小干扰RNA对前列腺癌表皮生长因子受体及其胞内效应蛋白表达的影响

目的应用RNA小干扰（SiRNA）技术影响表皮生长因子受体（EGFR）及其胞内效应蛋白水平的表达，观察其对激素非依赖前列腺癌细胞在体外以及在实验裸鼠模型体内的生长情况的影响。方法筛选出最有效的EGFRSiRNA，采用慢病毒为载体，转染激素非依赖前列腺癌细胞（HIPC）PC．3，MTT法检测细胞生长抑制情况，荧光实时定量PCR和Western印迹法检测细胞EGFR及其胞内效应蛋白Akt和MAPK的表达水平和磷酸化程度。同时，建市HIPC裸鼠模型，瘤体内注射EGFRSiRNA，观察肿瘤生长情况。结果慢病毒为载体的EGFRSiRNA对PC-3细胞转染率可稳定在75％，并显著抑制PC-3细胞牛长率，仅为40％～50％，其作用可能为沉默细胞EGFRmRNA及其蛋白的表达，抑制效率〉90％（P〈0．01）；而且，Akt和MAPK表达水平和磷酸化均明显降低，表达抑制率分别为76．49％和47．15％，P〈0．05。，与对照组比较，EGFRSiRNA体内抑瘤率为34．83％，P〈0．05。结论慢病毒介导的靶向EGFRSiRNAu，以在体内外显著抑制HIPC生长，其机制可能是沉默EGFR表达，进而抑制胞内效应蛋白的作用，后者叮作为未来靶向治疗的目标。

Gefitinib对激素非依赖性前列腺癌的治疗及其效应初探

目的探讨受体酪氨酸激酶抑制剂Gefitinib在体内外对激素非依赖前列腺癌(HIPC)的抑制作用及其效应机制。方法不同浓度的Gefitinib处理HIPC细胞株PC-3后24～120h,MTT法检测细胞生长抑制率,Westernblot检测细胞表皮生长因子受体(EGFR)、蛋白激酶B(Akt)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和蛋白激酶C(PKC)蛋白的表达水平。建立PC-3细胞裸鼠移植瘤,观察Gefitinib体内的肿瘤抑制率。结果Gefitinib抑制PC-3细胞生长呈现时间-浓度依赖性,最佳抑制浓度为5ng/mL,最佳抑制时间为72h,细胞生长抑制率稳定在50%～60%。与对照组比较,经Gefitinib处理后PC-3细胞中EGFR、Akt蛋白水平分别降低了70.44%和59.01%,而MAPK及PKC蛋白分别仅降低34.83%和33.40%。裸鼠实验结果表明,Gefitinib可显著抑制HIPC肿瘤的生长,抑制率高达53.95%,常规病理HE染色提示大片灶状癌细胞坏死。结论Gefitinib可在体内外显著抑制HIPC的生长,其机制可能为通过降低癌细胞EGFR和胞内蛋白Akt的表达水平来发挥作用。