyl trifluoromethyl ketone,AACOCF3)隔日1次腹腔注射。干预结束后取材,苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察脊髓组织形态学变化,酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测脊髓组织和血清前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)、血小板活化因子(platelet activating factor,PAF)的含量;Western blot法检测脊髓cPLA2、p-cPLA2蛋白的表达;实时荧光定量PCR法检测脊髓cPLA2 mRNA的表达。结果与假手术组比较,模型组BBB评分明显降低(P<0.01),脊髓组织形态明显受损;脊髓组织和血清PGE2、PAF水平明显升高(P<0.01);脊髓组织p-cPLA2蛋白及cPLA2 mRNA表达水平明显升高(P<0.01)。除电针组cPLA2 mRNA和各治疗组cPLA2蛋白表达水平外,干预后各治疗组大鼠上述指标较模型组都明显逆转(P<0.01)。电针+阻断剂组BBB评分高于电针组和阻断剂组(P<0.01,P<0.05),脊髓组织和血清PGE2、PAF水平低于电针组和阻断剂组(P<0.05),cPLA2 mRNA表达水平低于电针组(P<0.01)。阻断剂组脊髓组织和血清PGE2、PAF水平低于电针组(P<0.01)。结论电针可能通过抑制cPLA2的活性,进而降低PGE2和PAF的水平,减轻神经细胞炎性反应,达到改善SCI大鼠神经功能的作用。

胞液型磷脂酶A_2在婴幼儿支气管肺炎中的变化及意义

目的:探讨婴幼儿支气管肺炎血清胞液型磷脂酶A2(cPLA2)的水平变化及意义。方法:运用酶联免疫吸附法(ELISA)测定50例婴幼儿支气管肺炎的cPLA2的水平变化,同时,以同期在门诊健康体检婴幼儿作为对照。结果:肺炎组cPLA2水平明显高于健康对照组,有统计学意义(P<0.01)。结论:cPLA2在婴幼儿肺炎时明显增高,说明了cPLA2参与了肺炎的病理生理过程,如能早期应用cPLA2抑制剂,可对肺炎的转归有一定干预作用。

胞质型磷脂酶A_2和环氧化酶-2在口腔黏膜不典型增生中的表达和意义

目的:通过观察胞质型磷脂酶A2(cPLA2)和环氧化酶-2(COX-2)蛋白在正常口腔黏膜和口腔不典型增生中的表达情况,研究cPLA2和COX-2在口腔不典型增生发生过程中的作用。方法:收集了9例正常口腔黏膜、36例口腔黏膜不典型增生标本,制作石蜡标本并行cPLA2和COX-2的免疫组化染色。结果:cPLA2和COX-2在口腔不典型增生的表达明显高于在口腔正常黏膜中的表达(P<0.01);cPLA2和COX-2在轻度不典型增生中的表达明显低于在中度和重度不典型增生中的表达(P均<0.01);cPLA2和COX-2的表达呈显著相关性(P<0.01)。结论:cPLA2和COX-2在口腔黏膜不典型增生发生过程中具有明显的协同作用,提示cPLA2可以作为口腔不典型增生化学治疗的新的分子靶标。

肾上腺素受体激动剂对新生大鼠心肌细胞胞质型磷脂酶A_2的活化作用

目的探讨肾上腺素受体(adrenergic receptor,AR)激动剂对培养的新生大鼠心肌细胞胞质型磷脂酶A2(cy-tosolic phospholipase A2,cPLA2)的磷酸化效应及机制。方法分别用β-AR激动剂异丙肾上腺素(10μmol/L)和α1-AR激动剂苯肾上腺素(10μmol/L)处理培养的新生大鼠心肌细胞,Western blot法检测cPLA2及丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)磷酸化水平随时间变化的效应曲线。结果α1-AR激活引起心肌细胞内cPLA2磷酸化水平显著增高,此效应可能由p38MAPK及ERK1/2的磷酸化介导;β-AR激活可引起p38MAPK及ERK1/2的磷酸化,但不伴有cPLA2的磷酸化。结论实验结果揭示了心肌细胞中α1-AR激动在调控cPLA2活性方面的重要作用。

