胞质多聚腺苷酸化成分结合蛋白与肿瘤相关研究进展

0引言胞质多聚腺苷酸化成分结合蛋白（cytoplasmicpolyadenylation element-binding proteins,CPEBs）是一组高度保守的介导mRNA胞质多聚腺苷酸化和翻译的RNA结合蛋白,它能够促进多聚腺苷酸化诱导的翻译过程并能够介导包括干细胞发育、细胞分化和细胞衰老、突触可塑性等过程。最初的研究表明其作用主要在于促进卵母细胞及神经元细胞中多聚腺苷酸化的翻译过程。

干扰胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白CPEBs对胶质瘤干细胞侵袭力的影响

目的分析干扰胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白(cytoplasmic polyadenylation element-binding protein,CPEBs)对胶质瘤干细胞(glioma stem cells,GSCs)侵袭力的影响。方法对GSCs进行原代培养,分为实验组、对照组及空白组,实验组接受CPEBs干扰处理,对照组接受空载体转染,空白组正常培养,通过细胞侵袭实验比较各组细胞侵袭力的变化。结果通过Western blot检测可见,siRNA-3对CPEBs干扰效果最佳;显微镜下可见,受慢病毒感染的实验组细胞呈绿色荧光表达,表达率70%以上;Western blot检测可见,受慢病毒感染的实验组CPEBs蛋白表达量显著低于对照组与空白组(P<0.05);处理48h后,实验组细胞凋亡率达到21.43%,显著高于空白组的0.51%及对照组的1.43%(P<0.05);MTT检测结果可见,处理3d后,实验组细胞生长速度显著降低,且低于对照组与空白组(P<0.05);Transwell侵袭实验结果示,实验组细胞穿膜数量显著低于对照组与空白组(P<0.05)。结论干扰CBEPs后胶质瘤干细胞生长、增殖、侵袭能力均得到大幅度抑制,为胶质瘤的靶向治疗提供了新的靶点研究方向,有望在改善胶质瘤患者预后方面发挥重要作用。

细胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4、缺氧诱导因子-1在脑胶质瘤中的表达及对患者术后复发的预测作用

目的探讨细胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4(CPEB4)、缺氧诱导因子-1(HIF-1)在脑胶质瘤中的表达及对患者术后复发的预测作用。方法收集149例脑胶质瘤患者的肿瘤组织及癌旁正常组织。比较肿瘤组织及癌旁正常组织中CPEB4、HIF-1的表达情况,术后对患者随访1年,记录复发情况,比较复发与未复发患者脑胶质瘤组织中CPEB4、HIF-1的表达情况,并分析脑胶质瘤患者术后复发的影响因素。结果脑胶质瘤组织中CPEB4、HIF-1阳性表达率均明显高于癌旁正常组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。术后复发患者脑胶质瘤组织中CPEB4、HIF-1阳性表达率均高于未复发患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。Logistic回归分析显示,肿瘤直径≥5 cm、CPEB4阳性表达、HIF-1阳性表达均为脑胶质瘤患者术后复发的独立危险因素(P﹤0.05)。结论CPEB4、HIF-1在脑胶质瘤组织中阳性表达率均明显增高,是脑胶质瘤患者术后复发的危险因素,临床可通过检测两种指标为脑胶质瘤患者的预后评估提供参考。

