细胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4、缺氧诱导因子-1在脑胶质瘤中的表达及对患者术后复发的预测作用

目的探讨细胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4(CPEB4)、缺氧诱导因子-1(HIF-1)在脑胶质瘤中的表达及对患者术后复发的预测作用。方法收集149例脑胶质瘤患者的肿瘤组织及癌旁正常组织。比较肿瘤组织及癌旁正常组织中CPEB4、HIF-1的表达情况,术后对患者随访1年,记录复发情况,比较复发与未复发患者脑胶质瘤组织中CPEB4、HIF-1的表达情况,并分析脑胶质瘤患者术后复发的影响因素。结果脑胶质瘤组织中CPEB4、HIF-1阳性表达率均明显高于癌旁正常组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。术后复发患者脑胶质瘤组织中CPEB4、HIF-1阳性表达率均高于未复发患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。Logistic回归分析显示,肿瘤直径≥5 cm、CPEB4阳性表达、HIF-1阳性表达均为脑胶质瘤患者术后复发的独立危险因素(P﹤0.05)。结论CPEB4、HIF-1在脑胶质瘤组织中阳性表达率均明显增高,是脑胶质瘤患者术后复发的危险因素,临床可通过检测两种指标为脑胶质瘤患者的预后评估提供参考。

吲哚胺2,3-双加氧酶和胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4在胃癌组织的表达及临床意义

目的探讨吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)和胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4(CPEB4)在胃癌及癌旁组织的差异表达及临床意义。方法收集92例胃癌肿瘤标本,应用免疫组织化学方法检测IDO和CPEB4在胃癌组织和癌旁组织的表达水平。结果IDO在胃癌组织的阳性表达率为65.22%(60/92),明显高于胃癌癌旁组织阳性表达率[38.04%(35/92),t=13.60,P<0.01],IDO表达水平与胃癌TNM分期、淋巴结转移明显相关(分别为t=7.64、5.37,P<0.05);CPEB4在胃癌组织的阳性表达率为57.61%(53/92),明显高于胃癌癌旁组织阳性表达率[32.61%(30/92),t= 11.61,P<0.01],CPEB4表达水平与胃癌组织学分化程度、TNM分期、淋巴结转移明显相关(分别为t= 5.58、6.85、7.35,P<0.05)。结论IDO和CPEB4的表达水平与胃癌的发生、发展明显相关。

脑胶质瘤中胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4的表达情况及其对胶质瘤细胞生长的影响

目的观察脑胶质瘤中胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4(CPEB4)的表达情况,以及CPEB4对胶质瘤细胞U87生长的影响。方法测定脑胶质瘤和脑组织中CPEB4蛋白含量。测定细胞中CPEB4蛋白表达、细胞增殖、细胞凋亡和细胞周期及CPEB4、PIK3CA、IGF2、SMAD3、IDH1和AKT1 mRNA的表达。结果低级别脑胶质瘤组织和高级别脑胶质瘤组织中CPEB4蛋白阳性表达率高于正常脑组织(P<0.05),高级别脑胶质瘤组织中CPEB4蛋白阳性表达率高于低级别脑胶质瘤组织(P<0.05)。低级别脑胶质瘤组织和高级别脑胶质瘤组织中CPEB4蛋白水平高于正常脑组织(P<0.05),高级别脑胶质瘤组织中CPEB4蛋白水平高于低级别脑胶质瘤组织(P<0.05)。转染后24 h,CPEB4-shRNA组U87细胞中CPEB4蛋白水平低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。培养第3天和第7天,CPEB4-shRNA组细胞的A490值低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。CPEB4-shRNA组早期细胞凋亡率明显高于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。CPEB4-shRNA组G1期细胞明显高于阴性对照组和空白对照组(P<0.05),S期细胞明显低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。CPEB4-shRNA组CPEB4 mRNA、PIK3CA mRNA、IGF2 mRNA和SMAD3 mRNA相对表达量均低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。结论 CPEB4在脑胶质瘤中高表达,CPEB4参与脑胶质瘤细胞的生长,CPEB4对脑胶质瘤细胞的影响可能和CPEB4、PIK3CA、IGF2和SMAD3水平有一定关系。

胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4对胶质瘤细胞生长的影响

目的探讨胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4(cytoplasmic polyadenylation-element-binding protein,CPEB4)在脑胶质瘤组织中的表达及其对胶质瘤细胞生长的影响。方法测定脑胶质瘤组织中CPEB4蛋白表达、脑胶质瘤组织和细胞中CPEB4 m RNA水平、细胞中CPEB4蛋白、PIK3CA蛋白、SMAD3蛋白的表达、细胞凋亡、细胞周期、细胞增殖和细胞的侵袭能力。结果低级别脑组织和高级别脑组织中CPEB4蛋白阳性率高于正常脑组织(P<0.05),高级别脑组织中CPEB4蛋白阳性率高于低级别脑组织(P<0.05);低级别脑组织和高级别脑组织中CPEB4蛋白水平高于正常脑组织(P<0.05),高级别脑组织中CPEB4蛋白水平高于低级别脑组织(P<0.05);SiRNA-CPEB4组细胞CPEB4蛋白表达量低于阴性对照组和空白对照组(均P<0.05);SiRNA-CPEB4组早期细胞凋亡率明显高于阴性对照组和空白对照组(均P<0.05);SiRNA-CPEB4组G1期细胞比例高于阴性对照组和空白对照组(均P<0.05),SiRNA-CPEB4组S期细胞比例低于阴性对照组和空白对照组(均P<0.05);SiRNACPEB4组第3天、第7天细胞OD值均低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05);SiRNA-CPEB4组侵袭细胞数低于阴性对照组和空白对照组;SiRNA-CPEB4组细胞PIK3CA蛋白、SMAD3蛋白表达量均低于阴性对照组和空白对照组(均P<0.05)。结论脑胶质瘤组织中CPEB4水平升高,CPEB4影响脑胶质瘤细胞的凋亡、细胞周期、增殖和侵袭,其机制可能和PIK3CA、SMAD3有关。

干扰胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白CPEBs对胶质瘤干细胞侵袭力的影响

目的分析干扰胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白(cytoplasmic polyadenylation element-binding protein,CPEBs)对胶质瘤干细胞(glioma stem cells,GSCs)侵袭力的影响。方法对GSCs进行原代培养,分为实验组、对照组及空白组,实验组接受CPEBs干扰处理,对照组接受空载体转染,空白组正常培养,通过细胞侵袭实验比较各组细胞侵袭力的变化。结果通过Western blot检测可见,siRNA-3对CPEBs干扰效果最佳;显微镜下可见,受慢病毒感染的实验组细胞呈绿色荧光表达,表达率70%以上;Western blot检测可见,受慢病毒感染的实验组CPEBs蛋白表达量显著低于对照组与空白组(P<0.05);处理48h后,实验组细胞凋亡率达到21.43%,显著高于空白组的0.51%及对照组的1.43%(P<0.05);MTT检测结果可见,处理3d后,实验组细胞生长速度显著降低,且低于对照组与空白组(P<0.05);Transwell侵袭实验结果示,实验组细胞穿膜数量显著低于对照组与空白组(P<0.05)。结论干扰CBEPs后胶质瘤干细胞生长、增殖、侵袭能力均得到大幅度抑制,为胶质瘤的靶向治疗提供了新的靶点研究方向,有望在改善胶质瘤患者预后方面发挥重要作用。

胞质多聚腺苷酸化成分结合蛋白与肿瘤相关研究进展

0引言胞质多聚腺苷酸化成分结合蛋白（cytoplasmicpolyadenylation element-binding proteins,CPEBs）是一组高度保守的介导mRNA胞质多聚腺苷酸化和翻译的RNA结合蛋白,它能够促进多聚腺苷酸化诱导的翻译过程并能够介导包括干细胞发育、细胞分化和细胞衰老、突触可塑性等过程。最初的研究表明其作用主要在于促进卵母细胞及神经元细胞中多聚腺苷酸化的翻译过程。

