嘌呤核苷酸对海洛因依赖及戒断大鼠睾丸和附睾组织中腺苷脱氨酶活性及基因表达的影响

目的:研究嘌呤核苷酸对海洛因依赖及戒断大鼠睾丸、附睾腺苷脱氨酶(ADA)活性及基因表达的影响,阐明海洛因对男性生殖系统嘌呤核苷酸代谢的损害及嘌呤核苷酸补偿的对抗作用。方法:建立海洛因依赖及戒断大鼠模型,80只建模成功的雄性Wistar大鼠随机分为对照组(生理盐水)、海洛因组、海洛因戒断3d组、海洛因戒断9d组、核苷酸组(不给海洛因)、海洛因+核苷酸组(同时给药)、核苷酸3d组及核苷酸9d组(每组10只),检测睾丸和附睾组织内ADA活性及基因表达的情况。结果:睾丸和附睾组织中ADA活性,海洛因组和海洛因戒断3d组均明显高于对照组(P<0.05),其他各组与对照组比较,差异均无显著性(P>0.05);睾丸组织中ADAmRNA水平,海洛因组明显高于对照组(P<0.05),附睾组织中ADAmRNA水平,海洛因组、海洛因戒断3d组和海洛因戒断9d组均明显高于对照组(P<0.05),其他各组与对照组比较,差异均无显著性(P>0.05)。结论:海洛因对大鼠睾丸和附睾组织中ADA活性和基因表达有持续增强作用,补偿嘌呤核苷酸可以对抗海洛因的作用。

腺苷脱氨酶抑制剂红-9-(2-羟基-3-壬烷基)腺嘌呤对白血病细胞凋亡及细胞周期的影响

目的探讨腺苷脱氨酶抑制剂-红-9-(2-羟基-3-壬烷基)腺嘌呤(EHNA)对白血病细胞凋亡及细胞周期的影响。方法选取白血病细胞HL60、Jurkat、U937、K562及人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC),培养至对数生长期,将细胞随机分为对照组、0.10 mmol·L^-1 EHAN处理组和0.25 mmol·L^-1 EHNA处理组。对照组细胞细胞采用正常培养基培养,0.10 mmol·L^-1 EHAN处理组和0.25 mmol·L^-1 EHNA处理组细胞分别应用含0.10、0.25 mmol·L^-1 EHNA的培养基培养,培养48 h后,采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率及对照组和0.10 mmol·L^-1 EHNA处理组细胞周期。结果细胞培养48 h后,0.10 mmol·L^-1 EHNA处理组和0.25 mmol·L^-1 EHNA处理组HL60、U937、K562、Jurkat细胞凋亡率均显著高于对照组(P<0.05);0.10 mmol·L^-1 EHNA处理组HL60、K562细胞凋亡率显著高于0.25 mmol·L^-1 EHNA处理组(P<0.05);0.10 mmol·L^-1 EHNA处理组与0.25 mmol·L^-1 EHNA处理组U937、Jurkat细胞凋亡率比较差异无统计学意义(P>0.05)。0.10 mmol·L^-1 EHNA处理组、0.25 mmol·L^-1 EHNA处理组和对照组HUVEC凋亡率比较差异无统计学意义(P>0.05)。0.10 mmol·L^-1 EHNA处理组K562细胞和Jurkat细胞的S期细胞比例显著高于对照组(P<0.05),K562细胞和HUVEC细胞的G 2/M期细胞比例显著低于对照组(P<0.05);0.10 mmol·L^-1 EHNA处理组与对照组HUVEC细胞的S期细胞比例及HL60、Jurkat、U937细胞的G 2/M期细胞比例比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论EHNA处理可以在不影响血管内皮细胞的前提下杀伤多种类型的白血病细胞,为白血病治疗药物开发提供了参考。

鸟嘌呤、腺嘌呤、胸腺嘧啶和胞嘧啶的紫外吸收谱研究

利用紫外光度法对构成核酸的鸟嘌呤（G）、腺嘌呤（A）、胸腺嘧啶（T）和胞嘧啶（C）的紫外吸收谱进行了研究。通过对含四种碱基的磷酸盐缓冲溶液（pH=7）分别进行分析，发现G在240～280nm范围内有两个紫外吸收峰，分别位于于244nm和274nm处；而A、C和T的吸收峰值则较为接近，分别位于258nm、264nm和266nm处。对A、C和T分组混合或共混后进行测试，发现当峰值出现在260nm时，溶液中至少存在A和C。当峰值位于258nm处时，溶液中存在A或T。在300～1100nm范围内未发现该四种碱基的吸收峰。

