酶法提取灵芝孢子粉胞壁水溶性糖的工艺优化及分子量分布

为提高灵芝(Ganoderma lucidum)孢子粉胞壁水溶性糖的提取效率,以灵芝孢子粉胞壁残渣为研究对象,用单因素实验、响应面实验优化酶法胞壁水溶性糖提取工艺,并比较酶法和不同物理法处理的灵芝孢子粉胞壁水溶性糖的分子量分布。结果表明:最佳提取工艺为溶壁酶加量2%,酶解时间5 h,料液比1︰10(g︰m L)、温度40℃、pH6.5,在此条件下提取的灵芝孢子粉胞壁水溶性糖含量达到17.86%。分子量分布分析结果表明,酶解后的水溶性糖以低聚糖为主。研究结果可为有效利用和开发灵芝孢子粉提供参考。

肠道细菌产物胞壁酰二肽的研究进展

肠道被称为多器官功能障碍综合征的发动机,肠源性脓毒症和肠道细菌移位在危重症救治中日益受到关注。肠道细菌移位的重要途径之一是细菌产物移位。而作为革兰氏阳性菌和阴性菌的细胞壁最小肽聚糖免疫活性物质,细菌产物胞壁酰二肽(muramyl dipeptide,MDP)肠道移位对机体的免疫与代谢具有重大的影响。本文重点关注MDP的肠道移位机制及其调控方法(包括MDP转运途径、作用靶点、信号通路和炎性损伤路径),聚焦MDP对免疫和代谢的影响。

果实软化的胞壁物质和水解酶变化

果实软化通常被认为是由于胞壁水解酶如多聚半乳糖醛酸酶、果胶醋酶、纤维素酶降解胞壁物质导致。本文概述了这三种酶分子与果实软化关系的研究进展。反义基因技术证明,这三种酶基因的任一种表达被抑制,果实能够正常软化,暗示果实的软化有其它因子的参与。其中由细胞内的淀粉酶和蔗糖酶引起的细胞膨压的变化及果胶的溶解可能是引起果肉软化的重要原因。

裂果发生与果皮细胞壁修饰的关系研究进展

果皮发育状态和力学性能直接影响裂果的发生,而其力学性能与果皮细胞壁修饰有着密切的关系。从果皮细胞壁中的多糖、蛋白质、酚类物质、矿质元素以及有关细胞壁松弛基因等方面概述了果皮细胞壁组分代谢与生化修饰和裂果的关系,并展望该领域今后的研究方向。

免疫佐剂—胞壁酰二肽的合成

N—乙酰基—胞壁酰—L—丙氨酰—D—异谷氨酰胺(MDP)是细菌细胞壁上具有免疫佐剂活性的最小结构单位。它的佐剂作用强而广泛,毒性低,水溶液口服有效。

水稻纹枯病菌胞壁降解酶的产生及致病作用

水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solaniKühn)在改良的Marcus培养液中能产生多聚半乳糖醛酸酶(PG)、纤维素酶(Cx)、果胶甲基半乳糖醛酸酶(PMG)、多聚半乳糖醛酸反式消除酶(PGTE)和果胶甲基反式消除酶(PMTE)5种胞壁降解酶,其中PG、Cx和PMG活性较高,而PGTE和PMTE活性很低。病菌产生胞壁降解酶的最佳条件是:在pH5培养液中28℃下静置培养6 d。病菌接种水稻叶鞘后也能显著产生PG、Cx和PMG等胞壁降解酶,并且病斑外侧褪绿部酶活最高,平均为对照(健康部)的3.4倍;其次是褐色部,酶活总量平均为对照的2.9倍;病斑中央枯白部酶活较低,但明显高于对照。这一结果提示,在病菌侵染和扩展过程中胞壁降解酶起重要作用。果胶酶(PG、PMG)和纤维素酶(Cx)无论是单独处理还是混合处理,对水稻叶鞘都具有显著地损伤细胞膜和浸渍组织的作用。

纹枯病菌胞壁降解酶对水稻组织和细胞的破坏作用

通过针刺接种,纹枯病菌(Rhizoctonia solani)胞壁降解酶——果胶酶(PG、PMG)和纤维素酶可使水稻叶鞘褪绿变黄。经浸泡处理,上述酶液使水稻愈伤组织细胞破裂崩解;水稻叶鞘细胞超微结构受到严重破坏,如细胞壁部分裂解、叶绿体和线粒体损伤等。这些结果提示病菌产生的胞壁降饵酶具有显著的致病作用。

环状芽孢杆菌胞壁溶解酶用于红发夫酵母虾青素提取的研究

采用单因素及均匀实验设计确定了将环状芽孢杆菌胞壁溶解酶用于红发夫酵母破壁提取虾青素的最佳酶作用条件,即粗酶液pH值为5.0,体积为33mL(酶量1603.8U·g-1干酵母),温度37℃,100r·min-1振荡反应16.5h,虾青素的提取率可达到98%以上。通过对不同方法提取所得虾青素的光、热稳定性进行测试,发现酶法提取的虾青素不论是在光照还是在加热条件下均比机械法及酸法破壁提取所得的虾青素稳定。

