胰岛素受体底物-1/-2与胰岛素信号转导

胰岛素受体底物(IRS)是胰岛素信号传递的重要介质,其中IRS-1和IRS-2在胰岛素信号转导通路中的作用尤为重要。IRS-1和IRS-2在体内多个组织中均有表达,其中在胰岛β细胞、肝脏、骨骼肌和脂肪组织中表达最为丰富。近年来国内外在对IRS-1和IRS-2的研究中发现,无论是糖尿病患者或是模型,其胰岛β细胞、肝脏、骨骼肌和脂肪组织中IRS-1和IRS-2的表达均有改变,且变化程度各有不同。

开郁清胃方对2型糖尿病模型大鼠胰岛细胞胰岛素受体及胰岛素受体底物-1表达的影响

目的研究中药复方开郁清胃方改善2型糖尿病胰岛细胞功能的作用机理。方法以高脂饲料喂养9周加小剂量链脲佐菌素腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型,造模后的动物随机分成模型组、开郁清胃组和文迪雅组,并设立正常对照组。测定空腹血糖、葡萄糖负荷后2h血糖以及糖化血清蛋白、基础胰岛素等,采用高胰岛素正葡萄糖钳夹技术评价整体的胰岛素抵抗,静脉糖耐量试验评估胰岛细胞功能,应用EnVision方法测定胰岛细胞胰岛素和胰岛素受体(IRc)、胰岛素受体底物-1(IRS-1)的表达。结果模型组大鼠同时具有胰岛素抵抗、胰岛素分泌异常和血糖的增高,开郁清胃方和文迪雅都可明显改善模型大鼠的糖代谢和胰岛素的分泌,提高胰岛细胞IRc和IRS-1的表达。结论开郁清胃方可以确切地改善2型糖尿病模型大鼠的糖代谢,其机理包括两个方面,一是外周胰岛素敏感性的提高;二是胰岛细胞功能的改善。对胰岛细胞的胰岛素信号转导的影响是其改善胰岛细胞功能的重要作用机理。

2型糖尿病患者胰岛素受体底物-2基因3′-非翻译区变异的研究

为了探讨胰岛素受体底物 2 (insulinreceptorsubstrate 2 ,简称IRS 2 )基因 3′ 非翻译区 (3′ untranslatedregion,简称 3′ UTR)的分子变异及其与 2型糖尿病 (type 2diabetesmellitus,简称T2DM)的关系 ,从湖南地区 12 8例T2DM患者外周血白细胞中提取基因组DNA ,采用聚合酶链式反应 (polymerasechainreaction ,简称PCR) 变性高效液相色谱 (denatur inghigh performanceliquidchromatography,简称DHPLC)技术筛查IRS 2基因 3′ UTR ,对DHPLC峰型异常样品进行序列分析。在 18例T2DM患者IRS 2基因 3′ UTR的 4 0 6 4bp处发现T→C的突变。IRS 2基因 3′ UTR的T40 64→C突变可能与T2DM有关。

中国人2型糖尿病患者胰岛素受体底物-1基因变异的研究

目的 确定中国人胰岛素受体底物 - 1基因变异是否与 2型糖尿病相关。方法 用聚合酶链反应 -单链构象多态性分析方法筛选了 6 8例中国人 2型糖尿病患者和 6 8例正常对照组的胰岛素受体底物 - 1基因的 +170 0～ +4 437bp片段。再将单链构象多态性有改变的全部片段进行 DNA序列分析。结果 发现 2种出现氨基酸变化的核苷酸变异[GGG→ AGG(G971 R)和 CCT→ TCT(P1 0 79S) ]和 3种无声变异 [GAT→ GAC(D42 2 D)、CCA→ CCC(P737P)和 GCA→ GCG(A80 4A) ],其中 CCA→CCC(P737P)和 CCT→ TCT(P1 0 79S) ]是首次报道。这 5种核苷酸变异均在 2型糖尿病患者中发现 ,而在正常对照组中只发现 GCA→ GCG(A80 4A)。中国人 2型糖尿病患者这 5种变异的发生频率远高于正常对照组(38.2 % vs7.4% ,χ2 =18.42 ,P<0 .0 1)。最常见的多态性是 GCA→GCG(A80 4A) ,在 2型糖尿病患者中它的发生率远高于正常对照组 (2 6 .5 % vs7.4% ,2 =8.84,P <0 .0 1)。在 2型糖尿病患者和正常对照组中 ,该变异的纯合子发生率分别为 8.8%和 1.5 % (χ2 =2 .41,P >0 .0 5 )。结论 胰岛素受体底物 - 1基因的核苷酸变异可能与中国人 2型糖尿病的发生有相关性。

