髓过氧化物酶-抗中性粒细胞胞质抗体相关性血管炎患者血清IgG4及Th1/Th2细胞因子检测分析

目的了解髓过氧化物酶(MPO)-抗中性粒细胞胞质抗体相关性血管炎(AAV)患者血清中IgG4及辅助性T细胞(Th)1/Th2细胞因子的表达情况。方法收集苏州大学附属第二医院50例AAV患者及40例同期健康体检者的血清样本,采用免疫比浊法测定IgG水平,采用ELISA法测定IgG4水平,采用流式细胞术微球阵列(CBA)技术检测血清中Th1/Th2细胞因子的水平,比较两组样本上述指标的差异,分析不同指标之间的相关性。结果共收集到50例AAV患者血清样本,其中MPO-AAV患者40例(80.0%)。MPO-AAV组血清IgG4水平为(1.13±0.33)g/L,IgG4/IgG比值为0.094±0.032,IL-4水平为(2.54±0.68)pg/mL,IL-6水平为15.22(8.83,59.52)pg/mL,均高于健康体检者[IgG4水平为(0.80±0.27)g/L,IgG4/IgG比值为0.070±0.028,IL-4水平为(1.96±0.60)pg/mL,IL-6水平为4.95(2.82,13.25)pg/mL],差异均有统计学意义(P均<0.01),且MPOAAV患者血清IgG4水平与IL-6水平呈正相关(r_(s)=0.508,P<0.05)。结论我院AAV患者中MPO-AAV比例较高。MPO-AAV患者血清中IgG4水平及IL-4、IL-6水平均升高,且IgG4升高与IL-6升高呈正相关,提示IgG4的升高与MPO-AAV患者Th1/Th2细胞因子平衡失调有关。

缺氧肾小管上皮细胞Rab7/Caveolin-1/MMP-2轴失调促进肾纤维化

目的:研究肾纤维化晚期Ras相关GTP结合蛋白7(Ras-related GTP binding protein 7,Rab7)可否通过小窝蛋白-1(Caveolin-1)的介导调节基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2, MMP-2)的活性,从而对肾纤维化产生影响。方法:通过单侧输尿管结扎(unilateral ureteral obstruction, UUO)法构建C57BL/6小鼠肾纤维化模型,检测肾纤维化组织中缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α, HIF-1α)、Rab7和Caveolin-1的表达以及MMP-2的活性。利用肾小管上皮细胞株(HK-2)进行体外实验,构建HK-2 Rab7-shRNA细胞,将HK-2和HK-2 Rab7-shRNA细胞分别进行常氧和缺氧培养,并检测各组中HIF-1α、Rab7、Caveolin-1的表达和MMP-2的活性,以及纤维化相关指标I型胶原(Collagen-1)、波形蛋白(Vimentin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)的表达。结果:利用小鼠UUO模型发现,相较正常肾脏组织,肾纤维化组织中Rab7和Caveolin-1的表达均上调,而MMP-2的活性反而下降。进一步体外实验显示,在HK-2细胞中Rab7下调后可通过抑制Caveolin-1的表达进而提高MMP-2的活性,并会使Collagen-1、Vimentin和α-SMA等反映纤维化的指标表达下调。结论:Rab7与MMP-2的活性密切相关;Rab7对MMP-2活性的调节通过Caveolin-1介导;当Rab7表达受抑后,可促进肾纤维化的缓解。

Rac1、Cdc42在肿瘤方面的研究

近年来对Rho家族蛋白的研究进展很快,其中以RhoA、Rac1、Cdc42最为人们所关注。这些小分子量G蛋白具有GTP酶活性,参与细胞周期调控和基因转录的调节。在调节细胞骨架、细胞运动、细胞凋亡、细胞恶性转化及肿瘤的浸润、转移等方面发挥重要作用。