环状RNA MYO9A_043通过下调CPEB4表达发挥抑制小鼠心脏成纤维细胞纤维化表型的作用

目的:研究环状RNA MYO9A_043(circular RNA MY09A_043, circMY09A_043)对小鼠心肌纤维化的调控作用和机制。方法:利用重组腺病毒circMYO9A_043介导其在C57BL/6乳小鼠心脏成纤维细胞(mouse cardiac fibroblasts, mCFs)中过表达,通过RT-qPCR和Western blot实验检测纤维化相关基因Ⅰ型胶原α1链(collagen type Ⅰ alpha 1 chain, Col1a1)、Ⅲ型胶原α1链(collagen type Ⅲ alpha 1 chain, Col3a1)和平滑肌肌动蛋白α2(smooth muscle actin alpha 2, Acta2)的表达。利用划痕实验检测mCFs的迁移能力。利用RNA测序分析和RT-qPCR验证circMYO9A_043对mCFs中胞质多腺苷酸化元件结合蛋白4(cytoplasmic polyadenylation element binding protein 4,CPEB4)等基因的下调作用。利用腺病毒介导mCFs过表达CPEB4,检测CPEB4对纤维化相关基因表达的影响。通过RNA结合蛋白免疫沉淀(RNA binding protein immunoprecipitation, RIP)实验检测CPEB4与纤维化相关基因的结合作用。进一步通过放线菌素D处理实验,检测mCFs中CPEB4对Col1a1、Col3a1和Acta2 mRNA的稳定作用。结果:利用腺病毒可以有效介导circMYO9A_043在mCFs中过表达。circMYO9A_043可显著下调Col1a1、Col3a1和Acta2表达,抑制mCFs的迁移能力(P<0.05)。circMYO9A_043可显著降低mCFs中CPEB4的表达(P<0.01),过表达CPEB4可逆转circMYO9A_043对纤维化相关基因表达的抑制作用。RIP实验显示CPEB4与mCFs中纤维化相关基因的mRNA有显著结合作用(P<0.01),而放线菌素D处理实验结果显示CPEB4可显著增强上述基因mRNA的稳定性(P<0.05)。结论:circMYO9A_043通过下调CPEB4的表达而抑制mCFs纤维化表型。

人脑胶质瘤组织中CPEB4和Bcl-xl蛋白的表达及其临床意义

目的:探讨人脑胶质瘤组织中胞质多聚腺苷酸化成分结合蛋白4(cytoplasmic polyadenylation element-binding pro-tein 4,CPEB4)和B细胞淋巴瘤-XL(B-cell lymphoma-extra large,Bcl-xl)蛋白的表达及其临床意义。方法:收集郑州大学第五附属医院2010年1月至2012年3月手术切除且经病理证实的65例人脑胶质瘤存档蜡块(WHOⅠ级8例、Ⅱ级19例、Ⅲ级21例、Ⅳ级17例)和10例正常脑组织,采用免疫组织化学SP法检测CPEB4和Bcl-xl蛋白的表达,分析CPEB4和Bcl-xl与脑胶质瘤临床病理特征间的相关性。结果:人脑胶质瘤组织中CPEB4和Bcl-xl蛋白的阳性表达率均显著高于正常脑组织(63.10%vs 0.00%,70.77%vs 20.00%;均P<0.01)。CPEB4和Bcl-xl蛋白的阳性表达率与患者的年龄、性别及家族史均无明显相关性(P>0.05),但与肿瘤的恶性程度呈正相关(P<0.05)。人脑胶质瘤组织中CPEB4和Bcl-xl蛋白的表达呈正相关关系(r=0.419,P=0.001)。结论:CPEB4和Bcl-xl在人脑胶质瘤组织中的阳性表达率明显增高,且与肿瘤恶性程度呈正相关,提示CPEB4可能与Bcl-xl蛋白相互作用,在人脑胶质瘤的发生、发展中起重要作用。

胞质型多聚腺苷酸化原件结合蛋白的结构及其功能研究进展

胞质型多聚腺苷酸化原件结合蛋白(cytoplasmic polyadenylation element binding protein,CPEB)是一种mRNA结合蛋白,在无脊椎动物和脊椎动物中发挥着重要生物功能。文章就其结构及相关生物学功能进行了综述,总结了它在mRNA翻译抑制与激活、卵子发生、细胞衰老、发育、神经细胞突触可塑性等方面的研究成果,并对相关生物学事件的分子机制进行了探讨。最后对CPEB蛋白的研究前景进行了展望。

