环状RNA-胞裂蛋白2/miR-150-5p/聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1分子轴在重症急性胰腺炎中的作用及机制研究

目的探讨环状RNA(circRNA)-胞裂蛋白2(SEPT2)/miR-150-5p/聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)分子轴在重症急性胰腺炎(SAP)中的作用及机制。方法选取2019年12月至2021年12月赣南医学院第一附属医院收治的46例SAP患者作为重症组;并选取本院同期收治的41例轻症急性胰腺炎(MAP)患者作为轻症组;另选取本院同期35名健康体检者作为对照组。3组均采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定血清circRNA-SEPT2、miR-150-5p、PARP-1基因表达量,采用急性生理和慢性健康评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评估病情严重程度;采用重组慢病毒包装合成有效感染序列sh-SEPT2(干扰组)与过表达序列oe-SEPT2(过表达组)建立动物模型,采用酶联免疫吸附试验测定大鼠生化指标[白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、D乳酸及二胺氧化酶(DAO)],采用RT-PCR及Western blot法检测大鼠circRNA-SEPT2、miR-150-5p、PARP-1及细胞凋亡相关基因半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-9 mRNA表达。比较3组circRNA-SEPT2、miR-150-5p、PARP-1基因表达量及APACHEⅡ评分,采用Pearson相关性分析SAP患者PARP-1与circRNA-SEPT2、miR-150-5p及APACHEⅡ评分的相关性;比较干扰组与过表达组大鼠苏木精-伊红染色法(HE)结果、肠黏膜损伤评分、炎症因子水平及cir-cRNA-SEPT2、miR-150-5p、PARP-1和Caspase-3、Caspase-9 mRNA表达量。结果重症组circRNA-SEPT2、miR-150-5p、PARP-1基因表达量及APACHEⅡ评分均高于轻症组和对照组,且轻症组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性结果显示,SAP患者PARP-1与circRNA-SEPT2、miR-150-5p及APACHEⅡ评分均呈正相关(r>0,P<0.05)。干扰组HE染色下胰岛细胞界限清晰,胰岛丰富,胞浆丰富,形态完整;过表达组大鼠胰岛细胞界限不清,胰岛数量较少,细胞形态不规则,细胞体积较大,边缘不齐;干扰组胰腺损伤评分为(2.58±0.16)分,低于过表达组的(3.95±0.53)分,差异有统计学意义(P<0.05)。干扰组IL-1β、IL-18、TNF-α、D乳酸及DAO水平均低于过表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。干扰组大鼠circRNA-SEPT2、miR-150-5p、PARP-1 mRNA表达及细胞凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-9 mRNA表达量均低于过表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PARP-1通过靶向作用于circRNA-SEPT2/miR-150-5p参与SAP的发生与发展,抑制circRNA-SEPT2表达,可减轻SAP肠黏膜屏障损伤,能为SAP治疗提供新的靶点。

尿苷二磷酸-葡萄糖4-差向异构酶编码基因galE影响甘薯青枯菌致病性和碳代谢

为明确尿苷二磷酸(uridine diphosphate,UDP)-葡萄糖4-差向异构酶编码基因galE的功能,通过构建甘薯青枯菌galE基因敲除菌株ΔgalE及回补菌株CΔgalE,探索galE基因与甘薯青枯菌致病相关表型间的关联及对甘薯青枯菌生理代谢的影响。结果表明:galE基因缺失显著降低了青枯菌对甘薯的致病性,并且影响了致病相关表型。ΔgalE菌落流动性、菌体泳动能力、胞外多糖含量和生物膜形成量均明显低于野生型SPRS911和CΔgalE。在半乳糖代谢途径中,galE基因缺失后,参与尿苷二磷酸葡糖与葡萄糖之间代谢的galU、pgm、glk基因表达量降低,D-葡萄糖-6-磷酸累积;与UDP-半乳糖代谢有关的dgoK、dgoAa、dgoAb、malZ和galM基因表达量升高。galE基因缺失还加强了甘薯青枯菌对于苹果酸的同化作用。上述研究结果说明,galE基因对青枯菌的致病性与碳代谢水平均有明显影响。

胞苷二磷酸胆碱纯化方法的研究

生物合成的胞苷二磷酸胆碱经初步纯化后,再用葡聚糖凝胶G 25过滤和717强碱性阴离子交换树脂(碳酸氢型)分离,产品纯度得到进一步提高。

环腺苷二磷酸核糖（cADPR）──一种新发现的胞内信使分子

环腺苷二磷酸核糖（ｃＡＤＰＲ）──一种新发现的胞内信使分子胡国渊，（中国科学院上海药物研究所新药研究国家重点实验室２０００３１）胡桦（上海医科大学临床医学系２０００３２）多种激素、递质和细胞膜表面对应的受体结合后能引起细胞内钙释放，从而使细胞内游离钙...