PABPC1在肝细胞癌患者癌组织中的表达及其与预后的关系

目的 分析多聚腺苷酸结合蛋白胞质1(PABPC1)在肝细胞癌(HCC)患者癌组织中的表达情况及其对患者预后的影响。方法 采用癌症基因组图谱计划(TCGA)中的数据分析369例HCC患者癌组织及50例正常肝组织的PABPC1 mRNA表达水平。回顾性分析、比较2018年1月至2019年2月在该院就诊的166例HCC患者癌组织和癌旁正常组织PABPC1 mRNA表达水平及不同临床病理特征的HCC患者癌组织中PABPC蛋白表达情况。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析采用PABPC1 mRNA表达水平区分癌组织和癌旁正常组织的效能,根据随访结果采用多因素COX回归模型分析影响HCC患者预后的因素。结果 TCGA数据结果显示,369例HCC患者癌组织中PABPC1 mRNA表达量显著高于50例正常肝组织中的表达量(P<0.05)。在临床病例分析中,166例HCC患者癌组织中PABPC1 mRNA表达水平及PABPC1蛋白阳性率均显著高于癌旁组织(P<0.05),且PABPC1蛋白阳性表达患者PABPC1 mRNA表达水平为2.76±0.79,显著高于阴性表达患者的1.52±0.84(P<0.001)。ROC曲线结果显示,PABPC1 mRNA区分癌组织和癌旁正常组织的曲线下面积为0.913。UICC分期Ⅲ~Ⅳ期、伴有淋巴结转移以及多发肿瘤灶HCC患者的PABPC1蛋白阳性表达率分别高于UICC分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移及单发肿瘤灶的患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。随访期间,50例(30.12%)患者在术后1年内死亡,95例(57.23%)患者在术后3年内死亡,101例(60.84%)患者在术后5年内死亡;多因素COX回归分析结果显示,癌组织PABPC1蛋白表达情况是影响HCC患者1年、3年、5年生存情况的独立因素(P<0.05)。癌组织PABPC1蛋白阳性表达及阴性表达HCC患者的1年、3年和5年总生存期比较,差异均有统计学意义(P<0.001)。结论 PABPC1 mRNA和蛋白在HCC患者癌组织中均呈高表达,且PABPC1蛋白高表达预示HCC患者生存预后不良。

多聚腺苷酸结合蛋白相互作用蛋白1与肿瘤关系的研究进展

多聚腺苷酸结合蛋白相互作用蛋白1[Poly(A)-binding protein-interacting protein 1,Paip1]是哺乳动物特有的蛋白质,可有效参与真核生物基因表达及细胞周期调控,并与肿瘤演进及预后密切相关。近年来Paip1成为肿瘤研究热点,Paip1与肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间质转化进程密切相关,可能是肿瘤进展及预后不良的潜在生物标志和新的治疗靶点。但其具体作用机制尚未阐明。本文就Paip1的结构、功能、泛素化和降解及其与肿瘤的关系等方面作一综述,为其在肿瘤中的研究提供新思路。

人前列腺癌细胞中肝X受体特异性激动剂GW3965对核受体结合蛋白1的影响

目的探讨人前列腺癌细胞系DU145细胞中肝X受体(liver X receptor,LXR)特异性激动剂GW3965对核受体结合蛋白1(nuclear receptor binding protein 1,NRBP1)的表达调控作用。方法采用MTT法检测不同浓度GW3965(浓度分别为0.5、5、10μmol/L)作用24 h后对DU145细胞增殖的影响。在人前列腺癌DU145细胞中用LXR的特异性激动剂GW3965处理24 h后,经逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测LXR特异性靶基因三磷腺苷结合A1(ATP-bindingcassette A1,ABCA1)转录水平的表达情况;随后在转录水平和翻译水平检测NRBP1的表达。结果 LXR特异性激动剂GW3965各实验组对细胞的活性和增殖无影响(P>0.05)。GW3965作用于DU145细胞后,ABCA1转录水平呈剂量依赖性升高,表明LXR在DU145细胞中具有功能活性。LXR经过活化后在转录和翻译水平对NRBP1的抑制作用呈剂量依赖性降低。结论 LXR在DU145细胞中可抑制NRBP1的表达。

CPEB1与Bcl-xL蛋白在人脑胶质瘤中的表达及其与恶性程度和预后的关系

目的探讨胞质多聚腺苷酸化成分结合蛋白1(CPEB1)与Bcl-xL蛋白在人脑胶质瘤中的表达及其与恶性程度和预后的关系。方法选取2008年5月—2014年12月收集的68例人脑胶质瘤组织和68例瘤旁正常组织,回顾性分析所有标本来源患者的临床及随访资料,观察2组CPEB1与Bcl-xL蛋白的表达情况,并分析影响预后的危险因素。结果脑胶质瘤组织CPEB1与Bcl-xL蛋白阳性表达率均高于瘤旁正常组织(P <0. 05)。CPEB1与Bcl-xL蛋白阳性表达患者3年总生存率均低于阴性表达者(P <0. 05)。肿瘤分级过高、分化程度过低、出现淋巴结转移、术前KPS评分过低、术后未进行放化疗及CPEB1和Bcl-xL蛋白阳性均为影响人脑胶质瘤患者预后的独立危险因素(P <0. 05)。结论 CPEB1与Bcl-xL蛋白在人脑胶质瘤患者其癌组织中均以高水平表达,且随着病情的加重其阳性表达率均上升,且过高表达均为影响人脑胶质瘤患者预后的独立危险因素,故临床可将其作为评估人脑胶质瘤患者病情及预后的有效指标。

