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闭合蛋白的胞外环缺失对小鼠TM4细胞紧密连接的影响分析
被引量:
3
1
作者
谭小方
陈德宇
+1 位作者
丁家怡
吴洁
《中华男科学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第8期675-680,共6页
目的:分析闭合蛋白的2个胞外环结构域在小鼠TM4细胞紧密连接中的功能。方法:利用基因工程的方法,分别或者同时缺失掉闭合蛋白的2个胞外环,将缺失了胞外环3个闭合蛋白基因序列,分别克隆入pcDNA3.1表达载体,再转入TM4细胞。用RT-PCR和West...
目的:分析闭合蛋白的2个胞外环结构域在小鼠TM4细胞紧密连接中的功能。方法:利用基因工程的方法,分别或者同时缺失掉闭合蛋白的2个胞外环,将缺失了胞外环3个闭合蛋白基因序列,分别克隆入pcDNA3.1表达载体,再转入TM4细胞。用RT-PCR和Western印迹分析闭合蛋白表达量,用紧密连接的体外细胞模型来分析闭合蛋白的胞外环对紧密连接程度的影响。结果:测序结果表明pcDNA3.1-occludinΔOCC1、pcDNA3.1-occludinΔOCC2和pcDNA3.1-occludinΔOCC1+OCC2表达载体已经构建成功。RT-PCR和Western印迹结果显示3个缺失组闭合蛋白的mRNA和蛋白质的表达量都显著高于对照组。体外紧密连接模型分析结果表明闭合蛋白2个胞外环都能够增加TM4的紧密连接程度,其中,pcDNA3.1-occludinΔOCC1转染组每天的大分子通过率均比pcDNA3.1-occludinΔOCC2转染组显著降低(P<0.05),表明闭合蛋白第二个胞外环对紧密连接的影响程度比第一个胞外环要高。结论:闭合蛋白2个胞外环都能够影响小鼠TM4细胞紧密连接的程度,并且第二个胞外环对紧密连接的影响程度比第一个胞外环要高。
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关键词
血-睾屏障
闭合蛋白
胞外环
结构域
紧密连接
TM4细
胞
小鼠
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职称材料
抗人Kv1.5胞外环肽段E215抗体的制备与鉴定
2
作者
戴芝银
刘坤
+8 位作者
曾秋棠
刘金平
祝聪聪
杨晓芳
廖玉华
王敏
陈志坚
黄丹
刘鸿涛
《临床心血管病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第5期389-392,共4页
目的:为研究新的人Kv1.5(hKv1.5)通道/超快激活延迟整流钾通道(Ikur)阻滞剂,通过免疫法制备抗hKv1.5胞外环肽段E215的特异性抗体,并进行鉴定。方法:雄性新西兰大白兔,随机分为免疫组和假性免疫组。从hKv1.5胞外环中筛选出一段短肽E215...
目的:为研究新的人Kv1.5(hKv1.5)通道/超快激活延迟整流钾通道(Ikur)阻滞剂,通过免疫法制备抗hKv1.5胞外环肽段E215的特异性抗体,并进行鉴定。方法:雄性新西兰大白兔,随机分为免疫组和假性免疫组。从hKv1.5胞外环中筛选出一段短肽E215作为抗原肽免疫动物。免疫组予抗原免疫,2周1次,假性免疫组予0.9%氯化钠溶液免疫,方法同前。实验63 d处死,留取血清,亲合层析法提取、纯化抗肽段E215抗体。酶联免疫吸附法(ELISA)动态地观察抗体在体内的产生及效价,免疫荧光组织化学及免疫印迹(Western-blot)观察制备的抗体与人心房肌细胞膜及hKv1.5/Ikur通道蛋白的结合。结果:ELISA结果表明,免疫组于实验第28、42、56、63 d血清抗体滴度分别达到1∶6 400、1∶6 400、1∶6 400、1∶12 800;免疫荧光组织化学显示,制备的抗体能结合于人心房肌细胞的细胞膜;Western-blot结果表明,此抗体能特异性结合人心房肌细胞膜上分子量为75000的蛋白(hKv1.5/Ikur通道蛋白)。而假性免疫组未发现相同抗体产生。结论:所制备胞外环肽段E215的抗体能与人心房肌细胞膜上hKv1.5/Ikur通道特异性结合,为下一步实验提供了新的药理学干预手段。
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关键词
抗体
人心房肌细
胞
KV1.5
胞外环
原文传递
蜜环菌酒的研制
被引量:
2
3
作者
申可佳
张熙
+2 位作者
朱伟
刘洪娜
谭周进
《中国医药指南》
2010年第27期53-54,共2页
目的蜜环菌酒富含多糖,具有天麻酒的相似药理活性,可作为天麻酒的替代品。方法将富含多糖的蜜环菌发酵液进行蜜环菌酒生产工艺的优化,制备蜜环菌酒。结果蜜环菌酒的主要成分为酒精16%、多糖0.301mg/mL、蛋白质44.9mg/L、氨基酸3.30g/L...
