应用地高辛标记的PCR-ELISA技术快速检测转基因水稻

应用地高辛标记的PCR-ELISA(Dig-PCR-ELISA)技术进行转基因水稻检测研究。针对转基因水稻中普遍存在的花椰菜花叶病毒(CaMV)35S 启动子(p35S)、胭脂碱合成酶(NOS)终止子(Tnos),筛选标记潮霉素磷酸转移酶基因(hpt,hpt)、β-葡萄糖苷酸酶基因(gus)、抗草丁膦除草剂基因(bar),建立Dig-PCR-ELISA检测方法;能进行半定量检测,敏感性试验表明,Dig-ELISA检测比常规电泳检测可提高敏感性达1 000倍,可检测含量达0.1％的GMO样品。全过程可在24 h内完成。

芹菜愈伤组织转化的初步研究

用根癌农杆菌Ｃ５８Ｃ１（ｐＢＺ６１１１）感染芹菜胚性愈伤组织，在筛选到的氯霉素抗性愈伤组织中检测到胭脂碱合成酶活性，表明外源基因已整合到芹菜细胞基因组中并得到表达．转化愈伤组织可在无激素培养基上增殖并分化畸形苗．