CPEB4在透明细胞性肾细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4(CPEB4)在透明细胞性肾细胞癌(ccRCC)患者ccRCC组织中的表达情况及与患者临床特征和预后的关系。方法收集76例ccRCC患者的ccRCC组织及其中32例患者的癌旁(距肿瘤外缘≥5 cm)正常组织标本,采用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学染色法检测不同组织中CPEB4 mRNA和蛋白的表达情况,分析ccRCC组织中CPEB4 mRNA的阳性表达情况与ccRCC患者临床特征及预后的关系,以及ccRCC患者预后的影响因素。结果ccRCC患者ccRCC组织中CPEB4蛋白的高表达率和CPEB4 mRNA的阳性表达率均明显高于癌旁正常组织(P﹤0.01)。不同年龄、性别、肿瘤部位的ccRCC患者ccRCC组织中CPEB4 mRNA的阳性表达率比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05);不同TNM分期、世界卫生组织(WHO)组织学分级和淋巴结转移情况的ccRCC患者ccRCC组织中CPEB4 mRNA的阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。Cox比例风险模型分析结果显示,TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期和CPEB4 mRNA阳性表达均是ccRCC患者预后的独立危险因素(P﹤0.05)。CPEB4 mRNA阴性表达患者的3年生存率明显高于CPEB4 mRNA阳性表达患者(P﹤0.01)。结论TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期和CPEB4 mRNA阳性表达均是ccRCC患者预后的独立危险因素,CPEB4的表达情况对临床ccRCC治疗方案的选择及ccRCC患者预后的评估具有重要的临床指导价值。

脑胶质瘤组织中胞质多聚腺苷酸化成分结合蛋白1、细胞周期蛋白B2的表达及临床意义

目的:检测脑胶质瘤组织中胞质多聚腺苷酸化成分结合蛋白1(CPEB1)、细胞周期蛋白B2(CCNB2)的表达,分析CPEB1、CCNB2表达与脑胶质瘤患者临床病理特征以及预后的关系。方法:选取2016年1月至2018年1月东莞松山湖中心医院神经外科收治的经手术切除的55例脑胶质瘤患者瘤组织标本(脑胶质瘤组)和50例颅脑损伤患者额叶或颞叶组织标本(对照组)。检测CPEB1、CCNB2表达,分析CPEB1、CCNB2表达与脑胶质瘤患者临床病理特征的关系。结合随访资料,采用Kaplan-Meier生存分析CPEB1、CCNB2阳性/阴性表达脑胶质瘤患者的预后差异及采用Cox比例风险回归分析其预后的影响因素。结果:脑胶质瘤组CPEB1、CCNB2阳性表达率均高于对照组(P<0.05)。肿瘤直径>2 cm、WHO分级Ⅲ级及远处转移的患者CCNB2阳性表达率高于肿瘤直径≤2 cm、WHO分级Ⅰ~Ⅱ级及无远处转移的患者(P<0.05);WHO分级Ⅲ级、远处转移患者的CPEB1阳性表达率高于WHO分级Ⅰ~Ⅱ级、无远处转移的患者(P<0.05)。CPEB1、CCNB2阳性表达患者3年生存率低于CPEB1、CCNB2阴性表达患者(P<0.05)。WHO分级Ⅲ级、CPEB1及CCNB2阳性表达是脑胶质瘤患者术后3年死亡的危险因素(P<0.05)。结论:脑胶质瘤组织中CPEB1、CCNB2的阳性表达率均升高,其与脑胶质瘤恶性生物学行为以及不良预后有关。

