浅析家禽胫骨发育不良的影响因素

禽类胫骨软骨发育不良(TD)在世界各国呈广泛分布,每年给禽类行业造成不可估量的经济损失。对TD产生的原因进行了概述,以期为禽类生产中预防此类疾病提供参考。

巴戟天多糖对肉鸡胫骨软骨发育不良治疗作用

胫骨软骨发育不良(TD)作为营养代谢性腿部疾病,常见于速成型家禽,该病以软骨内骨化受阻和胫骨干骺端软骨细胞异常增生形成无血管、未钙化、透明的“软骨楔”为特征,其临床主要表现为精神不振、食欲下降、生产性能降低、胫骨发育畸形、关节肿大等,并且对肉鸡生产性能及免疫功能造成损伤,还会导致继发性疾病的出现,严重威胁肉鸡的健康生长,同时也给全球肉鸡养殖行业带来巨大的经济损失。巴戟天多糖(MOP)是从巴戟天中提取的衍生物,其在自然界中广泛分布,具有抗氧化,抗疲劳、免疫调节、抗抑郁、促进血管生成、抗炎和促进骨骼形成的作用。本研究旨在探讨MOP对TD肉鸡的治疗作用,为MOP在肉鸡腿部疾病中的应用提供新的思路。

福美双对肉鸡生长性能和胫骨软骨发育不良组织病理学变化的影响

用160羽1日龄健康AA肉鸡进行试验,研究福美双对肉鸡生长性能和胫骨软骨发育不良组织病理学变化的影响。将试验肉鸡预饲1周后随机分为2组。对照组饲以基础日粮;试验组饲以基础日粮添加福美双100mg/kg饲料,4 d后继续饲以基础日粮。试验期23 d。在试验的第4、9、16、23天,计算平均日增重(ADG)和料重比(F/G);胫骨软骨发育不良(TD)评分,计算TD发病率,观察病理变化;并进行发病不同阶段组织病理学观察。结果表明,第4天试验组肉鸡TD发病率达到94.44%,料重比增加;第4和第9天肉鸡体增重显著下降,病理剖检症状典型。不同阶段组织病理学观察表明,福美双可促进软骨细胞极剧增殖,引起细胞大量死亡,挤压血管以致血管坏死,基质合成受阻,延缓软骨钙化,最终导致前肥大细胞大量聚集形成软骨栓。因此,对肉鸡短期饲喂福美双100mg/kg可显著影响AA肉鸡生长性能,提高TD发病率,引起与自然发生TD相同的形态学和组织病理学变化,是一个较为理想的研究TD发生发展、筛选各种微营养素预防TD的试验动物模型。

福美双对肉仔鸡肝功能和胫骨软骨发育不良的影响

研究了福美双对肉鸡胫骨软骨发育不良、血清相关酶活性、肝脏SOD、MDA及增重的影响。120只1日龄AA肉仔鸡随机分为3组,对照组、低浓度福美双组(50 mg/kg)、高浓度福美双组(100 mg/kg)。每组40只鸡,每组4个重复,每个重复10只鸡,试验进行28 d。结果表明,饲料中添加福美双可以显著提高肉鸡TD发病率(P<0.05),升高血清中AST、ALT和ALP的水平和肝脏MDA的含量(P<0.05),降低肝脏SOD水平和肉鸡的生产性能。福美双可能通过改变肝脏的抗氧化状态,损害肉仔鸡的肝脏功能,影响骨代谢的相关酶活性,导致肉仔鸡胫骨软骨发育不良的发生。

