胡椒碱-双环酰胺衍生物的设计、合成及抗宫颈癌活性

以胡椒碱为母核进行结构改造,合成了一系列胡椒碱-双环酰胺衍生物;并用核磁共振氢谱(1H NMR),核磁共振碳谱(^(13)C NMR)和高分辨质谱(HRMS)进行了结构确证.噻唑蓝(MTT)比色法测试结果表明,目标化合物对肾细胞(293T)、宫颈癌(HeLa)和乳腺癌(MDA-MB-321)细胞有良好的抑制活性,大多数衍生物对HeLa细胞的抑制活性优于阳性对照药5-氟尿嘧啶(5-FU)和胡椒碱.化合物6b对HeLa细胞的抗增殖活性最高,半数抑制浓度(IC_(50))为3.49μmol/L,对MDA-MB-321细胞的IC50值为20.89μmol/L.机理研究发现,化合物6b不仅可有效抑制HeLa细胞的迁移、侵袭、黏附和克隆能力,而且对HeLa细胞肿瘤异种移植物的生长表现出强烈的抑制作用.因此,化合物6b有可能成为肿瘤治疗中潜在的先导化合物.

胡椒碱逆转氟西汀所致骨破坏作用的实验研究

目的针对氟西汀的骨破坏作用,研究胡椒碱与其联用的骨保护作用并探讨作用机制。方法建立SD大鼠去卵巢模型,分别灌胃给予雌二醇、氟西汀、胡椒碱及氟西汀与胡椒碱联用处理共8周。双能X射线吸收法测量骨密度;microCT检测骨微观结构;三点弯曲检测骨生物力学性能;ELISA法检测血清骨转换生化指标。培养大鼠原代成骨细胞,检测药物处理对细胞成骨分化及矿化的影响。结果与去卵巢组比,雌二醇及胡椒碱明显提高骨密度和生物力学性能,并改善骨小梁微观结构;给予氟西汀后,骨密度、骨生物力学性能和骨小梁微观结构进一步恶化,并加速骨转换;胡椒碱与氟西汀联用后,能明显减少氟西汀对骨的破坏作用。氟西汀明显降低原代成骨细胞的分化和矿化能力;胡椒碱明显提高其成骨分化。结论氟西汀引起去卵巢大鼠骨质进一步流失,其机制可能与抑制成骨细胞分化及矿化相关,氟西汀与胡椒碱联用可逆转氟西汀对骨的破坏作用。

基于脂质组学研究胡椒碱对肥胖大鼠脂代谢基因昼夜节律的影响

采用高脂饮食(high fat diet,HFD)诱导的肥胖大鼠模型,探究口服胡椒碱(1-piperoylpiperidine,PIP)对代谢紊乱引发生物钟异常的调控作用。结果表明,PIP减轻了HFD诱导的肝脏损伤,降低了血脂水平,缓解了肝脏生物钟和脂代谢基因的昼夜节律紊乱,恢复了与生物钟密切相关的脂质分子溶血磷脂酸(16:0_18:1)、双甲基磷脂酸(38:8e)、磷脂酰乙醇胺(16:0p_22:6)和甲基磷胆碱(32:4e)的表达水平变化。本研究结果可为PIP调节肝脏脂代谢昼夜节律提供一定的理论依据。

新型AChE抑制剂胡椒碱衍生物对阿尔茨海默病小鼠的治疗作用评价

目的研究胡椒碱衍生物4a对乙酰胆碱酯酶的抑制活性及对阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)小鼠的神经保护的作用。方法雄性C57BL/6J小鼠30只,随机分:(i)空白对照组,(ii)模型组,(iii)多奈哌齐(10 mg·kg^(-1),阳性对照)组,(iv)4a低浓度(20 mg·kg^(-1))组,(v)4a高浓度(40 mg·kg^(-1))组。iii至v组,小鼠给药东莨菪碱(3 mg·kg^(-1))30 min后,口服多奈哌齐和4a,连续10 d,Morris水迷宫实验观察由东莨菪碱诱导的认知功能障碍小鼠的记忆功能。体外实验采用硫黄素-T(ThT)荧光法测定溶液中Aβ的聚集能力,Western blot测定Tau蛋白磷酸化表达,并对化合物4a进行了抑制乙酰胆碱酯酶的动力学研究。结果化合物4a有效抑制AChE活性、Aβ的聚集和Tau蛋白的过度磷酸化,几乎使受损小鼠恢复正常的认知能力。结论化合物4a认为是一种潜在的治疗AD的候选化合物。

