葡萄糖及细胞因子对胰岛素瘤相关蛋白-2表达水平的影响

目的探讨葡萄糖、肿瘤坏死因子(TNF)-α、干扰素(IFN)-γ对胰岛细胞自身抗原胰岛素瘤相关蛋白(IA)-2表达水平及胰岛素分泌水平的影响。方法以不同浓度的葡萄糖(3、7、11、30mmol/L)、10ng/mlIFN-γ及100ng/mlTNF-α分别刺激胰岛细胞系RIN5F24h和48h,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组RIN5F细胞中IA-2的mRNA表达水平,并用放射免疫法检测上清中胰岛素的浓度。结果RT-PCR结果显示以不同浓度葡萄糖(3、7、11、30mmol/L)分别刺激RIN5F细胞系后IA-2mRNA水平呈浓度依赖性和时间依赖性增加;TNF-α可抑制IA-2mRNA的水平,并且作用48h后IA-2表达水平显著降低(P<0.05);IFN-γ作用24h及48h均可显著抑制IA-2的表达(P<0.05)。TNF-α或IFN-γ刺激RIN5F细胞系后,上清中胰岛素水平均较基础值降低,并且作用48h后差异有统计学意义(P<0.05)。结论葡萄糖可使IA-2的mRNA水平呈剂量依赖性和时间依赖性增加,TNF-α、IFN-γ可抑制IA-2的mRNA表达和胰岛素分泌浓度。

金花茶CnbHLH79转录因子的克隆、亚细胞定位及表达分析

为探究CnbHLH79转录因子在金花茶花色形成中的作用机理,克隆了金花茶CnbHLH79转录因子的编码序列,对其进行生物信息学和亚细胞定位分析,利用荧光定量PCR技术分析了CnbHLH79转录因子在金花茶不同组织,以及不同发育阶段的花瓣中的表达模式,并分析CnbHLH79转录因子的表达量与色相b^(*)、类黄酮物质含量的相关关系。研究结果表明,CnbHLH79转录因子的开放阅读框长度为855 bp,共编码284个氨基酸,具有bHLH_AtBPE_like保守结构域。系统进化分析发现,金花茶CnbHLH79蛋白与茶树bHLH79蛋白的亲缘关系最近。亚细胞定位分析显示,CnbHLH79转录因子主要在细胞核中发挥功能。对CnbHLH79转录因子进行实时荧光定量PCR分析发现,该转录因子在金花茶的根、花等组织中表达量较高;还发现在花朵开放过程中,CnbHLH79转录因子的表达量总体呈先高后低,逐步下降的趋势;此外,CnbHLH79的表达量与色相b^(*)值、槲皮素-7-O-葡糖苷的相关性系数分别为-0.92、-0.7,它们之间的负相关性较高。本研究将为阐明CnbHLH79转录因子在金花茶中调控类黄酮的合成机制,以及调控花瓣显黄色的作用机理奠定基础。

抑制细胞周期蛋白依赖性激酶8表达对小鼠胰岛β细胞增殖及胰岛素分泌功能的影响观察

目的观察抑制细胞周期蛋白依赖性激酶8(CDK8)表达对MIN6胰岛β细胞胰岛素分泌功能及细胞增殖的影响,并探讨其可能作用机制。方法将培养好的MIN6细胞分为3组,观察组转染siRNA-CDK8慢病毒液(可抑制细胞CDK8表达),空白组不给予任何干预,对照组转染siRNA-NC慢病毒液(阴性对照),培养48 h。CCK-8检测各组细胞增殖活性(OD值),流式细胞术观察各组细胞周期分布,ELISA法检测各组细胞上清液胰岛素,荧光定量PCR法检测各组细胞CDK8、胰岛素合成相关转录因子(PDX1、INS2和MAFA)、胰岛素转运相关因子GLUT2 mRNA,Western blotting检测各组细胞CDK8、细胞周期蛋白(Cyclin)、过氧化物酶体增殖剂激活受体γ(PPARγ)、增殖细胞核抗原(PCNA)。结果与对照组及空白组比较,观察组细胞OD值降低,G0/G1、S期细胞比例增加,细胞上清液胰岛素水平降低,CDK8、PDX1、INS、MAFA、GLUT2 mRNA相对表达量降低(P均<0.05)。与对照组及空白组比较,观察组CDK8、Cyclin D1、PCNA、PPARγ蛋白相对表达量降低(P均<0.01)。结论抑制CDK8表达的MIN6细胞,细胞增殖活性显著下降,胰岛素分泌减少,其机制可能与抑制Cyclin D1、PCNA及PPARγ蛋白表达相关。

