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胰升糖素样肽-1对胰腺-十二指肠同源异型盒基因-1表达的调节 被引量:2
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作者 董凌燕 刘超 +2 位作者 张梅 刘翠萍 覃又文 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2013年第10期1045-1048,共4页
目的胰升糖素样肽-1(glucagons-1ike peptide l,GLP-1)最重要的生理作用是葡萄糖依赖的胰岛素刺激作用,但其分子基础尚不清楚。文中研究不同浓度GLP-1对大鼠胰岛细胞胰腺-十二指肠同源异型盒基因-1(pancreatic-duodenal homeobox-1,PDX... 目的胰升糖素样肽-1(glucagons-1ike peptide l,GLP-1)最重要的生理作用是葡萄糖依赖的胰岛素刺激作用,但其分子基础尚不清楚。文中研究不同浓度GLP-1对大鼠胰岛细胞胰腺-十二指肠同源异型盒基因-1(pancreatic-duodenal homeobox-1,PDX-1)表达的调节作用,探讨GLP-1对胰岛素基因转录的调节机制和临床意义。方法不同刺激浓度GLP-1(0、1、10、100、1000 nmol/L)与葡萄糖浓度分别为2.2、5.5、11.1 mmol/L的RPMI1640营养液共培养24 h后,提取胰岛细胞总RNA。运用RT-PCR技术检测PDX-1基因表达的变化。结果葡萄糖浓度为2.2和5.5 mmol/L时,随GLP-1浓度升高,PDX-1基因表达量呈钟型方式升高;葡萄糖浓度为11.1 mmol/L时,随GLP-1浓度升高,PDX-1基因表达量呈浓度依赖性升高。结论 GLP-1以葡萄糖依赖和浓度依赖方式促进PDX-1基因的表达。 展开更多
关键词 升糖素样肽-1 腺-十二指肠同源异型基因-1 葡萄糖
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葡萄糖对胰岛细胞胰腺-十二指肠同源盒基因-1表达的影响 被引量:3
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作者 董凌燕 刘超 +2 位作者 张梅 刘翠萍 覃又文 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期381-382,共2页
目的研究不同浓度葡萄糖对大鼠胰岛细胞胰腺-十二指肠同源盒基因-1(PDX-1)表达的调节作用。方法用不同浓度葡萄糖分别刺激胰岛细胞1、4、7、14d,运用RT-PCR技术检测PDX-1基因表达的变化。结果与对照组相比(葡萄糖浓度为5.5mmol/L),刺激... 目的研究不同浓度葡萄糖对大鼠胰岛细胞胰腺-十二指肠同源盒基因-1(PDX-1)表达的调节作用。方法用不同浓度葡萄糖分别刺激胰岛细胞1、4、7、14d,运用RT-PCR技术检测PDX-1基因表达的变化。结果与对照组相比(葡萄糖浓度为5.5mmol/L),刺激胰岛细胞1d时,葡萄糖浓度为2.2mmol/L时,PDX-1表达显著降低,当葡萄糖浓度高于对照组时,PDX-1基因的表达量呈浓度依赖性升高;4d时,低糖浓度仍然显著抑制PDX-1基因表达,浓度升至11.1mmol/L,PDX-1基因表达量呈显著升高,浓度为16.7mmol/L时,PDX-1基因表达量呈下降趋势,浓度升至33.3mmol/L时,PDX-1基因表达量明显降低;7d时,除浓度11.1mmol/L外,其余浓度PDX-1基因表达均降低;刺激时间延长到14d,非生理浓度葡萄糖均表现为对PDX-1基因的抑制作用。结论低血糖可以抑制PDX-1基因表达。短期的血糖升高可以一定程度地刺激PDX-1基因表达,但长期的高血糖则使PDX-1基因表达明显受抑。 展开更多
关键词 葡萄糖 腺-十二指肠同源基因-1 葡萄糖毒性
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胰十二指肠同源异型盒基因-1多态性与2型糖尿病的相关性 被引量:1
3
作者 谭英姿 李俊燕 +1 位作者 陶枫 陆灏 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第24期6136-6138,共3页
