重组α-胞衬蛋白的表达及其在原发性干燥综合征临床研究中的意义

目的:利用pGEX-4T-2表达载体在大肠杆菌BL21中表达重组的GST-α-胞衬蛋白(α-Fodrin),以纯化获得的GST-α-胞衬蛋白为抗原,利用免疫印迹法对其抗体在原发性干燥综合征(pSS)中的诊断意义进行研究。方法:将表达质粒pGEX-4T-2-α-Fodrin转入大肠杆菌BL21,IPTG诱导培养,收集的细菌经超声破碎后离心,利用Glutathione-Sepharose4B亲和层析及Sephacryl-S100分子筛获取纯化的α-胞衬蛋白,通过SDS-PAGE电泳及免疫印迹法进行鉴定。最终以纯化得到的GST-α-胞衬蛋白为抗原,运用免疫印迹法测定干燥综合征患者及其他疾病患者血清中的抗α-胞衬蛋白抗体。结果:SDS-PAGE凝胶电泳显示表达产物分子量为97kD,与GST-α-胞衬蛋白分子量一致。用原发性干燥综合征病人血清对纯化出的GST-α-胞衬蛋白和GST分别进行免疫印迹分析,结果表明血清中的抗α-胞衬蛋白抗体是针对α-胞衬蛋白抗原的特异性抗体。原发性干燥综合征(pSS)患者血清中抗α-胞衬蛋白抗体的阳性率为63·75%(51/80),明显高于正常人的21·67%(8/37)(P<0·01),且各例正常人的阳性条带均明显浅于原发性干燥综合征患者。其他疾病包括类风湿关节炎(RA)、系统性红斑狼疮(SLE)及骨性关节炎(OA)患者血清抗α-胞衬蛋白抗体的阳性率分别为33·33%(13/39)、25·71%(9/35)及33·33%(4/12)。结论:通过GST融合蛋白表达系统获得了具有抗原性的α-胞衬蛋白,抗α-胞衬蛋白抗体测定可能对原发性干燥综合征的诊断有重要意义。

抗α-胞衬蛋白抗体用于干燥综合征诊断的临床价值

目的研究抗α-胞衬蛋白抗体在诊断干燥综合征(Sjgren syndrome,SS)中的敏感性和特异性,探讨其对诊断SS的临床应用价值。方法采用酶联免疫吸附法检测SS组、结缔组织病(connective tissue diseases,CTD)、非CTD对照组血清抗α-胞衬蛋白抗体,分析各组间抗α-胞衬蛋白抗体的敏感性、特异性。结果 SS患者253例,其中原发性干燥综合征(primary Sjgren’s syndrome,p SS)患者204例,继发性干燥综合征(secondary Sjgren’s syndrome,s SS)49例;CTD组60例,其中类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)22例,系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)38例;非CTD对照组105例。SS、p SS、s SS组抗α-胞衬蛋白抗体的敏感性分别为51.4%、52.0%、49.0%;RA、SLE组为18.2%、26.3%;特异性分别为81.8%、74.8%、63.1%、60.6%和60.5%。SS组抗α-胞衬蛋白抗体的敏感性高于RA、SLE组,差异有统计学意义(P<0.05),p SS组与s SS组敏感性差异无统计学意义(P>0.05);非CTD对照组的敏感性低于其余各组,差异有统计学意义(P<0.05)。p SS组抗α-胞衬蛋白抗体的特异性高于其余各组,差异有统计学意义(P<0.05)。ANA、抗SSA及抗SSB抗体均阴性SS患者的抗α-胞衬蛋白抗体的阳性率为62.5%。SS患者中抗SSA抗体、抗SSB抗体及抗α-胞衬蛋白抗体阳性患者为42.5%。结论抗α-胞衬蛋白抗体在SS诊断中有一定的临床价值,抗α-胞衬蛋白抗体可作为诊断SS联合检测抗体,在其他抗体阴性的疑诊SS患者具有补充诊断价值。

