血小板衍生生长因子-BB与胰岛素样生长因子-Ⅰ联合应用对大鼠正畸牙牙周膜细胞整合素β_3表达的影响

目的观察血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)与胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)联合应用对大鼠正畸牙压力侧牙周膜细胞(PDLCs)中整合素β3蛋白表达的影响。方法建立SD大鼠正畸牙移动模型,隔日于正畸牙颊侧牙龈黏膜下单独或联合注射10 ng PDGF-BB及200 ng IGF-Ⅰ,加力10 d后处死大鼠,取材用免疫组织化学方法检测正畸牙压力侧牙周膜细胞中整合素β3的表达。结果 PDGF-BB、IGF-Ⅰ单独或联合应用均能增强压力侧牙周膜细胞中整合素β3表达(P<0.01);与PDGF-BB、IGF-Ⅰ单独应用比较,IGF-Ⅰ加PDGF-BB组牙周膜细胞中整合素β3表达明显增强(P<0.05和P<0.01)。结论外源性PDGF-BB和IGF-Ⅰ在大鼠正畸牙的局部注射能上调压力侧牙周膜细胞中整合素β3表达,二者联合应用具有协同效应。

骨生长因子调控骨折愈合机制及在骨再生修复中的作用

背景:研究发现生物复合支架载体诱导骨生长因子在骨折局部的充分表达能够有效缩减骨折愈合的时间。目的:综述国内外相关文献,总结骨生长因子调控骨折愈合机制及应用进展。方法:中文以"骨生长因子、成纤维细胞生长因子、血小板衍生生长因子、转化生长因子β、骨形态发生蛋白、血管内皮生长因子、胰岛素样生长因子"检索CNKI、维普、万方数据库;英文以"BGF、FGF、PDGF、TGF-β、BMP、VEGF、IGF"为检索词检索PubMed数据库,纳入骨生长因子调控骨折愈合机制及其应用研究文章,排除重复及陈旧文献,共纳入文献58篇。结果与结论:各类骨生长因子来源广泛,特点不一,都有各自的作用机制,通过旁分泌、自分泌等多种方式形成局部及系统的协同作用,与靶细胞受体相结合,活化细胞内信号通路,增强细胞功能从而影响细胞迁移、增殖、合成、分化甚至细胞凋亡,有效促进骨愈合、治疗骨缺损。但是骨生长因子具有半衰期短、蛋白易失活等缺陷,通过优化载体设计、递送方式和研发新型生物医学材料能够有效改善骨生长因子的这些缺点,更好地用于骨再生修复。

REG3α基因促进胰岛内皮细胞分泌胰岛素

目的探讨小鼠胰岛再生衍生因子3α(REG3α)对胰岛β细胞功能代偿作用。方法建立小鼠部分(90%)胰腺切除模型,分别于术前、术后12和24 h检测血糖,术后48 h收集小鼠剩余胰腺组织,经全基因组芯片分析、q-PCR验证REG3α表达;然后构建REG3α过表达质粒,转染MS1细胞系,48 h后ELISA检测细胞上清培养液胰岛素分泌量的变化,并通过q-PCR检测转染后MS1中PDX1、INSULIN2 mRNA表达水平。结果小鼠部分胰腺切除后REG3α发生高表达。转染REG3α过表达质粒组胰岛素分泌量显著高于未转染组(转染REG3α组879±2 ng/L,未转染组686±5 ng/L,P<0.01);转染REG3α过表达质粒组胰岛素分泌量显著高于转染空载体pcDNA3.1组(转染REG3α组879±2 ng/L,转染空载体组671±5 ng/L,P<0.01)。转染REG3α过表达质粒后MS1中的PDX1、INSULIN2mRNA表达水平明显高于未转染组及转染空载体pcDNA3.1组(P<0.01)。结论 REG3α促进内皮细胞表达和分泌胰岛素可能具有对胰岛β细胞功能代偿作用。