亚糊化热处理对玉米淀粉-胡椒碱复合物功能特性的影响

为探究在亚糊化温度下胡椒碱负载于玉米淀粉对其结构和理化特性的影响,本研究选用玉米淀粉在60℃下制备亚糊化玉米淀粉-胡椒碱复合物,并通过扫描电镜、快速糊化粘度测定仪、差示扫描量热、傅里叶变换红外光谱和X射线衍射等进行了表征。结果表明,胡椒碱成功负载到亚糊化玉米淀粉上,负载率为39.45%;扫描电镜结果显示淀粉颗粒膨胀的裂隙内部成功负载胡椒碱,粒径从天然玉米淀粉的15.20μm增大到亚糊化玉米淀粉的25.80μm,再到亚糊化玉米淀粉-胡椒碱复合物的81.90μm;胡椒碱的加入降低了亚糊化玉米淀粉的峰值粘度和谷值粘度;复合物红外光谱未产生新的基团或化学键,但胡椒碱的加入增强了玉米淀粉与胡椒碱的分子内和分子间氢键作用;X-射线衍射表明相对结晶度从天然玉米淀粉的23.52%升高到亚糊化玉米淀粉-胡椒碱复合物的28.15%,但是亚糊化处理未改变玉米淀粉的晶型结构;与天然玉米淀粉相比,亚糊化玉米淀粉和亚糊化玉米淀粉-胡椒碱复合物的凝胶焓值显著(P<0.05)降低。亚糊化玉米淀粉负载胡椒碱,胡椒碱的加入对亚糊化玉米淀粉的结构影响较小,但对其理化性质产生了显著的影响,并为淀粉与胡椒碱之间的相互作用和复合机理提供重要依据。

共载姜黄素与胡椒碱纳米结构脂质载体的体外释放研究

目的 制备姜黄素/胡椒碱纳米结构脂质载体(CP-NLCs)并对其外观性状、包封率、载药量和体外药物释放进行考察。方法 本研究使用乳化蒸发-高压均质法制备CP-NLCs,并对制备的CP-NLCs进行质量评价,包括利用透射电镜对CP-NLCs的外观形态进行观察;Malvern激光粒度仪测定CP-NLCs的粒径、Zeta电位和多分散系数(PDI);采用超滤离心法测定CP-NLCs的包封率和载药量;利用正向动态透析法研究CP-NLCs以及姜黄素、胡椒碱溶液的体外释放行为。结果 测得CP-NLCs外观为类球状颗粒,平均粒径为38.59 nm,PDI为0.217,Zeta电位为-6.86 mV。CP-NLCs中姜黄素的包封率为(99.48±0.41)%,载药量为(13.26±0.06)%;胡椒碱的包封率为(97.28±0.19)%,载药量为(6.48±0.13)%。体外释放实验显示姜黄素溶液在48 h释放69.30%,胡椒碱溶液在24 h释放68.86%,而CP-NLCs中的姜黄素在48 h内累积释放86.02%,CP-NLCs中的胡椒碱在24 h内累积释放90.35%。结论CP-NLCs粒径较小,包封率、载药量较高,具有一定的缓释作用,并能显著增加难溶性药物的释放量。

含1,3,4-噁二唑片段的胡椒碱类衍生物合成及杀螨活性

为了开发基于天然产物的新型杀螨剂,以胡椒碱为先导化合物,设计并合成了26个含1,3,4-噁二唑杂环的胡椒碱类衍生物8a~8z,并经核磁共振氢谱(或碳谱)、红外光谱和高分辨质谱确证其结构。化合物8g通过X-射线单晶衍射确定其空间构型。采用玻片浸渍法测定了系列化合物对朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus Boisduval雌成螨的触杀活性。结果表明:化合物8m(LC_(50):0.41 mg/mL)、8r(LC_(50):0.36 mg/mL)及8u(LC_(50):0.32 mg/mL)表现出良好的杀螨活性,其活性分别为胡椒碱(LC_(50):15.64 mg/mL)的38.1、43.4及48.9倍,且化合物8u在0.3 mg/mL质量浓度下对朱砂叶螨有较好的室内防治效果,施药后第5天的防治效果为61.8%。构效关系分析发现:在胡椒碱C2位引入1,3,4-噁二唑杂环有利于提高其杀螨活性,且杀螨活性与噁二唑苯环上的取代基密切相关。