目的蜜环菌酒富含多糖,具有天麻酒的相似药理活性,可作为天麻酒的替代品。方法将富含多糖的蜜环菌发酵液进行蜜环菌酒生产工艺的优化,制备蜜环菌酒。结果蜜环菌酒的主要成分为酒精16%、多糖0.301mg/mL、蛋白质44.9mg/L、氨基酸3.30g/L、总酸4.8g/L、总酯3.21g/L。结论蜜环菌酒色、香、味、体纯正,含有功能成分。
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关键词
蜜
环
菌酒
蜜
环
菌
胞
外
多糖
发酵
天麻酒
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职称材料
P2X7受体在人固有免疫中的作用
被引量:
2
4
作者
王坤
贺茂林
+2 位作者
王哲
吴洋
蒋腾龙
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第4期556-559,共4页
P2受体是嘌呤受体的一种。P2受体包括P2X和P2Y,P2X受体是一类离子型配体门控通道有7个不同的亚型(P2X1-7)[1],P2Y受体是一类与G蛋白偶联的代谢型受体,发现有8个亚型(P2Y1、P2Y2、P2Y4、P2Y6、P2Y11-14)。近年来,随着科研工作者对P2X...
P2受体是嘌呤受体的一种。P2受体包括P2X和P2Y,P2X受体是一类离子型配体门控通道有7个不同的亚型(P2X1-7)[1],P2Y受体是一类与G蛋白偶联的代谢型受体,发现有8个亚型(P2Y1、P2Y2、P2Y4、P2Y6、P2Y11-14)。近年来,随着科研工作者对P2X7受体的研究深入,P2X7受体的功能得到了更全面的认识。
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关键词
P2X7
固有免疫
配体门控
细
胞
凋亡
巨噬细
胞
吞噬体
免疫反应
细
胞
因子
胞外环
树突状细
胞
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职称材料
题名
闭合蛋白的胞外环缺失对小鼠TM4细胞紧密连接的影响分析
被引量:
3
1
作者
谭小方
陈德宇
丁家怡
吴洁
机构
南京医科大学第一附属医院/江苏省人民医院/江苏省妇幼保健院生殖医学国家重点实验室
南通大学附属妇幼保健院生殖医学中心
阜阳师范大学食品与生物工程学院
出处
《中华男科学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第8期675-680,共6页
基金
国家自然科学基金(81771567)
安徽省高校自然科学重大、重点研究项目(KJ2017A338)
南通市科技计划项目(GLZ16078)。
文摘
目的:分析闭合蛋白的2个胞外环结构域在小鼠TM4细胞紧密连接中的功能。方法:利用基因工程的方法,分别或者同时缺失掉闭合蛋白的2个胞外环,将缺失了胞外环3个闭合蛋白基因序列,分别克隆入pcDNA3.1表达载体,再转入TM4细胞。用RT-PCR和Western印迹分析闭合蛋白表达量,用紧密连接的体外细胞模型来分析闭合蛋白的胞外环对紧密连接程度的影响。结果:测序结果表明pcDNA3.1-occludinΔOCC1、pcDNA3.1-occludinΔOCC2和pcDNA3.1-occludinΔOCC1+OCC2表达载体已经构建成功。RT-PCR和Western印迹结果显示3个缺失组闭合蛋白的mRNA和蛋白质的表达量都显著高于对照组。体外紧密连接模型分析结果表明闭合蛋白2个胞外环都能够增加TM4的紧密连接程度,其中,pcDNA3.1-occludinΔOCC1转染组每天的大分子通过率均比pcDNA3.1-occludinΔOCC2转染组显著降低(P<0.05),表明闭合蛋白第二个胞外环对紧密连接的影响程度比第一个胞外环要高。结论:闭合蛋白2个胞外环都能够影响小鼠TM4细胞紧密连接的程度,并且第二个胞外环对紧密连接的影响程度比第一个胞外环要高。
关键词
血-睾屏障
闭合蛋白
胞外环
结构域
紧密连接
TM4细
胞
小鼠
Keywords
blood-testis barrier
occluding
extracellular loop
tight junction
TM4 cell
mouse
分类号
R321.1 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
抗人Kv1.5胞外环肽段E215抗体的制备与鉴定
2
作者
戴芝银
刘坤
曾秋棠
刘金平
祝聪聪
杨晓芳
廖玉华
王敏
陈志坚
黄丹
刘鸿涛
机构
华中科技大学协和医院心内科华中科技大学同济医学院心血管病研究所
华中科技大学协和医院心外科
出处
《临床心血管病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第5期389-392,共4页
基金
国家自然科学基金(No:30700747)
湖北省科技攻关重大项目资助(No:2006AA301A04)
+1 种基金