环腺苷二磷酸核糖对血管平滑肌细胞钙调控的研究进展

游离钙在介导和调节血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells，VSMCs）的功能中起着重要作用，很多血管活性物质也都通过改变胞内钙浓度来实现它们的功能。已有较多认识的三磷酸肌醇（inositol 1,4，5-trisphosphate，IP3）是胞内重要的第二信使，它通过肌浆网上的IR受体介导钙释放，从而引起胞内钙浓度的变化。cADPR作为一个新近认识的钙动员第二信使也参与了对胞内钙的调控，而且是独立于IP3通路的。目前越来越多的研究已经开始关注这条通路，并取得了一系列的研究结果，本文就cADPR信号通路在VSMCs钙调控中的作用作一综述。

二磷酸胞苷发酵液直接上阴离子交换柱分离

为提高二磷酸胞苷的收率 ,对原生产工艺进行改革 ,将二磷酸胞苷发酵液预先处理 ,然后直接上2 0 1× 8阴离子交换树脂柱分离 ,革除了一步上活性炭柱纯化分离。二磷酸胞苷产品的质量符合企业标准 ,收率比原工艺提高 10

利用啤酒酵母生产二磷酸胞苷的工艺研究

通过改进传统生产工艺,从啤酒酵母中提取降解酶,将三磷酸胞苷发酵液进行降解,然后上阴离子交换柱分离,再经过精制得到二磷酸胞苷结晶物,提高了二磷酸胞苷的得率与含量。

Citicoline对大鼠中脑原代细胞培养的神经保护作用

目的:探讨胞二磷胆碱(citicoline,CC)对6-OHDA诱导的帕金森体外细胞模型的保护作用及其机理。方法:孕15 d大鼠胚胎中脑原代培养,在培养第6、8及10天,实验组加不同浓度CC(2、1、0.1、0.01和0.001 mmol.L-1),并于第11天加50μmol.L-1的6-OHDA作用0.5 h,制作帕金森病细胞模型;6-OHDA组为原代培养细胞加50μmol.L-1的6-OHDA;对照组为原代培养细胞。培养11 d收集细胞。采用MTT法测细胞活力,通过流式细胞仪,用Fluo3/AM检测细胞内[Ca2+]i及用罗丹明123检测线粒体膜电位(Δψm)。结果:2、1和0.1 mmol.L-1CC组,细胞活力与对照组比较明显增高,并随着浓度的增加而增加,差异具有显著性(P<0.05)。1、0.1、0.01和0.001 mmol.L-1CC+6-OHDA组,细胞活力均高于6-OHDA组,差异有显著性(P<0.01)。1、0.1、0.01、0.001 mmol.L-1CC+6-OHDA组细胞内[Ca2+]i均明显下降,分别为(32.23±1.87)%、(17.09±7.45)%、(21.71±8.89)%及(29.18±4.71)%,与6-OHDA组(49.30±7.62)%相比,差异均有显著性(P<0.01);与对照组(42.40±0.81)%比较明显下降,差异均有显著性(P<0.01)。CC+6-OHDA各组与6-OHDA组比较均使Δψm升高,其中1 mmol.L-1CC+6-OHDA组Δψm高于对照组,差异有显著性(P<0.01)。结论:CC通过保护神经元细胞膜、增加细胞活力、降低细胞内[Ca2+]i以及提高Δψm,发挥其对神经元的保护作用。