抗α-胞衬蛋白抗体与干燥综合征

干燥综合征(SS)是一种以侵犯泪腺、唾液腺等外分泌腺体为主的慢性自身免疫性疾病。目前SS的诊断尚缺乏特异度高的简便易行的检测方法,α-胞衬蛋白是从小鼠涎腺组织中提取的器官特异度自身抗原,与SS患者的发病机制密切相关。抗α-胞衬蛋白抗体是SS的一个标志性抗体,其对SS诊断的灵敏度和特异度国内外报道不一,总体来说,具有较低的灵敏度和较高的特异度,抗体阴性对于临床排除SS诊断意义不大,抗体阳性对于确定SS诊断可能具有更高的临床价值。近年来研究发现,抗α-胞衬蛋白抗体有可能为SS疾病早期的一项标志性抗体,而且与疾病活动相关。

干燥综合征特异性α-胞衬蛋白的抗原表位筛选及鉴定

目的:筛选和鉴定干燥综合征特异性α-胞衬蛋白(α-Fodrin)的抗原表位.方法:采用蛋白质计算机分析软件预测α-胞衬蛋白的抗原决定簇,设计8条重叠蛋白片段序列,应用GST融合表达系统原核表达该系列融合蛋白.通过Western blot实验检测融合蛋白片段的抗原性,并对抗原性片段以外的序列片段进行融合表达和检测,最终确定抗体所识别的部位.结果:8条重叠融合蛋白片段均有抗原性,最小片段以外序列的表达片段检测不具有抗原性.结论:α-胞衬蛋白的第1～59位氨基酸是其抗原表位区域,为进一步研究α-胞衬蛋白在干燥综合征中的作用机制和应用奠定了基础.

α-胞衬蛋白siRNA对干燥综合征模型NOD小鼠IFN-γ和IL-4表达水平及基因沉默效果的影响

目的:观察α-胞衬蛋白(α-Fodrin)特异性小干扰RNA(siRNA)对干燥综合征(SS)动物模型非肥胖糖尿病(NOD)小鼠细胞因子IFN-γ和IL-4表达水平的影响,探讨α-Fodrin siRNA治疗NOD的可能性。方法:12只NOD雌性小鼠随机分为对照组、空载体组、α-Fodrin siRNA1组和α-Fodrin siRNA2组,每组3只。将成功构建的α-Fodrin siRNA1和α-Fodrin siRNA2表达载体分别经尾静脉注射α-Fodrin siRNA1组和α-Fodrin siRNA2组NOD小鼠,对照组和空载体组小鼠分别注射同等剂量的PBS和pGFP-V-RS空载体,测定每周每只小鼠的饮水量。注射后1、3、5和7d,各组小鼠尾部采血,ELISA法检测4组小鼠血清中细胞因子IFN-γ、IL-4的表达水平,RT-PCR法检测NOD小鼠肺脏组织中α-Fodrin mRNA的表达水平,免疫组织化学法检测NOD小鼠肺脏组织中α-Fodrin的表达水平。结果:4组小鼠饮水量比较差异无统计学意义(P>0.05)。注射后1和3d,siRNA1组和siRNA2组NOD小鼠血清中IL-4水平明显升高、IFN-γ/IL-4比值减低,与对照组和空载体组比较差异有统计学意义(P<0.05),对照组与空载体组比较差异无统计学意义,siRNA1组与siRNA2组比较差异亦无统计学意义;注射后5和7d,4组小鼠血清中IL-4水平和IFN-γ/IL-4比值比较差异无统计学意义。注射后7d,siRNA1组和siRNA2组NOD小鼠肺脏组织中α-Fodrin及其mRNA的表达水平明显低于对照组和空载体组(P<0.05),对照组和空载体组比较差异无统计学意义,siRNA1组和siRNA2组比较差异无统计学意义。结论:NOD小鼠注射α-Fodrin siRNA载体后,血清中IL-4的水平升高、IFN-γ/IL-4的比值降低,同时α-FodrinmRNA表达水平和α-Fodrin表达水平下降,提示α-Fodrin siRNA可以通过减轻NOD小鼠炎症反应延缓SS病情进程。

