胰十二指肠同源框因子-1联合细胞因子诱导人脐带间充质干细胞分化为胰岛β样细胞的研究

目的探讨人脐带间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）体外诱导分化为胰岛β样细胞的办法。方法用含胰十二指肠同源框因子-1基因（pancreatic and duodenal homeobox factor 1，PDX1）重组腺病毒（Adxsi—CMV—PDX1）感染人脐带MSCs，再联合多种细胞因子进行诱导分化。应用RT—PCR、免疫荧光染色法检测诱导后细胞的PDX1、胰岛素（insulin）、神经元素3（ngn3）、葡萄糖转运体2（glut2）、NK转录因子6．1（NKX6．1）mRNA的表达；化学发光法检测诱导后细胞培养上清中胰岛素和C肽的分泌精；流式细胞仪检测胰岛素阳性细胞率。结果Adxsi—CMV—PDX1感染脐带MSCs并联合细胞因子诱导后，细胞从短梭形变成长梭形，并聚集形成胰岛样细胞团，经双硫腙染成亮红色。诱导17d后的细胞表达PDX1、ngn3、NKX6．1、insulin、glut-2的mRNA；细胞胞质内有胰岛素和C肽；细胞培养上清中胰岛素和C肽含量分别为（473．1±51．5）mU／L和（1．61±0．41）ng／ml，用25mmol／L高糖刺激1h后，胰岛素和C肽分泌量高达（964．4±68．1）mU／L和（3．72±1．52）ng／ml；胰岛素阳性细胞率达（11．6±4．8）％。结论PDX1转入脐带MSCs后，联合细胞因子在体外能够诱导其分化为胰岛β样细胞，胰岛素和C从分泌水平较高，且对高糖刺激有反应，但还不是完全成熟的β细胞。

胰十二指肠同源框基因-1在骨髓来源nestin阳性细胞的转染及表达

目的将真核表达载体pEGFP-C1-PDX-1转染大鼠骨髓来源nestin阳性细胞,并对其转染条件进行优化以获得较高效率。方法将已构建好的重组载体转染骨髓来源nestin阳性细胞,改变DNA的量、转染后培养基中的血清浓度,在荧光显微镜下观察荧光并计算转染效率;转染后48h用RT-PCR检测目的基因的表达情况。结果质粒2～10μg获得最佳的转染效率,提高转染后培养基的血清浓度可提高转染后细胞存活率及转染效率。RT-PCR检测转染后骨髓来源nestin阳性细胞有PDX-1表达。结论通过优化转染条件提高了pEGFP-C1-PDX-1转染大鼠骨髓来源nestin阳性细胞的效率,为其成为组织工程的种子细胞提供了实验依据。

胰腺十二指肠同源框-1基因促进大鼠骨髓间充质干细胞体外横向分化为胰岛素分泌细胞

目的:研究胰腺十二指肠同源框-1基因(Pdx-1)在骨髓间充质干细胞(MSC)体外分化中的作用。方法:构建含有Pdx-1基因的真核表达载体,转染介质Superfect介导重组载体转染MSC,G418筛选阳性细胞后对转染组(Pdx-1+MSC)和未转染组(Pdx-1-MSC)均体外进行诱导分化,细胞免疫组化染色鉴定诱导后胰岛素分泌阳性细胞。结果:限制性酶切分析和序列测定证实成功构建了含有Pdx-1基因的真核表达载体,荧光显微镜观察证实Superfect能高效介导重组载体转染MSC;细胞免疫组化染色显示Pdx-1+MSC分化为胰岛素分泌细胞的数量较Pdx-1-MSC明显增多,阳性率分别为(28.23±2.56)%和(7.08±2.69)%。结论:Pdx-1能增强大鼠MSC体外分化为功能性胰岛素分泌细胞的能力,为胰岛移植开辟新的思路,对1型糖尿病治疗有重要的应用价值。

胰腺-十二指肠同源框-1与糖尿病的研究新进展

糖尿病是以胰岛素绝对或相对不足为主要特征的临床综合征,而胰岛素是由胰岛β细胞分泌的体内唯一降血糖激素。胰腺-十二指肠同源框-1(PDX-1)在胰腺的早期发育和晚期分化、胰岛β细胞正常功能的维持及胰岛素的分泌等方面均有重要作用。此外,PDX-1可诱导非胰岛细胞如肝细胞、成肌细胞等向胰岛素分泌细胞分化,提示PDX-1在糖尿病的治疗领域有重要作用。