胰岛素相关蛋白1与乳腺癌关系的研究进展

乳腺癌是全球女性中最常见的癌症。胰岛素相关蛋白1是一种锌指转录因子,在乳腺癌诊断中作为新一代生物标志物,与其他神经内分泌因子比较显示出了较好的敏感性及特异性,其在乳腺癌早期诊断、预后判断及治疗靶点探索中的研究可以帮助我们更全面地认识乳腺癌的发生发展过程。作者对近年来胰岛素相关蛋白1与乳腺癌关系的研究进展作一综述。

白细胞介素-1家族细胞因子等位基因对相关细胞因子的产生及全身感染预后的影响

目的 探讨白细胞介素-1(IL- 1)家族细胞因子基因多态性中等位基因对细胞因子m RNA表达、蛋白质合成以及全身感染预后的影响。方法 选择全身感染患者及健康志愿者各6 0例。分离健康志愿者外周血单核细胞,体外培养并给予脂多糖(L PS)刺激,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT- PCR)分析细胞因子IL -1α、IL -1β、IL 1ra m RNA表达,酶联免疫吸附法(EL- ISA)检测细胞因子浓度。盐析法提取所有受试者基因组DNA,行IL- 1A(内合子6 ,VNTR) ,IL- 1B(5 11,RFL P)及IL- 1RN (内合子2 ,VNTR)基因多态性分析。结果 与健康志愿者比较,全身感染患者中等位基因IL -1RN2携带者显著增多,而IL- 1A2、IL -1B2及IL 1RN2携带者病死率增加。体外研究表明,等位基因IL RN2较IL 1RN 1携带者外周血单核细胞在受L PS刺激时细胞因子IL- 1ra分泌及m RNA表达显著增加,而IL- 1A、IL- 1B各等位基因不影响相应细胞因子表达。结论 遗传因素可能是导致全身感染患者发生不同程度炎症反应的重要原因。等位基因IL- 1RN2通过上调细胞因子IL- 1ra表达,影响全身感染患者预后,可能是全身感染的高危遗传学标志。

肝脏脂质合成的转录调控研究进展

肝脏中脂质的合成对于形成极低密度脂蛋白和向其他组织输送能量非常重要,而这一过程受到严格调控。脂质合成基因的转录受到一系列转录因子如上游刺激因子、固醇反应元件结合蛋白、碳水化合物反应元件结合蛋白、肝脏X受体等的调控。而这些转录因子及其共调节因子的功能、稳定性和细胞内定位又受到翻译后修饰状态如磷酸化、乙酰化、糖基化等的影响。肝脏脂质合成调节紊乱能导致肝脏脂肪病变并与肥胖和胰岛素抵抗密切相关。本文就调控脂质合成的重要转录因子及其翻译后修饰做一综述。

热量限制与沉默信息调节因子2相关酶1

热量限制是指一种有计划地减少由食物供给的热量，一般是在保证足够的维生素和矿物质水平下，将正常自由进食的热量减去30％～50％。1935年，McCay等首先报道热量限制能延长大鼠的生命，随后关于酵母、线虫、鱼、蜘蛛和哺乳动物等的诸多研究证实热量限制能够延长生命，大量实验已表明，热量限制是除遗传操作以外最强有力的延缓衰老的方法，可使个体寿命延长最高达到50％。

生姜ZoWRKY1基因的克隆及其与6-姜酚生物合成的相关性分析

生姜(Zingiber officinale Roscoe)是药食兼用的高附加值特色经济作物,姜辣素是生姜的核心药用成分,6-姜酚则是姜辣素的主要成分。以川渝特色生姜品种竹根姜根茎为研究材料,克隆ZoWRKY1基因并分析其在竹根姜不同发育阶段的表达及其与6-姜酚含量增量的相关性,探讨不同浓度NaCl胁迫下ZoWRKY1与6-姜酚合成酶基因ZoPAL、ZoC4H和Zo4CL的表达及其相关性。结果表明:克隆的ZoWRKY1基因cDNA全长1026 bp,登录号为MT414710;氨基酸序列分析显示ZoWRKY1属于WRKY家族的第二类成员;ZoWRKY1的表达水平在竹根姜发育的第二阶段即播种后1个月左右高度上调,且与6-姜酚含量增量存在显著的相关性;在25 g/L NaCl胁迫下,ZoWRKY1与6-姜酚合成酶基因ZoPAL、ZoC4H和Zo4CL高度上调表达,且ZoWRKY1与ZoC4H和Zo4CL的表达存在显著相关性,推测ZoWRKY1基因与ZoC4H及Zo4CL基因存在调控关系并进一步影响6-姜酚的生物合成。