胞磷胆碱配合遮盖治疗大龄弱视76例

目的 观察胞磷胆碱配合遮盖治疗大龄弱视患者的远期疗效 .方法 弱视患者 76例 ,年龄 12～ 2 6 (平均 16 .6±3. 3)岁 ,接受 1～ 3个疗程的胞二磷胆碱治疗 (体质量 <40kg,5 0 0 mg· d- 1 ,体质量≥ 40 kg,10 0 0 m g· d- 1 ) ,每个疗程15 d,随访 3～ 9mo.所有患者均先进行配镜矫正 .对双眼视力相差超过两行 (以国际标准视力表计 )的患者 ,连续遮盖 2 0d后 ,间断遮盖每周 6 d,3mo为一疗程 .对双眼视力相当的远视患者配合双色光闪烁弱视治疗仪治疗 ,双眼各 15 min·d- 1 .结果 经 1～ 3个疗程后 ,80 (71% )只眼视力提高在 2行以上 ,其中 36只眼 (32 % )提高在 4行以上 .停药 5 wk后视力均有不同程度降低 ,但遮盖及再次用药后仍能继续提高 .坚持治疗的患者视力有波动 ,但趋势向好 ;优势眼视力与弱视眼的视力均可提高 ;视力≥ 5 .0者视力仍可提高 ;大剂量组疗效显著 .结论 胞磷胆碱治疗大龄弱视 ,其疗效显著 。

胞磷胆碱治疗新生儿缺氧缺血性脑病

目的：观察胞磷胆碱加对症治疗对中、重度新生儿缺氧缺血性脑病的疗效。方法：新生儿缺氧缺血性脑病８０例（男性４４例，女性３６例；年龄为生后２４ｈ内）给予胞磷胆碱０．１２５ｇ，ｉｖ，ｄｒｉｐｑｄ，共用７～１０ｄ。同时应用吸氧、碳酸氢钠、补液、止惊、能量合剂等对症治疗，对照组为同样病人６０例（男性３８例，女性２２例；年龄同治疗组）只应用上述对症治疗。结果：治疗组总有效率９５％；对照组有总有效率６８％，Ｐ＜０．０１。结论：胞磷胆碱加对症治疗对新生儿缺氧缺血性脑病的效果较单纯对症治疗为优。

胞磷胆碱对大脑中动脉狭窄患者轻度认知功能障碍的影响

目的探讨胞磷胆碱对大脑中动脉狭窄患者轻度认知功能障碍的影响。方法选择2014年10月~2016年10月在中南大学湘雅医学院附属海口医院神经内科就诊的大脑中动脉狭窄合并轻度认知功能障碍患者86例,随机分为胞磷胆碱组44例和对照组42例。胞磷胆碱组在常规治疗基础上从入院后开始给予胞磷胆碱胶囊0.2g 3次/d,持续6个月。应用经颅多普勒超声对2组患者治疗后脑血管储备、搏动指数、屏气指数及大脑中动脉狭窄平均流速(Vm)上升率进行评定,应用蒙特利尔认知评估量表(Montreal cognitive assessment,MoCA)对2组患者治疗后轻度认知功能障碍进行评定。结果与对照组比较,胞磷胆碱组治疗后脑血管储备[(13.59±1.16)%vs(7.61±1.12)%,P<0.01]、搏动指数(0.51±0.16 vs 0.58±0.12,P<0.05)、屏气指数(1.36±0.08 vs 0.74±0.11,P<0.01)、Vm上升率[(32.63±2.32)%vs(16.92±1.68)%,P<0.05]明显改善。与对照组比较,胞磷胆碱组治疗后MoCA总分及各分项注意力、语言功能、视空间与执行功能、抽象概括能力、命名、定向力、记忆能力较对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论大脑中动脉狭窄合并轻度认知功能障碍患者存在脑血管储备受损,早期给予胞磷胆碱治疗能改善脑血管储备,并减轻患者轻度认知功能障碍。

石杉碱甲联用胞磷胆碱钠治疗血管性痴呆的疗效观察

【目的】了解石杉碱甲联用胞磷胆碱钠治疗血管性痴呆的疗效和安全性。【方法】将入组患者随机分为观察组（n=37）和对照组（n=35），观察组采用石杉碱甲胶囊联用胞磷胆碱钠片口服，对照组仅口服石杉碱甲胶囊，观察周期24周。用药后12周、24周使用简易精神状态检查量表（MMSE）评分和日常生活自理量表（ADL）进行评分，并评价治疗效果。【结果】治疗前MMSE评分观察组与对照组相比无统计学差异（t=0．45，P〉0．05），治疗12周、24周时两组MMSE评分有统计学差异。ADL评分治疗24周时两组之间有统计学差异（t=2．61，P〈0．05）。【结论】石杉碱甲联用胞磷胆碱钠治疗血管性痴呆能显著提高患者的认知功能，日常生活自理能力，且不良反应少。

