重症肺炎患者中性粒细胞胞吐作用的改变

目的 研究重症肺炎患者中性粒细胞的功能改变。方法 采用免疫化学法测定 32例重症肺炎患者中性粒细胞胞吐作用和氧化酶反应的变化 ,并与健康对照组比较。结果 重症肺炎患者血液中性粒细胞的基础和PMA刺激的胞吐作用均明显下降 (P <0 .0 1) ;重症肺炎患者的基础和PMA刺激的反应性氧属 (ROS)产生明显增加 ;重症肺炎患者肺部中性粒细胞释放乳铁蛋白、髓过氧化物酶 (MPO)和ROS增加 ,PMA刺激后相似 ;肺炎的严重性与血液中性粒细胞释放乳铁蛋白呈负相关。结论 重症肺炎患者中性粒细胞胞吐作用明显受损 ,与预后相关。

百合花粉管中的胞吞/胞吐作用观察分析

应用细胞膜染料FM4-64结合Zeiss 5 live快速扫描型共聚焦显微镜观察了百合花粉管中的吞排作用.结果显示,培养基中加入FM4-64后,染料迅速进入到花粉管中,并在花粉管顶端形成一个锥形的区域;锥形区域表现出周期性变化,并且与花粉管脉冲生长呈负相关,即锥形区形成期花粉管生长缓慢,而锥形区消退期花粉管生长迅速;在锥形区域的消退期,花粉管顶端,尤其是最顶端快速向前延伸,而在锥形区域的形成期,花粉管最顶端的延伸速度显著下降,但亚顶端区域仍基本维持原有的生长速度.研究发现,花粉管的最顶端既是内吞作用也是胞吐作用的主要场所,但胞吞作用仅局限于花粉管的最顶端,而胞吐作用发生在包括亚顶端在内的整个花粉管顶端;胞吞和胞吐作用在花粉管最顶端交替发生,可能是花粉管脉冲生长的一个非常重要的原因.

受体介导内吞引起的巨噬细胞胞质酸化和胞吐作用

本文利用激光扫描共聚焦显微镜A-CAS570从细胞形态学和功能两方面,研究了刀豆素A(Concanavalin A,Con A)、麦芽凝集素(Wheat Germ Agglutinin,WGA)、酵母多糖(Zymosan A,Z.A)对小鼠腹腔巨噬细胞胞质pH和溶酶体内荧光探针FITC—Dextran排出细胞的影响。结果显示三种配体加入细胞外液10min内,胞质pH很快下降,此后维持在该水平;在15min左右细胞外FITC一Dextran迅速增加,20min后变化趋于停止;在三种配体加入后15min左右,细胞内溶酶体在质膜内侧增多;25—30min溶酶体重新向细胞中央运动。根据上述实验结果,我们认为溶酶体pH升高是触发溶酶体内荧光探针通过胞吐作用排出细胞的必要条件,胞质酸化抑制溶酶体内容物通过胞吐作用排出细胞。配体刺激引起的溶酶体内容物通过胞吐作用排出细胞和胞质酸化是细胞自我调节和保护的一种反映。

胰岛素分泌泡合成和转运及胞吐的临床作用机制研究进展

胰岛β细胞分泌胰岛素的主要生理过程包括胰岛素分泌泡的合成、转运、胞吐，其中涉及到的分子生物学机制十分复杂，许多细胞因子参与、影响胰岛素分泌。探讨这些因素在胰岛素分泌泡合成、转运和胞吐中的作用，对于认识高葡萄糖毒性损伤胰岛β细胞胰岛素分泌功能的机制非常重要。本文对近年来有关胰岛素分泌泡合成、转运和胞吐的分子机制及高葡萄糖对胰岛素分泌泡形态和分泌过程的影响的研究做一综述，这将有助于预防及治疗糖尿病。

胞吐作用在Ascaris线虫精子细胞激活过程中调控细胞极性建立及细胞运动的功能研究

在动物生殖过程中,精子激活是非常关键的一步,静止精子接受胞外信号的刺激,产生极性和运动,进而完成受精。而在信号调控下。

钙调蛋白及其结合蛋白对神经递质释放的调控作用

钙离子(Ca2+)是调节突触前神经递质的胞吐释放的关键离子信号.作为胞内最普遍存在的钙离子感受器的钙调蛋白(CaM)被发现能通过与多种蛋白的相互作用,调控着突触小泡的生发、运输及再填充,从而传递胞内Ca2+浓度变化的信号,对神经递质的释放及突触电生理活动起到至关重要的调控作用.本文综述了CaM及其结合蛋白是如何参与对突触小泡的胞吐释放和胞吞恢复的调控,并探讨了其中可能的分子机制.