胰高血糖素样肽-1受体激动剂对糖耐量减低大鼠胰岛β细胞胰腺十二指肠同源盒因子-1的影响

糖耐量减低（IGT）是2型糖尿病（T2DM）患者的必经阶段,近20年来T2DM呈迅猛发展,Yang等[1]研究显示,城市、乡镇和富裕农村20岁以上人群中糖调节受损的患者达15.5%,平均每年有10%～15%的发展为糖尿病。

胰升糖素样肽-1对胰腺-十二指肠同源异型盒基因-1表达的调节

目的胰升糖素样肽-1(glucagons-1ike peptide l,GLP-1)最重要的生理作用是葡萄糖依赖的胰岛素刺激作用,但其分子基础尚不清楚。文中研究不同浓度GLP-1对大鼠胰岛细胞胰腺-十二指肠同源异型盒基因-1(pancreatic-duodenal homeobox-1,PDX-1)表达的调节作用,探讨GLP-1对胰岛素基因转录的调节机制和临床意义。方法不同刺激浓度GLP-1(0、1、10、100、1000 nmol/L)与葡萄糖浓度分别为2.2、5.5、11.1 mmol/L的RPMI1640营养液共培养24 h后,提取胰岛细胞总RNA。运用RT-PCR技术检测PDX-1基因表达的变化。结果葡萄糖浓度为2.2和5.5 mmol/L时,随GLP-1浓度升高,PDX-1基因表达量呈钟型方式升高;葡萄糖浓度为11.1 mmol/L时,随GLP-1浓度升高,PDX-1基因表达量呈浓度依赖性升高。结论 GLP-1以葡萄糖依赖和浓度依赖方式促进PDX-1基因的表达。

白细胞介素10基因对未发病非肥胖型糖尿病小鼠肝脏胰-十二指肠同源盒1表达的影响

背景:研究发现肝脏细胞在给予转入胰-十二指肠同源盒1基因后可合成胰岛素,抗CD20单克隆抗体可抑制产胰岛素的肝脏细胞发生自身免疫反应,但机制尚不明确。目的:了解腺病毒介导的小鼠白细胞介素10(Adenovirus vector-mediated murine interleukin,Ad-mI L-10)及抗CD20单克隆抗体联合干预未发病非肥胖糖尿病模型小鼠,对其肝脏细胞以及肝脏胰-十二指肠同源盒1表达的影响。方法:3-5周龄雌性未发病非肥胖糖尿病模型小鼠40只,随机分为抗CD20单克隆抗体组、抗CD20单克隆抗体+白细胞介素10组、白细胞介素10组和对照组,分别于第1,8,15,21天尾静脉注射抗CD20单克隆抗体、抗CD20单克隆抗体+Ad-m IL-10、Ad-mI L-10和生理盐水。结果与结论:12周后,与对照组相比,经抗CD20单克隆抗体和/或白细胞介素10治疗的未发病非肥胖糖尿病模型小鼠血糖水平明显降低,而血清和肝脏中胰岛素、白细胞介素10和CD20表达明显增加,同时肝脏中胰-十二指肠同源盒1表达水平增加;且经抗CD20单克隆抗体和白细胞介素10联合对上述指标的影响高于单独应用;但无论是联合干预还是单独干预均对小鼠肝脏炎症病变无明显影响。证实CD20单抗及白细胞介素10基因联合干预为促使非肥胖糖尿病模型小鼠肝脏胰-十二指肠同源盒1表达机制之一。

胰十二指肠同源盒基因-1逆转录病毒表达载体的构建及其在肝干细胞中的稳定表达

目的:通过克隆胰十二指肠同源盒基因-1(pancreatic duodenal homeobox-1,PDX-1),构建表达PDX-1的逆转录病毒表达载体和稳定表达PDX-1的肝原始细胞系(liver epithelial progenitor cells,LEPCs),以研究肝干细胞向胰腺细胞的转分化潜能。方法:通过PCR方法克隆PDX-1基因全长,将其构建到pMSCVpuro逆转录病毒载体中获得pMSCV PDX-1 puro载体。将该载体导入Phoenix包装细胞系,进而采用乒乓转染的方法感染包装细胞PT67,获得高滴度稳定产毒的PT67细胞系。结果:成功构建了pMSCV PDX-1 puro载体,并转染PT67细胞。利用PT67细胞系产生的病毒上清可以高效的感染体外培养的肝干细胞LEPCs,获得稳定表达PDX-1基因的LEPCs(LEPCs PDX-1)。结论:PDX-1逆转录病毒表达载体的成功构建和稳定表达PDX-1的肝干细胞系的获得为研究LEPCs向胰腺细胞的转分化奠定了基础。