干燥综合征患者血清抗α-胞衬蛋白、抗SSA/SSB抗体、IFN-γ及TNF-α与唇腺病理损害相关性研究

目的:观察干燥综合征患者(SS)血清抗α-胞衬蛋白、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平及抗SSA/SSB抗体与患者唇腺活检病理损害的关系,探讨SS患者的抗体表达、免疫异常与唇腺病理损害的相关性。方法:收集SS患者36例为SS组。具有口干症状、慢性非唇腺、唾液腺免疫性炎症的非干燥综合征患者24例为非SS组,两组均行唇腺活检。同时记录患者的一般资料及临床数据,包括年龄、性别、病程、临床体征,记录口干评分,血清学指标包括类风湿因子(RF)、C-反应蛋白(CRP)、血细胞沉降率(ESR),抗SSA/SSB抗体、血清干扰素水平等。结果:①与非SS组比较,SS组唇腺活检阳性率达100%,显著高于非SS组(P<0.05);两组的年龄和性别比较差异无统计学意义(均P>0.05)。②与非SS组比较,SS组的CRP及ESR水平明显增高(P<0.05),抗α-胞衬蛋白、抗SSA/SSB抗体、抗CCP抗体、RF阳性率也高于非SS组。③与轻度病理损伤组比较,中重度病理损伤组抗α-胞衬蛋白的比率无统计学差异;与轻度病理损伤组比较,中重度病理损伤组抗SSB抗体阳性率均明显升高,两组比较差异具有统计学意义,而抗SSA抗体两组间比较无统计学差异(P>0.05)。③TNF-α与每低倍视野下导管扩张数、腺泡萎缩数具有相关性(P<0.05),而CRP、ESR与其未见相关性(P>0.05);TNF-α、CRP和ESR与唇腺灶性指数、淋巴细胞计数均具有相关性(P<0.05);IFN-γ与淋巴细胞计数具有相关性(P<0.05),而与导管扩张数、腺泡萎缩数未见明显相关性(P<0.05)。结论:SS的发病与免疫异常密切相关,SS的唇腺淋巴细胞浸润、腺泡损害等病理损害,可能由于多种自身抗体、细胞因子的作用调控而发生发展的。

抗α-胞衬蛋白多肽IgA抗体对干燥综合征的诊断价值

目的以α-胞衬蛋白(α-Fodrin)多肽为抗原,采用ELISA检测干燥综合征(Sjgren's syndrome,SS)患者血清抗α-Fodrin多肽IgA抗体(α-Fodrin-derived polypeptide antibody,αF5-IgA),并分析其与SS临床表现和其他实验室指标的关系。方法以固相法合成的α-Fodrin 37-59多肽(αF5)为包被抗原,ELISA定量检测169例原发性干燥综合征(primary Sjgren's syndrome,pSS)、31例继发性干燥综合征(secondary Sjgren syndrome,sSS)、221例其他结缔组织病患者及88名健康对照者血清抗α-Fodrin37-59多肽IgA(αF5-IgA)抗体水平,并分析其与SS患者临床表现及自身抗体、IgG、IgA、血沉及血常规等的相关性。结果 ELISA定量检测抗αF5-IgA抗体,pSS和sSS组的阳性率分别为73.4%和64.5%,而类风湿关节炎、系统性红斑狼疮和健康对照组的阳性率分别是27.3%、17.8%和2.3%,抗αF5-IgA抗体在SS患者的阳性率显著高于其他结缔组织病患者及健康对照组(χ2=114.5～234.1,P<0.01)。抗αF5-IgA抗体对SS诊断的特异性为86.1%,在抗SSA、抗SSB抗体和ANA阴性的pSS患者中,抗αF5-IgA抗体的阳性率分别为48.9%、46.6%和57.1%。抗αF5-IgA抗体阳性pSS患者的肾脏受累率高于抗αF5-IgA抗体阴性患者(χ2=3.0,P<0.05)。抗αF5-IgA抗体阳性pSS患者IgG、IgA升高,血沉增快,白细胞与血小板下降的概率明显高于抗体阴性的患者(χ2=17.9～73.5,P<0.05)。结论 ELISA法可用于检测SS患者血清抗αF5-IgA抗体,该抗体为诊断SS较为特异的自身抗体之一,且抗αF5-IgA抗体对其他自身抗体阴性的SS的诊断有参考意义。

