大鼠Notch1胞质段的克隆及其表达

Notch 1信号途径参与决定细胞命运 ,其水解后产生的活性片段———胞质段 (Notch 1intracellularcytoplasmicdomain ,NICD)能被转运进核 ,激活下游靶基因的表达 .Notch 1参与细胞的增殖、分化、程序性死亡、发育过程中的形态发生和器官形成等许多重要过程 .为了获得重组的NICD ,以大鼠脑cDNA文库为模板 ,用PCR方法扩增出编码NICD的基因片段 ,克隆至谷胱甘肽 S 转移酶 (GST)融合表达载体pGEX KG中 ,并在大肠杆菌中获得较高水平的表达 .表达的融合蛋白GST NICD分子质量约为 12 0ku左右 ,以包涵体和可溶性两种形式存在 ,易于亲合层析纯化 .为制备抗体和进一步的功能研究奠定了基础 .

人红细胞带3蛋白胞质段的克隆及其表达

人红细胞带３ 蛋白胞质段（ｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃｄｏｍａｉｎ ｏｆ ｂａｎｄ ３，ｃｄｂ３） 起着将膜与膜骨架、细胞内环境相联系的重要作用．以带３ 蛋白全长基因为模板， 用ＰＣＲ方法扩增出ｃｄｂ３ 片段， 克隆至ｐＲＳＥＴ表达质粒上， 转化大肠杆菌ＢＬ２１ （ＤＥ３） ． 转化菌经诱导表达出较高含量的ｃｄｂ３ 蛋白， 纯化后，