急性冠状动脉综合征患者血清Reg3β、OSM水平的变化及临床意义

目的探讨急性冠状动脉综合征(ACS)患者血清再生胰岛衍生蛋白3β(Reg3β)、抑瘤素M(OSM)水平的变化及临床意义。方法选取2021年9月—2022年12月海南医学院附属海南医院/海南省人民医院急诊科收治ACS患者183例为ACS组,同期医院健康体检者65例为健康对照组,再根据随访12个月预后将ACS患者分为不良预后亚组(52例)和良好预后亚组(131例)。采用酶联免疫吸附法检测血清Reg3β、OSM水平;Spearman相关性分析ACS患者血清Reg3β与OSM水平的相关性;多因素Logistic回归和ROC曲线分析ACS患者不良预后的危险因素及血清Reg3β、OSM水平对其预测价值。结果与健康对照组比较,ACS组血清Reg3β、OSM水平升高(t/P=7.748/<0.001、9.450/<0.001);183例ACS患者12个月不良预后发生率为28.42%(52/183);与良好预后亚组比较,不良预后亚组血清Reg3β、OSM水平升高(t/P=7.390/<0.001、7.087/<0.001);ACS患者血清Reg3β与OSM水平呈正相关(r s/P=0.793/<0.001);年龄增加、KILLIP分级≥Ⅱ级、Gensini评分增加和Reg3β升高、OSM升高是ACS患者不良预后的独立危险因素[OR(95%CI)=1.071(1.008~1.138)、3.709(1.186~11.600)、1.045(1.022~1.067)、1.014(1.007~1.021)、1.007(1.004~1.010)];血清Reg3β、OSM水平及二者联合预测ACS患者不良预后的曲线下面积(AUC)分别为0.784、0.789、0.861,二者联合的AUC大于血清Reg3β、OSM水平单独预测(Z/P=2.955/0.003、2.696/0.007)。结论ACS患者血清Reg3β、OSM水平升高,并与不良预后密切相关,且二者联合预测ACS患者不良预后的价值较高。

白细胞介素-26/信号转导和转录激活因子3信号调控人膀胱癌5637细胞再生胰岛源性1A的表达

目的研究白细胞介素-26(IL-26)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号调控人膀胱癌5637细胞再生胰岛源性1A(REG1A)蛋白的表达机制。方法检测5637细胞白细胞介素-20受体1(IL-20R1)和白细胞介素-10受体2(IL-10R2)蛋白表达。使用小干扰RNA(si RNA)沉默5637细胞STAT3基因表达以及JAK2激酶(JAK2)抑制剂AG490抑制JAK2/STAT3信号通路,观察IL-26/STAT3信号对REG1A蛋白的表达调控。数据采用SPSS 13.0统计软件分析,组间数据比较应用单因素方差分析。结果 5637细胞表达IL-20R1和IL-10R2蛋白。IL-26能诱导5637细胞STAT3蛋白磷酸化(F=243.854,P<0.05)及上调REG1A蛋白表达(F=294.772,P<0.05),IL-26能通过诱导5637细胞STAT3蛋白磷酸化上调REG1A蛋白表达(F=2 087.99,P<0.05;F=811.734,P<0.05;F=1 497.064,P<0.05;F=586.943,P<0.05)。结论 IL-26能通过诱导STAT3蛋白磷酸化上调5637细胞REG1A蛋白表达。