高脂状态下Exendin-4对胰岛βTc6细胞内胰-十二指肠同源盒-1表达、细胞增殖功能及胰岛素分泌能力的干预作用

目的 探讨Exendin-4在高脂状态下是否具有抗脂毒性及其相关机制是否涉及胰-十二指肠同源盒（PDX）-1。方法 不同浓度的Exendin-4培育βTc6细胞不同时间,再应用1 mmol/L游离脂肪酸（FFA）干预24 h,检测细胞内PDX-1表达及增殖能力和胰岛素分泌功能。结果 1Exendin-4干预6 h,各组细胞PDX-1表达、细胞增殖能力和胰岛素分泌功能均未见明显改善;2当Exendin-4干预延长至12~24 h,随着干预浓度增高,细胞内PDX-1逐渐升高,细胞增殖能力和胰岛素分泌功能明显好转。结论 高脂状态下适宜浓度的Exendin-4干预一定时限可上调β细胞内PDX-1的表达,并改善细胞增殖功能及胰岛素分泌能力。

胰十二指肠同源盒基因-1启动子在肝干细胞分化研究中的应用

背景与目的利用报告基因监测肝干细胞向胰腺细胞的转分化潜能。材料与方法通过PCR从小鼠基因组中克隆胰十二指肠同源盒基因-1(Pancreaticduodenalhomeobox-1,PDX-1)启动子片段,构建PDX-1启动子调控的绿色荧光蛋白报告载体(pPDX-1EGFP),并利用报告载体标记的肝原始细胞系(Liverepithelialprogenitorcells,LEPCs)观察肝干细胞向胰腺细胞的转分化潜能。结果获得PDX-1启动子调控的绿色荧光蛋白报告载体及报告载体标记的LEPCs。结论pPDX-1EGFP报告载体的成功构建为研究LEPCs向胰腺细胞的转分化提供了简捷的分子工具。

艾塞那肽在高糖和低糖条件下对INS-1细胞胰腺十二指肠同源盒表达和细胞凋亡的影响

目的探讨胰高糖素样肽-1(GLP-1)类似物艾塞那肽在高糖和低糖条件下对胰岛B细胞株INS-1细胞胰腺十二指肠同源盒(PDX-1)表达和细胞凋亡的影响。方法体外培养INS-1细胞,分为正常对照组、高糖组、低糖组、高糖艾塞那肽干预组、低糖艾塞那肽干预组、高糖二甲双胍干预组。使用相差显微镜观察细胞生长状态,采用流式细胞仪双染法和原位TUNEL法检测INS-1细胞凋亡情况,分别采用实时PCR法、Western印迹法和免疫组织化学法检测PDX-1表达情况。结果高糖组和低糖组的细胞凋亡指数和细胞凋亡率均显著高于正常对照组(P值均<0.01),高糖组与低糖组间的差异均无统计学意义(P值均>0.05);高糖艾塞那肽干预组的细胞凋亡指数和细胞凋亡率均显著高于正常对照组(P值均<0.05),但均显著低于高糖组(P值均<0.05);低糖艾塞那肽干预组的细胞凋亡指数和细胞凋亡率均显著高于正常对照组(P值均<0.05),但均显著低于低糖组(P值均<0.05);高糖艾塞那肽干预组与低糖艾塞那肽干预组间细胞凋亡指数和细胞凋亡率的差异均无统计学意义(P值均>0.05);高糖二甲双胍干预组的细胞凋亡指数和细胞凋亡率均显著高于正常对照组(P值均<0.05),但与高糖组的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。高糖组和低糖组的PDX-1表达均显著低于正常对照组(P值均<0.01),高糖组与低糖组间的差异无统计学意义(P>0.05);高糖艾塞那肽干预组的PDX-1表达显著低于正常对照组(P<0.05),但显著高于高糖组(P<0.05);低糖艾塞那肽干预组的PDX-1表达显著低于正常对照组(P<0.05),但显著高于低糖组(P<0.05);高糖艾塞那肽干预组与低糖艾塞那肽干预组间PDX-1表达的差异无统计学意义(P>0.05);高糖二甲双胍干预组的PDX-1表达显著低于正常对照组(P<0.05),但与高糖组的差异无统计学意义(P>0.05)。结论在高糖和低糖条件下,艾塞那肽均能抑制INS-1细胞的凋亡,同时上调PDX-1的表达水平。