基于miRNA-132信号通路探究胡椒碱对肝癌血管形成及肿瘤抑制作用

目的:基于miRNA-132信号通路探究胡椒碱对肝癌血管形成及肿瘤抑制作用。方法:制备肝癌细胞转移瘤,将裸鼠分为空白组(不制备肝癌裸鼠模型)、模型组(肝癌小鼠模型组)、胡椒碱组(肝癌小鼠模型给予胡椒碱干预组)、miR-132组(肝癌小鼠模型给予miR-132类似物组)、联合组(肝癌小鼠模型给予胡椒碱联合miR-132类似物组)。比较各组裸鼠的瘤体积和肿瘤抑制率;比较肿瘤组织病理学变化;用ELISA检测血清中血管内皮生长因子(VEGF)含量;比较微血管密度(MVD)数量;用蛋白质印迹法检测肝组织中miR-132、GP73表达。结果:和模型组相比,miR-132组、胡椒碱组和联合组裸鼠的瘤体积均显著降低,且联合组瘤体积较胡椒碱组和miR-132组降低更明显(P<0.05)。和模型组相比,miR-132组、胡椒碱组和联合组裸鼠肿瘤生长抑制率显著增加(P<0.05);联合组裸鼠的肿瘤生长抑制率明显高于miR-132组和胡椒碱组(P<0.05)。模型组裸鼠血清中VEGF含量和MVD数量和空白组相比显著增加(P<0.05);和模型组相比,miR-132组、胡椒碱组和联合组裸鼠血清中VEGF含量和MVD数量均显著减少,且联合组血清中VEGF含量和MVD显著低于胡椒碱组(P<0.05)。和空白组相比,模型组裸鼠肝组织中miR-132表达显著降低,GP73蛋白表达显著增加(P<0.05);和模型组相比,miR-132组、胡椒碱组和联合组裸鼠肝组织中miR-132表达均明显增加,GP73蛋白表达均显著降低,且联合组中miR-132和GP73表达变化最大(P<0.05)。双荧光素酶检测报告结果显示,过表达miR-132可降低GP73活性(P<0.05)。结论:胡椒碱可通过调控miR-132负向调控GP73抑制肝癌血管形成,同时也能显著抑制肿瘤的生长。

UPLC同时检测姜黄素-胡椒碱纳米混合胶束中姜黄素和胡椒碱的含量

文章采用了同时测定姜黄素-胡椒碱纳米混合胶束中姜黄素和胡椒碱含量的超高效液相色谱(UPLC)分析方法。超高效液相色谱法,Waters BEH C_(18)(2.1×100 mm,1.7μm)色谱柱;流动相为乙腈;检测波长为430 nm(姜黄素)、343 nm(胡椒碱);流速为0.15 m L·min^(-1);进样量为1μL,柱温为30℃。姜黄素和胡椒碱的线性范围分别为12.41~198.6μg·m L^(-1)(r=0.9999)和0.62~9.9μg·m L^(-1)(r=0.9999);平均回收率分别为99.77%和99.82%,S_(RSD)分别为0.10%和0.17%。该方法分析速度快、灵敏度高、准确性高、重复性好,结果准确、可靠,可用于姜黄素-胡椒碱纳米混合胶束中姜黄素和胡椒碱含量的测定。

胡椒碱及其衍生物3,4-次甲二氧桂皮酰哌啶的抗抑郁作用

目的研究胡椒碱及其衍生物3,4次甲二氧桂皮酰哌啶的抗抑郁作用,并对其作用机理进行初步探讨。方法利用小鼠强制游泳实验、悬尾实验等考察胡椒碱和3,4次甲二氧桂皮酰哌啶的抗抑郁作用,并通过测定不同脑区内单胺类神经递质质量浓度以及全脑单胺氧化酶活性变化,探讨作用机制。结果胡椒碱和3,4次甲二氧桂皮酰哌啶(10、20 mg.kg-1)长期给药后,能明显缩短小鼠在行为学实验中的不动状态时间,并且该作用随剂量增大效应逐渐降低,高剂量(80 mg.kg-1)表现出明显的中枢神经抑制作用;能显著提高脑内5羟色胺水平,而对脑内肾上腺素递质水平未见明显影响;具有较弱的单胺氧化酶抑制作用。结论胡椒碱和3,4次甲二氧桂皮酰哌啶具有较好的抗抑郁作用,其作用是通过上调中枢神经系统5羟色胺或多巴胺水平实现的。