胰岛素受体底物-2基因多态性与2型糖尿病的相关性研究

目的 研究北京地区汉族人群中胰岛素受体底物 - 2 (IRS- 2 )基因密码子 10 5 7g/a多态性与 2型糖尿病及其中间表型的相关性。 方法 选取北京地区的中国汉族患者 110例 ,对照组 80例。用聚合酶链反应 -限制性内切酶片段长度多态性 (PCR- RFL P)的方法检测 IRS- 2基因密码子10 5 7g/a多态性。 结果 (1) IRS- 2基因密码子 10 5 7g/a多态性的 a等位基因频率在糖尿病组和对照组中分别为 2 6 .4%和 36 .3%。 (2 )糖尿病组 aa基因型频率明显低于对照组 ,分别为 5 .5 %和 18.7% (P=0 .0 16 )。L ogistic相关分析表明 :aa基因型为 2型糖尿病的保护性因素 ,OR值为 0 .2 8(95 %CI=0 .0 9～ 0 .91,P=0 .0 3)。 (3)不同基因型组间血压、血脂、胰岛素抵抗指数及胰岛 β细胞功能指数等均差异无显著性。 结论 中国北方地区汉族人群中 IRS- 2基因密码子 10 5 7g/a多态性的 aa基因型在 2型糖尿病中明显减少 ,但 2型糖尿病各种中间表型特征在不同基因型间均无明显差异。上述结果有待于进一步扩大样本量来加以确认。

2型糖尿病大鼠胰岛素受体底物-2基因表达变化及中药的干预作用

目的:观察2型糖尿病大鼠血糖、血清胰岛素浓度和胰岛素受体底物-2(insulin receptor substrate 2,IRS-2)基因表达的变化及复方黄连降糖片对其变化的影响。方法:以小剂量链脲佐菌素(28mg/kg)腹腔注射合并高脂饮食诱导2型糖尿病大鼠模型,给予不同剂量复方黄连降糖片治疗8周。处死后分别测定其血糖、血清胰岛素浓度,肝脏、骨骼肌和脂肪组织的IRS-2的mRNA及蛋白表达。结果:2型糖尿病大鼠的血糖、血清胰岛素升高,各组织IRS-2的mRNA及蛋白表达下降;复方黄连降糖片能降低模型大鼠的血糖和血清胰岛素,并能显著升高各组织IRS-2的mRNA及蛋白表达。结论:复方黄连降糖片治疗2型糖尿病可能与其提高外周组织IRS-2的基因表达从而改善胰岛素的信号传导有关。

胰岛素受体底物-1基因3′非翻译区的突变与中国人2型糖尿病的关系

目的 :研究胰岛素受体底物 1(IRS 1)基因 3′非翻译区的突变与中国 2型糖尿病的关系。方法 :采用PCR SSCP技术扫描 12 0例中国 2型糖尿病患者和 12 0例正常对照的IRS 1基因 3′非翻译区序列 ,所有SSCP变异的样品进行DNA测序分析。结果 :SSCP分析存在假阳性结果。测序未发现有基因突变。结论 :IRS 1基因 3′非翻译区的突变不是引起中国人

胰岛素受体底物-4基因多态性与2型糖尿病的相关性研究

目的 研究北京地区汉族人群胰岛素受体底物 4 (IRS 4 )基因密码子 879c g多态性与 2型糖尿病的相关性。 方法 采用配偶对作病例 对照研究。用聚合酶链反应 (PCR) 限制性内切酶片段长度多态性 (RFLP)的方法检测IRS 4基因密码子 879c g多态性。 结果 ( 1)男性与女性间IRS 4基因密码子 879c g多态性分布特点不同 ,男性无杂合子。g等位基因频率为男性 6 1.8%,女性6 3 .9%。 ( 2 )此多态性位点的基因型频率和等位基因频率在 2型糖尿病组和对照组间差异无显著意义。 ( 3)在男性对照组中 ,可见gg基因型组胰岛 β细胞功能指数低于cc基因型组。 结论 北京地区汉族人群中IRS 4基因密码子 879c g多态性与 2型糖尿病无明显相关性。