福美双诱导的肉鸡胫骨软骨发育不良软骨细胞凋亡

为研究肉鸡胫骨软骨发育不良(TD)软骨细胞的凋亡分布及凋亡相关基因的表达水平,将80羽1日龄健康AA肉鸡基础日粮饲养1周后,随机分为对照组和处理组,处理组饲喂添加100mg·kg-1福美双的日粮,采用HE染色和TUNEL法分别对肉鸡胫骨生长板软骨细胞的形态学和凋亡情况进行观察,同时采用Real-time PCR方法和免疫组化技术分别对软骨细胞中凋亡相关基因的mRNA转录水平及蛋白质表达水平进行检测。结果显示,福美双诱发TD后第1、2、4和6天,肉鸡生长板软骨栓形成逐渐增大,异常软骨细胞增加,TD病变区软骨细胞,尤其是肥大区软骨细胞凋亡程度明显增加。Real-time PCR检测结果显示,与对照组比较,TD生长板促凋亡基因Bax在试验第1、2、4和6天表达量极显著上调(P<0.01);Caspase-3在第1、2和4天表达量极显著增加(P<0.01);抗凋亡基因BAG-1表达下调,在试验第1和2天差异极显著(P<0.01)。免疫组化结果显示,第1和4天处理组Bax的蛋白表达量明显高于对照组。本研究提示肉鸡TD生长板软骨细胞凋亡与促凋亡基因的表达增强和抗凋亡基因的表达下降有关。

福美双诱发肉鸡胫骨软骨发育不良的组织病理学变化

120羽1日龄健康AA肉鸡预饲1周后随机分为2组,对照组饲以基础日粮,试验组饲以基础日粮添加100mg/kg福美双,进行了肉鸡胫骨长度、生长板厚度、肉鸡胫骨软骨发育不良(TD)指数及TD发病率等指标的检测,并进行了形态学和组织病理学观察。结果显示,患病鸡胫骨长度、生长板厚度和TD指数均有显著变化(P<0.01),TD发病率显著上升(P<0.05);病鸡胫骨近端的纵切面有玉白色楔状软骨团块深入干骺端甚至骨髓腔,呈现典型的胫骨软骨发育不良病理学变化。结果提示,100 mg/kg福美双可显著提高AA肉鸡TD发病率,并引起相应的组织病理学变化,为TD分子机理的研究提供了一个理想的实验动物模型。

福美双对肉鸡生产性能、血清相关酶活性及胫骨软骨发育不良的影响

将120只1日龄AA肉鸡随机分为对照组、低浓度福美双组(50mg/kg福美双)、高浓度福美双组(100mg/kg福美双),试验进行28d。结果显示,饲料中添加福美双显著升高了血清AST、ALT和ALP水平(P<0.05),提高了肉鸡胫骨软骨发育不良(TD)的发病率(P<0.05),降低了肉鸡生产性能。表明福美双能通过损害肉鸡肝脏功能,影响骨代谢相关酶活性,而致发肉鸡TD。

I型胶原和热休克蛋白90在肉鸡胫骨软骨发育不良不同阶段的变化

应用免疫组织化学方法,研究了I型胶原(Col I)和热休克蛋白90(Hsp90)在肉鸡胫骨软骨发育不良(TD)不同阶段的变化。将80羽1日龄健康AA肉鸡预饲1周后分为2组。对照组饲以基础日粮;试验组在基础日粮中添加福美双100 mg.kg-1,4 d后继续饲以基础日粮。试验历时23 d。应用抗Col I和Hsp90多克隆抗体对试验第4、9、16、23天的肉鸡胫骨生长板进行免疫组织化学研究。结果表明,在饲喂福美双后第4、第9天,Col I和Hsp90的合成在生长板前肥大区和肥大区软骨细胞都明显增加,而第16、第23天时在TD损伤周边的前肥大区软骨细胞出现。由此推测,Col I蛋白合成增加,可能是由于不能正常钙化的反馈调节所致;而上调表达的Hsp90可能在调节软骨细胞发育周期中发挥重要作用,为进一步认识TD提供了新的思路。

饮水高氯诱发肉鸡胫骨软骨发育不良的试验研究

24 0羽健康AA肉鸡随机均分为对照组 ,试验 1组 ,试验 2组。从 8日龄起分别饮用含Cl 0 0 %、0 0 9%、0 18%的饮水以观察肉鸡胫骨软骨发育情况 ,同时对其进行了X射线、骨密度、血清学和形态学的研究。结果表明 :(1)饮水高氯可增加胫骨软骨发育不良的发病率。 (2 ) 3周后病鸡胫骨近端的X射线可透区与软骨增生区的形态一致 ,其承重侧的骨皮质增厚。 (3)试验组鸡的胫骨骨密度较对照组稍高 ,但差异不显著。骨密度随日龄的增加而增大。 (4 )血清Ca、P、Cl 的变化各组间差异均不显著。 (5)病鸡胫骨近端的纵切面有玉白色楔状软骨团块深入干骺端甚至骨髓腔。此软骨团块由大量的过渡型软骨细胞构成 ,血管稀少 ,骨小梁排列紊乱、扭曲 。