基于正交实验法优化从荜茇中提取胡椒碱的工艺

基于正交实验,优化胡椒碱提取工艺并建立HPLC测定胡椒碱含量的方法。以荜茇为原料,在单因素实验设计的基础上,采用正交实验进行优化乙醇浓度、乙醇用量、提取时间及提取次数进行考察。胡椒碱的最佳提取工艺是65%乙醇,提取时间2 h,提取次数为3次,溶剂用量为6倍。胡椒碱在0.70~27.50μg/mL的范围内具有良好线性关系、相对标准偏差小于0.52%(n=5)、加标回收率为103.23%。胡椒碱的提取工艺合理、可行、胡椒碱的提取率较高,为荜茇的进一步开发提供了理论依据。

胡椒碱及其衍生物对SH-SY5Y细胞的保护作用研究

对胡椒碱进行结构改造,合成了4个胡椒碱衍生物。以高浓度皮质酮(corticosterone)模拟抑郁及焦虑症神经细胞损伤状态。对包括胡椒碱在内的5个化合物进行了SH-SY5Y细胞保护作用的研究。结果表明:胡椒碱、5-(3,4-methylenedioxy phenyl)-2E,4E-pentadienoic acid n-propylamine amide(2)以及5-(3,4-methylenedioxyphenyl)-2E,4E-pentadienoic acid N-methyl piperazine amide(4)对SH-SY5Y细胞有较好的保护作用。其中化合物2对SH-SY5Y细胞具有明显和持久的保护作用。

胡椒碱及其衍生物抗疲劳和心肌细胞保护作用研究

目的对胡椒碱母核结构修饰,并研究胡椒碱及其衍生物的抗疲劳和心肌保护作用。方法胡椒碱及其衍生物(胡椒酸乙酯,胡椒酸甲酯,四氢胡椒碱)的水溶液灌胃给药,通过小鼠力竭游泳实验,测定血浆肌酸激酶,血浆乳酸脱氢酶,血浆尿素氮,血乳酸,血糖等指标;采用异丙肾上腺素损伤原代培养乳鼠心肌细胞,通过MTT法检测心肌细胞存活率,探讨胡椒碱及其衍生物对心肌细胞的保护作用。结果胡椒碱及其衍生物的水溶液能明显的改善小鼠外周血血象,降低小鼠血清中尿素氮、肌酸激酶,血乳酸;其中四氢胡椒碱和胡椒酸甲酯对异丙肾上腺素损伤的心肌细胞有明显的保护作用。结论胡椒碱及其衍生物可以通过其抗疲劳作用和心肌保护作用,提高机体运动机能。

胡椒碱的光异构化研究

为探索胡椒碱的光致异构化规律,以纯胡椒碱为原料,采用不同辐照时间、辐照波长、光源等处理,HPLC检测胡椒碱及其3种异构体。结果表明:(1)辐照一定时间后,胡椒碱及其异构体相互转化并形成动态平衡;(2)365 nm紫外辐照对胡椒碱异构化的影响大于254 nm辐照;(3)不同光源处理时胡椒碱的损耗量相近,紫外辐照利于异胡椒碱和胡椒脂碱形成,日光灯照射利于异胡椒脂碱形成。

胡椒碱及其衍生物对小鼠的抗抑郁作用研究

目的以胡椒碱为母核进行结构修饰,观察胡椒碱及其衍生物5-(3',4'-次甲二氧苯基)-戊烯酰丙胺的抗抑郁活性。方法采用小鼠强制游泳实验、悬尾实验,观察胡椒碱和5-(3',4'-次甲二氧苯基)-戊烯酰丙胺对小鼠悬尾不动时间、游泳不动时间的影响。结果胡椒碱(10,20mg kg-1)和其衍生物5-(3',4'-次甲二氧苯基)-戊烯酰丙胺(10,20mg kg-1)给药后,均能明显缩短小鼠在行为学实验中的不动状态时间(P<0.01),且5-(3',4'-次甲二氧苯基)-戊烯酰丙胺较胡椒碱更为明显。结论胡椒碱和5-(3',4'-次甲二氧苯基)-戊烯酰丙胺具有明显的抗抑郁作用,且5-(3',4'-次甲二氧苯基)-戊烯酰丙胺的抗抑郁作用优于胡椒碱。