胶质瘤组织中CPEB4和Bcl-xL的表达及预后影响因素分析

目的:检测胞质多聚腺苷酸化成分结合蛋白4(CPEB4)和Bcl-xL在胶质瘤组织中的表达,并探讨二者及多种临床病理因素与患者预后的关系。方法:应用免疫组化染色检测165例不同级别胶质瘤(低级别69例,高级别96例)组织中CPEB4和Bcl-xL的表达情况,采用logistic回归分析探讨影响胶质瘤预后的危险因素。结果:高级别胶质瘤组织中CPEB4和Bcl-xL的阳性表达率均高于低级别胶质瘤组织(χ2=28.971和17.601,P<0.05)。单因素分析显示,患者术前KPS评分、肿瘤直径、肿瘤切除范围、术后放疗、术后化疗、病理级别、CPEB4和Bcl-xL的表达对3 a生存率有影响(P<0.05),构建的判别函数判别符合率达90.9%;多因素分析表明,术前KPS评分、肿瘤切除范围、术后化疗、病理级别、CPEB4和Bcl-xL的表达是影响胶质瘤患者3 a生存率的独立因素(P<0.05),判别函数Y=-0.644+1.386X3+1.052X5+1.248X6-2.679X10-1.042X11-2.659X12,判别符合率达88.3%。结论:CPEB4和Bcl-xL阳性表达与胶质瘤恶性程度有关;术前KPS评分、肿瘤切除范围、术后化疗、病理级别、CPEB4和Bcl-xL的表达可作为考察胶质瘤患者预后情况的重要指标。

CPEB1与Bcl-xL蛋白在人脑胶质瘤中的表达及其与恶性程度和预后的关系

目的探讨胞质多聚腺苷酸化成分结合蛋白1(CPEB1)与Bcl-xL蛋白在人脑胶质瘤中的表达及其与恶性程度和预后的关系。方法选取2008年5月—2014年12月收集的68例人脑胶质瘤组织和68例瘤旁正常组织,回顾性分析所有标本来源患者的临床及随访资料,观察2组CPEB1与Bcl-xL蛋白的表达情况,并分析影响预后的危险因素。结果脑胶质瘤组织CPEB1与Bcl-xL蛋白阳性表达率均高于瘤旁正常组织(P <0. 05)。CPEB1与Bcl-xL蛋白阳性表达患者3年总生存率均低于阴性表达者(P <0. 05)。肿瘤分级过高、分化程度过低、出现淋巴结转移、术前KPS评分过低、术后未进行放化疗及CPEB1和Bcl-xL蛋白阳性均为影响人脑胶质瘤患者预后的独立危险因素(P <0. 05)。结论 CPEB1与Bcl-xL蛋白在人脑胶质瘤患者其癌组织中均以高水平表达,且随着病情的加重其阳性表达率均上升,且过高表达均为影响人脑胶质瘤患者预后的独立危险因素,故临床可将其作为评估人脑胶质瘤患者病情及预后的有效指标。

siRNA干扰CPEB4基因表达对胶质瘤侵袭与生长的影响

目的探讨胞质多聚腺苷酸化成分结合蛋白4(CPEB4)在胶质瘤发生发展过程中的作用。方法免疫组化、Western blot及Real Time PCR法检测胶质瘤组织和细胞中CPEB4的表达情况,Western blot及Real Time PCR法检测CPEB4 siRNA的干扰效率,裸鼠成瘤试验测定CPEB4基因表达下调后胶质瘤细胞在体内致瘤情况。结果免疫组化、Western blot和Real Time PCR结果显示脑胶质瘤组织CPEB4的蛋白和mRNA表达明显升高,随着WHO分级的增加,CPEB4的蛋白和mRNA水平也显著增加。Western blot和Real Time PCR结果显示U87细胞系CPEB4的蛋白和mRNA水平显著高于胶质瘤细胞系U251。在体干扰CPEB4表达能显著降低肿瘤的体积和质量。结论脑胶质瘤组织和细胞高表达CPEB4基因,在体干扰CPEB4表达能显著抑制脑胶质瘤细胞的生长,CPEB4可能成为治疗胶质瘤的重要靶点。