生姜ZoWRKY1基因的克隆及其与6-姜酚生物合成的相关性分析

生姜(Zingiber officinale Roscoe)是药食兼用的高附加值特色经济作物,姜辣素是生姜的核心药用成分,6-姜酚则是姜辣素的主要成分。以川渝特色生姜品种竹根姜根茎为研究材料,克隆ZoWRKY1基因并分析其在竹根姜不同发育阶段的表达及其与6-姜酚含量增量的相关性,探讨不同浓度NaCl胁迫下ZoWRKY1与6-姜酚合成酶基因ZoPAL、ZoC4H和Zo4CL的表达及其相关性。结果表明:克隆的ZoWRKY1基因cDNA全长1026 bp,登录号为MT414710;氨基酸序列分析显示ZoWRKY1属于WRKY家族的第二类成员;ZoWRKY1的表达水平在竹根姜发育的第二阶段即播种后1个月左右高度上调,且与6-姜酚含量增量存在显著的相关性;在25 g/L NaCl胁迫下,ZoWRKY1与6-姜酚合成酶基因ZoPAL、ZoC4H和Zo4CL高度上调表达,且ZoWRKY1与ZoC4H和Zo4CL的表达存在显著相关性,推测ZoWRKY1基因与ZoC4H及Zo4CL基因存在调控关系并进一步影响6-姜酚的生物合成。

黑素合成相关MITF基因及其表达研究概况

小眼畸形相关转录因子(MITF)是黑素合成过程中最重要的转录因子。介绍了MITF基因及其转录水平的调控;综述了MITF蛋白及其对黑素细胞作用和黑素合成的调控,其主要通过调控酪氨酸酶(TYR)基因家族来控制黑素细胞的生存和分化以及黑素的合成、转运和分布;介绍了MITF在化妆品、医学方面的应用研究现状,并对其在该领域的应用和研究趋势进行了展望。

转录调节因子的新公司

原在美国Genentech公司的David.V.Goeddel今年一月成立了Tularik公司。该氏开发的产品包括人胰岛素、生长激素、α干扰素(IFNα)、IFNγ、TPA等Genentech公司的制品。最近正在生产肝实质细胞生长因子和分析转录调节因子等。Tularik公司是以转录调节因子为目标,筛选医药品的风险企业。通过阻止和促进转录调节因子,研究针对疾病的基因的开启和关闭。当前的目标是开发抗病毒剂。将来要广泛地开发药品如抗炎剂、抗癌剂等。与具有化学合成化合物和微生物化合物文库的企业合作。

GSK3/Nrf2调控的生物节律在机体衰老中的规律

背景:生物节律(昼夜节律)紊乱是一个典型的与衰老有关的问题,维持生物节律的正常运作可能是一种很有前景的抗衰老策略。核转录因子NF-E2相关因子2的表达具有生物节律;糖原合成酶激酶3系统代表了一个“调节阀”,它控制核转录因子NF-E2相关因子2水平的细微振荡。抗氧化基因转录水平的昼夜变化可以影响生物体对氧化应激的反应,但是糖原合成酶激酶3/NF-E2相关因子2在调节机体衰老中的具体分子机制仍令人困惑。目的:拟通过对该领域文献的回顾,寻找糖原合成酶激酶3/核转录因子NF-E2相关因子2调控的生物节律在机体衰老中的一般规律。方法:文献资料法通过对有关“糖原合成酶激酶3、核转录因子NF-E2相关因子2、生物节律以及衰老”等相关文献进行检索、查阅和筛选,为全文的分析奠定理论基础。对比分析法通过对所得到文献进行阅读分析,比较文献之间的异同点,为论点提供合理的理论支撑。通过对文献的进一步对比分析,理清相关指标间的关系,为全文的分析明确思路。结果与结论:①糖原合成酶激酶3可通过对节律基因的调节间接调控核转录因子NF-E2相关因子2的表达;②糖原合成酶激酶3和核转录因子NF-E2相关因子2是抗衰老程序的组成部分,且与生物节律相关;③并且糖原合成酶激酶3/核转录因子NF-E2相关因子2参与多种代谢途径,包括与衰老相关疾病(2型糖尿病和癌症)和神经退行性疾病相关的代谢途径。

运动与骨骼肌线粒体生物合成

骨骼肌收缩诱导线粒体生物合成,不仅可以有效地延缓运动性疲劳的发生,还可积极预防与年龄相关的退行性改变导致的肌肉功能下降。这一线粒体对运动的适应过程是核基因与线粒体基因共同参与调节的结果。本文综述了当前有关运动与线粒体生物合成分子机理,着重讨论了肌肉收缩引起的细胞启动信号及转录、转录因子的激活及线粒体生物合成的转录后机制等分子生物学过程。

中药促黑素合成及其机理的研究进展

白癜风的发生与黑素合成密切相关。近来大量实验报道,中药可提高酪氨酸酶家族成员及MITF相应蛋白、mRNA的表达,从而促黑素合成。临床以疏肝解郁、活血祛风为主要治则。治疗时依据辨证兼用滋肝补肾、调节免疫的药物,同时可酌情加入富含呋喃香豆素类物质的药物,如:白芷、独活、补骨脂、北沙参、防风等。