立枯丝核菌对马铃薯侵染过程的显微结构观察与胞壁降解酶活性的测定

由立枯丝核菌引起的马铃薯茎溃疡病(黑痣病)已成为限制甘肃省马铃薯产业健康发展的主要土传病害之一。本研究在盆栽试验条件下将病原菌接种于马铃薯植株的茎基部,显微观察侵染过程,并测定了胞壁降解酶活性的变化。结果表明,土壤中接种病原菌后,马铃薯侵染顺序依次为:芽-茎-根-匍匐茎-块茎;接菌12 h后菌丝开始附着寄主表面,36 h后形成附着胞,48 h后形成侵染垫;电镜下可见,细胞壁变形、断裂,细胞膜破损,质体结构变形,细胞质溶解和质壁分离等;纤维素酶(Cx)、多聚半乳糖醛酸酶(PG)和果胶甲基半乳糖醛酸酶(PMG)的活性高达1.7,2.9和3.1μg/(h·g),显著高于对照,尤其是PG和PMG的活性,为对照的两倍。这些酶活性的提高可能与组织坏死有关。

三种酵母胞壁多糖的化学组成及血清学试验

分别提取啤酒酵母（Saccharomycescerevisiae），热带假丝酵母（Candidatropicalis）及八胞裂殖酵母（Schizosacchromycesoctosporus）的胞壁多糖，并通过血清学试验及理化测试。

胞壁蛋白酶(CEP)酶解对酪蛋白结构及功能特性的影响

通过纳米粒度分析、傅立叶红外光谱(FT-IR)、乳化性、乳化稳定性、蛋白溶解性、抗氧化性及ACE抑制率的测定,分析探讨酪蛋白及其不同水解度(DH 2.4%、4.5%、7.1%、8.3%)的嗜酸乳杆菌胞壁蛋白酶(CEP)酶解产物的结构及功能特性。FTIR分析表明CEP酶解改变了酪蛋白各种构象所占的比例,酪蛋白二级结构发生了不同程度的变化;纳米粒度分析表明酪蛋白颗粒大小随水解的加深先减小后增大,其水解物颗粒在DH 4.5%时最小,乳化稳定性最大;酪蛋白的乳化性随水解的加深先增大后减小,DH7.1%时增至最大,与其溶解性的变化趋势一致;此外酪蛋白的酶解物具有一定的ACE抑制活性及抗氧化性,且DPPH清除能力在一定范围内随水解度及浓度的增大而增大,当DH为8.3%,浓度为5 mg/mL时,DPPH清除能力增大至35.00%。因此CEP酶解可有效改善酪蛋白的结构及功能特性,为乳源性功能多肽的开发提供理论依据。

吸附铅、镉固定化细菌胞壁多糖小球包埋条件的优化选择

细菌已广泛应用于重金属废水的处理,多糖则是细胞壁的主要成分,并通过螯合作用吸附重金属,而固定化技术具有处理效率高,生产成本低等优势。采用正交实验法,以聚乙烯醇和海藻酸钠为包埋剂,同时添加活性炭,硅藻土等对细菌胞壁多糖进行固定化,并以吸附铅、镉能力为主要考察指标,同时从机械强度、传质性、耐酸性等方面综合考虑,选择最优化的固定化小球最佳配方。结果表明,在聚乙烯醇、海藻酸钠、活性炭、硅藻土、多糖、二氧化硅和饱和硼酸中氯化钙的质量分数分别为10%、0.2%、1.5%、1.5%、0.8%、4%、3%,胶联时间为16h,己二胺浓度为0.06mol?L-1的条件下制得的固定化小球对铅、镉吸附的能力较强,并按照最佳配方进行了验证实验,对铅的吸附量达到4.4575μmol?g-1,对镉的吸附量达到4.1708μmol?g-1,机械强度、传质性和耐酸性都较好。

巴西橡胶树不同抗风性品系木材胞壁纤丝角

应用X射线(002)衍射的Cave法,对巴西橡胶树的13个具不同抗风力的品系PR107、海垦1、RRIM600、PB86、GT1等主干和枝干木材纤维壁的(微)纤丝角,进行了初步测试分析。结果表明:主干和枝干木材纤维壁S2层的纤丝角,在抗风和弱抗风品系之间存在着明显的差异;品系的抗风力与木材纤维S2层纤丝角度有一定的关系,抗风品系的木材纤维壁S2层纤丝角度较小,弱抗风品系的纤丝角度较大;主干木材纤维S2层纤丝角度小于枝干材的纤丝角度。