miR-29c-5p负性调控CPEB4对肾透明细胞癌细胞增殖、迁移的影响

目的探讨miR-29c-5p对胞质多聚腺苷酸化原件结合蛋白4(CPEB4)的负性调控作用,以及对肾透明细胞癌Caki-1细胞增殖、迁移的影响。方法采用Lipofectamine TM 2000将miR-NC(miR-NC组)、miR-29c-5p mimics(miR-29c-5p mimics组)、miR-29c-5p inhibitor(miR-29c-5p inhibitor组)、miR-29c-5p inhibitor+si-CPEB4转染(si-CPEB4+miR-29c-5p inhibitor组)转染至Caki-1细胞。采用MTT法和Transwell实验检测各组细胞增殖和迁移活性的影响,采用实时荧光定量PCR(QPCR)和Western blotting检测各组miR-29c-5p、CPEB4 mRNA和蛋白的表达水平。结果miR-29c-5p mimics组细胞的增殖和迁移活性明显低于miR-NC组(P<0.05);而miR-29c-5p inhibitor组细胞的增殖和迁移活性明显高于miR-NC组(P<0.05)。miR-29c-5p mimics组CPEB4 mRNA和蛋白的表达水平明显低于miR-NC组和miR-29c-5p inhibitor组,差异具有统计学意义(P<0.05);miR-29c-5p inhibitor组CPEB4 mRNA和蛋白的表达量明显高于miR-NC组和miR-29c-5p mimics组,差异具有统计学意义(P<0.05)。沉默CPEB4基因表达后,miR-29c-5p inhibitor组miR-29c-5p表达水平明显上调,差异具有统计学意义(P<0.05)。与miR-29c-5p inhibitor组比较,si-CPEB4+miR-29c-5p inhibitor组细胞的增殖和迁移活性明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论miR-29c-5p可负性调控CPEB4的表达,从而抑制肾透明细胞癌的增殖和迁移活性。

PD-L1、CPEB4和GRP在脑胶质瘤中的表达及与临床病理特征和预后的关系研究

目的分析程序性死亡受体-配体1(PD-L1)、胞质多聚腺苷酸化成分结合蛋白4(CPEB4)、胃泌素释放肽(GRP)在脑胶质瘤中的表达及与临床病理特征和预后的关系。方法回顾性选取辽宁省健康产业集团铁煤总医院2015年2月至2018年11月收治的94例脑胶质瘤患者取手术切除的癌组织作为脑胶质瘤组(94例)同时取距离肿瘤组织5 mm处的组织作为癌旁组(94例),另取同期颅脑损伤减压术切除的脑组织作为正常对照组(87例)。采用免疫组化法检测三组PD-L1、CPEB4、GRP表达情况;分析PD-L1、CPEB4、GRP在脑胶质瘤患者不同临床病理特征中的表达差异,并比较预后良好组和预后不良组临床病理特征脑胶质瘤组织中PD-L1、CPEB4、GRP表达;通过Logistic回归分析PD-L1、CPEB4、GRP对预后的影响。结果脑胶质瘤组患者组织中PD-L1、CPEB4、GRP强阳性及阳性表达率高于癌旁组、正常对照组差异有统计学意义(P <0.05)。脑胶质瘤组织中PD-L1、CPEB4、GRP在WHO分级Ⅲ~Ⅳ级中阳性率高于Ⅰ~Ⅱ级在KPS评分<80分患者中阳性率高于KPS评分≥80分患者差异有统计学意义(P<0.05)。患者随访1~3年,出现复发者16例(17.02%),肿瘤源性死亡4例(4.26%),预后不良共20例(21.28%)。预后不良组患者PD-L1、CPEB4、GRP阳性表达率高于预后良好组差异有统计学意义(P <0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,PD-L1、CPEB4、GRP阳性是脑胶质瘤患者预后不良的危险因素(B=2.535、2.164、2.373,95%CI=1.513~105.257、1.764~42.973、1.274~90.311,均P<0.05)。结论 PD-L1、CPEB4、GRP在脑胶质瘤组织中阳性表达率增高且与WHO分级、KPS评分有关,并影响患者预后,检测PD-L1、CPEB4、GRP对脑胶质瘤患者的病理分级和预后评估具有重要意义。