乳腺癌患者唾液中转铁蛋白、间-α胰蛋白酶抑制因子重链H1、α2巨球蛋白及锌指同源框蛋白4水平测定及临床意义

目的探讨乳腺癌患者唾液蛋白内转铁蛋白(TF)、间-α胰蛋白酶抑制因子重链H1(ITIH1)、α2巨球蛋白(α2M)及锌指同源框蛋白4(ZFHX4)等4个相关蛋白的水平变化规律。方法收集18例乳腺癌患者和18例健康女性作为研究对象,采集其唾液标本,采用酶联免疫吸附试验检测唾液中TF、ITIH1、α2M及ZFHX4等4个蛋白表达水平。通过STRING和KEGG数据库对上述4种蛋白进行生物信息学分析。结果乳腺癌患者唾液中TF、ZFHX4水平分别为(3.092±0.309)mg/L、(0.546±0.084)μg/L,均高于健康女性的(2.231±0.217)mg/L、(0.207±0.059)μg/L,差异均有统计学意义(t=2.281,P=0.030;t=3.310,P=0.003)。乳腺癌患者唾液中ITIH1、α2M水平分别为(0.162±0.105)μg/L、(2.448±0.218)mg/L,均低于健康女性的(1.709±0.384)μg/L、(3.568±0.258)mg/L,差异均有统计学意义(t=3.891,P=0.001;t=3.318,P=0.003)。蛋白相互作用分析发现TF和α2M具有相互作用,TF是一个核心蛋白,还与多个蛋白具有相互作用。TF存在于缺氧诱导因子-1信号通路上,该通路在细胞生长发育和生理应激以及肿瘤的发生发展过程中具有重要作用。结论唾液中TF、ITIH1、α2M及ZFHX4等4个蛋白的水平变化可能与乳腺癌的发生发展密切相关,为乳腺癌的临床诊断提供一种新的方式。

胰腺十二指肠同源盒基因-1/神经生成素3信号通路在胰岛β细胞分化中的作用机制研究进展

胰岛β细胞数量的绝对不足或相对减少可导致糖尿病的发生发展。胰腺十二指肠同源盒基因-1(Pdx-1)是胰腺发育和胰岛素基因转录的重要调控基因,在胰腺发育和胰腺各种细胞的分化中发挥重要作用。神经生成素3(Ngn3)是对胰岛发育有重要影响的转录因子,可始动内分泌祖细胞,促进胰内胚层细胞向内分泌细胞分化,同时维持成熟胰岛细胞的功能。Pdx-1/Ngn3信号通路可促进干细胞向胰岛β细胞的分化和增殖,Pdx-1是Ngn3的上游调控因子,对胰干细胞的作用在于激活Ngn3的表达,Ngn3可通过调控神经细胞分化因子1、胰岛素瘤相关蛋白1(Insm1)、胰岛素基因增强结合蛋白1及Insm2、桩蛋白6、Nkx2同源框2、NK6 Homeobox 1等直接靶基因,影响胰内分泌细胞的分化和形成。

胰头十二指肠切除术联合替吉奥治疗胰腺癌对患者血清MIC-1、REG4水平的影响

目的探讨胰头十二指肠切除术联合替吉奥治疗胰腺癌对患者血清MIC-1、REG4水平的影响。方法回顾性分析110例胰腺癌行胰头十二指肠切除术后患者的临床资料,按术后辅助化疗方式的不同,分为观察组和对照组,各55例。对照组用吉西他滨辅助化疗,观察组用替吉奥辅助化疗,2组均连续治疗2个疗程。比较2组化疗前后血清肿瘤标志物水平、血清MIC-1、REG4水平、生活质量评分;比较2组化疗期间不良反应发生情况;比较2组随访4、8、12个月的平均生存期及生存率。结果与化疗前相比,化疗后2组血清肿瘤标志物CA19-9、CA50、CA125、CA242水平,血清MIC-1、REG4水平均降低,且观察组低于对照组。与化疗前相比,2组化疗后1、4、10周的生活质量评分逐渐升高,且观察组高于对照组。化疗期间,观察组不良反应总发生率(32.73%)低于对照组(52.73%)。观察组患者随访4、8、12个月平均生存期长于对照组;观察组患者随访12个月的生存率高于对照组(P均<0.05)。结论胰头十二指肠切除术后替吉奥辅助化疗可降低胰腺癌患者血清MIC-1、REG4水平,抑制肿瘤细胞分化,有利于患者预后,可延长患者生存周期并提高生活质量。