福美双诱发肉鸡胫骨软骨发育不良早期生长板消减cDNA文库的构建

【目的】为应用cDNA芯片技术筛选肉鸡胫骨软骨发育不良(TD)时序性差异表达基因,本研究构建了早期生长板消减cDNA文库。【方法】将7日龄AV肉鸡随机分为两组,对照组(control,C)饲以基础日粮,试验组(thiram diet-fed,T)饲以基础日粮添加福美双100 mg·kg-1,2 d后继续饲以基础日粮,诱发肉鸡TD。应用抑制消减杂交技术(SSH)构建正反向消减cDNA文库,用PCR验证两个文库中克隆的插入片段,随机抽取100个阳性克隆测序,对所测序列同源性分析和功能预测。【结果】从两个文库共获得2 227个有效阳性克隆,插入片段大小主要分布在200—1 000bp之间;所测序列中有97条ESTs与GenBank中的鸡基因序列同源性达到99%,且非冗余度达到68.7%;此外,有3条ESTs未找到同源序列。这些基因具有构成细胞外基质,参与软骨内骨化和骨的重构,调节骨发育,行使信号转导、血管发生,参与电子传递及能量代谢等功能。【结论】成功构建了消减cDNA文库,将为进一步点制cDNA芯片,筛选不同阶段的差异表达基因奠定了基础,也为肉鸡TD机理研究提供新线索。

福美双对肉鸡胫骨软骨发育不良发生的影响

120羽1日龄健康AA肉鸡经1周预饲后随机分为2组,对照组饲以基础日粮,试验组饲以基础日粮并添加100mg/kg福美双,对肉鸡胫骨长度、生长板厚度、肉鸡胫骨软骨发育不良(TD)指数及TD发病率等指标进行检测。结果表明,添加福美双使肉鸡TD发病率显著上升。患病鸡胫骨长度、生长板厚度和TD指数均有显著变化(P<0.01)。说明100mg/kg福美双可显著提高AA肉鸡TD发病率,具有应用该方法建立TD实验动物模型的潜力。

肉鸡胫骨软骨发育不良分子机理的研究进展

对参与肉鸡胫骨软骨发育不良的酶、生长因子、维生素D及其受体,基因表达水平进行了综述,它们形成一个复杂的网络调控系统。阐述了它们在肉鸡胫骨软骨发育不良中所起的作用和变化。认为对参与干扰软骨细胞分化的各种基因的深入研究将为基因选择、消除机能紊乱、防治胫骨软骨发育不良的发生开辟新的途径。

肉鸡胫骨软骨发育不良早期钙黏蛋白1(CDH1)差异表达研究

为研究福美双诱发肉鸡胫骨软骨发育不良(Tibial Dyschondroplasia,TD)早期钙黏蛋白1(CDH1)的差异表达,基础日粮中添加福美双,在试验第1、2、6天,对试验鸡进行剖杀,迅速采取胫骨生长板放入4%多聚甲醛溶液于4℃固定,做CDH1免疫组化分析;提取对照组和饲喂福美双组的生长板总RNA,采用Real-time PCR对CDH1基因进行差异表达验证。结果钙黏蛋白1(CDH1/E-cadherin)基因在TD生长板表达上调,在对照和TD软骨生长板,其蛋白合成主要在前肥大、肥大区软骨细胞质,增殖区软骨细胞无表达,钙化区软骨细胞表达少,在饲喂福美双第1、2、6天其表达增加与定量PCR变化结果相一致,且在饲喂福美双第2、6天呈明显高表达。结果表明CDH1参与细胞黏附、血管入侵及调节Wnt/β-cat的信号传递,和其它分子共同调节软骨内骨化。