目的探讨胰十二指肠同源异型盒基因(PDX)-1多态性位点(rs4415872,rs1124607和rs4581569)与上海汉族人群2型糖尿病的关系。方法选取1 285例正常健康个体为对照组,经确诊的1 245例2型糖尿病患者为病例组。收集静脉血液标本1 ml,提取全基因... 目的探讨胰十二指肠同源异型盒基因(PDX)-1多态性位点(rs4415872,rs1124607和rs4581569)与上海汉族人群2型糖尿病的关系。方法选取1 285例正常健康个体为对照组,经确诊的1 245例2型糖尿病患者为病例组。收集静脉血液标本1 ml,提取全基因组DNA。应用Taqman基因分型技术进行多态性检测。结果与对照组相比,PDX-1基因rs1124607位点的基因型和等位基因频率分布在病例组中具有统计学意义[基因型:P=7.82×10^(-5);等位基因:P=0.000 9,OR=0.780(0.688~0.886)]经Bonferroni矫正后仍具有统计学差异(基因型:P=2.35×10^(-4);等位基因:P=0.000 3)。结论 PDX1基因rs1124607位点可能与上海汉族人群2型糖尿病具有相关性。 展开更多
关键词 2型糖尿病 基因多态性 十二指肠同源异型基因
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瘦素对大鼠胰岛细胞胰腺-十二指肠同源盒基因-1表达的调节作用 被引量:1
4
作者 董凌燕 刘超 +2 位作者 张梅 刘翠萍 覃又文 《军医进修学院学报》 CAS 北大核心 2008年第4期312-313,共2页
目的:研究不同浓度瘦素对大鼠胰岛细胞PDX-1基因表达的影响,在基因转录调节因子水平探讨其在肥胖2型糖尿病发病中的作用。方法:不同刺激浓度瘦素(0 ng.mL-1、10 ng.mL-1、25 ng.mL-1、50 ng.mL-1、102ng.mL-1、103ng.mL-1)与葡萄糖浓度... 目的:研究不同浓度瘦素对大鼠胰岛细胞PDX-1基因表达的影响,在基因转录调节因子水平探讨其在肥胖2型糖尿病发病中的作用。方法:不同刺激浓度瘦素(0 ng.mL-1、10 ng.mL-1、25 ng.mL-1、50 ng.mL-1、102ng.mL-1、103ng.mL-1)与葡萄糖浓度分别为2.2 mmol.L-1、5.5 mmol.L-1、11.1 mmol.L-1的RPM I1640营养液共培养24 h后,提取细胞总RNA。运用RT-PCR技术检测PDX-1基因表达的变化。结果:葡萄糖浓度为2.2 mmol.L-1、5.5 mmol.L-1、11.1 mmol.L-1时,各种浓度的瘦素对PDX-1基因的表达均无明显影响。结论:瘦素对PDX-1表达无明显调节作用。 展开更多
关键词 瘦素 基因 同源 十二指肠
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白细胞介素10基因对未发病非肥胖型糖尿病小鼠肝脏胰-十二指肠同源盒1表达的影响 被引量:2
5
作者 于淑凤 任安霞 +1 位作者 张丽娟 李堂 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2015年第27期4371-4378,共8页
背景:研究发现肝脏细胞在给予转入胰-十二指肠同源盒1基因后可合成胰岛素,抗CD20单克隆抗体可抑制产胰岛素的肝脏细胞发生自身免疫反应,但机制尚不明确。目的:了解腺病毒介导的小鼠白细胞介素10(Adenovirus vector-mediated murine inte... 背景:研究发现肝脏细胞在给予转入胰-十二指肠同源盒1基因后可合成胰岛素,抗CD20单克隆抗体可抑制产胰岛素的肝脏细胞发生自身免疫反应,但机制尚不明确。目的:了解腺病毒介导的小鼠白细胞介素10(Adenovirus vector-mediated murine interleukin,Ad-mI L-10)及抗CD20单克隆抗体联合干预未发病非肥胖糖尿病模型小鼠,对其肝脏细胞以及肝脏胰-十二指肠同源盒1表达的影响。方法:3-5周龄雌性未发病非肥胖糖尿病模型小鼠40只,随机分为抗CD20单克隆抗体组、抗CD20单克隆抗体+白细胞介素10组、白细胞介素10组和对照组,分别于第1,8,15,21天尾静脉注射抗CD20单克隆抗体、抗CD20单克隆抗体+Ad-m IL-10、Ad-mI L-10和生理盐水。结果与结论:12周后,与对照组相比,经抗CD20单克隆抗体和/或白细胞介素10治疗的未发病非肥胖糖尿病模型小鼠血糖水平明显降低,而血清和肝脏中胰岛素、白细胞介素10和CD20表达明显增加,同时肝脏中胰-十二指肠同源盒1表达水平增加;且经抗CD20单克隆抗体和白细胞介素10联合对上述指标的影响高于单独应用;但无论是联合干预还是单独干预均对小鼠肝脏炎症病变无明显影响。证实CD20单抗及白细胞介素10基因联合干预为促使非肥胖糖尿病模型小鼠肝脏胰-十二指肠同源盒1表达机制之一。 展开更多
关键词 糖尿病 1 抗原 CD20 白细胞介素10 实验动物 组织工程 单克隆抗体 -十二指肠同源1 非肥胖型糖尿病小鼠 1型糖尿病 岛素 肝脏 国家自然科学基金
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胰十二指肠同源盒基因-1逆转录病毒表达载体的构建及其在肝干细胞中的稳定表达
6