延长针刺时间大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核非突触部位胞吐数量的变化

目的:用形态与功能相结合的方法,观察在甲醛致痛时,延长针刺时间并增强针刺频率,大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核内大颗粒小泡非突触部位胞吐的情况。方法:实验于2004-06/12在承德医学院中心实验室完成。选择成年健康Wistar大鼠60只,雌雄不拘。按完全随机法分为3组,即针刺组、甲醛+针刺组及生理盐水组,每组20只。每组再随机分为5个亚组,每个亚组4只。①针刺组大鼠应用针麻仪(9-6805Ⅱ型、输出电压5V)在相当于人的“四白(”处给予针刺。②甲醛+针刺组先给予大鼠前爪跖侧皮下注射5g/L甲醛150μL致痛10min,然后进行针刺,针刺方法同上。③生理盐水大鼠只给予前爪皮下注射生理盐水150μL,不给予针刺。以上3组大鼠中,每组的5个亚组大鼠在原实验(针刺0.5,1,1.5,2,2.5h,针刺疏密波频率40Hz/s)基础上,将针刺时间分别延长至4,6,8,10,12h,针刺疏密波频率增至60Hz/s。在分别给予实验条件处理后立即将各组大鼠麻醉处死,经升主动脉插管灌注生理盐水150mL,经固定液固定后取出脑干,切片,电镜下观察,记录大颗粒小泡于非突触部位的胞吐情况。结果:60只大鼠全部进入结果分析,实验过程中无脱落。①各组大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核大颗粒小泡于非突触部位的胞吐数量比较:在针刺镇痛早期,各组大颗粒小泡于非突触部位的胞吐数量均增加,到10h时达高峰,甲醛+针刺组反应最明显,针刺组次之,生理盐水组无明显变化。3组间比较,差异有显著性意义(P<0.01)。以后随针刺时间延长大颗粒小泡的数量及胞吐呈下降趋势,逐渐出现大颗粒小泡衰竭现象。②胞吐按下列过程连续进行:大颗粒小泡与质膜接触、融合进而形成小的开放通道;通道进一步开大,呈“Ω”样,其内的物质开始排入细胞间隙;大颗粒小泡完全将其内的物质排入细胞间隙,自身的单位膜成为细胞膜的一部分。结论:在一定时间内,大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核大颗粒小泡于非突触部位的胞吐数量随针刺时间的延长而增加。在针刺镇痛过程中,三叉神经脊束核尾侧亚核可能通过大颗粒小泡于非突触部位胞吐释放其内储存的化学物质,参与了对甲醛致痛的抑制作用,从而起到镇痛作用。

整合素αvβ6对结肠癌细胞中整合素αvβ5内吞胞吐循环的影响

目的:探讨整合素αvβ6对结肠癌细胞中整合素αvβ5内吞胞吐循环及细胞黏附、迁移能力的影响。方法:采用Western blotting检测不同细胞中整合素αvβ6和αvβ5的表达情况,通过整合素内吞实验、胞吐实验和capture-ELISA实验检测不同细胞中整合素αvβ6和αvβ5的内吞胞吐循环时相,利用细胞黏附实验和细胞迁移实验检测各种细胞在不同基质表面黏附和迁移能力的差异。结果:SW480、SW480 wild-typeβ6和SW480 mock细胞中整合素αv亚基和β5亚基的表达无显著差异(P>0.05),SW480 wild-typeβ6细胞中整合素β6亚基的表达显著高于另外2种细胞(P<0.05);SW480细胞中整合素αvβ5存在内吞胞吐循环,但当向SW480细胞中转染β6亚基后,整合素αvβ6进行内吞胞吐循环的同时,会对整合素αvβ5的内吞和胞吐过程产生抑制作用,差异有统计学意义(P<0.05);3种细胞中整合素αvβ6和αvβ5的内吞胞吐循环的差异,会影响细胞在纤连蛋白(整合素αvβ6配体)和玻连蛋白(整合素αvβ5配体)表面的黏附和迁移能力。结论:整合素αvβ6和αvβ5拥有共同的α亚基,它们在细胞内的内吞胞吐循环存在某种竞争性关系,当二者同时存在时,整合素αvβ6会抑制αvβ5的内吞胞吐循环过程,并由此对细胞在相应基质表面黏附和迁移能力产生影响。