非小细胞肺癌组织中miR-454-3p、CPEB1 mRNA表达水平及临床意义

目的分析非小细胞肺癌组织中微小RNA-454-3p(miR-454-3p)、胞质多聚腺苷酸化成分结合蛋白1(CPEB1)信使RNA(mRNA)表达水平与临床病理特征及预后的相关性。方法选取2014年4月—2016年3月在中国科学院合肥肿瘤医院确诊为非小细胞肺癌患者96例,术中取其癌组织设为肺癌组,癌旁正常组织为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测2组miR-454-3p、CPEB1 mRNA表达水平;以二者表达水平均值为界,再分为miR-454-3p低表达亚组、高表达亚组和CPEB1 mRNA低表达亚组、高表达亚组,分析癌组织中miR-454-3p、CPEB1 mRNA表达水平与患者临床病理特征及预后的关系;Logistic回归分析影响非小细胞肺癌患者预后的因素。结果肺癌组miR-454-3p表达水平高于对照组,CPEB1 mRNA表达水平低于对照组(t/P=14.130/0.000、12.541/0.000)。患者癌组织miR-454-3p、CPEB1 mRNA表达水平与性别、年龄、吸烟史、分化程度无关(P>0.05),与肿瘤直径、病理类型、淋巴结远处转移、TNM分期有关(miR-454-3p:χ^(2)/P=7.102/0.008、13.577/0.000、9.687/0.002、14.291/0.000;CPEB1 mRNA:χ^(2)/P=10.816/0.001、18.288/0.000、14.122/0.000、16.239/0.000);癌组织miR-454-3p与CPEB1 mRNA表达水平呈负相关(r/P=-0.524/0.000)。miR-454-3p高表达患者5年生存率低于miR-454-3p低表达患者(χ^(2)/P=7.012/0.008),CPEB1 mRNA高表达患者5年生存率高于CPEB1 mRNA低表达患者(χ^(2)/P=4.112/0.043);miR-454-3p高表达、淋巴结远处转移是影响非小细胞肺癌患者死亡的独立危险因素[OR(95%CI)=2.255(1.725~2.948)、1.987(1.428~2.765)],CPEB1 mRNA高表达是影响患者死亡的保护因素[OR(95%CI)=0.677(0.518~0.886)]。结论非小细胞肺癌组织中miR-454-3p呈高表达,CPEB1 mRNA呈低表达,且二者均与患者肿瘤直径、病理类型、淋巴结远处转移、TNM分期及预后有关。

CPEB3在人舌鳞状细胞癌组织中的表达及与临床病理特征相关性分析

目的:探讨人舌鳞状细胞癌(TSCC)组织中胞质多聚腺苷化元件结合蛋白3(CPEB3)的表达及其临床意义。方法:通过UALCAN在线分析CPEB3在头颈部鳞状细胞癌(HNSC)组织中的差异表达及其与临床特征的相关性,免疫组织化学法检测CPEB3在TSCC和癌旁组织中的表达,分析CPEB3表达水平与TSCC病人病理特征间的相关性。结果:生物信息学分析结果显示,CPEB3在HNSC组织中的表达量明显低于正常组织(P<0.01)。与正常组织相比,CPEB3在不同分期和分化程度的HNSC病人中表达量降低(P<0.05);CPEB3低表达的HNSC病人的3年生存率低于CPEB3高表达的病人(P<0.05)。与癌旁组织相比,CPEB3在TSCC组织中低表达(P<0.01);CPEB3的表达与TSCC病人的性别和年龄无明显相关性(P>0.05),而与TNM分期、病理分级和淋巴结转移有相关性(P<0.05~P<0.01)。结论:CPEB3在TSCC中低表达,并与TNM分期、分化程度和淋巴结转移相关,CPEB3可能为TSCC诊断和治疗的潜在生物标志物。

