构建和验证肝细胞癌胞吞作用相关的预后特征

目的胞吞作用在多种疾病中都已证实与疾病进程有着紧密的关联,但关于胞吞在癌症中的作用的研究相对有限。本研究旨在探索胞吞相关基因在肝癌(HCC)中的角色及其与生存预后的关联。方法我们从TCGA和GEO数据库中下载了HCC的转录组表达谱和匹配的临床信息。通过“limma”R包进行差异分析以识别差异表达基因。采用LASSO Cox回归分析构建了胞吞相关的预后特征,并在GEO数据集上进行验证。结合TNM分期和其他临床变量,我们进一步建立了预后列线图。结果成功鉴定了33个与胞吞有关的差异表达基因,并进一步筛选出6个关键胞吞相关基因,包括ALDH2、C3、ANXA2、CD5L、IL33和HAVCR1。这些基因在HCC的生存中表现出显著的相关性(P<0.01)。通过多数据集的验证,预后特征显示出较好的准确性和稳定性。结合临床变量进行的深入分析证实,胞吞相关预后特征是HCC总体生存率的独立预测因子(P<0.01)。我们构建了一个胞吞相关的列线图。该列线图在整体样本中的1年、3年和5年生存预测的AUC值分别为70.7%、70.4%和70.1%,表现出较好的预测性能。结论本研究系统鉴定了胞吞相关预后基因并构建了HCC预后特征,该模型在预后评估中展现卓越准确性,为HCC治疗提供新思路,但仍需进一步研究验证。

神经原性因素对小鼠比目鱼肌胞吞作用的影响

本文报道用辣根过氧化物酶 ( HRP)酶标生化方法探讨神经原性因素对小鼠比目鱼肌胞吞作用的影响及其与肌萎缩的关系。坐骨神经鞘内注射秋水仙素诱发比目鱼肌去神经样改变 ,再用脑提取液处理秋水仙素小鼠比目鱼肌 ;用河豚毒素 ( TTX)毛细管埋藏坐骨神经鞘内 ;另将变性神经提取液注入正常及人工冬眠小鼠的比目鱼肌间隙。测定比目鱼肌 HRP摄取的相对含量及肌肉湿重和总蛋白量。结果表明 ,脑提取液可完全消除秋水仙素引起的胞吞摄取增加和肌肉湿重及总蛋白量的减少。河豚毒素比秋水仙素对肌肉的去神经样影响要小 ,变性神经提取液对正常及人工冬眠小鼠的肌肉胞吞摄取明显增强 ,但肌肉湿重及总蛋白量无显著改变 ,提示在生理情况下 ,脑源性神经营养性生物大分子是维持肌肉胞吞稳态的首要因素 ,正常神经支配的肌肉 ,变性神经产物显著诱导胞吞增强 。

小鼠孤雌激活胚胎早期发育过程中胞吞作用相关蛋白的动态表达分析

为探索哺乳动物孤雌激活胚胎早期发育过程中胞吞作用相关蛋白的动态表达,通过体外生产小鼠孤雌激活胚胎,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)技术检测不同发育时期小鼠孤雌激活胚胎胞吞作用相关蛋白Cav1、Cav2基因和蛋白相对表达水平,并采用免疫荧光技术进行不同发育时期小鼠孤雌激活胚胎中Cav1、Cav2表达定位分析。结果表明,在小鼠孤雌激活胚胎不同时期均可检测到Cav1、Cav2基因及其蛋白的表达,其中囊胚和桑椹胚中该2个基因的表达水平最高,4-8细胞时期次之,2细胞最低;各发育时期孤雌激活胚胎中Cav1、Cav2蛋白主要定位在胚胎细胞胞质内;囊胚中内细胞团(ICM)细胞中Cav1的荧光强度高于滋养层细胞。说明胞吞作用相关蛋白Cav1、Cav2可能参与小鼠早期胚胎发育的生理调控,桑椹胚和囊胚时期可能是其发挥生理功能的重要时期,并且在囊胚时期对内细胞团发育的调控作用更为显著。研究结果可为探索胞吞作用参与哺乳动物胚胎早期发育的调控机制提供重要参考。

网格蛋白介导型胞吞作用的分子机制研究和抑制剂开发进展

网格蛋白介导型胞吞作用(clathrin-mediated endocytosis,CME)是代谢产物、激素、蛋白质和某些病毒进入细胞的主要途径.前期研究已报道超过50种胞吞辅助蛋白(endocytic accessory proteins,EAPs)参与到CME的进程中,但是其复杂的分子调控机制仍有待厘清.近年来显微成像技术及CME抑制剂的发展为更好地解析CME的分子机制提供了机会.本文重点介绍了哺乳动物细胞中CME的分阶段调控机制以及CME抑制剂的开发现状.