作者 金彩霞 李文林 +3 位作者 朱吉 田棣 张南 胡以平 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期834-836,共3页
目的:通过克隆胰十二指肠同源盒基因-1(pancreatic duodenal homeobox-1,PDX-1),构建表达PDX-1的逆转录病毒表达载体和稳定表达PDX-1的肝原始细胞系(liver epithelial progenitor cells,LEPCs),以研究肝干细胞向胰腺细胞的转分化潜能。... 目的:通过克隆胰十二指肠同源盒基因-1(pancreatic duodenal homeobox-1,PDX-1),构建表达PDX-1的逆转录病毒表达载体和稳定表达PDX-1的肝原始细胞系(liver epithelial progenitor cells,LEPCs),以研究肝干细胞向胰腺细胞的转分化潜能。方法:通过PCR方法克隆PDX-1基因全长,将其构建到pMSCVpuro逆转录病毒载体中获得pMSCV PDX-1 puro载体。将该载体导入Phoenix包装细胞系,进而采用乒乓转染的方法感染包装细胞PT67,获得高滴度稳定产毒的PT67细胞系。结果:成功构建了pMSCV PDX-1 puro载体,并转染PT67细胞。利用PT67细胞系产生的病毒上清可以高效的感染体外培养的肝干细胞LEPCs,获得稳定表达PDX-1基因的LEPCs(LEPCs PDX-1)。结论:PDX-1逆转录病毒表达载体的成功构建和稳定表达PDX-1的肝干细胞系的获得为研究LEPCs向胰腺细胞的转分化奠定了基础。 展开更多
关键词 十二指肠同源基因-1 逆转录病毒科 干细胞
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胰十二指肠同源盒基因-1启动子在肝干细胞分化研究中的应用
7
作者 金彩霞 李文林 +3 位作者 朱吉 张南 田棣 胡以平 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2006年第5期337-339,共3页
背景与目的利用报告基因监测肝干细胞向胰腺细胞的转分化潜能。材料与方法通过PCR从小鼠基因组中克隆胰十二指肠同源盒基因-1(Pancreaticduodenalhomeobox-1,PDX-1)启动子片段,构建PDX-1启动子调控的绿色荧光蛋白报告载体(pPDX-1EGFP),... 背景与目的利用报告基因监测肝干细胞向胰腺细胞的转分化潜能。材料与方法通过PCR从小鼠基因组中克隆胰十二指肠同源盒基因-1(Pancreaticduodenalhomeobox-1,PDX-1)启动子片段,构建PDX-1启动子调控的绿色荧光蛋白报告载体(pPDX-1EGFP),并利用报告载体标记的肝原始细胞系(Liverepithelialprogenitorcells,LEPCs)观察肝干细胞向胰腺细胞的转分化潜能。结果获得PDX-1启动子调控的绿色荧光蛋白报告载体及报告载体标记的LEPCs。结论pPDX-1EGFP报告载体的成功构建为研究LEPCs向胰腺细胞的转分化提供了简捷的分子工具。 展开更多
关键词 肝干细胞 十二指肠同源基因-1启动子 转分化 绿色荧光蛋白
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胰十二指肠同源基因1在胃癌中的表达及对胃癌生物学行为的影响 被引量:7
8
作者 马娟 余莲英 +4 位作者 廖山婴 王蓓蓓 沙卫红 王启仪 刘庆华 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期215-223,共9页
【目的】明确PDX1基因在胃癌中的表达模式,探讨PDX1表达上调对胃癌细胞增殖和凋亡的影响,从而揭示PDX1在胃癌发生发展中的作用。【方法】免疫组化法检测胃癌组织芯片的PDX1蛋白表达,RT-PCR和免疫印迹法检测3株胃癌细胞(AGS、SGC7901、BC... 【目的】明确PDX1基因在胃癌中的表达模式,探讨PDX1表达上调对胃癌细胞增殖和凋亡的影响,从而揭示PDX1在胃癌发生发展中的作用。【方法】免疫组化法检测胃癌组织芯片的PDX1蛋白表达,RT-PCR和免疫印迹法检测3株胃癌细胞(AGS、SGC7901、BCG823)PDX1 mRNA表达;构建PDX1正义表达载体,瞬时转染胃癌细胞,免疫印迹法检测转染后PDX1、Ki-67、PCNA、Caspase3的表达,同时检测转染后胃癌细胞的增殖指数和凋亡指数。筛选PDX1稳定表达株,评价胃癌细胞伤口愈合、克隆形成、移植瘤形成等生物学行为。【结果】胃癌组织芯片包括171例腺癌,12例黏液腺癌,6例印戒细胞癌,5例未分化癌,7例恶性间质瘤,1例类癌,8例正常胃黏膜组织。PDX1蛋白在正常胃粘膜组织中腺上皮细胞的胞浆及胞核中高表达,胃癌组织中PDX1蛋白则表达下降甚至缺失(P<0.05);肿瘤分化级别越高,PDX1表达随之下降(P<0.05);与淋巴结无转移组比较,淋巴结转移组PDX1表达显著降低(P<0.05)。与正常对照相比,PDX1 mRNA和蛋白在胃癌细胞中表达微弱。瞬时转染PDX1正义表达载体后,PDX1表达明显上调,胃癌细胞增殖相关蛋白Ki67和PCNA下降,增殖指数显著下降;凋亡蛋白Caspase3被激活,cleaved-Caspase3被诱导表达,凋亡指数显著增加。与空质粒对照组比较,PDX1稳定过表达抑制了体外胃癌细胞的伤口愈合率以及克隆形成率和体内裸鼠移植瘤形成率(P<0.05)。【结论】PDX1基因在胃癌组织和细胞中表达下调,与癌组织淋巴结转移与分化程度有关;PDX1基因可能在胃癌发展过程中可能起着重要作用。 展开更多