木棉纤维的微细结构研究——胞壁层次结构与原纤尺度

通过对木棉纤维横截面超薄切片的透射电镜观察,获得了木棉纤维的胞壁层次结构、原纤尺度及排列。木棉纤维胞壁具有清晰可见的多层状结构,基本上可以分为外表皮层S、胞壁1层W1、胞壁2层W2、胞壁3层W3和内皮层IS共5个基本的层次,各层具有不同的厚度和原纤堆砌密度与排列方向。可见木棉纤维横截面最小结构单元宽度为3.2～5.0nm,与棉纤维基原纤尺寸相当。实验证明,碱液对木棉纤维的可及性存在显著的个体差异;对于同一纤维胞壁各层的溶胀也存在差异。其中W2是最易被溶胀的;内皮层的原纤容易被分离出来。而未经溶胀处理的木棉纤维电镜照片反差弱,层次结构不够细致。

胞壁酰二肽激活大鼠巨噬细胞抗肿瘤免疫效应的研究

目的:探讨胞壁酰二肽(MDP)激活大鼠巨噬细胞抗肿瘤效应的途径和机制。方法:以SD大鼠为骨肉瘤动物模型进行肿瘤抑制试验;采用中性红吞饮实验、间接MTT法及硝酸还原酶法,测定大鼠腹腔巨噬细胞的功能。结果:MDP(50μg～100μg/鼠)皮下注射可明显抑制UMR106骨肉瘤细胞在SD大鼠体内的生长,并可显著提高巨噬细胞的吞噬功能、杀伤活性及TNF和NO的分泌水平,且呈现一定的量效关系。结论:MDP激活的巨噬细胞可能是机体非特异性免疫抗瘤效应的主要基础。

枯草芽孢杆菌中胞壁肽的分离纯化及其对芽孢的影响

胞壁肽是来源于细菌细胞壁中肽聚糖酶解后产物,具有促进芽孢萌发的生理功能。本文利用枯草芽孢杆菌为对象,通过酶解制备枯草芽孢杆菌中胞壁肽。利用反式高效液相色谱仪对制备的胞壁肽进行分离,并利用液相-质谱联用、傅里叶变换红外光谱、核磁共振方法对胞壁肽进行结构鉴定。还研究了胞壁肽对芽孢萌发的影响。结果表明:分离纯化后得到的胞壁肽最小结构单元为二糖三肽,胞壁肽可促进90%芽孢萌发。

细菌胞壁多糖对水体中低浓度Pb^(2+)和Cd^(2+)的吸附研究

室内模拟研究了长春市伊通河天然水环境中优势细菌胞壁多糖对Pb2 + 和Cd2 + 吸附 ,结果发现 :胞壁多糖对Pb2 + 和Cd2 + 的吸附量分别在pH为 4 5、 5 0时最大 ;且均分为两个阶段 ,即当pH <4 5 ,对Pb2 + 的吸附量与pH呈正相关 ,当pH >4 5时 ,对Pb2 + 的吸附量与pH呈负相关 ;对Cd2 + 的吸附量在pH <5 0时与pH呈正相关 ,在pH >5 0时与pH呈负相关。温度对胞壁多糖吸附Pb2 + 和Cd2 + 影响不显著 ;吸附体系在 8h达到吸附平衡。共存Cd2 + 对胞壁多糖吸附Pb2 + 影响显著 ,而共存Pb2 + 对吸附Cd2 + 不显著。胞壁多糖对Pb2 + 和Cd2 + 吸附过程符合Langmuir和Freundlich热力学等温方程 ;胞壁多糖吸附Pb2 + 和Cd2 + 的动力学过程分为快速阶段和慢速阶段 。

哈茨木霉(Trichoderma harzianum)多种胞壁降解酶基因表达载体的构建及转化水稻

为提高水稻的抗病性,利用哈茨木霉(Trichodermahazianum)P1菌株的3个胞壁降解酶基因ech42、nag70与gluc78构建了7个植物表达载体,每个基因受独立的Act1启动子调控.构建的7个载体不仅包含3个外源基因的所有组合(A,B,C,A+B,A+C,B+C,A+B+C),而且具有双元载体本身携带的HPT基因与Gus基因,为研究不同T-DNA长度、不同基因组合与不同基因排列方向对植物遗传转化效率以及外源基因在转基因植株中表达的影响提供了一套比较完整的材料.利用本实验室的农杆菌高效转化体系,将所有组合的7个载体分别转入粳稻品种石狩白毛(OryzasativaLssp.Japonicacv.Ishikari-shiroge)中,共获得再生植株1800余株.对部分再生植株进行了PCR检测,证明96%的植株至少携带有外源基因中的一个,80%以上的植株整合有完整的外源基因片断.

酵母胞壁多糖对黄瓜植株防御酶系活性的影响

采用浸种和喷雾两种处理方法研究了酵母胞壁多糖对黄瓜植株体内防御酶系的影响,结果表明,浸种和喷雾处理均能提高黄瓜植株体内PAL和PPO活性,有效期达一个月之久,并且酵母胞壁多糖对PAL活性的诱导效应具有可传导性。