百合花粉管中的胞吞/胞吐作用观察分析

应用细胞膜染料FM4-64结合Zeiss 5 live快速扫描型共聚焦显微镜观察了百合花粉管中的吞排作用.结果显示,培养基中加入FM4-64后,染料迅速进入到花粉管中,并在花粉管顶端形成一个锥形的区域;锥形区域表现出周期性变化,并且与花粉管脉冲生长呈负相关,即锥形区形成期花粉管生长缓慢,而锥形区消退期花粉管生长迅速;在锥形区域的消退期,花粉管顶端,尤其是最顶端快速向前延伸,而在锥形区域的形成期,花粉管最顶端的延伸速度显著下降,但亚顶端区域仍基本维持原有的生长速度.研究发现,花粉管的最顶端既是内吞作用也是胞吐作用的主要场所,但胞吞作用仅局限于花粉管的最顶端,而胞吐作用发生在包括亚顶端在内的整个花粉管顶端;胞吞和胞吐作用在花粉管最顶端交替发生,可能是花粉管脉冲生长的一个非常重要的原因.

哺乳动物细胞的胞吞作用实验教学设计和探讨

胞吞作用在物质的跨膜运输中具有重要的作用,但在传统的实验教学中缺少相关的内容。为优化细胞生物学实验教学内容,使学生及时掌握先进的科研技术,实现研究型与创新型人才培养的目标,作者设计了一套简便的、适合教学的动物细胞培养和细胞胞吞作用的实验方案。无菌环境下体外培养专职吞噬细胞(小鼠腹腔巨噬细胞)和非专职吞噬细胞(He La细胞),然后用荧光标记的高分子量葡聚糖(dextran)分子作为示踪物,观察细胞体外的胞饮作用;巨噬细胞体内和体外的吞噬功能的实验以鸡红细胞作为示踪物。该实验完整直观地展示了细胞的胞饮作用和吞噬作用。实验内容的开展使学生综合分析与解决问题的能力得到锻炼与提高,为培养高素质的综合型技能人才奠定了坚实的基础。

肝细胞对白蛋白纳米粒的胞吞作用研究

目的研究L02细胞对白蛋白纳米粒的胞吞作用。方法采用钙黄绿素作为白蛋白纳米粒的荧光标记探针,用去溶剂化法制备钙黄绿素白蛋白纳米粒(calcein HSA-NPs),并考察粒径、体外释放、细胞摄取、胞内分布和细胞毒性。结果 CalceinHSA-NPs平均粒径为203.3 nm,体外释放96 h不到80%。白蛋白纳米粒的胞吞作用呈现时间、浓度、温度依赖性,可以显著提高水溶性小分子钙黄绿素的入胞能力(P<0.01)。Calcein HSA-NPs主要经clathrin介导的内吞途径和大胞饮入胞的,进入细胞后分布在细胞核外的胞内空间,主要集中在溶酶体内。白蛋白纳米载体对细胞基本无毒。结论所制备的calcein HSA-NPs可作为有效的载体来研究胞吞作用机制。

稀土增强拟南芥根细胞胞吞作用

环境中稀土元素(rare earth elements, REEs)可通过启动植物叶胞吞作用进入植物体,而自然条件下,植物与外源REEs接触多发生在根系。因此,以环境中累积量高的REE La(Ⅲ)和模式植物拟南芥为代表,从细胞与分子生物学视角揭示REEs影响根胞吞作用的机制。结果表明:处理12 h, La(Ⅲ)可增强根细胞胞吞作用,且增强作用与La(Ⅲ)剂量有关:高(160μmol·L^(-1))>中(80μmol·L^(-1))>低(30μmol·L^(-1));处理24 h:中(80μmol·L^(-1))>高(160μmol·L^(-1))>低(30μmol·L^(-1))。除160 mnol·L^(-1) La(Ⅲ)处理(24 h),衔接蛋白2 (Adapter protein 2, AP2)基因表达量降低外,其他处理条件下AP2和网格蛋白基因表达量均增加。综上所述, La(Ⅲ)可通过上调AP2网格蛋白基因表达量增强拟南芥根细胞胞吞作用。

白蛋白胞吞受体及其在近端肾小管胞吞过程中的作用

近端肾小管通过胞吞作用重吸收白蛋白的理论在40余年前就已经被证实，其中受体介导的胞吞作用是近端肾小管上皮细胞重吸收和代谢经肾小球滤过的蛋白质及其他营养物质的重要途径，这个过程受损会直接导致这些物质的丢失和蛋白尿产生。