胡椒碱对中枢神经系统功能的影响

目的 研究胡椒碱对动物睡眠的影响及其抗惊厥作用。方法 小鼠开野实验 ;戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠实验 ;家兔睡眠时相分析 ;最大电休克发作实验 ;戊四唑发作阈值实验 ;鼠脑单胺类递质的测定。结果 胡椒碱可明显减少小鼠的自主活动 ,并明显的延长戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠时间 ,还能显著增加家兔的深睡眠。胡椒碱有很强的抗小鼠MES和对抗戊四唑引起的小鼠阵挛性发作的作用 ,并可明显增加小鼠脑内单胺类神经递质 5 HT的含量。结论 胡椒碱延长家兔的深睡眠和抗惊厥作用可能与其增加脑内 5

中药单体胡椒碱促进表皮黑素细胞黑素合成的实验研究

目的:研究中药单体胡椒碱对表皮黑素细胞黑素合成的影响,初步探讨胡椒碱影响表皮黑素细胞黑素合成的作用机制。方法:培养的表皮黑素细胞分别以系列浓度的胡椒碱作用24、72、120h,测定细胞增殖率、黑素含量,激光共聚焦显微镜观察并定量分析荧光染色后细胞内酪氨酸酶、酪氨酸酶相关蛋白酶(TRP)1、TRP2的表达情况。结果:胡椒碱呈浓度依赖性促进黑素合成,且作用72h时效果最明显。0.50mmol/L胡椒碱作用72h可促进表皮黑素细胞酪氨酸酶、TRP1的表达,而对TRP2的表达无明显影响。结论:中药单体胡椒碱可轻度抑制表皮黑素细胞的生长,明显促进表皮黑素细胞的黑素合成,其机制可能主要通过上调酪氨酸酶和TRP1的表达而发挥作用。

假蒟中胡椒碱的分离鉴定及杀虫活性研究

为进一步探讨假蒟的杀虫活性成分,采用生物活性示踪法从假蒟乙醇提取物中分离纯化出1种活性成分,其化学结构经MS、1H NMR、13C NMR分析鉴定为胡椒碱。以螺旋粉虱为供试对象,采用叶片浸渍法测试胡椒碱及假蒟乙醇提取物对螺旋粉虱成虫和若虫的毒杀活性及杀卵作用,结果表明:胡椒碱及乙醇提取物对螺旋粉虱成虫和若虫均具有很好的杀虫活性,对成虫LC50值分别为28.59、224.31 mg/L,对若虫的LC50值分别为65.91、336.68 mg/L,胡椒碱对成虫的毒力优于若虫,与对照药剂印楝素无显著性差异;其杀虫活性明显高于假蒟乙醇提取物;胡椒碱及乙醇提取物有一定的杀卵作用,但作用方式有所不同,胡椒碱对初孵幼虫有较高的致死率,而假蒟乙醇提取物则明显影响螺旋粉虱卵的孵化。

胡椒碱调节大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴抗抑郁作用的实验研究

目的:观察胡椒碱对慢性应激抑郁模型大鼠行为学和血清促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin-releasing hormone,CRH)、促肾上腺皮质激素(adrenocorticotrophic hormone,ACTH)和皮质酮(corticos-terone,CORT)含量的影响。方法:采用慢性轻度不可预见性应激结合孤养造模。Wistar大鼠60只分为空白对照组、模型组、地昔帕明(20mg/kg)组和低(5mg/kg)、中(10mg/kg)、高(20mg/kg)剂量胡椒碱组,每组10只。观察各组体质量以及糖水摄入量等行为学指标变化;放射免疫法检测血清中CRH、ACTH和CORT含量。结果:与模型组比较,中、高剂量胡椒碱给药后,能明显增加大鼠的糖水消耗量;低、中、高剂量胡椒碱对大鼠血清CORT含量无明显影响;各个剂量胡椒碱可对抗慢性应激损伤所引起的血清CRH和ACTH含量的增加。结论:胡椒碱具有较好的抗抑郁作用,其作用可能与其对下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响有关。

HPLC法同时测定蒙药通拉嘎-5中胡椒碱和荜茇宁的含量

目的建立同时测定蒙药通拉嘎-5中胡椒碱和荜茇宁含量的HPLC方法。方法采用C18ODS Hypersil ThermoDim(250 mm×4.6mm,5μm)色谱柱,以乙腈-水(50∶50)为流动相,流速为1 ml/min,进样量20μl,检测波长343 nm,在室温下测定。结果胡椒碱和荜茇宁分别在4～80μg/ml(r=0.9992)和0.25～12.50μg/ml(r=0.999)浓度范围内具有良好的线性关系,其平均回收率分别为99.6%和98.5%(n=5)。结论该方法便捷、准确和重现性好,可用于通拉嘎-5的质量控制。