miR-891a-5p通过CPEB1调控结肠癌细胞生物过程的机制研究

目的 探讨miR-891a-5p通过细胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白1(CPEB1)调控结肠癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的机制。方法 运用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qPCR)检测结肠癌组织、癌旁组织、人正常结肠上皮细胞和人结肠癌细胞中miR-891a-5p的表达;将LOVO细胞分为A组(不做任何处理)、B组(转染anti-miRcon)、C组(转染anti-miR-891a-5p)、D组(共转染anti-miR-891a-5p和si-con)、E组(共转染anti-miR-891a-5p和siCPEB1)、F组(转染miR-con)、G组(转染miR-891a-5p);CCK-8法检测细胞增殖率、Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡率;蛋白免疫印迹实验检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、胱天蛋白酶-3酶原(Pro-caspase-3)、裂解的胱天蛋白酶-3(C-caspase-3)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的蛋白表达;Transwell实验检测细胞迁移、侵袭;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性。结果 与癌旁组织相比,结肠癌组织miR-891a-5p表达升高,与正常结肠上皮细胞相比,结肠癌细胞中miR-891a-5p的表达均显著升高(P<0.05)。与B组相比,C组miR-891a-5p、Cyclin D1、N-cadherin、Vimentin蛋白表达下降,细胞增殖率、迁移、侵袭数量降低,C-caspase-3、CPEB1、E-cadherin蛋白表达和凋亡率升高(P<0.05);与D组相比,E组miR-891a-5p、Cyclin D1、N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平升高,细胞增殖率、迁移、侵袭数量升高,C-caspase-3、CPEB1、E-cadherin蛋白表达和凋亡率降低(P<0.05)。miR-891a-5p与CPEB1的3′-UTR存在连续的6个互补结合位点。与F组相比,G组WT-CPEB1荧光活性和CPEB1蛋白表达降低;与B组相比,C组WT-CPEB1荧光活性升高(P<0.05)。结论 miR-891a-5p可促进结肠癌细胞增殖、迁移、侵袭,抑制凋亡,其作用机制可能与靶向抑制CPEB1有关。

抑制PTBP1对脉络膜黑色素瘤细胞增殖和侵袭力的影响

目的探讨多聚嘧啶区结合蛋白1(PTBP1)对脉络膜黑色素瘤(CM)细胞增殖活性和迁移、侵袭能力的影响。方法选取人CM细胞系OCM-1,根据转染序列的不同分为si-PTBP1组(转染PTBP1特异性干扰序列)、si-Control组(转染阴性对照序列)和空白组(不作任何处理)。分别检测各组细胞PTBP1 mRNA的表达,以及PTBP1、上皮型钙黏蛋白(E-Cad)和波形蛋白的表达。通过细胞实验分析各组细胞的增殖活性和迁移、侵袭能力。结果si-PTBP1组PTBP1 mRNA相对表达量显著低于si-Control组和空白组(P<0.05),si-Control组和空白组之间差异无统计学意义(P>0.05)。培养24、48、72和96h,si-PTBP1组细胞增殖活性均低于si-Control组和空白组(P<0.05)。si-PTBP1组迁移细胞数和侵袭细胞数均少于si-Control组和空白组(P<0.05)。si-PTBP1组PTBP1和波形蛋白相对表达量低于si-Control组和空白组(P<0.05),E-Cad相对表达量高于si-Control组和空白组(P<0.05)。结论抑制OCM-1细胞PTBP1表达可抑制细胞增殖活性,削弱细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能与抑制上皮-间质转化有关。

PABPC1对人单核白血病细胞系THP-1翻译活性的影响

目的研究细胞质多聚腺苷酸结合蛋白-1(PABPC1)对人单核细胞白血病细胞系THP-1翻译活性的影响。方法在THP-1细胞中转染shPABPC1,Western blot验证敲低效率,多聚核糖体分析技术检测细胞翻译活性变化。结果转染后THP-1细胞中PABPC1表达被抑制(P<0.001);与对照组相比,敲低PABPC1组的翻译活性减弱。结论敲低PABPC1可抑制THP-1细胞翻译活性,PABPC1可能成为治疗急性髓系白血病(AML)的潜在靶点。