血浆生物标记物水平与儿童急性移植物抗宿主病的相关性

背景:急性移植物抗宿主病是造血干细胞移植最主要的并发症之一,也是影响移植成败的关键,寻找其特异性生物学标记物对于疾病的早期诊断及治疗尤为重要。婴幼儿时期免疫功能不完善,其急性移植物抗宿主病发生后血浆生物标记物的变化有其自身特点。目的:研究异基因造血干细胞移植儿童患者血浆可溶性生长刺激表达基因2、胰岛再生衍生因子3α、肿瘤坏死因子受体1、白细胞介素6和白细胞介素8水平变化与急性移植物抗宿主病的关系,以期为急性移植物抗宿主病的早期诊断、预测治疗效果和预后提供可靠的检测指标。方法:南方医院儿科2019年3月至2020年12月行异基因造血干细胞移植共计127例患儿,采集移植前10 d、移植后第0,7,14,28,90天、临床急性移植物抗宿主病症状出现时、急性移植物抗宿主病药物干预后1,2,4周患儿外周血,采用Luminex方法检测血清可溶性生长刺激表达基因2、胰岛再生衍生因子3α、肿瘤坏死因子受体1、白细胞介素6和白细胞介素8水平。结果与结论:①在127例患儿中有100例在急性移植物抗宿主病发生点采集血浆标本,按照EBMT-NIH-CIBMTR分级标准未发生急性移植物抗宿主病60例,发生急性移植物抗宿主病有40例,其中有9例Ⅱ-Ⅳ度肠道急性移植物抗宿主病。②急性移植物抗宿主病组发生点的血浆可溶性生长刺激表达基因2和胰岛再生衍生因子3α水平高于无急性移植物抗宿主病组,差异均有显著性意义(P<0.05)。与无急性移植物抗宿主病组相比,急性移植物抗宿主病组移植后7 d的血浆可溶性生长刺激表达基因2水平显著增加(P<0.05)。单纯Ⅱ-Ⅳ度肠道急性移植物抗宿主病组发生点的血浆可溶性生长刺激表达基因2和胰岛再生衍生因子3α水平高于非肠道急性移植物抗宿主病组,差异均有显著性意义(P<0.01;P<0.05)。在发生点和造血干细胞移植后7 d时,急性移植物抗宿主病组和非急性移植物抗宿主病组间肿瘤坏死因子受体1、白细胞介素6和白细胞介素8水平无显著差异(P>0.05)。③在所有急性移植物抗宿主病患者中,与激素敏感组相比,激素耐药组的血浆可溶性生长刺激表达基因2和胰岛再生衍生因子3α水平呈上升趋势。④结果表明,移植后发生点的血浆可溶性生长刺激表达基因2和胰岛再生衍生因子3α水平升高提示急性移植物抗宿主病的发生,二者有助于急性移植物抗宿主病的早期预测。通过分析用药后1,2,4周的生物标记物水平,急性移植物抗宿主病患者治疗后血浆可溶性生长刺激表达基因2和胰岛再生衍生因子3α水平不降低可能与预后不良相关。

番石榴叶总黄酮促进糖尿病模型小鼠胰岛再生机制

目的:观察番石榴叶总黄酮对链脲佐菌素(streptozocin,STZ)糖尿病模型小鼠胰腺组织中胰腺十二指肠同源盒因子-1(pancreas-duodenumhomeobox-1,PDX-1),神经元素3(neurogenin 3,Ngn3),NK6转录因子相关基因座1(NK6 transcription factor related locus 1,Nkx6.1)表达的影响,探讨其促进胰岛β细胞再生的机制。方法:将STZ糖尿病模型小鼠随机分为模型组和治疗组,治疗组包括番石榴叶总黄酮低、高剂量组及二甲双胍组,另设10只正常小鼠为正常组。番石榴叶总黄酮低、高剂量组按小鼠体重分别以番石榴叶总黄酮0.198,0.396 g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,二甲双胍组以二甲双胍0.087 5 g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,正常组和模型组以等体积蒸馏水灌胃,2周后检测其空腹血糖、体重,苏木素-伊红(HE)染色观察胰岛病理形态学改变,实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测胰腺组织内胚胎期胰岛β细胞发育相关转录因子PDX-1,Ngn3,Nkx6.1 mRNA相对表达量。结果:与正常组比较,STZ糖尿病模型小鼠胰腺组织中PDX-1,Ngn3,Nkx6.1表达量明显下降(P<0.01);与模型组比较,番石榴叶总黄酮治疗组PDX-1,Ngn3,Nkx6.1 mRNA表达升高(P<0.05)。结论:番石榴叶总黄酮能上调糖尿病小鼠胰腺组织中PDX-1,Ngn3,Nkx6.1的表达;胰岛β细胞再生机制可能与PDX-1,Ngn3,Nkx6.1 mRNA表达的上调有关。