Synaptotagmin1在小鼠卵母细胞体外受精过程中的作用

目的探讨小鼠受精时卵母细胞皮质颗粒胞吐的动态变化以及Synaptotagmin1(Syt1)对小鼠受精过程的影响。方法活细胞实时拍摄系统观察小鼠卵母细胞受精时皮质颗粒发生胞吐的动态变化特点。利用Syt1-Morpholino干扰方法,并设立对照,采用免疫荧光、Western blot和q RT-PCR方法分析Syt1在小鼠受精和不同时期受精卵中的作用,并统计分析Syt1对小鼠受精率的影响。结果活细胞实时拍摄系统成功显示了小鼠皮质颗粒胞吐的动态过程,未发现胞吐位置与纺锤体和染色体位置之间存在明确的位点关系,但是部分位置在卵母细胞极体附近。Syt1在小鼠受精后30 min^24 h不同时期受精卵中的表达量逐渐增加。Syt1表达降调后影响了小鼠受精及皮质颗粒分布,降低了小鼠受精率。结论用活细胞实时拍摄系统动态观察了小鼠皮质颗粒受精时胞吐的动态变化,Syt1直接参与了小鼠卵母细胞的受精过程。

神经递质释放的胞吐过程膜融合机制的新观点

胞吐作用(excocytosis)是与胞吞作用(endo-Cytosis)方向相反的细胞活动过程,前者是细胞将某种要释放或分泌的物质排到细胞外面,后者是物质进入细胞的过程。胞吐作用是真核细胞一种极复杂的机能活动,是某些物质从细胞中释放或分泌的共同途径。例如:胰腺消化酶原的分泌,胰岛素从β-细胞的分泌。

CAPS在钙离子触发的囊泡释放中的作用

钙离子依赖的分泌激活蛋白(Ca^(2+)-dependent activator protein for secretion,CAPS)是一类在进化中高度保守的促分泌蛋白,它存在两种异构体CAPS1和CAPS2,两者在不同发育阶段的表达水平及组织中的分布上均有所差异。以往的研究认为CAPS1作为磷脂酰肌醇二磷酸(phosphati-dylinositol diphosphate,PIP2)连接蛋白参与钙离子调节的大的致密核心囊泡(largedense-corevesci-cle,LDCV)与膜融合过程。最近的研究表明,CAPS1还作用于LDCV与膜融合的上游阶段,在分泌性囊泡的形成以及维持其稳定性方面发挥作用。

三氧化二砷诱导小鼠肝癌细胞H_(22)外泌exosome及相关机制研究

目的探讨三氧化二砷在小鼠肝癌细胞H22外泌exosome中的影响。方法MTT法筛选三氧化二砷的合适药物浓度;密度梯度离心和超速离心法提纯exosome,Bradford法对exosome总蛋白进行定量分析;Western blot检测影响小囊泡vesicle分泌的复合体SNARE的重要组成及调节蛋白Syntaxin的表达;结合钙荧光探针Fura-2、荧光倒置定量显微镜测定细胞内游离钙的相对浓度。结果维持小鼠肝癌细胞H2290%存活48h的药物浓度为1.25μmmol/L;药物作用前后,细胞数为5×104ml-1的H22细胞常规培养48h所得细胞悬液200ml,经密度梯度离心和超速离心所得exosome的总蛋白浓度分别为(0.85±0.13)、(0.96±0.10)mg/ml,差异具有统计学意义(P<0.05);三氧化二砷作用前后,H22细胞均有Syntaxin蛋白表达,三氧化二砷处理后,其表达明显增加(P<0.05)。结论SNARE复合体假说也适用于小鼠肝癌细胞H22的exosome外泌过程,三氧化二砷在exosome的外泌过程中有一定的促进作用。