UCA1/miR-122-5p/CPEB1轴促进肺腺癌的顺铂耐药发生机制研究

目的探讨尿路上皮癌胚抗原1(UCA1)/miR-122-5p/pcDNA-胞质多聚腺苷酸元件结合蛋白1(CPEB1)轴促进肺腺癌的顺铂耐药发生机制研究。方法通过实时荧光反转录定量PCR(RT-qPCR)检测UCA1相关miRNA分子,并通过细胞转染获得miR-122-5p和CPEB1相关细胞株。通过双荧光素酶报告实验分别验证UCA1与miR-122-5p、CPEB1与miR-122-5p的结合。药物敏感性实验获得顺铂药物半抑制浓度(IC50);通过肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库分析CPEB1在肺腺癌中的表达情况以及与免疫细胞功能的关系。结果miR-122-5p在肺腺癌细胞中的表达水平明显升高,并通过双荧光素酶报告实验以验证UCA1与miR-122-5p结合,构建miR-122-5p抑制物和模拟物转染肺腺癌细胞株,发现miR-122-5p抑制后,顺铂IC50浓度下降,而miR-122-5p过表达后,顺铂IC50浓度升高。CPEB1在肺腺癌细胞中的表达水平明显降低,双荧光素酶报告实验证实CPEB1是与miR-122-5p结合,CPEB1过表达后,顺铂IC50浓度减低;对TCGA数据库分析显示肺腺癌组织CPEB1 mRNA明显低于癌旁组织,ROC曲线分析显示CPEB1表达水平能较好地用于诊断肺腺癌(AUC=0.849),进一步分析显示CPEB1表达水平与肺腺癌患者的细胞功能如T细胞、B细胞、CD8+T细胞、自然杀伤细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、树突状细胞、肥大细胞存在密切关联。结论UCA1与miR-122-5p存在结合位点,后者可影响肺腺癌的顺铂耐药,并与靶基因CPEB1结合;肺腺癌中CPEB1呈低表达,降低肺腺癌顺铂药物的敏感性。UCA1/miR-122-5p/CPEB1轴有望为干预肺腺癌顺铂耐药的靶点。

多聚腺苷酸结合蛋白相互作用蛋白1在胶质瘤的预后价值及其对免疫微环境的影响

目的探讨多聚腺苷酸结合蛋白相互作用蛋白1(PAIP1)在胶质瘤的预后价值及其对肿瘤免疫的影响。方法在癌症基因组图谱(TCGA)数据库下载得到泛癌转录组数据及患者临床数据,比较PAIP1在泛癌中的表达差异性。通过免疫组织化学方法检测胶质瘤PAIP1表达情况。通过Kaplan-Meier分析PAIP1表达对胶质瘤患者预后的影响及其与胶质瘤患者临床病理特征的关系。利用GO功能与KEGG通路富集分析PAIP1在胶质瘤的潜在作用。单样本GSEA(ssGSEA)免疫浸润算法分析胶质瘤微环境免疫细胞浸润网络。利用Wilcoxon检验或T检验进行组间差异分析,Spearman检验进行相关性分析。结果胶质瘤组织中PAIP1表达量高于癌旁组织(5.386±0.277比5.858±0.455,P<0.05),高表达PAIP1的胶质瘤患者肿瘤恶性程度较高,总体生存期[风险比(HR)=2.95,P<0.01]和疾病特异生存期(HR=2.91,P<0.01)均显著缩短。免疫组织化学结果显示,胶质瘤组PAIP1表达量高于阴染组(11.460%比7.650%,t=4.917,P<0.001)。功能分析结果提示,PAIP1可能参与肿瘤细胞周期及肿瘤免疫的调控。高表达PAIP1的胶质瘤患者辅助型T细胞2浸润程度(0.337±0.033比0.383±0.037)和白细胞介素(IL)-4的表达量高于低表达PAIP1的胶质瘤患者(R=0.194,P<0.01)。结论PAIP1高表达与胶质瘤预后不良相关,可能通过促进Th2细胞浸润及IL-4分泌参与肿瘤免疫调控。