信号转导及转录激活因子3、垂体同源框1及胶质瘤相关癌基因同源蛋白-1在皮肤恶性黑色素瘤中的表达及临床意义

目的探讨信号转导及转录激活因子3(STAT3)、垂体同源框1(PITX1)及胶质瘤相关癌基因同源蛋白-1(Gli-1)在皮肤恶性黑色素瘤中的表达及临床意义。方法选取89例皮肤恶性黑色素瘤患者的肿瘤组织及癌旁组织。对患者进行随访,根据预后情况分为预后良好及预后不良。采用免疫组化法检测STAT3、PITX1、Gli-1蛋白表达情况,分析皮肤恶性黑色素瘤患者预后的影响因素。结果肿瘤组织中STAT3、Gli-1蛋白阳性表达率均明显高于癌旁组织,PITX1阳性表达率明显低于癌旁组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。预后不良患者肿瘤组织中STAT3、Gli-1蛋白阳性表达率均高于预后良好患者,PITX1阳性表达率低于预后良好患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。肿瘤直径≥5 cm、STAT3阳性、PITX1阴性、Gli-1阳性均为皮肤恶性黑色素瘤患者预后不良的独立危险因素(P﹤0.05)。结论STAT3、PITX1及Gli-l蛋白在皮肤恶性黑色素瘤中存在异常表达,通过检测其水平能为临床治疗及预后提供新的思路与依据。

卵巢高级别浆液性癌组织中叉头框转录因子M1和胶质瘤相关癌基因同源蛋白-1的表达与患者临床病理特征和预后的关系

目的探究卵巢高级别浆液性癌组织中叉头框转录因子M1(forkhead box M1,FOXM1)、胶质瘤相关癌基因同源蛋白-1(glioma-associated oncogene homoglog-1,Gli-1蛋白)的表达与患者临床病理特征和预后的关系。方法选取2009年1月至2013年9月中国人民解放军中部战区总医院妇产科收治的经手术病理证实为卵巢高级别浆液性癌的82例患者为研究对象,采用免疫组织化学法检测石蜡标本中FOXM1和Gli-1蛋白的表达情况;收集患者临床资料,分析FOXM1和Gli-1蛋白表达与患者临床病理特征和预后的关系。结果临床分期Ⅲ~Ⅳ期、高中分化和伴腹水的卵巢高级别浆液性癌患者FOXM1和Gli-1蛋白阳性表达率均显著升高(均P<0.05)。FOXM1和Gli-1蛋白阳性表达患者的20、40、60个月生存率均显著低于阴性表达患者(均P<0.05),累计存活时间均显著短于阴性表达患者(均P<0.05)。结论临床分期Ⅲ~Ⅳ期、高中分化和伴腹水的卵巢高级别浆液性癌患者FOXM1和Gli-1蛋白阳性表达率均显著升高,且FOXM1和Gli-1蛋白阳性表达患者的生存率均下降。

烟酰胺单核苷酸对RIN-m5f细胞中胰岛素分泌及PDX-1和FoxO1基因表达的影响(英文)

目的:在细胞水平研究烟酰胺单核苷酸(nicotinamide mononucleotide,NMN)对胰岛素分泌的调节作用及其对与胰岛素分泌相关的重要转录因子胰十二指肠同源盒基因(pancreatic and duodenalhomeobox-1,PDX-1)和分叉头框家族转录因子1(forkhead box-containing protein O-1,FoxO1)基因表达的影响。方法:采用大鼠胰岛素ELISA试剂盒检测RIN-m5f细胞胰岛素分泌水平。用Real-time PCR检测RIN-m5f细胞PDX-1和FoxO1的mRNA表达水平。用Western印迹检测RIN-m5f细胞PDX-1蛋白表达水平。结果:用瑞格列奈10 nmol/L+NMN 100μmol/L处理RIN-m5f细胞48 h,与空白对照及DMSO对照组相比,胰岛素分泌量均显著增高(P<0.05);与NMN 50μmol/L组比较,胰岛素分泌量的增高也有统计学意义(P<0.05)。10,50和100μmol/L的NMN作用RIN-m5f细胞36 h,PDX-1的mRNA表达量均上调(依次为P<0.05,P<0.01,P<0.001)。100μmol/L剂量组与10μmol/L和50μmol/L剂量组比较差异也有统计学意义(P<0.001)。50,100和200μmol/L的NMN作用RIN-m5f细胞36或48 h,PDX-1的蛋白表达量与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:NMN可以调控RIN-m5f细胞中胰岛素的分泌及PDX-1的mRNA表达水平。