外泌体在肝脏纤维化中的研究进展

外泌体是由多种细胞通过胞吐作用分泌到体液中的膜包被小泡,介导细胞间信息交流以及调节细胞微环境,参与细胞生长、增殖、分化、凋亡,肿瘤生长、侵袭等多种生理病理活动.肝脏纤维化是细胞坏死以及炎症刺激等引起肝脏细胞外基质（extracellularmatrices,ECMs）过量产生并沉积的病理过程.肝星状细胞（hepaticstellatecells,HSCs）受多种信号通路调节,激活后可以向肌成纤维细胞（myofibroblasts,MF）转化,是引起肝脏纤维化的ECMs的主要来源.大量实验证明外泌体在肝脏纤维化发生发展过程中发挥着重要作用,在肝脏纤维化诊治中具有潜在的应用价值.

外泌体与病毒感染

外泌体（exosomes）是一种可由多种细胞通过胞吐作用分泌释放到胞外或体液环境中的直径为纳米级别（40-150nm）的膜性囊泡结构，它由胞内多囊泡体（multivesicular bodies，MVBs）和细胞质膜融合形成，内含有独特的蛋白质、脂质和核酸等物质。已知外泌体介导的脂类、蛋白质及编码和非编码RNA的运输，广泛参与了细胞内和细胞间的生理过程，如抗原递呈、先天免疫、肿瘤发生和发展等。

Syntaxin-1通过激活突触递质传递加速早期突触的形成

Syntaxin-1是一种多结构域蛋白,通过与synaptobrevin-2和SNAP-25形成SNARE复合体调节囊泡融合.然而,syntaxin-1在突触形成过程中是否发挥作用,目前尚不清楚.本研究显示syntaxin-1的表达水平与突触形成过程高度相关.Syntaxin-1的R151A和I155A突变影响其在突触形成中的促进作用,而Habc结构域或跨膜结构域在突触形成中无显著作用.结果表明,syntaxin-1通过激活突触囊泡释放来加速突触的形成.

FK506结合蛋白12.6调节小鼠嗜铬细胞分泌(英文)

FK506结合蛋白12.6(FKBP12.6)能够结合并调控钙离子释放通道兰尼碱受体2型(RyR2)的开放,可能是儿茶酚胺分泌的重要调控器.利用FKBP12.6敲除小鼠模型,我们研究了FKBP12.6在肾上腺嗜铬细胞胞吐中的作用.结果表明,FKBP12.6在小鼠肾上腺嗜铬细胞中表达,而敲除FKBP12.6小鼠的嗜铬细胞中有正常的去极化引起的钙电流和胞吐作用.然而,FKBP12.6敲除会导致嗜铬细胞中出现增强的咖啡因引起的细胞整体钙瞬变和咖啡因引起的胞吐作用.结果提示,FKBP12.6调控肾上腺嗜铬细胞儿茶酚胺的分泌,这种调控作用是通过调节钙离子的释放而实现的.FKBP12.6是嗜铬细胞分泌的重要蛋白.

中枢神经系统中的桥梁分子Intersectin 1(英文)

唐氏综合征(Down syndrome,DS),也称21三体综合症,由先天性染色体异常引起,其主要特征是精神发育迟缓和先天性心脏病。所有的DS患者都会出现早发的阿尔茨海默病样的神经病理学特征。Intersectin 1基因位于人类第21条染色体DS的关键区域,且Intersectin 1蛋白在DS病人脑中有高表达,因此全面掌握Intersectin 1的功能特性对进一步阐明DS的发病机制有重要意义。Intersectin 1的功能不仅表现在中枢神经系统中特有的神经递质的传递,并且还参与介导细胞增殖分化等有关的一系列信号通路的传导。本文就Intersectin 1在中枢神经系统中的分布、表达特征及功能作一综述。