SDF-1/CXCR4轴在骨髓间充质干细胞移植促进胰岛再生中的作用

目的 观察同种异体骨髓间充质干细胞（MSCs）移植入受体后,基质细胞衍生因子（SDF）-1/CXCR4轴在促进残存胰岛及其周围新生血管增殖中的作用.方法 对大鼠MSCs进行体外培养、鉴定.链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病大鼠随机分为A组（MSCs移植组）、B组（MSCs移植＋SDF-I/CXCR4轴阻断剂AMD组）和C组（糖尿病对照组）,另设D组（正常大鼠对照组）.移植MSCs后第30天取出各组大鼠胰腺和血清,胰腺组织采用苏木素-伊红（HE）染色和免疫组织化学法观察CD31、增殖细胞核抗原（PCNA）、胰腺干细胞标志物（PDX）-1在胰腺组织的表达水平.血糖仪检测血糖水平、放免法检测胰岛素水平、酶联免疫吸附试验（ELISA）检测SDF-1水平.结果 （1）A组残存胰岛周围可见新生血管,CD31、PCNA、PDX-1染色阳性率分别为（71.2±5.3）%、（76.5±4.5）%、（69.8±6.7）%;B组残存胰岛周围基本未见新生血管,CD31、PCNA、PDX-1染色阳性率分别为（7.4±2.1）%、（5.5±3.7）%、（8.8±2.9）%,两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）.（2）移植后第25天,A组血糖浓度基本正常,低于B组和C组,而胰岛素水平明显高于B组和C组（P＜0.05）.（3）A组与B组血清SDF-1水平差异无统计学意义（P＞0.05）,但都明显高于C组（P＜0.05）.结论 MSCs促进胰岛再生和新生血管形成,AMD3100能抑制MSCs的作用,进而提示SDF-1/CXCR4轴在胰岛再生和血管形成中具有重要作用.

雷米普利抑制RAS后对糖尿病大鼠Reg3α表达的影响

目的观察雷米普利抑制肾素-血管紧张素系统(RAS)阻断后对糖尿病(DM)大鼠胰岛再生衍生因子3α(Reg3α)表达的影响。方法 SD大鼠10只采用链脲菌素40mg/kg腹腔注射建立DM模型:B组5只为模型对照(用生理盐水灌胃10周);C组5只采用雷米普利50mg·kg-1·d-1灌胃10周。另取5只大鼠腹腔注射等量柠檬酸缓冲液作为空白组(A组,用生理盐水灌胃10周)。基因芯片检测大鼠胰岛相关基因表达;实时定量PCR和Western blot验证相关基因mRNA和蛋白表达。结果 B组Reg3α表达较A组上调7.9倍,C组较B组Reg3α表达上调7.1倍。C组胰岛染色面积和胰岛形态结构较B组增加和改善。结论雷米普利抑制胰岛局部RAS系统,促进DM大鼠的胰岛再生;其作用可能部分通过影响Reg3α基因的表达实现。

新型肠壁通透性标志物用于评价炎症性疾病的研究进展

肠道菌群及其代谢产物失衡可能通过增加肠壁通透性(intestinal permeability,IP)影响宿主免疫反应。研究发现一些新型IP标志物不但能反映肠道局部功能性或机械性损伤程度,还能反映全身炎症反应。而炎症反应是炎症性疾病发生的基础,其严重程度是炎症性疾病进展的关键。最新研究表明,再生胰岛衍生蛋白3α(Reg3α)不但可用于诊断评价炎性肠病,还可用于评估消化道肿瘤的进展、分期、治疗效果及预后,而且还能反映酒精性肝病患者、肝细胞癌患者及HIV感染者的全身免疫反应状态。小肠脂肪酸结合蛋白(I-FABP)能用于评估新生儿坏死性肠炎和急性胰腺炎的进展与预后。而血浆瓜氨酸(CIT)对肠上皮细胞的功能性损伤敏感。本文综述了与局部或全身炎症反应相关的IP标志物用于评价炎症性疾病的研究进展以及这些标志物的临床应用价值与局限性,这些标志物包括Reg3α、I-FABP、CIT、D-乳酸、肠黏膜紧密连接蛋白及血清二胺氧化酶等。