关键词 十二指肠同源基因1 PDX1 胃癌 生物学行为
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胰腺十二指肠同源盒基因-1/神经生成素3信号通路在胰岛β细胞分化中的作用机制研究进展 被引量:5
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作者 洪洋 杨开明 《山东医药》 CAS 2020年第30期92-96,共5页
胰岛β细胞数量的绝对不足或相对减少可导致糖尿病的发生发展。胰腺十二指肠同源盒基因-1(Pdx-1)是胰腺发育和胰岛素基因转录的重要调控基因,在胰腺发育和胰腺各种细胞的分化中发挥重要作用。神经生成素3(Ngn3)是对胰岛发育有重要影响... 胰岛β细胞数量的绝对不足或相对减少可导致糖尿病的发生发展。胰腺十二指肠同源盒基因-1(Pdx-1)是胰腺发育和胰岛素基因转录的重要调控基因,在胰腺发育和胰腺各种细胞的分化中发挥重要作用。神经生成素3(Ngn3)是对胰岛发育有重要影响的转录因子,可始动内分泌祖细胞,促进胰内胚层细胞向内分泌细胞分化,同时维持成熟胰岛细胞的功能。Pdx-1/Ngn3信号通路可促进干细胞向胰岛β细胞的分化和增殖,Pdx-1是Ngn3的上游调控因子,对胰干细胞的作用在于激活Ngn3的表达,Ngn3可通过调控神经细胞分化因子1、胰岛素瘤相关蛋白1(Insm1)、胰岛素基因增强结合蛋白1及Insm2、桩蛋白6、Nkx2同源框2、NK6 Homeobox 1等直接靶基因,影响胰内分泌细胞的分化和形成。 展开更多
关键词 十二指肠同源基因-1 神经生成素3 岛细胞 岛Β细胞 细胞分化 神经细胞分化因子1 岛素瘤相关蛋白1 岛素基因增强结合蛋白1 岛素基因增强结合蛋白2
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胰十二指肠同源框基因-1在骨髓来源nestin阳性细胞的转染及表达 被引量:1
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作者 王海澜 潘明新 +2 位作者 张会迎 安靓 高毅 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期528-531,共4页
目的将真核表达载体pEGFP-C1-PDX-1转染大鼠骨髓来源nestin阳性细胞,并对其转染条件进行优化以获得较高效率。方法将已构建好的重组载体转染骨髓来源nestin阳性细胞,改变DNA的量、转染后培养基中的血清浓度,在荧光显微镜下观察荧光并计... 目的将真核表达载体pEGFP-C1-PDX-1转染大鼠骨髓来源nestin阳性细胞,并对其转染条件进行优化以获得较高效率。方法将已构建好的重组载体转染骨髓来源nestin阳性细胞,改变DNA的量、转染后培养基中的血清浓度,在荧光显微镜下观察荧光并计算转染效率;转染后48h用RT-PCR检测目的基因的表达情况。结果质粒2~10μg获得最佳的转染效率,提高转染后培养基的血清浓度可提高转染后细胞存活率及转染效率。RT-PCR检测转染后骨髓来源nestin阳性细胞有PDX-1表达。结论通过优化转染条件提高了pEGFP-C1-PDX-1转染大鼠骨髓来源nestin阳性细胞的效率,为其成为组织工程的种子细胞提供了实验依据。 展开更多
关键词 nestin阳性细胞 十二指肠同源基因-1 电转染 糖尿病
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胰腺十二指肠同源框1基因在大鼠骨髓间充质干细胞向胰岛素分泌细胞定向分化过程中的作用 被引量:2
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作者 于丽 孙吉平 +2 位作者 陈燕春 岳炳德 管英俊 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期261-264,共4页