ASAP1蛋白在乳腺癌中的表达及临床意义

目的检测乳腺癌组织中ADP核糖基化因子GTP酶活化蛋白1(ASAP1)蛋白的表达,探讨ASAP1与乳腺癌发生的相关性,为乳腺癌的防治寻找新的靶点。方法采用单纯随机抽样选取2008年6月至2012年6月武汉市汉口医院就诊乳腺癌患者41例,进行免疫组织化学检测并分析乳腺癌组织中增殖细胞相关核抗原Ki67、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和人表皮生长因子受体2(HER2)的表达与ASAP1的相关性;比较不同转移能力乳腺癌细胞株中ASAP1与HER2水平;检测RNA干扰抑制ASAP1对MDA-MB-231细胞中血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的影响,对照组MDA-MB-231细胞培养体系中加入阴性对照干扰小RNA。结果免疫组织化学显示乳腺癌组织中HER-2的表达与ASAP1无相关性(P=0.803),Ki67和MMP-2的表达与ASAP1有显著相关性(P=0.035;P=0.013);免疫印迹显示高侵袭力乳腺癌细胞中ASAP1高表达,低侵袭力乳腺癌细胞ASAPI呈弱表达(P<0.01),HER-2的表达与ASAP1无相关性(P>0.05);RNA干扰抑制MDA-MB-231细胞中ASAP1的表达,VEGF水平显著低于对照组(P<0.01)。结论乳腺癌组织中ASAP1的表达与肿瘤细胞的增殖和转移存在相关性,ASAP1有望成为乳腺癌的治疗靶点。

尿急性肾损伤标志物与抗中性粒细胞胞浆抗体相关性肾炎预后相关性研究

目的分析尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)及肾脏损伤分子-1(kidney injury molecule-1,KIM-1)与抗中性粒细胞胞浆抗体(anti-neutrophil cytoplasmic antibody,ANCA)相关性肾炎(ANCA associated glomerulonephritis,AAGN)严重程度及预后的关系。方法回顾2009年4月至2013年11月间南京军区南京总医院肾脏科住院的69例AAGN患者,其中抗过氧化物酶抗体阳性61例,抗蛋白酶3抗体阳性8例,肾活检进行病理分型及肾小管间质炎症细胞浸润和肾间质纤维化及肾小管萎缩半定量积分。尿NGAL及KIM-1采用ELISA方法检测,Spearman检验分析尿NGAL及KIM-1与肾脏损害指标(血肌酐、尿蛋白及血白蛋白)的关系,采用Mann-Whitney检验比较组间差异,分析尿NGAL及KIM-1与肾小管病变评分及肾脏预后的关系。结果69例AAV肾脏病理类型:局灶型14例,新月体型26例,混合型29例。基线肌酐:276.69(47.74~1193.40)μmol/L,24 h尿蛋白定量1.61(0.11~9.78)g。3种病理类型之间尿NGAL及KIM-1差异无统计学意义。尿NGAL与尿蛋白及Scr呈正相关(r值分别为0.3242、0.3257,P分别为0.0095、0.0081),与血清白蛋白呈负相关(r=-0.3964,P=0.0009)。尿KIM-1与血清白蛋白呈负相关(r=-0.2539,P=0.0413),但与血肌酐及尿蛋白无相关性。尿KIM-1与肾间质浸润细胞程度相关,差异有统计学意义(P=0.0413)。尿NGAL与肾间质浸润细胞程度无相关性。45例随访24(14~58)个月,13例进入终末期肾脏疾病者基线尿NGAL高于未进入终末期肾脏疾病者[(117.6(3.06~518.4)μg/L对28.86(2.17~461.5)μg/L,P=0.0372)],多因素COX回归分析示尿NGAL为不良肾脏预后的独立危险因素(HR 1.012,95%CI 1.001~1.022,P=0.033)。结论尿NGAL水平反映AAGN的严重程度,为不良肾脏预后的独立危险因素,而KIM-1与间质浸润细胞程度相关。

衣被蛋白复合物Ⅱ在RNA病毒增殖过程中的作用

细胞内膜系统在病毒蛋白及病毒颗粒合成、组装以及释放过程中发挥着重要作用。衣被蛋白复合物Ⅱ(COPⅡ)介导细胞内顺向运输,即负责从内质网到高尔基体的物质运输,多种RNA病毒会利用COPⅡ通路和(或)COPⅡ组分为其生命周期服务。该文就COPⅡ在RNA病毒增殖过程中发挥的作用及其研究进展进行综述。