大鼠胰岛细胞原代培养方法的改良

目的探讨一种简单易行的大鼠胰岛细胞培养方法,获取尽可能多的高质量胰岛,并寻找进行体外实验研究的最佳时间和条件。方法运用胶原酶原位灌注法分离胰腺,Ficoll400纯化胰岛细胞,双硫腙(DTZ)染色鉴定胰岛,运用倒置显微镜观察细胞生活状态,放免法检测胰岛素分泌考察胰岛功能。结果每只大鼠可分离438±27个胰岛/胰腺,细胞存活率为92.3±2.3%,GSIS实验中胰岛素释放指数SI为3.25±0.26。结论本分离纯化方法可获得数量多,质量高的胰岛细胞,为原代胰岛细胞的体外研究提供实验条件。

DPP-4抑制剂对胰岛β-细胞功能的影响

糖尿病的预防及治疗一直备受研究者关注,推动2型糖尿病患者病情逐渐发展的根本原因在于胰岛功能的进行性衰竭,其中既包括胰岛β细胞分泌胰岛素的缺陷,同时又存在α细胞不适当地分泌胰高血糖素及外周组织存在的胰岛素抵抗作用。随着对疾病发生发展的深入研究,如何改善糖尿病患者的胰岛功能,逆转修复胰岛功能,进而延缓病程发展,成为目前糖尿病治疗的一个新热点。

口服药及胰岛素治疗对初发2型糖尿病患者β细胞功能影响的比较

目的观察口服药及胰岛素治疗对初发2型糖尿病患者β细胞功能的不同影响。方法 68例初诊2型糖尿病患者在饮食及运动干预下,随机分为胰岛素组(Ins)33例及口服药组(OHA)35例,观察两组治疗前后FPG、2hPG、HbA1c、C-p、Ins等相关指标。用胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)评价胰岛素敏感性,用胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)评价β细胞功能,用胰岛素初期分泌功能指数(△I30/△G30)评价糖负荷早期β细胞的分泌功能,并计算胰岛素曲线下面积(AUGIns)。结果 (1)随防至12个月时,Ins组和OHA组的HOMA-β、△I30/△G30、AUGIns均较治疗前明显升高,但Ins组效果优于OHA组,与OHA组比较差异有统计学意义(P<0.01);(2)HOMA-β、△I30/△G30及AUGIns水平均较治疗前显著升高(P<0.01),Ins组较OHA组升高更显著,差异有统计学意义(P<0.01)。结论对初发2型糖尿病患者选择胰岛素治疗可以更好地保护胰岛β细胞功能,而且这种保护可以产生长期的影响。

胰岛素对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠视网膜血管内皮生长因子表达的影响

目的观察胰岛素对链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病大鼠视网膜血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法60只雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠随机分为柠檬酸钠缓冲液对照组（CIT-CON）和STZ诱导糖尿病组（STZDM），每组各30只。16周时，在CI-CON组中随机抽取24只大鼠分为柠檬酸钠缓冲液对照组（A组）和柠檬酸钠缓冲液加胰岛素作用组（B组），每组各12只，剩余6只作为阴性对照。同时，在STZ-DM组中也随机抽取24只大鼠分为STZ诱导糖尿病组（C组）和STZ诱导糖尿病组加胰岛素作用组（D组），每组也为12只，同样剩余6只作为阴性对照。胰岛素作用组皮下注射4IU胰岛素，24h后处死各组大鼠，3只取眼球、4％多聚甲醛固定，供制备病理切片；9只取视网膜神经上皮层，保存于液氮中。实时聚合酶链反应（Real-time PCR）检测视网膜VEGF mRNA表达，免疫组织化学、蛋白免疫印迹（Western Blot）检测VEGF蛋白表达。结果胰岛素作用于正常对照大鼠和STZ诱导的糖尿病大鼠后，正常大鼠VEGF mRNA 表达为7．71±0．25，蛋白表达为0．4925±0．0122，分别与胰岛素作用前比较，差异均有统计学意义（t=5．32，3．97；P〈0．05）；STZ诱导的糖尿病大鼠VEGF mRNA表达为9．05±0．28，蛋白表达为0．5152±0．0109，分别与胰岛素作用前比较，差异均无统计学意义（t=0．34，0．36；P〉0．05）。结论胰岛素作用于STZ诱导的糖尿病大鼠不能显著上调视网膜VEGF mRNA和蛋白水平。

冠心病和原发性高血压患者检测糖化血红蛋白、胰岛功能的应用价值研究

目的观察冠心病(CHD)和原发性高血压(EH)患者的糖化血红蛋白(HbAlc)、胰岛功能变化。方法检测CHD 137例、EH 152例、健康对照组50例的空腹和服糖2h后HbAlc、血糖、胰岛素、C-肽,并进行比较。结果 CHD患者、EH患者的HbAlc、空腹及服糖2h血糖、胰岛素、C-肽明显高于正常健康人(P<0.01)。结论 CHD、EH患者存在HbAlc增高,胰岛素抵抗(IR)、高胰岛素血症(HI)、高C-肽水平,IR拟处于核心地位,是多种代谢异常和心血管疾病的致病基础。

糖尿病胰岛功能与骨密度相关分析

目的探讨2型糖尿病与骨质疏松间的内在联系。方法使用DPX2L双能骨密度X线测量仪测定40例2型糖尿病患者及20例健康对照者正位腰椎(L2～4)和左侧股骨近端neck、ward、troch区骨密度。测定2型糖尿病患者的血钙、磷、碱性磷酸酶及C肽水平。结果 2型糖尿病合并骨质疏松组的C肽释放曲线下面积(AUC)低于未合并骨质疏松组(P<0.01)。结论 2型糖尿病患者的骨密度与胰岛功能有关,胰岛功能明显减退者骨密度亦明显降低,易患骨质疏松。