目的:探讨胰腺十二指肠同源框1基因(PDX-1)在大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向胰岛素分泌细胞定向分化过程中的作用。方法:新型纳米载体Superfect介导含有PDX-1基因的真核表达载体转染骨髓MSCs,G418筛选,分步法进行体外诱导;流式细胞仪检... 目的:探讨胰腺十二指肠同源框1基因(PDX-1)在大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向胰岛素分泌细胞定向分化过程中的作用。方法:新型纳米载体Superfect介导含有PDX-1基因的真核表达载体转染骨髓MSCs,G418筛选,分步法进行体外诱导;流式细胞仪检测诱导后胰岛素阳性细胞的比例,SABC免疫细胞化学染色和Western印迹法检测诱导后细胞胰岛素蛋白的表达;ELISA法检测诱导后细胞对葡萄糖刺激的反应能力。结果:Superfect可高效介导重组载体在骨髓MSCs表达,随着转染时间延长,表达逐渐增强PDX-1^+MSCs分化为胰岛素阳性细胞数较转染空白载体和PDX-1^-MSCs组明显增多;诱导后细胞表达胰岛素,转染PDX-1基因后表达明显增加;PDX-1^+MSCs对不同浓度的葡萄糖刺激表现出不同的胰岛素分泌反应。结论:骨髓MSCs体外能分化为胰岛素分泌细胞,PDX-1能显著提高其分化效率。 展开更多
关键词 十二指肠同源框1基因 骨髓间充质干细胞 岛素分泌细胞 细胞分化
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胰腺十二指肠同源框-1基因促进大鼠骨髓间充质干细胞体外横向分化为胰岛素分泌细胞 被引量:2
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作者 孙吉平 杨于嘉 贾延劼 《医学研究生学报》 CAS 2006年第11期980-983,I0008-I0009,共6页
目的:研究胰腺十二指肠同源框-1基因(Pdx-1)在骨髓间充质干细胞(MSC)体外分化中的作用。方法:构建含有Pdx-1基因的真核表达载体,转染介质Superfect介导重组载体转染MSC,G418筛选阳性细胞后对转染组(Pdx-1+MSC)和未转染组(Pdx-1-MSC)均... 目的:研究胰腺十二指肠同源框-1基因(Pdx-1)在骨髓间充质干细胞(MSC)体外分化中的作用。方法:构建含有Pdx-1基因的真核表达载体,转染介质Superfect介导重组载体转染MSC,G418筛选阳性细胞后对转染组(Pdx-1+MSC)和未转染组(Pdx-1-MSC)均体外进行诱导分化,细胞免疫组化染色鉴定诱导后胰岛素分泌阳性细胞。结果:限制性酶切分析和序列测定证实成功构建了含有Pdx-1基因的真核表达载体,荧光显微镜观察证实Superfect能高效介导重组载体转染MSC;细胞免疫组化染色显示Pdx-1+MSC分化为胰岛素分泌细胞的数量较Pdx-1-MSC明显增多,阳性率分别为(28.23±2.56)%和(7.08±2.69)%。结论:Pdx-1能增强大鼠MSC体外分化为功能性胰岛素分泌细胞的能力,为胰岛移植开辟新的思路,对1型糖尿病治疗有重要的应用价值。 展开更多
关键词 十二指肠同源框-1基因 骨髓间充质干细胞 糖尿病
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高脂状态下Exendin-4对胰岛βTc6细胞内胰-十二指肠同源盒-1表达、细胞增殖功能及胰岛素分泌能力的干预作用
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作者 黄林晶 侯毅翰 +2 位作者 杨立勇 严孙杰 沈喜妹 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第20期4945-4947,共3页
目的 探讨Exendin-4在高脂状态下是否具有抗脂毒性及其相关机制是否涉及胰-十二指肠同源盒(PDX)-1。方法 不同浓度的Exendin-4培育βTc6细胞不同时间,再应用1 mmol/L游离脂肪酸(FFA)干预24 h,检测细胞内PDX-1表达及增殖能力和胰岛... 目的 探讨Exendin-4在高脂状态下是否具有抗脂毒性及其相关机制是否涉及胰-十二指肠同源盒(PDX)-1。方法 不同浓度的Exendin-4培育βTc6细胞不同时间,再应用1 mmol/L游离脂肪酸(FFA)干预24 h,检测细胞内PDX-1表达及增殖能力和胰岛素分泌功能。结果 1Exendin-4干预6 h,各组细胞PDX-1表达、细胞增殖能力和胰岛素分泌功能均未见明显改善;2当Exendin-4干预延长至12~24 h,随着干预浓度增高,细胞内PDX-1逐渐升高,细胞增殖能力和胰岛素分泌功能明显好转。结论 高脂状态下适宜浓度的Exendin-4干预一定时限可上调β细胞内PDX-1的表达,并改善细胞增殖功能及胰岛素分泌能力。 展开更多
关键词 EXENDIN-4 -十二指肠同源-1 岛素 游离脂肪酸 βTc6细胞
