目的:研究胰岛再生源蛋白(regenerating isletderived protein,Reg)Ⅰ、Ⅲ在大鼠重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)小肠中表达,评价RegⅠ、Ⅲ水平与肠黏膜屏障损伤的关系,并初步探其作用机制.方法:72只SD大鼠随机分为对照...目的:研究胰岛再生源蛋白(regenerating isletderived protein,Reg)Ⅰ、Ⅲ在大鼠重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)小肠中表达,评价RegⅠ、Ⅲ水平与肠黏膜屏障损伤的关系,并初步探其作用机制.方法:72只SD大鼠随机分为对照组(N)、重症急性胰腺组(S)、10 mg/kg吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)预处理组(P)各为12 h及24 h两组.S组腹腔注射20%L-精氨酸2.5 g/kg大鼠体质量2次,中间间隔1 h;N组于腹腔注射等体积0.9%氯化钠;P组:于造模前1 h腹腔注射PDTC 10 mg/kg预处理.HE染色观察胰腺、小肠的病理变化,ELISA方法检测血清中白介素22(interleukin22,IL-22)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis f a c t o r-α,T N F-α)及肠型脂肪酸结合蛋白(intestinal fatty acid binding protein,I-FABP)水平,RT-PCR测定小肠组织中RegⅠ、ⅢmRNA表达含量,Western blot检测小肠组织中核转录因子κB(nuclear-factorκB,NF-κB)p65及RegⅠ、Ⅲ蛋白水平.结果:(1)SAP组在胰腺评分(S12 h 8.92±1.130,S24 h 11.31±1.609)、肠道评分(S12 h3.79±0.689,S24 h 4.33±0.354)、IL-22(S12h 712.46 ng/mL±81.549 ng/mL,S24 h 751.02ng/mL±104.054 ng/mL)、TNF-α(S12 h 138.08ng/mL±20.369 ng/mL,S24 h 159.43 ng/mL±24.46 ng/mL)、I-FABP(S12 h 338.04 IU/mL±61.876 IU/mL,S24 h 395.26 IU/mL±58.547IU/mL)、RegⅠ蛋白(S12 h 0.45±0.047,S24 h0.56±0.033)、RegⅢ蛋白(S12 h 0.70±0.084,S24 h 0.92±0.163)、NF-κB p65蛋白(S12 h0.51±0.065,S24 h 0.60±0.066)水平较对照组均有明显升高(P<0.05);(2)应用PDTC预处理后各指标较SAP组均有表达降低(P<0.05),但仍高于对照组(P<0.05);(3)RegⅠ、Ⅲ蛋白表达与肠黏膜病理评评分、IL-22、I-FABP、TNF-α及NF-κBp65表达呈正相关.结论:SAP时大鼠小肠组织RegⅠ、Ⅲ表达上调,与肠黏膜损伤及NF-κB通路活性相关.展开更多
文摘目的:研究胰岛再生源蛋白(regenerating isletderived protein,Reg)Ⅰ、Ⅲ在大鼠重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)小肠中表达,评价RegⅠ、Ⅲ水平与肠黏膜屏障损伤的关系,并初步探其作用机制.方法:72只SD大鼠随机分为对照组(N)、重症急性胰腺组(S)、10 mg/kg吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)预处理组(P)各为12 h及24 h两组.S组腹腔注射20%L-精氨酸2.5 g/kg大鼠体质量2次,中间间隔1 h;N组于腹腔注射等体积0.9%氯化钠;P组:于造模前1 h腹腔注射PDTC 10 mg/kg预处理.HE染色观察胰腺、小肠的病理变化,ELISA方法检测血清中白介素22(interleukin22,IL-22)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis f a c t o r-α,T N F-α)及肠型脂肪酸结合蛋白(intestinal fatty acid binding protein,I-FABP)水平,RT-PCR测定小肠组织中RegⅠ、ⅢmRNA表达含量,Western blot检测小肠组织中核转录因子κB(nuclear-factorκB,NF-κB)p65及RegⅠ、Ⅲ蛋白水平.结果:(1)SAP组在胰腺评分(S12 h 8.92±1.130,S24 h 11.31±1.609)、肠道评分(S12 h3.79±0.689,S24 h 4.33±0.354)、IL-22(S12h 712.46 ng/mL±81.549 ng/mL,S24 h 751.02ng/mL±104.054 ng/mL)、TNF-α(S12 h 138.08ng/mL±20.369 ng/mL,S24 h 159.43 ng/mL±24.46 ng/mL)、I-FABP(S12 h 338.04 IU/mL±61.876 IU/mL,S24 h 395.26 IU/mL±58.547IU/mL)、RegⅠ蛋白(S12 h 0.45±0.047,S24 h0.56±0.033)、RegⅢ蛋白(S12 h 0.70±0.084,S24 h 0.92±0.163)、NF-κB p65蛋白(S12 h0.51±0.065,S24 h 0.60±0.066)水平较对照组均有明显升高(P<0.05);(2)应用PDTC预处理后各指标较SAP组均有表达降低(P<0.05),但仍高于对照组(P<0.05);(3)RegⅠ、Ⅲ蛋白表达与肠黏膜病理评评分、IL-22、I-FABP、TNF-α及NF-κBp65表达呈正相关.结论:SAP时大鼠小肠组织RegⅠ、Ⅲ表达上调,与肠黏膜损伤及NF-κB通路活性相关.