CPEB1对人脐静脉血管内皮细胞增殖和迁移的影响及机制

目的探讨胞质多聚腺苷酸结合蛋白1(CPEB1)对人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)增殖和迁移的影响及可能机制。方法取对数生长期的HUVECs细胞,分为实验组与对照组,分别用肿瘤细胞上清液培养基和普通培养基重悬细胞,Real-time PCR法和Western blotting法分别检测CPEB1及整合素-金属蛋白酶17(ADAM17)的mRNA和蛋白表达;取对数生长期HUVECs细胞,待培养至细胞达70%~80%融合时用LipofectamineTM2000进行转染,细胞分为携带基因的质粒转染组(转染组)、不带任何基因的空质粒转染细胞组(转染对照组)和不经任何处理的细胞组(空白对照组)。MTT法检测转染后HUVECs的增殖能力,Transwell小室法检测转染后HUVECs的迁移能力,RT-PCR法检测ADAM17的mRNA表达,Western blotting法检测ADAM17蛋白表达。结果实验组中CPEB1的mRNA及蛋白表达均低于对照组(P均<0.05),ADAM17的mRNA及蛋白表达均高于对照组(P均<0.05);转染48、72 h后,转染组吸光度值低于转染对照组和空白对照组(P均<0.05);转染组细胞穿过小室膜数目低于转染对照组和空白对照组(P均<0.05);转染组ADAMl7的mRNA和蛋白表达低于转染对照组和空白对照组(P均<0.05)。结论 CPEB1可抑制HUVECs细胞增殖和迁移,其机制可能与调控ADAM17表达有关。

脑胶质瘤组织中胞质多聚腺苷酸化成分结合蛋白1、细胞周期蛋白B2的表达及临床意义

目的:检测脑胶质瘤组织中胞质多聚腺苷酸化成分结合蛋白1(CPEB1)、细胞周期蛋白B2(CCNB2)的表达,分析CPEB1、CCNB2表达与脑胶质瘤患者临床病理特征以及预后的关系。方法:选取2016年1月至2018年1月东莞松山湖中心医院神经外科收治的经手术切除的55例脑胶质瘤患者瘤组织标本(脑胶质瘤组)和50例颅脑损伤患者额叶或颞叶组织标本(对照组)。检测CPEB1、CCNB2表达,分析CPEB1、CCNB2表达与脑胶质瘤患者临床病理特征的关系。结合随访资料,采用Kaplan-Meier生存分析CPEB1、CCNB2阳性/阴性表达脑胶质瘤患者的预后差异及采用Cox比例风险回归分析其预后的影响因素。结果:脑胶质瘤组CPEB1、CCNB2阳性表达率均高于对照组(P<0.05)。肿瘤直径>2 cm、WHO分级Ⅲ级及远处转移的患者CCNB2阳性表达率高于肿瘤直径≤2 cm、WHO分级Ⅰ~Ⅱ级及无远处转移的患者(P<0.05);WHO分级Ⅲ级、远处转移患者的CPEB1阳性表达率高于WHO分级Ⅰ~Ⅱ级、无远处转移的患者(P<0.05)。CPEB1、CCNB2阳性表达患者3年生存率低于CPEB1、CCNB2阴性表达患者(P<0.05)。WHO分级Ⅲ级、CPEB1及CCNB2阳性表达是脑胶质瘤患者术后3年死亡的危险因素(P<0.05)。结论:脑胶质瘤组织中CPEB1、CCNB2的阳性表达率均升高,其与脑胶质瘤恶性生物学行为以及不良预后有关。

吲哚胺2,3-双加氧酶和胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4在胃癌组织的表达及临床意义

目的探讨吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)和胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4(CPEB4)在胃癌及癌旁组织的差异表达及临床意义。方法收集92例胃癌肿瘤标本,应用免疫组织化学方法检测IDO和CPEB4在胃癌组织和癌旁组织的表达水平。结果IDO在胃癌组织的阳性表达率为65.22%(60/92),明显高于胃癌癌旁组织阳性表达率[38.04%(35/92),t=13.60,P<0.01],IDO表达水平与胃癌TNM分期、淋巴结转移明显相关(分别为t=7.64、5.37,P<0.05);CPEB4在胃癌组织的阳性表达率为57.61%(53/92),明显高于胃癌癌旁组织阳性表达率[32.61%(30/92),t= 11.61,P<0.01],CPEB4表达水平与胃癌组织学分化程度、TNM分期、淋巴结转移明显相关(分别为t= 5.58、6.85、7.35,P<0.05)。结论IDO和CPEB4的表达水平与胃癌的发生、发展明显相关。