导致肉鸡胫骨软骨发育不良的营养因素

胫骨软骨发育不良（Tibial Dyschondroplasia,TD)是在1965年由Leach和Nesheim首次发现的。其特点是胫骨软骨发育异常，在近干骺端有一锥形未钙化的软骨，可能是肉鸡软胶原蛋白合成速度超过了降解速度所致。肉鸡胫骨软骨发育不良是对现代肉鸡养殖业造成巨大损失的一种营养代谢病，患胫骨软骨发育不良的病鸡运动不便，采食受限，生长发育受影响，增重明显下降，种禽生殖性能和商品肉禽的肉品质均下降，其发生受遗传、饲料饲养水平及Ca,P,Mg,Cl等含量及肉鸡体内阴阳离子失衡引起的酸碱代谢紊乱有关。

磷源对福美双诱导的肉鸡胫骨软骨发育不良及骨骼钙、磷代谢的影响

本试验旨在研究磷酸一二钙(MDCP)和磷酸氢钙(DCP)对福美双诱导的肉鸡胫骨软骨发育不良(TD)及骨骼钙、磷代谢的影响。选取1日龄科宝(Cobb)肉雏鸡120只,试验1～21 d采用2因子设计,按磷源的不同分为2个处理(磷源DCP和MDCP),每个处理60只鸡;试验22～42 d采用2×2因子设计,将每种磷源按福美双的添加水平不同再分为2个处理(福美双水平为0和100 mg/kg),每个处理3个重复,每个重复10只鸡。福美双组在基础饲粮中添加100mg/kg福美双,于22～28 d饲喂,然后换喂对应不含福美双饲粮。结果表明:1)MDCP组肉鸡第35天TD评分相对DCP组有降低的趋势(P=0.09),但磷源对肉鸡第28和42天TD评分影响差异不显著(P>0.05)。福美双显著升高了肉鸡第28、35和42天TD评分(P<0.05)。2)福美双和磷源对肉鸡第35天胫骨灰分、钙和磷含量交互效应显著(P<0.05)。福美双诱导条件下,MDCP组肉鸡第35天胫骨灰分、钙、磷含量显著高于DCP组(P<0.05)。3)DCP组第35天血清甲状旁腺素含量高于MDCP组(P=0.12)。由此可见,相对DCP,MDCP对福美双诱导的TD发生有一定减缓作用,且与肉鸡骨骼钙、磷代谢密切相关。2种磷源对肉鸡最终TD评分影响差异不显著。

破骨细胞在肉鸡胫骨软骨发育不良中的作用

肉鸡胫骨软骨发育不良(TD)是一种肉鸡的骨代谢疾病,由软骨血管形成受阻导致。破骨细胞(OC)在骨吸收过程中释放出的血管内皮生长因子(VEGF)能促进骨组织血管化,很可能在肉鸡胫骨软骨发育不良中发挥至关重要的作用。文章就肉鸡TD的发生机制以及OC在其中所起的作用作一综述。

福美双和铜对肉鸡胫骨软骨发育不良的影响

本试验旨在研究福美双和铜对肉鸡胫骨软骨发育不良、血清相关酶活性和组织铜含量的影响。100羽1日龄AA肉鸡随机分为4组,从8日龄起分别给予基础日粮(对照组),福美双日粮(基础日粮+福美双100 mg/kg),福美双低铜日粮(基础日粮+福美双100 mg/kg+CuSO4.5H2O 50 mg/kg),福美双高铜日粮(基础日粮+福美双100 mg/kg+CuSO4.5H2O 100 mg/kg),试验期至21日龄。结果表明:(1)日粮中添加福美双(100 mg/kg)能显著增加肉鸡TD的发生率;添加铜能降低福美双的这种作用,两者之间存在明显的互作关系;(2)与对照组相比,福美双组和福美双高铜日粮组肉鸡血清钙、磷水平明显升高(P<0.05);血清ALT水平在各组之间无显著差异;血清ALP、AST水平,福美双高铜日粮组与其余各组相比明显升高,差异显著(P<0.05);(3)与对照组相比,其余各组肉鸡胫骨长度均显著下降(P<0.05);(4)日粮中铜添加可提高各组织中铜的沉积;添加福美双能提高肝脏、肾脏、胰腺中铜的沉积,同时降低铜在肾脏中的沉积,而铜的添加能够降低福美双所引起的肾脏铜的增加。提示福美双可能通过损伤肝、肾功能,影响机体组织对铜的生物利用从而诱导肉鸡胫骨软骨发育不良的发生。