国家973重点基础研究发展规划基金资助项目(No:2007CB512000
No:2007CB512005)
文摘
目的:为研究新的人Kv1.5(hKv1.5)通道/超快激活延迟整流钾通道(Ikur)阻滞剂,通过免疫法制备抗hKv1.5胞外环肽段E215的特异性抗体,并进行鉴定。方法:雄性新西兰大白兔,随机分为免疫组和假性免疫组。从hKv1.5胞外环中筛选出一段短肽E215作为抗原肽免疫动物。免疫组予抗原免疫,2周1次,假性免疫组予0.9%氯化钠溶液免疫,方法同前。实验63 d处死,留取血清,亲合层析法提取、纯化抗肽段E215抗体。酶联免疫吸附法(ELISA)动态地观察抗体在体内的产生及效价,免疫荧光组织化学及免疫印迹(Western-blot)观察制备的抗体与人心房肌细胞膜及hKv1.5/Ikur通道蛋白的结合。结果:ELISA结果表明,免疫组于实验第28、42、56、63 d血清抗体滴度分别达到1∶6 400、1∶6 400、1∶6 400、1∶12 800;免疫荧光组织化学显示,制备的抗体能结合于人心房肌细胞的细胞膜;Western-blot结果表明,此抗体能特异性结合人心房肌细胞膜上分子量为75000的蛋白(hKv1.5/Ikur通道蛋白)。而假性免疫组未发现相同抗体产生。结论:所制备胞外环肽段E215的抗体能与人心房肌细胞膜上hKv1.5/Ikur通道特异性结合,为下一步实验提供了新的药理学干预手段。
关键词
抗体
人心房肌细
胞
KV1.5
胞外环
Keywords
antibody
human atrial myocyte
Kvl.5
extracellular loop
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
原文传递
题名
蜜环菌酒的研制
被引量:
2
3
作者
申可佳
张熙
朱伟
刘洪娜
谭周进
机构
湖南中医药大学基础医学院
湖南中医药大学
出处
《中国医药指南》
2010年第27期53-54,共2页
基金
长沙市科技局项目(k0803270-31)
文摘
目的蜜环菌酒富含多糖,具有天麻酒的相似药理活性,可作为天麻酒的替代品。方法将富含多糖的蜜环菌发酵液进行蜜环菌酒生产工艺的优化,制备蜜环菌酒。结果蜜环菌酒的主要成分为酒精16%、多糖0.301mg/mL、蛋白质44.9mg/L、氨基酸3.30g/L、总酸4.8g/L、总酯3.21g/L。结论蜜环菌酒色、香、味、体纯正,含有功能成分。
关键词
蜜
环
菌酒
蜜
环
菌
胞
外
多糖
发酵
天麻酒
Keywords
Armillaria wine
Armillaria Exopolysaccharides
Fermentation
Gastrodin wine
分类号
R-03 [医药卫生]
TS201.3 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
P2X7受体在人固有免疫中的作用
被引量:
2
4
作者
王坤
贺茂林
王哲
吴洋
蒋腾龙
机构
广西医科大学第一附属医院
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第4期556-559,共4页
文摘
P2受体是嘌呤受体的一种。P2受体包括P2X和P2Y,P2X受体是一类离子型配体门控通道有7个不同的亚型(P2X1-7)[1],P2Y受体是一类与G蛋白偶联的代谢型受体,发现有8个亚型(P2Y1、P2Y2、P2Y4、P2Y6、P2Y11-14)。近年来,随着科研工作者对P2X7受体的研究深入,P2X7受体的功能得到了更全面的认识。
关键词
P2X7
固有免疫
配体门控
细
胞
凋亡
巨噬细
胞
吞噬体
免疫反应
细
胞
因子
胞外环
树突状细
胞
分类号
R392.9 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
闭合蛋白的胞外环缺失对小鼠TM4细胞紧密连接的影响分析
谭小方
陈德宇
丁家怡
吴洁
《中华男科学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020
3
下载PDF
职称材料
2
抗人Kv1.5胞外环肽段E215抗体的制备与鉴定
戴芝银
刘坤
曾秋棠
刘金平
祝聪聪
杨晓芳
廖玉华
王敏
陈志坚
黄丹
刘鸿涛
《临床心血管病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010
0
原文传递
3
蜜环菌酒的研制
申可佳
张熙
朱伟
刘洪娜
谭周进
《中国医药指南》
2010
2
下载PDF
职称材料
4
P2X7受体在人固有免疫中的作用
王坤
贺茂林
王哲
吴洋
蒋腾龙
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015
2
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职称材料
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