抗α-胞衬蛋白抗体对干燥综合征的诊断价值:一项meta分析

目的探讨抗α-胞衬蛋白抗体对干燥综合征(SS)的诊断价值。方法对已经发表的采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗α-胞衬蛋白抗体诊断SS(以2002年国际标准为诊断依据)的文献进行了分析,并且采用随机效应模型分析了ELISA检测抗α-胞衬蛋白抗体对SS的总体诊断敏感性、特异性、阳性似然比(PLR)、阴性似然比(NLR)和诊断优势比(DOR)。以汇总受试者工作特征(sROC)曲线分析抗α-胞衬蛋白抗体的总体诊断性能。结果最终有7项研究进入了本次meta分析,ELISA检测抗α-胞衬蛋白抗体IgA、IgG的总体诊断敏感性[95%可信区间(CI)]分别为0.30(0.25～0.34)和0.32(0.28～0.36),总体特异性分别为0.90(0.87～0.93)和0.83(0.80～0.86)。已有的研究质量并不高,且之间存在较大的异质性。结论抗α-胞衬蛋白抗体对SS具有较高的诊断特异性,但其诊断敏感性并不理想。对抗α-胞衬蛋白抗体的结果解释应建立在患者临床特征之上。

α-胞衬蛋白抗原多肽的筛选及其在干燥综合征临床诊断中的意义

目的:筛选鉴定干燥综合征特异性α-胞衬蛋白抗原多肽,进一步研究该抗原多肽在干燥综合征(SS)疾病临床诊断中的意义。方法:采用固相法合成α-胞衬蛋白第1～59位氨基酸区域的5条多肽,利用酶联免疫吸附法(ELISA)比较合成多肽与干燥综合征患者血清IgG的反应强弱,确定最佳α-胞衬蛋白抗原多肽;以筛选出的最佳α-胞衬蛋白抗原多肽作为包被抗原,检测原发性SS患者135例,继发性SS患者25例,系统性红斑狼疮(SLE)患者48例,类风湿关节炎(RA)患者88例和正常人83例血清中的抗α-胞衬蛋白抗原多肽IgG抗体。结果:合成的5条多肽中有一条(F5)与SS血清IgG反应最强,抗F5多肽抗体(α-F5-PA)在原发性SS患者中的阳性率(78.5%)明显高于SLE(10.4%)、RA(21.6%)患者及正常人(6%)(P<0.01)。抗F5多肽抗体在原发性SS诊断中的敏感性为78.5%,特异性为86.8%,而且该抗体的检测对于SSA抗体、SSB抗体或ANA阴性的原发性SS患者的诊断具有补充作用。结论:F5多肽作为最佳α-胞衬蛋白抗原多肽。

抗α-胞衬蛋白抗体在干燥综合征诊断及病情判断中的作用

目的探讨抗α-胞衬蛋白(Fodrin)抗体在干燥综合征(SS)诊断及病情判断中的作用。方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测40例原发性SS(pSS)、24例继发性SS(sSS)、32例其他结缔组织病(CTD)和31例非CTD患者血清抗α-Fodrin-IgA、IgG抗体,同时记录SS患者的临床资料。结果抗α-Fodrin-IgA、IgG抗体诊断SS的敏感性分别为31.3%、28.1%,特异性分别为90.5%、88.9%;同时检测两型抗体诊断SS的敏感性显著提高,达48.4%(P<0.05)。pSS和sSS患者抗α-Fodrin抗体(Ⅰ型或Ⅱ型)的阳性率均显著高于非CTD组(P<0.05);SS患者抗α-Fodrin抗体的出现与临床症状、眼部体征及核素检查显示的唾液腺功能受损无明显相关性(P>0.05);抗α-Fodrin抗体阳性患者血清C反应蛋白高于阴性者(P<0.05);抗核抗体(ANA)、抗SSA(干燥综合征抗原A)、抗SSB(干燥综合征抗原B)抗体3项阴性的患者抗α-Fodrin抗体阳性率为36.4%。结论抗α-Fodrin抗体特异性较好,对诊断SS有一定参考价值,尤其对于ANA、抗SSA、抗SSB抗体阴性的患者,且可能有助于评估SS病情活动性。