双酶法呈味核苷酸的研制 第2报 高产腺嘌呤核苷酸脱氨酶菌种筛选、酶的形成及其作用条件的研究

酵母 RNA 经 PD 酶降解,产生4种5′—核苷酸,其中5′—AMP 需脱氨后才能转化为具有鲜味的5′—IMP。脱氨作用可用化学方法或者生物化学方法来完成。我们采用生化方法,即从微生物中筛选产 AMP 脱氨酶(简称 AD酶)强的菌种来完成 AMP 到 IMP 的转化过程,同时确定菌种的产酶条件和酶作用条件,尤其要解决与脱氨酶同时存在的磷酸单酯酶作用的问题,以免后者将5′—核苷酸分解为核苷。

M（Ⅱ）（ArP）^（2－）与核酸碱基（腺嘌呤，胞嘧啶）三元混配配合物稳定性研究

用ｐＨ电位滴定法测定了金属离子（Ｍ^（２＋）＝Ｃｕ^（２＋），Ｃｏ^（２＋），Ｎｉ^（２＋），Ｚｎ^（２＋），Ｃｄ^（２＋）与核酸碱基（Ｌ＝腺嘌呤，胞嘧啶）形成的二元配合物以及与腺昔－５’－三磷酸（ＡＴＰ）形成的三元混配配合物的稳定常数。三元配合物相对于二元配合物的稳定性用平衡常数表示。结果表明：ΔｌｇＫ_ｍ比咪唑或氨的相应配合物ΔｌｇＫ_ｍ大，这可能与三元混配配合物分子内存在配体间的芳环堆积、氢键作用以及π_Ａ－π_Ｂ协同效应有关。

白屈菜红碱与腺嘌呤核苷、胞嘧啶核苷相互作用的光谱对比研究

通过紫外分光光度计与荧光分光光度计测量表明白屈菜红碱与腺嘌呤核苷、胞嘧啶核苷相互作用后,紫外光谱发生了减色和红移现象,荧光光谱发生了猝灭现象。通过荧光数据定量计算出了白屈菜红碱与腺嘌呤核苷、胞嘧啶核苷的猝灭为静态猝灭,线性拟合方法适用于静态猝灭,因此计算出了白屈菜红碱与腺嘌呤核苷、胞嘧啶核苷的猝灭常数、结合常数和热力学常数。白屈菜红碱-核苷的猝灭常数KSV的大小关系:腺嘌呤核苷>胞嘧啶核苷。白屈菜红碱-核苷的结合常数K的大小关系:腺嘌呤核苷>胞嘧啶核苷。结合比n值:腺嘌呤核苷>胞嘧啶核苷。白屈菜红碱与腺嘌呤核苷的结合反应为吸热反应,而白屈菜红碱与胞嘧啶核苷的结合反应为放热反应,两个反应均为熵驱动的反应。

keV离子辐照固态腺嘌呤与胞嘧啶的剂量效应研究

研究了经20keV的氮离子、氩离子辐照后 ,腺嘌呤与胞嘧啶的残存率与注入剂量的关系。结果表明 ,在相同的剂量下 ,氮离子对碱基的损伤比氩离子高 ,而对同种离子而言 ,胞嘧啶比腺嘌呤表现出较高的辐射敏感性。计算了碱基分子损伤的G值 ,发现它们随剂量的增大呈减小的趋势。考察了加入自由基清除剂后 ,碱基损伤剂量效应的变化。

日本血吸虫腺苷脱氨酶基因的克隆和融合表达

目的克隆和表达日本血吸虫(Sj)腺苷脱氨酶(ADA)编码基因,分析该基因的系统发育及预测其编码蛋白的空间结构。方法根据表达序列标签(EST)测序的结果设计引物,PCR法从含有SjADA基因的cDNA克隆中扩增得到该编码基因片段,亚克隆入原核表达载体pET32中表达,表达的融合蛋白用螯合琼脂糖凝胶FF亲和层析纯化。采用MrBayes算法构建系统发育进化树,用自动蛋白注释工具(DS GeneAtlas)软件模拟SjADA的蛋白空间结构。结果获得SjADA基因全长为1 059 bp的编码序列,并克隆、表达和纯化了重组蛋白(SjADA)。生物信息学分析显示,该基因与曼氏血吸虫的同源基因之间的序列一致性仅25%,属于不同的亚家族。其空间结构与PDB模板1A4M的一致性为41%,具有相似的二级结构和相应的活性位点残基。结论获得了SjADA重组蛋白。提示日本血吸虫嘌呤补救合成代谢途径与曼氏血吸虫有差异。