慢性阻塞性肺疾病患者血清胞浆型磷脂酶A2α基因和表达水平检测的临床意义

目的：探讨慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者检测胞浆型磷脂酶 cPLA2α（cPLA2α）基因表达水平的临床意义。方法选取收治的 COPD 患者90例，按照 COPD 严重程度分级标准分为轻度组30例，中度组35例和重度组25例，以同期90例肺功能正常的健康体检者为对照组。用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测受试者血清中 cPLA2α含量，同时用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测同组患者 cPLA2α基因表达水平。结果 COPD 轻度组 cPLA2α的含量为（0.0392±0.0051）pg／ml，表达为（0.68±0.01）；中度组含量为（0.049 8±0.0074）pg／ml，表 达为（0.92±0.02）；重度组含量为（0.0554±0.0081）pg／ml，表达为（1.35±0.02）；而对照组含量为（0.0102±0.0066）pg／ml，表达为（0.11±0.01）。无论是 cPLA2α血清学水平还是基因表达水平，四组之间差异均有统计学意义（F ＝8.643，12.415，P ＜0.05）。且 COPD 各组随着病变程度加重 cPLA2α的水平逐渐增加，且三组彼此比较差异有统计学意义（t＝3.013～5.817，5.039～11.667，P 均＜0.05）。结论血 cPLA2α水平可预示 COPD 严重程度，cPLA2α是诊疗 COPD 及分级的新靶标。

胞液型磷脂酶A_2cDNA与载体PRCCMV连接及表达

目的 选择适当的表达载体 ,启动胞液型磷脂酶A2 (cytosolicphospholipaseA2 ,简称cPLA2 )cDNA的表达 ,为进一步研究各种因素对该酶活性的影响奠定基础。方法 从cPLA2 PMT2 重组体中获得人cPLA2cDNA片段 ,使之与酶切线性化的PRC CMV载体平末端连接 ,并转染鼠巨噬细胞 ,筛选、扩增阳性细胞 ,提取RNA ,Northern杂交法检测cPLA2 mRNA。结果 应用cPLA2 PRC CMV重组体转染鼠巨噬细胞后 ,经过North ern杂交检测到cPLA2 cDNA的表达。结论 cPLA2 PRC CMV是一有效的表达系统。

胞浆型磷脂酶A_2介导弱氧化修饰低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡

探讨弱氧化修饰低密度脂蛋白 (MM LDL)能否诱导人脐静脉内皮细胞 (HUVECs)凋亡以及胞浆型磷脂酶A2 (cPLA2 )在此过程中的作用 .MTT法测定细胞存活率 ;相差显微镜、荧光显微镜和流式细胞仪检测细胞凋亡 ;3 H 花生四烯酸 (3 H AA)预标法测定PLA2 活性 ;蛋白质印迹检测cPLA2 磷酸化 ;激光共聚焦显微镜检测单个细胞内钙离子浓度的变化 .结果表明 ,MM LDL (10 0～ 30 0mg/L)作用后的HUVECs呈现凋亡典型的形态特征 ,凋亡率随MM LDL浓度的增加而上升 .MM LDL能引起胞内钙离子浓度增加 ,cPLA2 的活化及磷酸化 .15 μmol/LAACOCF3 和 5mmol/LEGTA在抑制cPLA2 活性的同时 ,部分抑制MM LDL诱导的HUVECs凋亡 .加入外源性AA (5 0 μmol/L)能逆转AACOCF3 引起的凋亡抑制 .结果提示 ,cPLA2 参与了MM LDL诱导HUVECs凋亡的信号传递 .

头针疗法对脑缺血-再灌注损伤大鼠胞浆型磷脂酶A_2的影响

目的探讨"百会"透"曲鬓"头针疗法对脑缺血再灌注损伤大鼠脑细胞凋亡和胞浆型磷脂酶A2(cytosolic phospholipase A2,cPLA2)及c-fos、c-jin蛋白表达的影响。方法采用线栓法制成大脑中动脉缺血再灌注(middle cerebral artery ischemia reperfusion,MCA-IR)模型,应用TUNEL法检测脑细胞凋亡,用免疫组化法检测cPLA2、c-fos和c-jin在皮层脑组织中表达,用头针疗法针刺患侧"百会"透"曲鬓"穴。结果大鼠脑损伤时,针刺能明显抑制cPLA2、c-fos和c-jin蛋白表达,并能降低神经细胞凋亡,与假手术对照组比较,具有显著性统计学意义(P<0.01)。结论头针"百会"透"曲鬓"对脑缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能与头针抗细胞凋亡,下调cPLA2及c-fos和c-jin蛋白表达有关。

