胡桃楸提取物对S_(180)肉瘤的抑制作用及机制

目的:研究胡桃楸提取物(JMME)对小鼠S180肉瘤的抑制作用及其免疫调节作用。方法:对3组荷瘤鼠(每组10只)用0.023、0.045和0.090 g.kg-1.d-1JMME灌胃给药,同时设阴性对照组和阳性对照组,检测JMME对小鼠体内移植性肿瘤S180肉瘤的抑瘤率;以细胞培养观察JMME对S180细胞生长的抑制作用;MTT法观察JMME对肿瘤坏死因子(TNF)活性和白细胞介素2(IL-2)诱生水平的影响。结果:JMME具有明显的抑制肿瘤的作用,不同浓度的抑瘤率分别为32%、43%和56%,与阴性对照组比较差异有显著性(P<0.05);对体外培养的肿瘤细胞增殖抑制率可高达60.10%,与对照组比较差异有显著性(P<0.05);TNF活性及IL-2诱生水平较对照组明显增高(P<0.05);。结论:JMME具有显著抑制肿瘤的作用,其抑瘤作用机制是抑制肿瘤细胞的增殖并调节机体的免疫功能。

胡桃楸提取物对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬弓形虫功能的影响

目的探讨胡桃楸提取物(JMME)对小鼠腹腔巨噬细胞(mouse peritoneal macrophage,MPM)吞噬弓形虫功能的影响。方法对3组实验鼠(每组10只)分别以0.068、0.135和0.278g/(kg.d)浓度的JMME每日两次灌胃给药,连续3d,然后收集小鼠腹腔巨噬细胞,通过观察单位时间内巨噬细胞吞噬弓形虫速殖子的个数,计算巨噬细胞的吞噬百分率及吞噬指数。同时设生理盐水(NS)和乙酰螺旋霉素(SM)各1组为阴性和阳性对照组。结果JMME不同浓度组的巨噬细胞吞噬率和吞噬指数分别为(84.7±2.1)%、(89.4±2.3)%、(95.8±2.5)%及4.80±0.10、5.17±0.12和5.22±0.10,与NS组(73.0±3.8)%和0.95±0.12比较差异有统计学意义(P<0.01),与SM组(91.2±2.4)%和5.07±0.23比较,差异有统计学意义(P<0.05);实验组组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。巨噬细胞吞噬率和吞噬指数均随JMME浓度增加而提高。结论JMME具有增强巨噬细胞吞噬弓形虫的功能。

胡桃楸提取物抗弓形虫作用的体外实验和超微研究

目的了解胡桃楸提取物(JMME)在体外杀灭弓形虫速殖子的作用效果及其机制。方法收集感染弓形虫小鼠腹水并稀释至含虫1×107个/ml,加入胡桃楸提取物使其终浓度为60μg/ml、30μg/ml、15μg/ml、7.5μg/ml、3.25μg/ml、1.625μg/ml;乙酰螺旋霉素为阳性对照组,终浓度25μg/ml,同时设培养液阴性对照组。用MTT法测定胡桃楸提取物及其含药血清对虫体增殖情况的影响。应用透射电镜观察药物作用24h虫体超微结构的变化并拍照。结果胡桃楸提取物可明显抑制弓形虫增殖,且具有剂量依赖性,浓度大于30μg/ml的抑虫效果优于乙酰螺旋霉素组(P<0.05)。胡桃楸提取物含药血清对弓形虫具有明显的增殖抑制作用,且随含药血清浓度的增加作用效果增强,JMME浓度为0.278g/(kg.d)的含药血清抑虫效果优于SM组(P<0.05)。透射电镜下可观察到虫体电子密度增高、大量空泡形成、细胞器被破坏、细胞膜破裂、内容物溢出。结论胡桃楸提取物对弓形虫具有明显的增殖抑制和破坏作用。

胡桃楸提取物对体外白念珠菌生物膜形成的影响

目的研究胡桃楸提取物对白念珠菌生物膜形成的影响。方法采用甲基四氮盐(XTT)还原法评价胡桃楸提取物对白念珠菌的生物膜形成及黏附性的影响。镜下观察胡桃楸提取物对白念珠菌生物膜的形态学影响。结果胡桃楸提取物抑制白念珠菌生物膜50%及90%的最小抑制药物浓度(SMIC50、SMIC90)分别为15.2μg、23.4μg。胡桃楸提取物作用浓度大于20μg时对该菌细胞黏附有抑制作用。30μg胡桃楸提取物可完全抑制白念珠菌生物膜的形成。结论胡桃楸提取物对体外白念珠菌生物的膜形成有较强的抑制作用。