自发曲率对受体介导的胞吞作用的影响

为研究纳米颗粒进入具有自发曲率的细胞膜的机理,在已建立的受体介导胞吞作用力学模型的基础上进行了扩展,对非零自发曲率的细胞膜上发生的受体介导的胞吞作用进行了研究。结果显示:包裹时间不仅依赖于颗粒的尺寸,而且依赖于细胞膜的自发曲率;存在最佳的颗粒半径使包裹时间最短;对于无限大尺寸的细胞膜,当细胞膜的自发曲率大于临界值时,存在最小和最大包裹半径,但当细胞膜的自发曲率小于等于临界值时,只存在最小包裹半径。

钙调蛋白及其结合蛋白对神经递质释放的调控作用

钙离子(Ca2+)是调节突触前神经递质的胞吐释放的关键离子信号.作为胞内最普遍存在的钙离子感受器的钙调蛋白(CaM)被发现能通过与多种蛋白的相互作用,调控着突触小泡的生发、运输及再填充,从而传递胞内Ca2+浓度变化的信号,对神经递质的释放及突触电生理活动起到至关重要的调控作用.本文综述了CaM及其结合蛋白是如何参与对突触小泡的胞吐释放和胞吞恢复的调控,并探讨了其中可能的分子机制.

Siglecs家族在免疫系统中的作用研究进展

免疫系统的各种细胞表面含有丰富的糖链结构,它们能被各种糖结合蛋白所识别。唾液酸结合的免疫球蛋白样凝集素(Siglecs)家族就是这样一类分子,它们特异性表达于各种免疫细胞和造血细胞表面,通过识别含有唾液酸的糖链结构而促进细胞与细胞间结合和相互作用,介导细胞信号转导,从而调节天然免疫与获得性免疫细胞的功能。除此之外,siglecs家族成员还有介导胞吞作用(endocytosis)和病原体识别等功能,以及作为药物进入细胞的靶点进行肿瘤靶向治疗等。现就Siglecs家族主要特性及其在免疫系统中的作用研究进展作一综述。

扰动流条件下血管内皮细胞SR-B1转胞吞LDL增强促进动脉粥样硬化

目的动脉粥样硬化(AS)斑块易形成在血管分叉和主动脉弓小弯等扰动流区域。最新研究发现,清道夫受体B1(SR-B1)在动脉内皮细胞中可通过转胞吞作用转运低密度脂蛋白(LDL)到内膜下沉积,加速AS的形成。通过体内外实验,检测在低切应力和振荡流等异常血流动力学情况下,血管内皮细胞上SR-B1的变化,及其与AS发生发展之间的关系。方法构建Apoe^(-/-)小鼠颈动脉部分结扎(PCL)的低切应力和振荡流体内模型,并辅以28 d高脂饮食。

细胞膜筏的结构及其在病毒复制和信号转导路径中的作用

膜筏是近年发现的广泛存在于细胞膜上的特定微区域,具有特殊的化学组成和生物学特性.膜筏参与了许多生命活动,如生物合成、胞吞作用、信号转导等,尤其在病毒感染、复制过程中,膜筏起到了重要的平台作用.对膜筏的深入研究,将为研究病毒感染过程、抗病毒治疗和详细阐述各种生命活动机制提供新的思路和启发.

掺Mg与接枝RGD的HAnps载体系统对MG63细胞胞吞功能的影响

采用水热合成法制备HAnps和掺镁HAnps(Mg-HAnps),通过硅烷化联合碳二亚胺法处理HAnps和Mg-HAnps后接枝黏附肽(RGD),以香豆素6(coumarin-6)为荧光探针标记HAnps,Mg-HAnps,RGD-HAnps和RGD-Mg-HAnps,并将其与人成骨肉瘤MG63细胞株(MG63)细胞共培养,研究掺Mg与接枝RGD的HAnps对MG63细胞胞吞作用的影响。研究结果表明:RGD-Mg-HAnps无细胞毒性,掺Mg与接枝RGD有利于MG63细胞胞吞HAnps颗粒,并有协同作用,RGD-Mg-HAnps具有介导胞吞的作用。

A型肉毒素治疗三叉神经痛的作用机制研究及进展

三叉神经痛的特征表现为单侧阵发性的面部疼痛,疼痛性质通常为针刺或电击样,疼痛范围局限在三叉神经支配区的一支或多支。经典的三叉神经痛被认为由于三叉神经受到血管慢性压迫后出现脱髓鞘或者髓鞘化不良,受损的神经纤维自发异常放电引起烧灼样的痛觉,然而其具体的发病机制仍存在争议。临床试验表明A型肉毒素可以安全有效治疗三叉神经痛,然而其作用机制仍不清楚,与其肌肉麻痹的作用机制相比,其镇痛机制似乎更加复杂。本篇综述回顾了三叉神经痛的发病机制、A型肉毒素的结构、镇痛作用机制以及注射可能带来的不良反应,作用机制部分包括在外周抑制炎性介质的释放、Na通道的失活、抑制瞬时感受器电位(TRP)通道在细胞膜上的表达、逆向轴突转运和转胞吞作用。

