补肾活血导法改善PER“胞宫摄精成孕”的网络调控机制研究

目的基于“精满则子宫易于摄精,血足则子宫易于容物”思想,通过实验研究结合网络分析、分子对接等方法,探讨补肾活血方治疗子宫内膜容受性不良(Poor endometrial receptivity,PER)的关键核心靶点及信号通路的作用机制。方法建立肾虚血瘀-PER病证结合大鼠模型,补肾活血导法干预10天后,通过扫描电镜观察大鼠的种植期胞饮突形态;利用TCMSP数据库结合Batman数据库筛选补肾活血方中有效组分,通过Genecards、OMIM数据库检索PER基因;筛选补肾活血方-PER共同作用靶点,导入String数据库及Cytoscape3.8.0软件进行可视化分析,构建PPI网络;应用Metascape数据库分别进行GO富集分析及KEGG富集分析。采用AutoDock对补肾活血方有效组分与核心靶标蛋白进行分子对接验证,通过Western Blotting、q-PCR和ELISA检测相关关键基因蛋白或mRNA的表达水平。结果补肾活血导法可提高PER大鼠着床率,促进胞饮突成熟。补肾活血方与PER共有130个交集靶点;String计算后应用Cytoscape中CytoNCA插件获得24个核心靶点,输入metascape平台获得相关66个生物学过程(BP)、38个分子功能(MF)、28个细胞组分(CC)和相关KEGG信号通路共113条。分子对接提示补肾活血方有效组分与关键蛋白具有良好的亲和力作用。实验研究显示补肾活血导法能够增强TNF、p-38、ESR1、PGR、IL6、1L1β等相关因子在子宫内膜组织上的表达。结论通过网络分析结合药理实验研究发现,补肾活血导法能够有效改善PER相关指标,并通过调控IL6、IL-1β、p-38蛋白和基因表达水平,改善子宫内膜容受性进而实现“胞宫摄精成孕”。