胰岛素受体底物-2和2型糖尿病

胰岛素受体底物 2 (IRS 2 )作为接头蛋白 ,主要连接胰岛素受体和含SH2区蛋白 ,介导胰岛素、胰岛素样生长因子 1等信号通道 ,而调节细胞新陈代谢、生长和分化。剔除IRS 2基因的纯合子动物 (IRS 2 / )具有 2型糖尿病的全部特征 ,因此IRS 2基因被确定为 2型糖尿病的候选基因。人类IRS 2基因有两个内含子 ,孕酮可以增强IRS 2的转录。

丝胶对2型糖尿病大鼠肝脏胰岛素受体底物-2表达的影响

目的研究丝胶对2型糖尿病大鼠肝脏胰岛素受体底物(IRS)-2表达的影响。方法 36只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组,每组12只。采用链脲佐菌素连续腹腔注射法制作2型糖尿病大鼠模型。待模型成功建立后,丝胶治疗组大鼠给予丝胶(2.4 g·kg^(-1)·d^(-1))灌胃。SP免疫组织化学染色、免疫印迹法和RT-PCR检测大鼠肝脏组织IRS-2的表达。结果丝胶可明显提高糖尿病模型大鼠肝脏组织IRS-2阳性细胞数、IRS-2蛋白和mRNA的表达(P<0.01)。结论丝胶可通过上调糖尿病大鼠肝脏IRS-2的表达,影响胰岛素的信号转导和改善胰岛素抵抗,起到降低血糖的作用。

丝胶对Ⅱ型糖尿病大鼠肝胰岛素受体和胰岛素受体底物-2的调控作用

目的：研究丝胶对Ⅱ型糖尿病大鼠肝细胞胰岛素受体（IR）及胰岛素受体底物-2 （IRS-2）表达的影响.方法：SD大鼠随机分为5组,分别为正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组、阳性对照组、丝胶预防组.采用链脲佐菌素连续腹腔注射法制作Ⅱ型糖尿病大鼠模型.丝胶治疗组大鼠给予丝胶（2.4g·kg-1·d-1）灌胃35 d,阳性对照组大鼠给予二甲双胍（55.33 mg·kg-1·d-1）灌胃35 d,丝胶预防组大鼠于2％链脲佐菌素（25 mg/kg）连续腹腔注射之前给予丝胶（2.4g·kg-1·d-1）灌胃35d.采用葡萄糖氧化酶法检测各组大鼠的空腹血糖;SP免疫组织化学显色、蛋白免疫印迹和RT-PCR检测肝细胞中IR和IRS2的表达.结果：丝胶可明显上调糖尿病大鼠肝胰岛素受体和胰岛素受体底物-2mRNA表达,显著增加IR和IRS-2蛋白的表达.结论：丝胶可通过上调糖尿病肝IR和IRS-2的表达,改善胰岛素抵抗,起到降低血糖的作用.