人脑胶质瘤组织中CPEB4和Bcl-xl蛋白的表达及其临床意义

目的:探讨人脑胶质瘤组织中胞质多聚腺苷酸化成分结合蛋白4(cytoplasmic polyadenylation element-binding pro-tein 4,CPEB4)和B细胞淋巴瘤-XL(B-cell lymphoma-extra large,Bcl-xl)蛋白的表达及其临床意义。方法:收集郑州大学第五附属医院2010年1月至2012年3月手术切除且经病理证实的65例人脑胶质瘤存档蜡块(WHOⅠ级8例、Ⅱ级19例、Ⅲ级21例、Ⅳ级17例)和10例正常脑组织,采用免疫组织化学SP法检测CPEB4和Bcl-xl蛋白的表达,分析CPEB4和Bcl-xl与脑胶质瘤临床病理特征间的相关性。结果:人脑胶质瘤组织中CPEB4和Bcl-xl蛋白的阳性表达率均显著高于正常脑组织(63.10%vs 0.00%,70.77%vs 20.00%;均P<0.01)。CPEB4和Bcl-xl蛋白的阳性表达率与患者的年龄、性别及家族史均无明显相关性(P>0.05),但与肿瘤的恶性程度呈正相关(P<0.05)。人脑胶质瘤组织中CPEB4和Bcl-xl蛋白的表达呈正相关关系(r=0.419,P=0.001)。结论:CPEB4和Bcl-xl在人脑胶质瘤组织中的阳性表达率明显增高,且与肿瘤恶性程度呈正相关,提示CPEB4可能与Bcl-xl蛋白相互作用,在人脑胶质瘤的发生、发展中起重要作用。

组织PABPC1 mRNA、Rap1GAP mRNA、Glypican-1 mRNA表达预测脑胶质瘤外科术后复发的效能及意义研究

目的探讨脑胶质瘤组织细胞质多聚腺苷酸结合蛋白1(PABPC1)mRNA、Rap1 GTP酶激活蛋白(Rap1GAP)mRNA、磷脂酰肌醇蛋白聚糖1(Glypican-1)mRNA表达与病理特征的关联性及预测外科术后复发的效能。方法选取2019年1月至2020年5月我院收治的106例脑胶质瘤手术患者,比较瘤组织、瘤旁组织PABPC1 mRNA、Rap1GAP mRNA、Glypican-1 mRNA表达,并根据术后6个月复发情况分为复发组和未复发组,比较两组脑胶质瘤组织PABPC1 mRNA、Rap1GAP mRNA、Glypican-1 mRNA表达,分析脑胶质瘤组织各指标预测外科术后复发的效能。结果瘤组织PABPC1 mRNA、Rap1GAP mRNA低于瘤旁组织,Glypican-1 mRNA高于瘤旁组织(P<0.05);复发组WHO病理分级、PABPC1 mRNA、Rap1GAP mRNA、Glypican-1 mRNA与未复发组比较,差异有统计学意义(P<0.05);WHO病理分级增高,PABPC1 mRNA、Rap1GAP mRNA逐渐降低,Glypican-1 mRNA逐渐升高(P<0.05);PABPC1 mRNA、Rap1GAP mRNA与WHO病理分级呈负相关,Glypican-1 mRNA与病理分级呈正相关(P<0.05);WHO病理分级控制后,脑胶质瘤组织PABPC1 mRNA、Rap1GAP mRNA、Glypican-1 mRNA仍与外科术后复发相关(P<0.05);PABPC1 mRNA、Rap1GAP mRNA、Glypican-1 mRNA联合预测外科术后复发的AUC为0.959,大于单一指标预测(P<0.05)。结论脑胶质瘤组织PABPC1 mRNA、Rap1GAP mRNA、Glypican-1 mRNA表达与病理特征关系密切,且是外科术后复发的独立危险因素,联合检测可为临床完善脑胶质瘤术后复发风险评价机制提供参考。

胞质型多聚腺苷酸化原件结合蛋白的结构及其功能研究进展

胞质型多聚腺苷酸化原件结合蛋白(cytoplasmic polyadenylation element binding protein,CPEB)是一种mRNA结合蛋白,在无脊椎动物和脊椎动物中发挥着重要生物功能。文章就其结构及相关生物学功能进行了综述,总结了它在mRNA翻译抑制与激活、卵子发生、细胞衰老、发育、神经细胞突触可塑性等方面的研究成果,并对相关生物学事件的分子机制进行了探讨。最后对CPEB蛋白的研究前景进行了展望。