海洛因对脑及肌肉组织中腺苷脱氨酶含量的影响

目的:检测海洛因给药、停药大鼠脑和肌肉组织中腺苷脱氨酶(ADA)含量,探讨海洛因给药对嘌呤核苷酸分解代谢的影响。方法:建立海洛因给药、停药大鼠模型,测定脑及肌肉组织中的ADA含量。结果:与对照组比较,给药3d组大鼠脑和肌肉组织中ADA含量均有增高趋势(P>0 .0 5 ) ,给药9d组显著增高(P<0 .0 5 )。与给药9d组比较,停药3d组大鼠脑组织中ADA含量下降不显著,停药8d组明显降低(P<0 .0 1) ;停药3d组肌肉组织中ADA含量已明显低于给药9d组(P<0 .0 1) ,停药8d组下降更为显著。结论:海洛因通过增加ADA的含量,使脑及肌肉组织中嘌呤核苷酸分解代谢增强,且脑组织中这一作用比肌肉组织更显著、持久。

胸水腺苷脱氨酶异常升高的T淋巴母细胞淋巴瘤1例并文献复习

腺苷脱氨酶（adenosine deaminase,ADA）是嘌呤核苷代谢中一种重要的核苷酸氨基水解酶,广泛存在于人体各组织中,胸腺、脾脏和其他淋巴组织中含量较高。ADA诊断结核性胸膜炎的敏感性为93-100%,特异性为92-100%,是目前鉴别结核性胸腔积液的重要指标。

腺苷脱氨酶缺陷所致严重联合免疫缺陷病的治疗

腺苷脱氨酶缺陷所致的严重联合免疫缺陷病（adenosine deaminase deficient severe comb-ined immunodeficiency,ADASCID）系罕见的影响嘌呤代谢的遗传性疾病,预估发病率为1/200 000~1/1 000 000[1],占所有严重联合免疫缺陷病的10%~15%[2]。该病以代谢底物堆积为主要特点,进而累及T细胞、B细胞、NK细胞的分化及功能[3]。因腺苷脱氨酶（adenosine deaminase,ADA）在人体内广泛存在,ADA缺陷可致人体多系统损害[4-8]。

慢性乙型肝炎患者血清中抗肝肾微粒抗体-1和腺苷脱氨酶活性测定

有研究表明，慢性乙肝患者血清中存在多种自身抗体，抗肝肾微粒抗体（LKM）就是其中之一。抗肝。肾微粒体抗体-1（LKM-1）是针对微粒体抗原的一类抗体，该抗体是Ⅱ型自身免疫性肝炎（MH）的标志抗体。腺苷脱氨酶（ADA）是人体嘌呤核苷分解代谢过程中起关键作用的酶，它能催化腺瞟呤核苷最终氧化成终产物尿酸，而这一过程是在肝脏完成的。为探索慢性乙肝患者肝肾微粒抗体与腺苷脱氨酶之间有无联系，本文收集76例慢性乙肝患者血清，同时检测肝肾微粒抗体和腺苷脱氨酶，现将结果报告如下。

嘌呤核苷酸补偿对吗啡依赖大鼠嘌呤核苷酸分解代谢的影响

目的探讨外源性补偿嘌呤核苷酸对吗啡依赖大鼠嘌呤核苷酸分解代谢的影响。方法将60只♂Wistar大鼠随机分为对照组、吗啡组、吗啡+嘌呤核苷酸组、对照戒断组、吗啡戒断组和吗啡+嘌呤核苷酸戒断组,戒断组于d8给药后4h观察纳洛酮急性戒断症状。各组检测血尿酸(UA)、尿素氮(BUN)和肌酐(Cre)含量,以及血浆和大脑皮质腺苷脱氨酶(ADA)活性。结果吗啡+嘌呤核苷酸戒断组的戒断症状综合评分明显少于吗啡戒断组(P<0.01)。吗啡组及吗啡戒断组血UA含量均明显高于相应的对照组和相应的吗啡+嘌呤核苷酸组(P<0.05)。各组间BUN和Cre含量差异无显著性(P>0.05)。吗啡组及吗啡戒断组血浆及大脑皮质ADA活性明显高于相应的对照组和相应的吗啡+嘌呤核苷酸组(P<0.05或P<0.01)。结论补充嘌呤核苷酸可改善吗啡增强大鼠嘌呤核苷酸分解代谢作用。