AtRGS1胞吞动态调控G蛋白参与拟南芥生长发育和抗性反应

异源三聚体G蛋白由Gα、Gβ和Gγ 3个亚基组成,是普遍存在于真核细胞中的跨膜信号转导因子。植物细胞通过定位于细胞质膜的G蛋白信号调节子RGS蛋白(regulator of G protein signaling),调控异源三聚体G蛋白的活性,进而参与生长发育、激素和糖信号转导以及抗病反应等多个重要生物学过程。膜蛋白可通过胞吞循环调控其在细胞质膜上的数量,以响应外界环境因子和自身发育信号。近年来,研究表明多种外界信号诱导拟南芥AtRGS1蛋白的胞吞,进而促进其与Gα亚基的解离,游离的Gα-GTP、Gβγ亚基和定位于内含体的AtRGS1蛋白均可能调控下游信号转导,进而影响相应生物学过程。本文综述了AtRGS1通过胞吞作用调控G蛋白参与的生长发育和抗性反应的分子细胞学机制研究进展,以期为深入理解G蛋白信号调节子影响植物发育进程和抗性反应的作用机制提供理论参考,为植物膜蛋白胞吞调控信号转导提供新的视角。

接枝TAT和RGD对Mg-CaPNPs-CKIP-1 siRNA载体系统的体外胞吞和生物学效应的影响

磷酸钙纳米粒(CaPNPs)作为基因载体具有良好的生物相容性;然而,CaPNPs通常表现出较低的转染效率。细胞穿透肽(TAT)可以增加纳米颗粒的摄取,但由于其非特异性而受到限制。纳米载体表面接枝细胞黏附肽(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸,RGD)可增强其靶向性。Plekho1基因编码酪蛋白激酶-2相互作用蛋白-1(CKIP-1)可负调控成骨分化。在此基础上,本研究通过水热合成法、硅烷化法和吸附法制备了Mg-CaPNPs-RGD-TAT-CKIP-1 siRNA载体系统。通过体外细胞培养,评价了该载体系统对细胞胞吞及生物学效应的影响。结果表明,掺镁7%的CaPNPs(粒径60 nm,短棒形,分散性好)适合作为基因载体。载体系统促进了MG63细胞的内吞作用,有利于促进成骨细胞的分化,且双配体系统具有协同作用。结果表明,Mg-CaPNPs-RGD-TAT-CKIP-1 siRNA载体系统在高效转运进入细胞和诱导成骨方面具有巨大的潜力。

冠状病毒入侵细胞途径的研究进展

近年来,冠状病毒严重威胁人类和动物的健康。病毒具有专性胞内寄生的特点,其需要利用细胞完成自身的增殖,因此入侵细胞的过程是其感染机制中非常重要的一部分。多项研究表明冠状病毒能通过细胞表面途径和内吞途径入侵细胞。通过对冠状病毒入侵途径研究有助于了解其生命周期,有利于冠状病毒的防治以及新型药物和疫苗的研发。本文对近年来不同冠状病毒的入侵途径及针对入侵途径所开发的潜在药物的相关研究进行总结,以期为全面了解冠状病毒的入侵方式提供参考。

仔猪小肠母源抗体IgG的摄取与肠道淋巴组织发育的组织学研究

本研究采用H．E．染色、硫化铅组织化学染色及IgG免疫组织化学染色的方法对0、5、28日龄仔猪小肠进行了组织学研究。结果显示：仔猪小肠IgG阳性反应物分布于小肠绒毛柱状细胞的转运泡、柱状细胞基底部、小肠小血管血浆、淋巴管淋巴浆中，中央乳糜管周围的结缔组织中也有分布。仔猪小肠IgG阳性强度随日龄的增加逐渐下降。在各肠段中。空肠IgG阳性最强。仔猪小肠酸性磷酸酶的分布规律与IgG相似。仔猪小肠上皮内淋巴细胞数目随日龄增加显著增多，集合淋巴小结由0日龄至28日龄逐渐发育成熟。结论：仔猪在出生时通过胞吞作用摄取母源抗体IgG，伴随此过程的还有溶酶体的细胞内消化作用。最终通过毛细血管和毛细淋巴管途径进行转运，0～5日龄是仔猪小肠摄取母源抗体IgG的最佳时机，至28日龄，仔猪小肠发生“肠关闭”，IgG摄取停止。与此同时，小肠淋巴组织逐渐发育成熟，肠道的黏膜免疫屏障趋于完善。