内源性胰岛素替代疗法中葡萄糖激酶基因逆转录病毒表达载体的构建(英文)

背景由于胰岛细胞分离技术难度较大,目前糖尿病细胞移植治疗尚缺乏理想的细胞来源。目的构建葡萄糖激酶(Glucokinase,GK)基因逆转录病毒表达载体及稳定的产毒细胞系,为构建具有葡萄糖反应性胰岛素分泌能力的胰岛代理细胞打下基础,可望为糖尿病提供一种更符合生理要求的内源性胰岛素替代疗法。设计非随机非对照的实验研究。地点、材料和干预本研究在解放军第三军医大学附属新桥医院中心实验室进行。将GK质粒(pCMV4-GKZ1)经EcoR1/BamH1双酶切后亚克隆至逆转录病毒载体PLXSN,构建逆转录病毒表达载体PLX-GK,用酶切法和测序法对重组体进行鉴定。然后脂质体介导逆转录病毒表达载体PLX-GK转入包装细胞PA317,筛选病毒滴度较高的稳定产毒细胞系,PCR鉴定。主要观察指标①重组逆转录病毒载体构建与鉴定结果。②病毒滴度鉴定及PCR结果。结果成功构建GK基因逆转录病毒表达载体,经酶切及测序证明目的基因插入位点和读码框架正确、无突变;产毒细胞系的平均病毒滴度为6.8×108CFU/L,筛选出一株病毒滴度为1.8×109CFU/L稳定产毒细胞系PA317/GK,PCR证实GK基因整合入细胞基因组。结论成功构建了携GK基因的逆转录病毒表达载体及高滴度的产毒细胞系。

糖尿病治疗中几点特殊情况的说明

1外科手术时的胰岛素替代治疗 对大多数患者来说,血糖在100～250mg/dl已足以避免术后感染及伤口裂开,但这一结论仅仅出于临床观察,尚缺乏足够证据.

联用药物治疗对妊娠期糖尿病患者血脂水平C反应蛋白D-二聚体与妊娠结局的影响

妊娠期糖尿病作为妊娠期最为常见的并发症,具有发病率高,危害严重等特点,若不及时控制妊娠期糖尿病孕妇的血糖水平,可增加剖宫产、巨大儿、胎儿窘迫及早产儿等不良妊娠结局风险,因此寻找一种合理、有效的治疗方式就显得尤为重要[1]。医学临床胰岛素替代疗法远期疗效欠佳,难以预防妊娠期糖尿病并发症。目前,二甲双胍联合胰岛素治疗妊娠期糖尿病疗效已得到实践证实,其中二甲双胍可增加外周组织在胰岛素敏感性,抑制肝糖原分解、脂肪组织相关氧化分解,进而有利调节糖代谢水平,但单独服用二甲双胍的临床疗效并不令人满意[2]。胰岛素可在短期之内将血糖水平控制住,消除高血糖对机体内相应B细胞的毒素反应,进而对胰岛B细胞产生较好的保护作用。基于此,本研究对二甲双胍联合胰岛素治疗妊娠期糖尿病的疗效进行分析,探讨其对孕妇妊娠结局、糖化血红蛋白水平的影响。报告如下。

名刊浏览

之前有报道认为，ICU内的成人和儿童使用胰岛素治疗以及血糖控制可能会影响生存率。而在极低出生体重婴儿中高血糖症同样也与发病率和死亡率相关。因此剑桥大学的一组研究人员对新生儿中采用早期胰岛素替代疗法是否可以减少高血糖症的发生进行了研究。研究人员对195例新生儿在1—7天时进行胰岛素连续静脉滴注，每小时0．05U／kg体重，使用20％的葡萄糖作为支持；对另外194例新生儿进行标准护理。通过持续血糖监测对血糖控制的效果进行分析。