吗啡对嘌呤核苷酸分解代谢的影响—吗啡依赖的生化与分子生物学机制研究

目的 :研究吗啡依赖及戒断对嘌呤核苷酸分解代谢的影响与作用机制。方法 :建立吗啡依赖、戒断的大鼠模型 ,测定大鼠血浆中尿酸及腺苷脱氨酶 (ADA)含量 ;各组织中的腺苷脱氨酶含量以及大鼠脑顶叶、肝脏、小肠和肌肉组织中腺苷脱氨酶的基因转录产物。结果 :吗啡给药大鼠血浆尿酸水平明显升高 (P <0 0 5 ) ;吗啡给药及戒断期间 ,大鼠血浆ADA水平均显著升高 (P <0 0 5 ) ;吗啡给药组大鼠脑顶叶、肝脏、小肠和肌肉组织匀浆中的ADA含量都有不同程度的升高 (P <0 0 5 ) ,而在自然戒断期间 ,上述各组织ADA含量较给药组有所下降 ;吗啡给药 3d组大鼠脑顶叶、吗啡给药 7d组大鼠肝脏、小肠和肌肉组织中ADA的基因表达均明显升高 (P <0 0 5 ) ,除肌肉组织外 ,在自然戒断期间 ,上述各组织ADA的基因表达水平都有不同程度的恢复。结论 :嘌呤核苷酸分解代谢加强可能是吗啡的基本作用 ,也可能是依赖的重要原因之一。

嘌呤核苷酸补偿对海洛因依赖大鼠嘌呤核苷酸分解代谢的影响

目的:探讨外源性补偿嘌呤核苷酸对海洛因依赖大鼠嘌呤核苷酸分解代谢的影响,阐明嘌呤核苷酸补偿治疗海洛因依赖效应机制。方法:将50只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、海洛因组、海洛因+AMP+GMP组、海洛因+AMP组、海洛因+GMP组。检测各组血尿酸(UA)、尿素氮(BUN)和肌酐(Cre)含量,以及血浆和大脑皮质腺苷脱氨酶(ADA)和黄嘌呤氧化酶(XO)活性。结果:海洛因组血浆中UA含量及ADA、XO的活性均比对照组明显升高(P<0.05),而海洛因+AMP+GMP组、海洛因+AMP组、海洛因+GMP组血浆UA含量及ADA、XO的活性与海洛因组相比明显降低(P<0.05)。各组间BUN和Cre含量差异无显著性(P>0.05)。海洛因组大脑皮质中ADA、XO的活性均比对照组明显升高(P<0.05),而海洛因+AMP+GMP组、海洛因+AMP组、海洛因+GMP组大脑皮质ADA、XO的活性与海洛因组相比明显降低(P<0.05)。结论:海洛因可促进大鼠整体水平上嘌呤核苷酸的分解代谢,而补偿嘌呤核苷酸可以抑制或拮抗海洛因的上述作用。

外源性嘌呤核苷酸减弱吗啡促PC12细胞核苷酸分解代谢的作用

目的探讨外源性嘌呤核苷酸对吗啡致神经细胞核苷酸分解代谢增强的影响。方法应用MTT比色法检测给予吗啡同时给予嘌呤核苷酸(AMP和GMP及ATP和GTP)对PC12细胞存活率的影响;RT-PCR法检测腺苷脱氨酶(ADA)和黄嘌呤氧化酶(XO)mRNA表达。结果同时给予吗啡和嘌呤核苷酸可改善吗啡对PC12细胞增殖的抑制作用。给予吗啡并补充AMP和GMP使得ADA mRNA表达与对照组及吗啡组比较均无差异,XO mRNA表达低于吗啡组(P<0.01);给予吗啡及ATP和GTP使得ADA mRNA表达仍高于对照组(P<0.05),XO mRNA表达低于吗啡组(P<0.05)。结论补充嘌呤核苷酸可改善吗啡对PC12细胞增殖的抑制作用,减弱吗啡所致的PC12细胞ADA和XO基因表达升高。