奈比洛尔对血管内皮细胞胰岛素抵抗的影响

目的观察奈比洛尔改善人主动脉内皮细胞(HAEC)胰岛素抵抗(IR)的作用及机制。方法HAEC分为空白组(正常培养,胰岛素不刺激),对照组(正常培养,胰岛素刺激),不同浓度奈比洛尔+对照组(对照组基础上加奈比洛尔0.1,1,10μmol·L^(-1)),IR组(高糖33.3 mmol·L^(-1)+胰岛素1×10^(-7) mol·L^(-1)),不同浓度奈比洛尔+IR组(IR基础上加奈比洛尔0.1,1,10μmol·L^(-1))。48 h后,细胞无血清饥饿处理12 h。以噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性,以葡萄糖氧化酶法测HAEC葡萄糖消耗量,以硝基还原酶法检测上清液一氧化氮(NO)水平,以蛋白质印迹法测定蛋白表达。结果与对照组(100%)比较,IR组细胞活性无显著性改变(95.13±2.10)%,且不同浓度奈比洛尔(0.1、1、10μmol·L^(-1))预处理对IR组和对照组细胞活性均无显著性影响。IR组的细胞葡萄糖消耗量和上清液NO水平分别为(0.53±0.17)mmol·L^(-1),(33.11±1.35)μmol·L^(-1),对照组分别为(1.14±0.24)mmol·L^(-1),(38.50±3.43)μmol·L^(-1);1μmol·L^(-1)奈比洛尔+IR组分别为(0.94±0.15)mmol·L^(-1),(39.15±1.44)μmol·L^(-1),10μmol·L^(-1)奈比洛尔+IR组分别为(0.89±0.19)mmol·L^(-1),(37.31±1.90)μmol·L^(-1),对照组与IR组比较,差异有统计学意义(P<0.05);1,10μmol·L^(-1)奈比洛尔+IR组与IR组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。蛋白质印迹显示IR组细胞胰岛素受体底物-1(IRS-1),磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K),蛋白激酶B(Akt),磷酸化Akt(p-Akt),内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和磷酸化eNOS(p-eNOS)蛋白表达均较对照组降低,p-IRS-1蛋白表达升高(P<0.05);1μmol·L^(-1)奈比洛尔+IR组以上蛋白表达与IR组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论奈比洛尔调节IRS-1/PI3K/Akt/eNOS改善血管内皮细胞IR。