胡桃楸提取物对白色念珠菌细胞增殖的影响

目的:探讨胡桃楸提取物对白色念珠菌细胞增殖的影响。方法:收集经胡桃楸提取物作用相应时间的白色念珠菌,制备菌悬液,碘化丙啶(PI)染色后流式细胞术(FCM)检测其细胞周期。结果:与空白对照比较,10、20、40μg/ml胡桃楸提取物浓度组白色念珠菌G0/G1期细胞比例显著升高(P<0.01),增殖指数明显降低(P<0.01);不同胡桃楸提取物浓度组之间比较,白色念珠菌G0/G1期细胞比例和增殖指数差异显著(P<0.01)。结论:胡桃楸提取物可抑制白色念珠菌细胞增殖。

胡桃楸提取物治疗小鼠弓形虫感染的实验观察

目的了解胡桃楸提取物(JMME)治疗小鼠弓形虫感染的作用。方法建立弓形虫感染小鼠模型。将弓形虫感染的小鼠分成5组,分别以0.090、0.045和0.023mg/(kg.d)的JMME灌胃治疗,1次/d,疗程12d,同时设乙酰螺旋霉素(SM)治疗组和生理盐水(NS)对照组,观察各组小鼠的生存情况,弓形虫在小鼠体内的分布,计算胸腺指数和脾指数,MTT法测定淋巴细胞转化能力。结果JMME高、中、低剂量治疗均能推迟弓形虫感染小鼠的死亡时间,JMME低剂量治疗组和SM治疗组小鼠30d存活率分别为20.0%和15.0%,差异有统计学意义(P<0.05)。弓形虫在小鼠体内的分布以腹水居多,密度NS组高于各治疗组,肝、脾组织内弓形虫也以NS组居多。治疗后感染鼠体内的弓形虫未出现远端播散,除NS组外,其他各组脑组织内均未查到虫体。JMME高、中、低三剂量治疗组小鼠的胸腺指数分别为2.44±0.45、2.43±0.58和2.36±0.47,与NS组1.74±0.83比较差异有统计学意义(P<0.05);脾指数分别为4.35±0.42、4.41±0.25和4.43±0.13,与NS组3.17±0.06比较差异有统计学意义(P<0.05);淋巴细胞转化A570值分别为0.535±0.028、0.512±0.043和0.498±0.024,与NS组0.318±0.027比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论JMME对小鼠弓形虫感染有一定的治疗作用。

胡桃楸树皮提取物对SMMC-7721、MCF-7和A549肿瘤细胞的抑制作用及其机制

目的:观察胡桃楸树皮提取物(JMME)对SMMC-7721、MCF-7和A549 3种肿瘤细胞的生长抑制作用,确定其抑瘤的药用价值,通过检测JMME诱导肿瘤细胞凋亡、抑制端粒酶活性变化阐述其抑瘤机制。方法:分别以25、50、100、200、400和800 mg.L-1JMME作用于体外培养的SMMC-7721、MCF-7和A549肿瘤细胞72 h,采用MTT法检测生长抑制率;以200 mg.L-1JMME作用于体外培养的SMMC-7721、MCF-7和A549,于倒置显微镜下观察细胞形态学变化;琼脂糖凝胶电泳法检测细胞凋亡;PCR-ELISA法检测端粒酶活性。结果:不同浓度JMME(25、50、100、200、400和800 mg.L-1)对SMMC-7721的细胞生长抑制率(%)分别为13.06、21.77、29.88、41.74、69.82和78.08;对MCF-7的抑制率(%)为24.91、38.63、49.72、61.84、65.69和81.28;对A549的抑制率(%)为12.32、26.21、41.65、55.38、62.87和80.13;与对照组比较,JMME各浓度作用的3种肿瘤细胞的生长抑制率均升高(P<0.05),抑制率随JMME对SMMC、MCF-7和A549细胞的浓度的增加而增高(P<0.05)。JMME对SMMC、MCF-7和A549细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为211.21、111.07和176.20 mg.L-1,对MCF-7的IC50小于其他两种瘤细胞株。经不同浓度JMME作用单位视野内细胞数量明显减少,细胞间隙增大,细胞体积明显缩小,细胞失去原有的形态,胞体皱缩变圆,出现膜发泡现象,对照组无此变化。提取DNA进行琼脂糖凝胶电泳,见DNA Ladder,表明3种肿瘤细胞经不同浓度JMME作用后出现不同程度凋亡。3种肿瘤细胞与阴性对照组比较端粒酶活性升高,而经过JMME作用后端粒酶活性均受到了抑制,抑制率分别为42.86%、73.30%和58.78%。结论:胡桃楸树皮提取物在体外有抗肿瘤活性,其机制可能与其诱导肿瘤细胞凋亡?抑制端粒酶活性有关。