不同化学激活剂对牛卵丘细胞重构胚发育的影响

本研究主要研究了Ⅰ:Ionomycin+6-甲氨基嘌呤(6-DMAP)、Ⅱ:Ionomycin+放线菌酮(CHX)、Ⅲ:体积分数7%乙醇+6-DMAP、Ⅳ:体积分数7%乙醇+CHX 4种不同化学激活方法对牛胞质内卵丘细胞全细胞注射法所获得重构胚的激活及前期发育的影响。Ionomycin和7%乙醇的处理时间为5 min,6-DMAP的处理时间为4 h,CHX的处理时间为5 h。结果表明,重构胚与颗粒细胞单层细胞共培养2 d后,各组卵裂率分别为52.6%、52.8%、53.8%和54.2%,差异不显著(P>0.05);培养8 d后,Ⅰ组激活的囊胚发育率(20.0%)极显著高于其他组(P<0.01),其他各组之间差异不显著,分别为8.5%、10.2%和6.1%;培养10 d后,Ⅰ组激活的囊胚孵化率(10.7%)极显著高于其他组(P<0.01),其他各组之间差异不显著,分别为2.3%、3.0%和1.8%。结果提示,4种激活方法均可以有效的激活重构胚,但Ionomycin+6-DMAP法激活重构胚的囊胚率和囊胚孵化率均极显著高于其它3组,说明Ionomycin+6-DMAP激活法有利于牛重构胚的发育,可以获得较理想的囊胚率,是胞质内全细胞注射法克隆的理想激活方法。

哺乳动物体细胞克隆的研究进展

随着克隆技术的发展,哺乳动物体细胞克隆在生物学、医学等领域有着越来越重要的价值,近年来,克隆技术不断完善,克隆方法不断优化,取得了很多重要的成果,但在成功率等方面仍存在许多难以攻破的问题。作者重点阐述了胞质内全细胞直接注射法这一技术在哺乳动物体细胞克隆上的应用情况,旨在阐明国内外哺乳动物体细胞克隆的研究现状,为进一步提高克隆成功率提供参考。

不同化学激活剂对牛卵丘细胞重构胚发育的影响

本文主要研究了①离子霉素(Ion)+6-二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)、②Ion+放线菌酮(CHX)、③体积分数7%乙醇+6-DMAP、④体积分数7%乙醇+CHX四种不同化学激活方法对牛胞质内卵丘细胞全细胞注射法所获得重构胚的激活及前期发育的影响。Ion和7%乙醇的处理时间为5min,6-DMAP的处理时间为4h,CHX的处理时间为5h。结果表明,重构胚与颗粒细胞单层细胞共培养2d后,各组卵裂率分别为52.7%、51.5%、53.2%和54.0%,差异不显著(P>0.05);培养8d后,①组激活的囊胚发育率(20.0%)极显著高于其他组(P<0.01),其他各组之间差异不显著,分别为8.5%、10.2%和6.1%;培养10d后,①组激活的囊胚孵化率(10.7%)极显著高于其他组(P<0.01),其他各组之间差异不显著,分别为2.3%、3.0%和1.8%。表明,4种激活方法均可以有效地激活重构胚,但Ion+6-DMAP法激活重构胚的囊胚率和囊胚孵化率均极显著高于其他3组,说明Ion+6-DMAP激活法有利于牛重构胚的发育,可以获得较理想的囊胚率,是胞质内全细胞注射法克隆的理想激活方法。