有氧运动对小鼠骨骼肌结节性硬化复合物蛋白2基因表达及胰岛素受体底物1丝氨酸磷酸化的影响

背景:研究表明,胰岛素受体底物蛋白1(insulin receptor substrate1,IRS1)的丝氨酸磷酸化和结节性硬化复合物蛋白2的表达及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/核糖体S6激酶1信号通路的异常可诱导机体产生胰岛素抵抗。目的:观察有氧运动对小鼠骨骼肌结节性硬化复合物蛋白2基因表达及IRS1丝氨酸磷酸化的影响。方法:将C57BL/6小鼠随机分为安静组和运动组,运动组进行6周的75%VO2max强度的有氧跑台运动,安静组不做任何干预。采用RT-PCR,Western blot和免疫荧光组织化学染色等方法检测各组大鼠骨骼肌结节性硬化复合物蛋白2,IRS1,pIRS1-Ser307和pIRS1-Ser636/639的表达和定位。结果与结论:运动组结节性硬化复合物蛋白2mRNA及蛋白表达高于安静组(P<0.05),两组间胰岛素受体底物蛋白1mRNA及蛋白表达差异无显著性意义。运动组胰岛素受体底物蛋白1的丝氨酸307和丝氨酸636/639位点的磷酸化明显低于安静组(P<0.05)。结果提示,有氧运动可增强骨骼肌组织结节性硬化复合物蛋白2基因表达,进而抑制胰岛素受体底物蛋白1的丝氨酸磷酸化。

胰岛素受体底物-2基因1057G/D多态性与妊娠期糖尿病的相关性

目的研究胰岛素受体底物-2(IRS-2)基因1057G/D多态性在南京地区汉族孕妇中的频率分布及其与妊娠期糖尿病(GDM)患者胰岛素抵抗的相关性。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)检测110例GDM孕妇(GDM组)及100例正常孕妇(NGT组)IRS-2基因1057G/D等位基因分布及基因频率,同时测定所有研究对象的空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FIns),并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)以评价胰岛素抵抗状态。结果①IRS-2基因1057 D等位基因频率在GDM和NGT组中分别为25.91%和31.50%,差异无显著意义(P>0.05);②与NGT组相比,GDM组的FPG、FIns和HOMA-IR明显升高,差异有显著意义(P<0.05)。③GDM组和NGT组中不同基因型孕妇FPG、FIns和HOMA-IR等差异均无显著性(P>0.05)。结论南京地区汉族孕妇中IRS-2基因1057G/D多态性可能与妊娠期糖尿病的发生和胰岛素抵抗状态无关。上述结果尚待进一步通过联合检测和扩大样本量来确认。

单纯性肥胖及2型糖尿病儿童胰岛素受体底物-1的研究

目的:探讨单纯性肥胖及2型糖尿病儿童胰岛素受体底物-1(IRS-1)表达的改变。方法:对20例单纯性肥胖儿童,20例2型糖尿病儿童及20例对照组儿童,采用细胞免疫技术进行白细胞染色,运用图像分析软件计算光密度值,从而定量分析白细胞中IRS-1的含量变化。结果:肥胖组、2型糖尿病组白细胞中IRS-1表达下降,且与对照组相比有统计学意义(P<0.05)。结论:肥胖组、2型糖尿病组白细胞中IRS-1表达下降,与对照组相比有统计学意义(P<0.05),提示肥胖组与2型糖尿病组儿童胰岛素信号传递中受体后作用的关键底物缺陷,影响了胰岛作用的发挥。提示IRS-1与胰岛素抵抗有关,有利于进一步理解2型糖尿病的发病机制,指导临床治疗。

胰岛素受体底物-2基因多态性在多囊卵巢综合征中的初步研究

目的:探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者与对照组胰岛素受体底物-2(IRS-2)基因密码子1057甘氨酸/天冬氨酸(1057Gly/Asp)多态性的不同。方法:应用PCR酶切方法(PCR-RFLP)检测60例PCOS患者和30例对照的IRS-2基因密码子1057G/A的等位基因分布及基因频率。结果:IRS-2基因型分布及基因频率在两组间差异有显著性,两组间空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数(HOMA1-IR)、促黄体生成素/促卵泡刺激素(LH/FSH)、游离睾酮(T)的差异也有显著性。结论:IRS-2基因1057G/A多态性在PCOS患者和对照组之间差异有显著性,可能是PCOS患者发生胰岛素抵抗(IR)的机制之一,也可能是PCOS的易感基因。

胰岛素受体底物和酪氨酸磷酸酶在2型糖尿病大鼠肌肉组织中的蛋白表达及其意义

目的研究2型糖尿病对胰岛素产生抵抗的分子机制。方法用Western杂交检测2型糖尿病模型(OLETF大鼠)肌肉组织内IRS-1及SH-PTP2的蛋白表达水平,并以同种属的Wistar大鼠做比较。结果OLETF糖尿病大鼠的空腹和餐后血糖水平较对照组明显增高(P<0.05);Western杂交显示OLETF大鼠肌肉组织内IRS-1蛋白表达较对照组减少(P<0.05);而SH-PTP2的蛋白表达则较对照组增加(P<0.05)。结论IRS-1及SH-PTP2蛋白表达的异常改变,可能是引起2型糖尿病产生胰岛素抵抗的分子机制之一。