胞浆型磷脂酶A2多态性与儿童支气管哮喘发生及孟鲁司特疗效的相关性

目的探究胞浆型磷脂酶A2(PLA2G4)基因rs932476位点多态性与儿童支气管哮喘发生及白三烯受体拮抗剂孟鲁司特治疗反应性的相关性。方法收集支气管哮喘患儿128例为病例组,100例健康儿童为对照组。比较两组儿童PLA2G4基因rs932476位点基因型及等位基因分布。病例组患儿采用常规治疗+孟鲁司特方案治疗2个月。比较病例组患儿治疗前后血清白三烯B4(LTB4)及炎性因子白细胞介素-4(IL-4)、免疫球蛋白E(IgE)和γ-干扰素(IFN-γ)、肺功能和呼出气一氧化氮(FeNO)的水平。结果 PLA2G4基因rs932476位点基因型及等位基因频率在病例组和对照组之间及不同严重程度哮喘组之间的分布差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后AA型患儿总有效率高于GG型,差异有统计学意义。与治疗前相比,治疗后各基因型患儿血清IgE和IL-4水平降低,IFN-γ水平升高(P<0.05)。治疗后GG型患儿血清IL-4水平高于AA型,IFN-γ的水平低于AA型。治疗后,各基因型患儿的肺功能参数升高,其中AA型患儿显著高于GG型;而FeNO水平治疗后明显下降,其中AA型患儿明显低于GG型。病例组治疗前血清LTB4水平明显高于对照组(P<0.05)。治疗后病例组血清LTB4水平明显降低(P<0.05),其中GG基因型患儿LTB4水平高于AA型(P<0.05)。结论 PLA2G4基因rs932476位点多态性与儿童支气管哮喘的易感性及病情严重程度无关,但对白三烯受体拮抗剂孟鲁司特的疗效有一定的影响,其机制可能与影响LTB4水平有关。

丹酚酸A对大鼠脑缺血再灌注损伤后胞浆型磷脂酶A2表达的影响及机制研究

目的探讨丹酚酸A对大鼠脑缺血再灌注损伤后胞浆型磷脂酶A2(cytosolic phospholipase A2,cPLA2)表达的影响及其机制。方法将SD大鼠65只,随机分为对照组,模型组、丹酚酸A组和联合组(LY294002+丹酚酸A)。分别于再灌注后0、8、24、48h取梗死脑组织,用TUNEL检测脑细胞凋亡,免疫组织化学检测cPLA2表达,Western blot检测蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt在脑组织表达水平。结果模型组和联合组0、8、24、48h海马CAl区TUNEL阳性细胞和cPLA2表达较对照组明显增高,脑组织磷酸化Akt表达较对照组明显降低(P<0.05)。丹酚酸A组0、8、24、48h脑组织磷酸化Akt表达较模型组明显增高,TUNEL阳性细胞和cPLA2表达较模型组明显降低[(10.1±5.3)个/mm^2 vs(12.8±4.7)个/mm^2、(14.6±6.2)个/mm^2 vs(30.1±7.5)个/mm^2、(19.7±6.5)个/mm^2 vs(73.8±11.4)个/mm^2、(22.8±9.6)个/mm^2 vs(94.6±15.2)个/mm^2,(13.6±3.1)个/mm^2 vs(41.3±3.6)个/mm^2、(14.8±4.7)个/mm^2 vs(62.5±6.9)个/mm^2、(16.6±7.1)个/mm^2 vs(72.3±9.6)个/mm^2、(17.0±5.3)个/mm^2 vs(83.2±11.7)个/mm^2,P<0.05]。结论丹酚酸A通过Akt信号通路,降低脑缺血再灌注后脑组织中cPLA2表达,减少脑细胞凋亡,发挥细胞保护作用。