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Nucleofector^(TM)技术在胰腺十二指肠同源基因1转染大鼠骨髓来源巢蛋白阳性细胞中的应用(英文)
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作者 王海澜 蒋泽生 +2 位作者 李爱辉 潘明新 高毅 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2008年第29期5773-5777,共5页
背景:通过直接转入基因可强化调控骨髓间充质干细胞特异性分化。所以,有效的基因转染技术是髓间充质干细胞可以在组织工程中使用的关键。目的:选择NucleofectorTM技术转染大鼠骨髓间充质干细胞的优化转染方案,为高效体外转染大鼠髓间充... 背景:通过直接转入基因可强化调控骨髓间充质干细胞特异性分化。所以,有效的基因转染技术是髓间充质干细胞可以在组织工程中使用的关键。目的:选择NucleofectorTM技术转染大鼠骨髓间充质干细胞的优化转染方案,为高效体外转染大鼠髓间充质干细胞提供一个新方法。设计、时间及地点:对比观察细胞基因工程实验,于2007-10/12在南方医科大学珠江医院神经外科实验室完成。材料:骨髓间充质干细胞来源于SD大鼠,三四周龄,清洁级,体质量60~70g。实验过程:采用密度梯度离心法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,采用全骨髓法+神经干细胞培养基获得巢蛋白阳性细胞。运用NucleofectorTM技术的A33及A31程序,分别用1,5,10μg重组质粒pEGFP-C1转染骨髓间充质干细胞及巢蛋白阳性细胞,并将转染后的细胞分别培养在含体积分数为0.10及体积分数为0.20胎牛血清的培养基中。主要观察指标:①通过LeicaDMIRE荧光显微镜下观察和计数表达绿色荧光的细胞计数转染率。②台盼蓝排斥实验检测细胞活力。③用RT-PCR法分析胰腺十二指肠同源基因1基因在转染细胞中的表达。结果:应用NucleofectorTM技术的A33程序转染神经干细胞较转染骨髓间充质干细胞的转染率高,并优于A31程序。转染后在含体积分数为0.20胎牛血清中培养的细胞24h转染率及存活率均显著高于在含体积分数为0.10胎牛血清培养的细胞(P<0.05)。RT-PCR检测转染重组质粒的巢蛋白阳性细胞中可见胰腺十二指肠同源基因1的mRNA表达,未转染胰腺十二指肠同源基因1的巢蛋白阳性细胞无胰腺十二指肠同源基因1的mRNA表达。结论:运用NucleofectorTM技术的A33程序以5μg的DNA转染骨髓来源的巢蛋白阳性细胞,转染后的细胞接种于含体积分数为0.20胎牛血清的培养基中可获得较高的转染效率及较高的存活率。 展开更多
关键词 十二指肠同源基因1 干细胞 大鼠基因转染
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胰高血糖素样肽-1受体激动剂对糖耐量减低大鼠胰岛β细胞胰腺十二指肠同源盒因子-1的影响
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作者 李晓丽 郗光霞 +5 位作者 李东 范雪梅 高芳 田冰 刘烨 张学力 《中国药物与临床》 CAS 2011年第4期400-402,I0001,共4页
糖耐量减低(IGT)是2型糖尿病(T2DM)患者的必经阶段,近20年来T2DM呈迅猛发展,Yang等[1]研究显示,城市、乡镇和富裕农村20岁以上人群中糖调节受损的患者达15.5%,平均每年有10%~15%的发展为糖尿病。
关键词 高血糖素样肽-1受体激动剂 糖耐量减低 十二指肠 岛β细胞 同源 2型糖尿病 因子 大鼠
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艾塞那肽在高糖和低糖条件下对INS-1细胞胰腺十二指肠同源盒表达和细胞凋亡的影响
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作者 陈凌 李国徽 +1 位作者 董幼平 李宝玲 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期551-556,I0003,共7页