胰岛素受体底物-1基因rs1078533单核苷酸多态性与2型糖尿病合并冠心病患者氯吡格雷抵抗的相关性研究

目的探讨胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate-1,IRS-1)基因rs1078533单核苷酸多态性与2型糖尿病合并冠心病患者氯吡格雷抵抗(clopidogrel resistance,CR)发生的相关性。方法入选2012年4月-2013年4月沈阳军区总医院2型糖尿病合并冠心病住院患者325例,采用光学比浊法测定20μmol/L二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)诱导的残余血小板聚集率(residual platelet agglutination,RPA),当RPA≥70%时定义为CR。所有入选患者根据RPA分为CR组(n=142)和非氯吡格雷抵抗(NCR)组(n=183)。采用聚合酶链式反应结合直接测序法测定IRS-1基因rs1078533位点在CR组和NCR组的基因型及等位基因分布频率。结果 IRS-1基因rs1078533多态位点在CR组和NCR组基因型分布频率符合Hardy-Weinberg平衡。三种基因型(AA、AC和CC)在两组的分布频率分别为1.4%、16.8%、81.8%和1.6%、19.8%、78.6%。基因型(AA、AC和CC)及等位基因(A和C)分布频率在CR组和NCR组间均无统计学差异(P=0.786,P=0.524)。Logistic回归分析校正性别、年龄、体质量指数、吸烟和高血压等冠心病和糖尿病易患因素后,IRS-1基因rs1078533单核苷酸多态性仍与2型糖尿病合并冠心病患者CR的发生无相关性。结论 IRS-1基因rs1078533单核苷酸多态性与2型糖尿病合并冠心病患者CR的发生无相关性。

性激素结合球蛋白、胰岛素信号转导蛋白和葡萄糖转运蛋白在妊娠期糖尿病胎盘组织中的表达及相关性分析

目的研究妊娠期糖尿病(GDM)孕妇胎盘组织中性激素结合球蛋白(SHBG)、胰岛素信号转导蛋白及葡萄糖转运蛋白表达,探讨其在GDM发病过程中的作用。方法收集足月妊娠且非肥胖(BMI<25 kg/m2)GDM孕妇(GDM组)和同期糖代谢正常(正常组)孕妇胎盘组织各10例,应用Western blotting、实时PCR方法检测2组胎盘组织中SHBG和胰岛素信号转导蛋白(IRS-1、ISR-2、PI3K p85α)和葡萄糖转运蛋白(GLUT-1、GLUT-3、GLUT-4)的表达,各指标进行直线回归依存关系分析。结果与正常组比较,GDM组胎盘组织中SHBG m RNA、蛋白表达降低(P<0.05);IRS-1蛋白、IRS-2 m RNA表达降低(P<0.05);PI3K p85α和GLUT-1蛋白及其m RNA表达无统计学差异(P>0.05);GLUT-3蛋白,GLUT-4 m RNA、蛋白表达降低(P<0.05)。直线回归分析结果显示SHBG m RNA与IRS-2 m RNA、PI3K p85αm RNA、GLUT-4 m RNA的表达呈正相关(均P<0.05);IRS-2 m RNA和GLUT-4 m RNA的表达呈正相关(P<0.01);IRS-1 m RNA和PI3K p85αm RNA、GLUT-3 m RNA的表达呈负相关(P<0.05);IRS-2m RNA和GLUT-1 m RNA的表达正相关(P<0.01)。结论 GDM孕妇胎盘中胰岛素信号转导和葡萄糖转运蛋白存在异常,SHBG可能参与胰岛素信号通路的调节,GDM时胎盘滋养细胞合成和分泌SHBG减少,引起胰岛素信号转导通路相关蛋白表达降低,从而导致胰岛素抵抗及GDM的发生。