槟榔碱对2型糖尿病大鼠胰腺β细胞PDX-1 mRNA表达的影响

目的:探讨槟榔碱对2型糖尿病大鼠β细胞分泌功能及胰腺十二指肠同源盒因子-1(pancreas-duodenum homeobox-1,PDX-1)mRNA表达的影响。方法:采用高果糖饲料饲养Wistar大鼠12周制备2型糖尿病大鼠模型,40只实验动物随机分为5组:对照组、模型组、模型+1 mg/kg槟榔碱组、模型+5 mg/kg槟榔碱组、模型+10 mg/kg槟榔碱组。药物注射4周后股动脉取血检测空腹血糖、三酰甘油、总胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、血清胰岛素,处死大鼠取胰腺组织,石蜡切片HE染色观察组织形态学变化,RT-PCR检测β细胞内PDX-1及胰岛素mRNA的表达水平。结果:(1)高糖作用引起Wistar大鼠胰腺β细胞PDX-1及胰岛素mRNA的表达水平显著下降(P<0.01);(2)1 mg/kg和5 mg/kg槟榔碱处理能显著上调高糖喂养Wistar大鼠胰腺β细胞PDX-1与胰岛素mRNA表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论:槟榔碱可以通过上调PDX-1和胰岛素基因表达,改善高糖环境下的β细胞胰岛素合成和分泌功能的损伤。

PDX-1联合利拉鲁肽诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为胰岛样细胞的效果

目的:探讨胰十二指肠同源盒-1(PDX-1)联合利拉鲁肽诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化为胰岛样细胞(IPCs)的效果。方法:构建真核表达载体p EGFP-pc DNA3.1(+)-PDX-1,脂质体介导其转染贴壁培养法分离得到的大鼠BMSCs,用潮霉素筛选稳定转染细胞PDX-1-BMSCs。将BMSCs和PDX-1-BMSCs分别用50 nmol/L利拉鲁肽或培养液培养10 d,然后ELISA法检测细胞上清胰岛素浓度,real-time PCR法检测细胞中Tle、Nkx6.1、Ngn3、Nestin、PDX-1 mRNA的表达。结果:4组细胞诱导过程中形态上趋向胰岛样细胞分化;利拉鲁肽和PDX-1均可诱导BMSCs胰岛素分泌水平增加(P<0.05);PDX-1可促进BMSCs中PDX-1、Ngn3、Nkx6.1、Tle mRNA的表达(P<0.05);利拉鲁肽可促进PDX-1、Ngn3 mRNA的表达(P<0.05);两者有协同作用的趋势。结论:PDX-1联合利拉鲁肽可以诱导BMSCs向IPCs分化并分泌胰岛素。

PDX-1对成肌细胞株C2C12分化为胰岛素分泌细胞的作用

【目的】探讨PDX-1对成肌细胞株C2C12分化为胰岛素分泌细胞的作用。【方法】将C2C12细胞分别经过不同浓度的类胰高血糖素(GLP-1)诱导120h后,瞬间转染胰腺十二指肠同源框(PDX-1)基因,用RT-PCR检测PDX-1的表达,流式细胞仪、放射免疫法检测细胞内和培养基中是否存在胰岛素。【结果】GLP-1可以直接诱导C2C12细胞表达PDX-1;PDX-1瞬时转染C2C12细胞后,胰岛素分泌细胞阳性率比值(1.19±0.10)、培养基中的胰岛素含量(2.45±1.48)×10-6U/mL均明显升高(P<0.05);单独的40nmol/LGLP-1诱导与瞬间转染PDX-1相比,阳性率比值及胰岛素浓度的差别均无统计学意义。【结论】GLP-1可以诱导C2C12表达PDX-1,而且PDX-1可以促进C2C12分泌胰岛素。提示GLP-1诱导C2C12分化为胰岛素分泌细胞可能与PDX-1有关。