目的探讨胰高糖素样肽-1(GLP-1)类似物艾塞那肽在高糖和低糖条件下对胰岛B细胞株INS-1细胞胰腺十二指肠同源盒(PDX-1)表达和细胞凋亡的影响。方法体外培养INS-1细胞,分为正常对照组、高糖组、低糖组、高糖艾塞那肽干预组、低糖艾塞那肽... 目的探讨胰高糖素样肽-1(GLP-1)类似物艾塞那肽在高糖和低糖条件下对胰岛B细胞株INS-1细胞胰腺十二指肠同源盒(PDX-1)表达和细胞凋亡的影响。方法体外培养INS-1细胞,分为正常对照组、高糖组、低糖组、高糖艾塞那肽干预组、低糖艾塞那肽干预组、高糖二甲双胍干预组。使用相差显微镜观察细胞生长状态,采用流式细胞仪双染法和原位TUNEL法检测INS-1细胞凋亡情况,分别采用实时PCR法、Western印迹法和免疫组织化学法检测PDX-1表达情况。结果高糖组和低糖组的细胞凋亡指数和细胞凋亡率均显著高于正常对照组(P值均<0.01),高糖组与低糖组间的差异均无统计学意义(P值均>0.05);高糖艾塞那肽干预组的细胞凋亡指数和细胞凋亡率均显著高于正常对照组(P值均<0.05),但均显著低于高糖组(P值均<0.05);低糖艾塞那肽干预组的细胞凋亡指数和细胞凋亡率均显著高于正常对照组(P值均<0.05),但均显著低于低糖组(P值均<0.05);高糖艾塞那肽干预组与低糖艾塞那肽干预组间细胞凋亡指数和细胞凋亡率的差异均无统计学意义(P值均>0.05);高糖二甲双胍干预组的细胞凋亡指数和细胞凋亡率均显著高于正常对照组(P值均<0.05),但与高糖组的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。高糖组和低糖组的PDX-1表达均显著低于正常对照组(P值均<0.01),高糖组与低糖组间的差异无统计学意义(P>0.05);高糖艾塞那肽干预组的PDX-1表达显著低于正常对照组(P<0.05),但显著高于高糖组(P<0.05);低糖艾塞那肽干预组的PDX-1表达显著低于正常对照组(P<0.05),但显著高于低糖组(P<0.05);高糖艾塞那肽干预组与低糖艾塞那肽干预组间PDX-1表达的差异无统计学意义(P>0.05);高糖二甲双胍干预组的PDX-1表达显著低于正常对照组(P<0.05),但与高糖组的差异无统计学意义(P>0.05)。结论在高糖和低糖条件下,艾塞那肽均能抑制INS-1细胞的凋亡,同时上调PDX-1的表达水平。 展开更多
关键词 高糖素样肽-1类似物 十二指肠同源 岛B细胞 细胞凋亡
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同源异形盒基因A1在结肠癌组织中的表达及临床意义
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作者 姜韬 马丽园 +4 位作者 邢林帅 赵立鹏 叶子琪 马硕 师新荣 《海南医学》 CAS 2023年第3期310-313,共4页
目的探讨同源异形盒基因A1(HOXA1)在结肠癌中的表达及临床意义。方法随机选取2021年3~10月宁夏医科大学总医院结直肠外科收治的结肠癌患者作为研究对象,运用RT-qPCR检测66例冰冻新鲜结肠癌组织及配对正常组织中HOXA1基因mRNA的表达;运... 目的探讨同源异形盒基因A1(HOXA1)在结肠癌中的表达及临床意义。方法随机选取2021年3~10月宁夏医科大学总医院结直肠外科收治的结肠癌患者作为研究对象,运用RT-qPCR检测66例冰冻新鲜结肠癌组织及配对正常组织中HOXA1基因mRNA的表达;运用免疫组织化学检测203例结肠癌石蜡组织芯片中HOXA1蛋白的表达水平,并分析其与临床病理参数间的关系。结果RT-qPCR结果显示,结肠癌中HOXA1 mRNA的相对表达量为5.634±0.563,明显高于正常结肠组织的1.893±0.442,差异具有显著统计学意义(P<0.01);免疫组织化学结果显示,HOXA1蛋白主要表达于细胞核中,其在结肠癌中的表达阳性率为62.56%,明显高于正常组织的21.67%,差异具有显著统计学意义(P<0.01);结肠癌中HOXA1表达水平与AJCC分期、T分期、淋巴结转移、远处转移及组织学分型均有关(P<0.05)。结论HOXA1在结肠癌中异常高表达,与肿瘤分期淋巴结转移等高危因素相关,是结肠癌潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 结肠癌 同源异形基因A1 组织芯片 免疫组化 预后
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胰腺十二指肠同源盒-1在乳腺癌分子亚型中的表达及临床意义 被引量:2
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作者 施华 宋旭东 +2 位作者 张晓霞 张志勇 朱海燕 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第17期1908-1909,共2页