脑胶质瘤中胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4的表达情况及其对胶质瘤细胞生长的影响

目的观察脑胶质瘤中胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4(CPEB4)的表达情况,以及CPEB4对胶质瘤细胞U87生长的影响。方法测定脑胶质瘤和脑组织中CPEB4蛋白含量。测定细胞中CPEB4蛋白表达、细胞增殖、细胞凋亡和细胞周期及CPEB4、PIK3CA、IGF2、SMAD3、IDH1和AKT1 mRNA的表达。结果低级别脑胶质瘤组织和高级别脑胶质瘤组织中CPEB4蛋白阳性表达率高于正常脑组织(P<0.05),高级别脑胶质瘤组织中CPEB4蛋白阳性表达率高于低级别脑胶质瘤组织(P<0.05)。低级别脑胶质瘤组织和高级别脑胶质瘤组织中CPEB4蛋白水平高于正常脑组织(P<0.05),高级别脑胶质瘤组织中CPEB4蛋白水平高于低级别脑胶质瘤组织(P<0.05)。转染后24 h,CPEB4-shRNA组U87细胞中CPEB4蛋白水平低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。培养第3天和第7天,CPEB4-shRNA组细胞的A490值低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。CPEB4-shRNA组早期细胞凋亡率明显高于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。CPEB4-shRNA组G1期细胞明显高于阴性对照组和空白对照组(P<0.05),S期细胞明显低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。CPEB4-shRNA组CPEB4 mRNA、PIK3CA mRNA、IGF2 mRNA和SMAD3 mRNA相对表达量均低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。结论 CPEB4在脑胶质瘤中高表达,CPEB4参与脑胶质瘤细胞的生长,CPEB4对脑胶质瘤细胞的影响可能和CPEB4、PIK3CA、IGF2和SMAD3水平有一定关系。

环腺苷酸反应元件结合蛋白3样蛋白1在骨肉瘤组织的表达及其临床意义

目的分析环腺苷酸反应元件结合蛋白3样蛋白1(CREB3L1)在骨肉瘤中的表达,探究CREB3L1在骨肉瘤中的作用及临床意义。方法收集2019年9月至2021年12月于郑州大学第一附属医院骨科住院并接受手术治疗的骨肉瘤患者组织5例,采用转录组测序分析差异表达基因;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测CREB3L1在另外12对匹配的骨肉瘤和癌旁组织中的表达;IHC验证CREB3L1表达;采用Kaplan-Meier方法分析公共数据中骨肉瘤队列中CREB3L1和患者预后的关系。组间比较采用t检验。结果对临床采集的5对匹配骨肉瘤和正常骨组织进行转录组测序分析。比较分析共发现1809个差异表达基因(|FC|>1.5,P<0.01),其中有1111个基因在骨肉瘤组织中表达升高,697个基因在骨肉瘤组织中表达下调;基因富集分析结果显示,差异表达的基因主要涉及细胞外基质组织、胶原蛋白分解代谢、细胞黏附等信号通路。参与胶原蛋白生物合成、修饰和降解,细胞外基质胶原纤维形成等多个通路的基因在骨肉瘤中显著富集,其中CREB3L1等在骨肉瘤中表达升高明显。RT-qPCR分析匹配的骨肉瘤及对应正常骨组织中CREB3L1的mRNA表达表明(n=12),大部分标本中(9/12)CREB3L1在骨肉瘤中的表达明显高于对应的正常骨组织(4.408±3.230比1.000±0.000,t=2.256,P<0.05);IHC表明,CREB3L1在骨肉瘤细胞核与细胞质的表达高于正常骨组织(细胞质:2.750±1.290比1.750±0.683,t=2.739,P<0.05;细胞核:2.125±0.806比1.250±0.775,t=3.130,P<0.01);Kaplan-Meier生存分析表明,CREB3L1的表达与骨肉瘤患者的总体生存率、无转移生存率负相关(P<0.01,P<0.001);通过比较有和无肺转移患者病例中CREB3L1细胞核IHC评分,CREB3L1在有肺部转移肿瘤细胞核内表达量高于非转移者(2.500±0.527比1.700±0.949,t=2.331,P<0.05)。结论CREB3L1在骨肉瘤中表达升高且与患者较差的生存预后密切相关。