抗SSA、抗SSB、抗α-胞衬蛋白抗体及类风湿因子联合检测在原发性干燥综合征的诊断价值

目的 研究抗干燥综合征A抗体（抗SSA）、抗干燥综合征B抗体（抗SSB）、抗α-胞衬蛋白抗体（抗α-fodrin）及类风湿因子（RF）联合检测对原发性干燥综合征的诊断价值.方法 检测75例干燥综合征（SS）[原发性SS 35例（pSS组）、继发性SS 40例（sSS组）]、80例其他结缔组织病（非SS的CTD组）及80例健康对照者（健康对照组）血清中抗核抗体（ANA）、RF、抗SSA、抗SSB、抗α- fodrin,比较各抗体诊断的敏感性和特异性.结果 抗SSA、抗SSB、抗α-fodrin、ANA、RF在pSS组敏感性分别为77.1%、62.9%、25.7%、80%、51.4%;3种特异性抗体联合RF检测的敏感性高于单一抗体,而四者联合检测时敏感性达91.4%;在抗SSA或抗SSB均阴性时,抗α-fodrin联合RF的敏感性为75%.结论 抗α-fodrin与抗SSA、抗SSB、RF的联合检测可提高pSS的诊断率;抗SSA、抗SSB阴性时联合检测抗α-fodrin和RF可避免漏诊.

α-胞衬蛋白siRNA对干燥综合征模型NOD小鼠血清中IL-2、IL-6和TGF-β的影响

目的:观察α-胞衬蛋白(α-Fodrin)的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对干燥综合征动物模型非肥胖糖尿病(NOD)小鼠细胞因子IL-2、IL-6和TGF-β的影响及泪腺的病理改变。方法:0.5 mg/kg体重的pGFPV-RS空载体和α-Fodrin-siRNA表达载体分别尾静脉注射NOD小鼠,1周/次,共2次。注射后2、4、6 d尾部采血,酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中细胞因子IL-2、IL-6和TGF-β的表达;注射后7 d病理切片,苏木精-伊红(HE)染色法观察各组小鼠泪腺的病理变化。结果:注射后2 d和4 d siRNA 1组和siRNA2组NOD小鼠血清中IL-6的浓度明显低于对照组和空载体组,差异有统计学意义;而对照组和空载体组间、siRNA 1组和siRNA 2组间比较差异无统计学意义。注射后2、4和6 d siRNA 1组和siRNA 2组NOD小鼠血清中TGF-β和IL-2的浓度较对照组和空载体组升高,但差异无统计学意义。病理切片结果显示,siRNA 1组和siRNA 2组与对照组和空载体组比较,小鼠泪腺淋巴细胞浸润减少。结论:NOD小鼠注射α-Fodrin siRNA载体后,血清中IL-6的水平降低、IL-2和TGF-β的浓度升高,泪腺淋巴细胞浸润减少,提示α-Fodrin siRNA可以减轻炎症反应。

抗α-胞衬蛋白抗体在原发性干燥综合征患者病情评估中的意义

目的:探讨抗α-胞衬蛋白在原发性干燥综合征患者病情评估中的作用。方法:应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测原发性干燥综合征(p SS)176例并分析患者临床资料。结果:56例抗α-胞衬蛋白阳性,120例阴性。抗α-胞衬蛋白阳性组炎症指标(ESR、CRP、Ig S)与阴性组比较差异无统计学意义。两组患者ESSDAI积分(欧洲风湿病联盟干燥综合征疾病活动度指数)比较差异无统计学意义。结论:抗α-胞衬蛋白在原发性干燥综合征患者疾病活动度及严重程度方面无明显提示作用。