目的通过检测乳腺癌病变中胰腺十二指肠同源盒-1(PDX-1)蛋白及mRNA的表达情况,分析其与乳腺癌分子亚型之间的关系。方法采用免疫组织化学EnVision法检测PDX-1、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、第二号人类表皮生长因子受体(Her-2)、细... 目的通过检测乳腺癌病变中胰腺十二指肠同源盒-1(PDX-1)蛋白及mRNA的表达情况,分析其与乳腺癌分子亚型之间的关系。方法采用免疫组织化学EnVision法检测PDX-1、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、第二号人类表皮生长因子受体(Her-2)、细胞角蛋白5&6(CK5/6)和上皮生长因子受体(EGFR)蛋白的表达,实时定量RT-PCR法检测PDX-1mRNA的表达。结果 PDX-1蛋白和mRNA在乳腺癌管腔A型和管腔B型中的表达显著低于在Her-2过表达型、基底细胞样型和未分类型中的表达(P<0.05)。结论 PDX-1蛋白和mRNA在乳腺癌管腔A型和管腔B型中的表达显著降低,PDX-1有望成为乳腺癌基因分型的筛选新指标。 展开更多
关键词 十二指肠同源-1 乳腺肿瘤 分子亚型
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微小RNA-433-3p靶向同源异形盒基因A1抑制胃癌MGC-803细胞增殖、侵袭的研究
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作者 赵轶峰 李明霞 +3 位作者 张超 胡晓敏 王雄 赵铁军 《消化肿瘤杂志(电子版)》 2023年第1期58-61,66,共5页
目的探讨微小RNA-433-3p(miR-433-3p)靶向同源异形盒基因A1(HOXA1)对胃癌MGC-803细胞增殖、侵袭的影响。方法体外培养人胃癌MGC-803细胞,分为对照组(正常培养,不进行任何处理)、si-NC组(转染miR-433-3p siRNA阴性对照)、si-miR-433-3p组... 目的探讨微小RNA-433-3p(miR-433-3p)靶向同源异形盒基因A1(HOXA1)对胃癌MGC-803细胞增殖、侵袭的影响。方法体外培养人胃癌MGC-803细胞,分为对照组(正常培养,不进行任何处理)、si-NC组(转染miR-433-3p siRNA阴性对照)、si-miR-433-3p组(转染miR-433-3p siRNA)、mimic-NC组(转染miR-433-3p mimic阴性对照)和miR-433-3p mimic组(转染miR-433-3p mimic)。荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测MGC-803细胞中miR-433-3p及HOXA1 mRNA表达;细胞计数法、Transwell法分别检测MGC-803细胞增殖、侵袭;双荧光素酶报告基因试验检测miR-433-3p与HOXA1的靶向关系。结果与对照组和si-NC组相比,si-miR-433-3p组MGC-803细胞中miR-433-3p表达降低(P<0.05),HOXA1 mRNA表达、细胞增殖率、侵袭细胞数升高(P<0.05)。与对照组和mimic-NC组相比,miR-433-3p mimic组MGC-803细胞中miR-433-3p表达升高(P<0.05),HOXA1 mRNA表达、细胞增殖率、侵袭细胞数降低(P<0.05)。TargetScan网站预测及双荧光素酶报告基因试验结果显示,miR-433-3p与HOXA1在MGC-803细胞中存在靶向关系。结论miR-433-3p能靶向调控HOXA1抑制胃癌MGC-803细胞的增殖、侵袭过程。 展开更多
关键词 微小RNA-433-3p 同源异形基因A1 胃癌MGC-803细胞 增殖 侵袭
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同源盒基因调控先天缺牙的研究进展
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作者 张伟杰 刘向晖 杨玉娥 《国际口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期374-380,共7页
同源盒基因是一个进化上高度保守的含有同源结构域的转录因子,其编码的转录调节因子在器官发生上起着重要的调控作用。该家族中的多个亚家族不仅参与了牙胚的分化过程,而且常由于其异常的表达导致先天缺牙的发生。随着分子遗传学、基因... 同源盒基因是一个进化上高度保守的含有同源结构域的转录因子,其编码的转录调节因子在器官发生上起着重要的调控作用。该家族中的多个亚家族不仅参与了牙胚的分化过程,而且常由于其异常的表达导致先天缺牙的发生。随着分子遗传学、基因工程和人类基因组计划在先天缺牙疾病上的不断深入探索,同源盒基因突变类型及表达模式的研究正成为先天缺牙疾病的主要研究方向。本文通过对近年来文献回顾,对同源盒基因的研究进展、与先天缺牙相关同源盒基因的表达模式和分子机制以及同源盒基因在先天缺牙临床诊疗中的应用前景进行综述。 展开更多
关键词 同源基因 先天缺牙 非综合征性先天缺牙 牙齿发育 基因突变 牙组织再生工程 配对基因9 肌节同源异型基因1
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