抗白灵霜在黑素合成中对TYR和MITF的调节作用

目的:明确抗白灵霜(KBL)在黑素合成中对TYR和MITF的调节作用。方法:体外培养小鼠B16黑素瘤细胞,分为空白对照组和不同浓度KBL(5 mg/mL,10 mg/mL和15 mg/mL)用NaOH溶解法检测黑素合成量,Real time-PCR检测TYR和MITF基因mRNA表达,Western Blot检测KBL组TYR和MITF蛋白的表达。结果:各浓度KBL组黑素合成量及TYR和MITF基因的mRNA和蛋白表达的水平均高于空白对照组,且呈浓度依赖性。结论:KBL可能通过上调MITF基因的表达,激活参与黑素合成的TYR以促黑素合成。

黄曲霉毒素生物合成途径调节基因aflR

黄曲霉毒素生物合成途径调节基因在黄曲霉毒素产生过程中发挥十分重要的作用,它为绝大多数黄曲霉毒素合成相关基因的表达所必需。黄曲霉毒素生物合成途径调节基因的启动子中,含有若干真菌转录因子同源物的假定结合位点。AflR蛋白是黄曲霉毒素生物合成途径中的主要正性转录因子,它调节大多数黄曲霉毒素合成相关基因,也包括其自身基因的表达。

激活转录因子4协同核因子相关因子-2调控γ谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚基的表达对支气管哮喘豚鼠的影响

支气管哮喘（简称哮喘）是一种气道慢性炎症性疾病。氧化应激在诱导气道炎症及其发展中起关键作用。核因子相关因子-2（NF-E2-relatedfactor2，Nrf2）是一种对氧化还原敏感的转录因子，调节肺部几乎所有相关抗氧化基因，如1．谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚基（γglutamyleysteinesynthetasecatalyticsubunitγGCSc）。

MicroRNA-100-5p通过成纤维生长因子21靶向调控羊驼黑素细胞的黑色素生成

目前已知许多microRNA(miRNA)可以调节动物毛色及黑色素生成,但miR-100-5p调节黑色素的分子机制尚未完全了解。成纤维细胞生长因子21(fibroblast growth factor 21,FGF21)是miR-100-5p的预测靶基因,萤光素酶报告基因检测结果表明,miR-100-5p通过与FGF21的3′非翻译区(3′UTR)结合来调节FGF21。在本研究中,用miR-100-5p过表达质粒和阴性对照质粒转染羊驼黑素细胞,结果表明,miR-100-5p过表达显著降低FGF21的mRNA和蛋白质表达。同时,抑制细胞外调控MAP激酶(extracellular regulated MAP kinase,ERK)信号通路,上调小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)、酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)和酪氨酸酶相关蛋白2(tyrosinase-related protein 2,TYRP2),从而增加了黑色素的产生。结果表明,miR-100-5p可能通过ERK信号通路靶向FGF21,从而调节黑色素生成。

FASN、Runx2在老年脑胶质瘤患者中表达及与临床病理特征、预后生存的相关性

目的分析脂肪酸合成酶(FASN)、人类runt相关转录因子(Runx)2在老年脑胶质瘤患者中的表达及与临床病理特征、预后生存的相关性。方法选取67例老年脑胶质瘤组织及相关临床资料,最终65例满足纳入标准作为研究组。选取同期收治的50例脑胶质瘤癌旁相对正常标本及相关临床资料作为对照组。比较两组FASN、Runx2表达水平,分析FASN、Runx2与老年脑胶质瘤患者各病理参数的相关性,采用多元Logistic回归分析影响老年脑胶质瘤患者预后生存的危险因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析影响老年脑胶质瘤患者预后生存的预测价值。结果研究组FASN、Runx2高表达率显著高于对照组(P<0.001);老年脑胶质瘤患者FASN、Runx2水平与组织分化类型、组织学分级、远处转移有关(P<0.05),与年龄、肿瘤直径、病理类型、肿瘤部位等无关(P>0.05);对65例患者进行2年随访发现,生存46例,死亡19例,预后不良率为29.23%。死亡组FASN、Runx2高表达率显著高于生存组(P<0.05);经多元Logistic回归分析显示,组织中低分化、组织学分级:Ⅲ+Ⅳ、FASN、Runx2高表达是影响老年脑胶质瘤患者预后生存的独立危险因素(P<0.05),FASN、Runx2蛋白及两者联合曲线下面积分别为0.666、0.781、0.798,各指标曲线下面积以联合检测最大。结论老年脑胶质瘤患者FASN、Runx2呈高表达状态;FASN、Runx2与患者预后生存关系密切,可作为预测老年脑胶质瘤患者预后的分子标志物和肿瘤治疗的潜在靶点。