胞二磷胆碱治疗妊娠剧吐效果观察

胞二磷胆碱治疗妊娠剧吐效果观察朴光华傅玉芹黑龙江省庆安县人民医院妇产科关键词妊娠剧吐；胞苷二磷酸胆碱；人类中图法分类号Ｒ７１４．２４１我院自１９９６年起采用胞二磷胆碱治疗妊娠剧吐，取得较好效果．１临床资料１．１一般资料２０例均为初孕妇，年龄２１～２６...

银杏叶提取物联合胞二磷胆碱治疗血管性痴呆临床观察

目的:观察银杏叶提取物联合胞二磷胆碱治疗血管性痴呆的疗效和安全性。方法:试验组给予银杏注射液及胞二磷胆碱静滴,14 d后口服金纳多片90 d;对照组采用脑复康注射液0.8 g,血栓通注射液静滴,14 d之后改为脑复康90 d。结果:两组治疗前后MMSE和ADL评分及治疗后的MMSE、ADL评分比较差异有显著性(P<0.01),显效率比较差异亦有显著性(P<0.05)。结论:银杏叶提取物与胞二磷胆碱联用疗效确切、安全、不良反应少。

ADP和CPA诱导的高血压病人血小板胞浆游离钙的变化

[目的]探讨高血压病人血小板胞浆游离钙浓度(cytoplasmic free Ca2+ concentration,[Ca2+]i)的变化。[方法]采 用Fura-2／Am荧光双波长测定[Ca2+]i技术,动态观察激动剂二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)和环匹阿尼酸 (cyclepiazonic acid,CPA)对高血压病人血小板[Ca2+]i的影响。[结果]高血压病人静息血小板[Ca2+]i与正常人比较明显增高 (P<0.05);ADP和CPA激动的高血压病人的血小板平台钙与静息钙比较有统计学意义(P<0.05);峰位钙-平台钙的差 (既钙释放)与正常人比较明显增高(P分别<0.05和<0.01);平台钙-静息钙的差(既钙内流)与正常人比较无明显差异 (P>0.05)。[结论]高血压病人静息血小板[Ca2+]i增高,平台钙水平明显增高,血小板呈高反应状态;高血压病人的血小板 被ADP和CPA激活不能恢复至静息动状态;ADP和CPA激动的高血压病人的血小板钙释放增多,钙内流正常。

樟树4-二磷酸胞苷-2-C-甲基-D-赤藓醇激酶基因的克隆及表达分析

4-二磷酸胞苷-2-C-甲基-D-赤藓醇激酶(4-diphosphocytidyl-2-C-methyl-D-erythritol kinase,CMK)是植物萜类化合物生物合成途径甲基赤藓醇-4-磷酸途径(methylerythritol-4-phosphate pathway,DXP/MEP)上的第4个关键酶。该研究根据樟树转录组数据,利用RT-PCR(reverse transcription-PCR)方法从药用植物樟树Cinnamomum camphora中克隆得到4-二磷酸胞苷-2-C-甲基-D-赤藓醇激酶基因,命名为Cc CMK1(Gene Bank登录号Ku376098),对其序列进行生物信息学分析,结果表明该基因开放阅读框(ORF)为1 212 bp,编码403个氨基酸,推测其相对分子质量为44.46 k Da,等电点(theoretical p I)为4.99。跨膜结构分析表明CMK蛋白不存在跨膜结构。信号肽分析表明其为非分泌蛋白,不存在信号肽。亚细胞定位表明其定位于叶绿体中。利用荧光实时PCR检测了龙脑樟、油樟、芳樟、脑樟和异樟5种化学型樟树中Cc CMK1基因的表达量,结果表明Cc CMK1基因在油樟中的表达量最高,龙脑樟中表达量最低,为樟树萜类化合物生物合成途径关键酶基因元件挖掘提供研究基础。