α-胞衬蛋白siRNA对人涎腺导管细胞的影响

目的观察α-胞衬(α-Fodrin)蛋白小干扰RNA(siRNA)对人涎腺导管(HSG)细胞的影响,探讨α-Fodrin siRNA治疗干燥综合征(SS)的作用。方法实验分对照组、空载体组、α-Fodrin siRNA1组及α-Fodrin siRNA2组,将成功构建的10μgα-Fodrin siRNA1和α-Fodrin siRNA2表达载体分别采用脂质体法转染HSG细胞,空载体组HSG细胞转染等剂量的pGFP-V-RS空载体。转染后24、48、72和96h观察细胞转染效率,实时荧光定量(RT)-PCR法检测4组HSG细胞中α-Fodrin mRNA的表达水平;细胞荧光免疫法检测4组细胞中α-Fodrin蛋白的表达水平;ELISA法检测4组细胞上清液中IFN-γ、IL-10的表达水平。结果转染后48hHSG细胞转染效率最高;转染后48hα-Fodrin siRNA1组和α-Fodrin siRNA2组HSG细胞中α-Fodrin mRNA和蛋白的表达水平明显低于对照组和空载体组(P<0.05),且α-Fodrin siRNA2组中α-Fodrin mRNA的表达水平低于α-Fodrin siRNA1组的表达水平(P<0.05);α-Fodrin siRNA1组和α-Fodrin siRNA2组细胞上清液中IL-10的水平明显升高,较对照组和空载体组差异有统计学意义(P<0.05),α-Fodrin siRNA1组和α-Fodrin siRNA2组比较差异无统计学意义(P>0.05);α-Fodrin siRNA1组和α-Fodrin siRNA2组细胞上清中IFN-γ的水平低于对照组和空载体组,但4组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HSG细胞转染α-Fodrin siRNA载体后,α-Fodrin mRNA和蛋白的表达水平下降,同时细胞上清中IL-10的水平升高、IFN-γ水平下降,提示α-Fodrin siRNA可以减轻炎性反应,为SS的治疗提供实验依据。

免疫印迹法检测抗α-胞衬蛋白抗体诊断舍格伦综合征的meta分析

目的确定免疫印迹法检测抗α-胞衬蛋白抗体对舍格伦综合征的诊断价值。方法检索了Pubmed，Embase和Cochrane上2012年3月以前发表的关于抗α-胞衬蛋白抗体诊断舍格伦综合征英文文献。以QUADAS标准对已经发表的关于抗α-胞衬蛋白抗体诊断舍格伦综合征的英文文献进行评价，通过随机效应模型分析了免疫印迹法检测抗α-胞衬蛋白抗体诊断舍格伦综合征的总体敏感度、特异度、阳／阴性似然比和诊断优势比。以sROC曲线法分析抗α-胞衬蛋白抗体的总体诊断性能。采用Egger检验分析已有的研究结果是否存在发表偏倚。结果5项研究符合该次meta分析的标准，免疫印迹法检测抗α-胞衬蛋白抗体诊断舍格伦综合征的总体诊断敏感度（95％可信区间）分别为0．77（0．70～0．83），总体诊断特异度（95％可信区间）为0．92（0．86～0．96），总体诊断阳性似然比为9．45（3．80～23．48），总体诊断阴性似然比为0．18（0．06～0．52），总体诊断优势比为59．46（20．73～170．58）。sROC曲线下面积为0．95，Q值为0．89。已有的研究不存在发表偏倚。结论免疫印迹法捡测抗α-胞衬蛋白抗体对舍格伦综合征具有较高的诊断价值。

抗SSA抗体、抗SSB抗体、抗α-胞衬蛋白抗体联合检测在干燥综合征诊断中的应用

目的探讨抗SSA抗体、抗SSB抗体、抗α-胞衬蛋白抗体检测在干燥综合征(SS)诊断中的作用。方法用ELISA法试剂盒检测SS、系统性红斑狼疮(SLE)和健康人血清中抗SSA抗体、抗SSB抗体和抗α-胞衬蛋白抗体,分组计算检测结果的灵敏度和特异度。结果 100例患者中,抗SSA抗体、抗SSB抗体和抗α-胞衬蛋白抗体检测诊断SS的灵敏度分别为66%、46%和50%;特异度分别为77.1%、85.6%和91.4%。三种抗体联合检测灵敏度为86%,特异度为92%。结论三种抗体联合检测与单独检测相比特异度相近而灵敏度显著提高,二组比较差异有统计学意义(P<0.05)。抗α-胞衬蛋白抗体检测对SS诊断灵敏度高,对抗SSA抗体和抗SSB抗体均阴性的患者联合检测三种抗体可显著提高SS诊断的灵敏度,检测抗SSA抗体和抗SSB抗体同时也需要检测抗α胞衬蛋白抗体。