UCA1/miR-122-5p/CPEB1轴促进肺腺癌的顺铂耐药发生机制研究

目的探讨尿路上皮癌胚抗原1(UCA1)/miR-122-5p/pcDNA-胞质多聚腺苷酸元件结合蛋白1(CPEB1)轴促进肺腺癌的顺铂耐药发生机制研究。方法通过实时荧光反转录定量PCR(RT-qPCR)检测UCA1相关miRNA分子,并通过细胞转染获得miR-122-5p和CPEB1相关细胞株。通过双荧光素酶报告实验分别验证UCA1与miR-122-5p、CPEB1与miR-122-5p的结合。药物敏感性实验获得顺铂药物半抑制浓度(IC50);通过肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库分析CPEB1在肺腺癌中的表达情况以及与免疫细胞功能的关系。结果miR-122-5p在肺腺癌细胞中的表达水平明显升高,并通过双荧光素酶报告实验以验证UCA1与miR-122-5p结合,构建miR-122-5p抑制物和模拟物转染肺腺癌细胞株,发现miR-122-5p抑制后,顺铂IC50浓度下降,而miR-122-5p过表达后,顺铂IC50浓度升高。CPEB1在肺腺癌细胞中的表达水平明显降低,双荧光素酶报告实验证实CPEB1是与miR-122-5p结合,CPEB1过表达后,顺铂IC50浓度减低;对TCGA数据库分析显示肺腺癌组织CPEB1 mRNA明显低于癌旁组织,ROC曲线分析显示CPEB1表达水平能较好地用于诊断肺腺癌(AUC=0.849),进一步分析显示CPEB1表达水平与肺腺癌患者的细胞功能如T细胞、B细胞、CD8+T细胞、自然杀伤细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、树突状细胞、肥大细胞存在密切关联。结论UCA1与miR-122-5p存在结合位点,后者可影响肺腺癌的顺铂耐药,并与靶基因CPEB1结合;肺腺癌中CPEB1呈低表达,降低肺腺癌顺铂药物的敏感性。UCA1/miR-122-5p/CPEB1轴有望为干预肺腺癌顺铂耐药的靶点。

CPEB4基因缓解脓毒症诱导的心肌损伤及作用机制

目的 探讨干扰胞质多聚腺苷酸化成分结合蛋白4(CPEB4)基因缓解脓毒症诱导的心肌损伤及作用机制。方法 将48只8~12周龄SD大鼠随机分为正常组、模型组[脂多糖(LPS)诱导脓毒症大鼠]、shRNA-NC组(LPS诱导脓毒症+shRNA-NC)和shRNA-CPEB4组(LPS诱导脓毒症心肌损伤+shRNA-CPEB4)。建模完成后,通过彩色多普勒超声测定心率、左心室射血分数(LVEF)及左心室壁厚度(LVWT);苏木精-伊红(HE)和原位末端转移酶标记技术(TUNEL)染色观察大鼠心肌组织病理变化;观察4组肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌红蛋白(Mb)和心肌肌钙蛋白I(cTnI)水平变化。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测大鼠心肌组织CPEB4表达水平,蛋白免疫印迹(Western Blot)检测大鼠心肌组织CPEB4、p38、细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白表达水平。结果 模型组CPEB4蛋白及mRNA表达高于正常组(P<0.05),shRNA-CPEB4组CPEB4蛋白及mRNA表达低于shRNA-NC组(P<0.05)。模型组心率、LVEF和LVWT水平低于正常组(P<0.05);shRNA-CPEB4组心率、LVEF和LVWT水平高于shRNA-NC组(P<0.05)。模型组心肌组织遭到严重破坏,细胞凋亡增多,而shRNA-CPEB4组心肌组织损伤有所改善,细胞凋亡减少。模型组心肌组织CK-MB、Mb和cTnI水平较正常组明显增加(P<0.05);shRNA-CPEB4组心肌组织CK-MB、Mb和cTnI水平较shRNA-NC组明显降低(P<0.05)。模型组、p-ERK1/2/ERK1/2磷酸化p38(p-p38)/p38蛋白水平高于正常组(P<0.05);shRNA-CPEB4组p-ERK1/2/ERK1/2、p-p38/p38蛋白水平低于shRNA-NC组(P<0.05)。结论 脓毒症可破坏大鼠心功能,改变心肌组织结构;干扰CPEB4基因后,可通过ERK/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路和p38 MAPK通路抑制脓毒症诱导大鼠心肌细胞凋亡。