我国原发性青光眼患者外周血中含缬酪肽蛋白和α-胞衬蛋白含量的研究

目的检测不同类型青光眼患者与正常人外周血中含缬酪肽蛋白(valosin-containing protein,VCP)、α-胞衬蛋白(α-fodrin)的水平差异,评估各指标在青光眼诊断中的价值。方法收集2015年1月至2017年9月首诊于我院和郑州大学第一附属医院眼科的青光眼患者80例,其中原发性闭角型青光眼(primary angle-closure glaucoma,PACG)组40例,原发性开角型青光眼(primary open angle glaucoma,POAG)组40例;同期收集我院健康体检者40例作为对照组。采用ELISA法分别测定各组外周血中VCP和α-fodrin的含量,并作对比,同时对上述指标绘制受试者工作特征曲线,计算曲线下面积。采用多因素Logistic回归分析青光眼患者发病的危险因素。结果POAG组、PACG组和对照组VCP含量分别为(124.866±34.858)ng·L^(-1)、(94.143±28.970)ng·L^(-1)和(44.707±8.892)ng·L^(-1),α-fodrin含量分别为(0.531±0.306)μg·L^(-1)、(0.399±0.213)μg·L^(-1)、(0.304±0.214)μg·L^(-1),3组间两两相比,VCP、α-fodrin含量的差异均有统计学意义(均为P<0.05)。受试者工作特征曲线下面积分析结果显示,VCP为0.754(95%CI为0.646~0.862,P<0.001),α-fodrin为0.610(95%CI为0.486~0.733,P=0.091)。多因素Logistic回归分析提示,仅VCP是POAG患者发病的独立危险因素(OR=9.134,P<0.01)。结论POAG患者外周血中VCP和α-fodrin的含量高于PACG患者和正常人群,提示免疫因素可能在青光眼视神经损害机制中起重要作用,VCP是POAG发病的独立危险因素。

检测α-胞衬蛋白抗体对诊断风湿病的临床价值

目的研究两种α-胞衬蛋白(αfodrin)抗体在原发性干燥综合征(pSS)等风湿病中的意义。方法选择本院门诊和住院患者256例,其中包括pSS 30例、类风湿关节炎(RA)53例、系统性红斑狼疮(SLE)36例,其他风湿病137例。以酶联免疫吸附法(ELISA)测定其血清αfodrin抗体IgG、IgA型,以免疫印迹法测定其抗SSA、SSB抗体。结果 pSS组、RA组、SLE组IgG型αfodrin抗体测定值分别为(10.87±7.44)u/mL、(8.21±4.02)u/mL、(6.70±1.50)u/mL;IgA型αfodrin抗体测定值分别为(12.72±15.52)u/mL、(6.60±2.36)u/mL、(6.55±1.73)u/mL;αfodrin抗体IgG、IgA型诊断pSS的敏感性分别为36.7%、33.3%;特异性分别为87.6%、92.1%。结论本研究检测的αfodrin抗体IgA型诊断pSS的特异性较高,与抗SSA、SSB联合检测,可以提高pSS的诊断水平,但其敏感性较低,可能与检测方法和试剂有关。

抗毒蕈碱受体3(M3R)抗体、抗α-胞衬蛋白抗体和抗SSA抗体、抗SSB抗体在原发性干燥综合征诊断中的价值

目的:了解抗M3R抗体、抗α-胞衬蛋白抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体检测在原发性干燥综合征(PSS)诊断中的价值。方法:检测88例PSS患者,34例其他风湿病患者及30名健康对照血清中抗M3R抗体、抗α-胞衬蛋白抗体、抗体SSA抗体、抗SSB抗体,比较四种抗体单独或联合检测对诊断PSS的敏感性和特异性。结果:PSS组抗M3R抗体、抗α-胞衬蛋白抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体阳性率及平均浓度显著高于其他风湿病组及健康对照组(P<0.05)。M3R对PSS敏感性最高(81.8%);SSB抗体特异性最高(74.8%)。结论:联合检测抗M3R抗体、抗α-胞衬蛋白抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体比其中单独检测一种抗体的敏感性高,有助于提高PSS诊断的敏感性和特异性。