miR-135a-5p对氟他胺致隐睾小鼠胰岛素样因子3及睾酮表达的影响

目的探讨miR-135a-5p对氟他胺导致的隐睾症小鼠睾丸组织中胰岛素样因子3(INSL3)和睾酮表达水平的影响。方法构建氟他胺致隐睾小鼠模型,将实验分为正常对照组、氟他胺组、氟他胺+miR-135a-5p敲降组及氟他胺+miR-135a-5p过表达组。用RT-qPCR法检测小鼠睾丸组织中miR-135a-5p和INSL3 mRNA的表达水平;用Western blot检测INSL3蛋白的表达水平;用ELISA法检测睾酮的表达水平。结果氟他胺致隐睾小鼠睾丸组织中miR-135a-5p、INSL3 mRNA和蛋白以及睾酮的表达水平均显著下调(P<0.05)。敲降miR-135a-5p可下调隐睾睾丸组织中INSL3 mRNA和蛋白以及睾酮的表达水平(P<0.01),而过表达miR-135a-5p则具有相反的结果。结论miR-135a-5p在氟他胺致隐睾小鼠睾丸组织中低表达,过表达miR-135a-5p可恢复INSL3和睾酮的表达水平。

补肾疏肝法对迟发性性腺功能减退症患者胰岛素样生长因子-1、胰岛素样因子3影响的研究

目的观察补肾疏肝中药对男性迟发性性腺功能减退症(LOH)患者血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、胰岛素样因子3(INSL3)的影响,探索补肾疏肝法治疗LOH的可能机制。方法选择2019年3月-2022年3月南方医科大学附属第十医院治疗的90例LOH肾虚肝郁证患者,根据就诊先后按随机数字表法将患者分为试验组和对照组,每组45例。试验组以补肾疏肝法治疗,药用还少丹合逍遥丸改煎剂加减内服,每日1剂;对照组给予十一酸睾酮胶囊口服,80 mg/次,2次/d,4周后用量减至40 mg/次,2次/d。2组均用药12周。观察比较2组患者治疗前后中老年男子部分雄激素缺乏综合征(PADAM)评分及血清睾酮(T)、促卵泡生成素(FSH)、黄体生成素(LH)、IGF-1及INSL3水平。结果与治疗前比较,2组患者治疗后PADAM评分均明显降低(P均<0.05),且试验组明显低于对照组(P<0.05);治疗后试验组患者血清T、血清IGF-1水平均明显升高(P均<0.05),FSH、LH水平均明显降低(P均<0.05),且试验组血清T水平明显低于对照组(P<0.05),IGF-1水平明显高于对照组(P<0.05);治疗后对照组患者血清T水平明显升高(P<0.05),IGF-1、FSH、LH水平均无明显变化(P均>0.05);2组INSL3水平均无明显变化(P均<0.05)。结论补肾疏肝法可能通过提升血清IGF-1、促进T合成及分泌,延缓INSL3下降,保护睾丸功能,有效治疗LOH。

胰岛素样因子3在氟他胺诱导的小鼠隐睾模型中的表达和意义

目的：通过氟他胺诱导小鼠隐睾动物模型的建立，探讨其睾丸组织的胰岛素样因子3（INSL-3）mRNA表达的变化。方法：妊娠BALB／c小鼠随机分成A、B、C、D、E5组，每组9只（雄鼠3只，雌鼠6只），合笼交配；分别在雌鼠孕第12—21天持续10d给予氟他胺灌胃，剂量依次为0、150、300、500、700mg／kg；分别在出生后第4周和第8周时运用荧光定量PCR技术检测子代小鼠睾丸组织中INSL-3mRNA的表达情况。结果：A组小鼠无隐睾，B、C组有单侧隐睾，发生率分别10．0％和25．0％；D、E组有双侧隐睾的发生，发生率分别为21．1％和40．0％。随着给药剂量的增大，INSL-3mRNA的表达逐渐降低；与对照组相比，B、C组表达强度无明显变化（P〉0．05）；D、E组表达强度明显低于A组（P〈0．05）。结论：剂量为150与300mg,／kg的氟他胺能诱导单侧隐睾模型，剂量为500与700mg／kg的氟他胺能诱导双侧隐睾模型；并且隐睾小鼠睾丸的INSL-3表达随氟他胺浓度升高水平明显下降，可能是隐睾发生的机制之一。

胰岛素样因子3及其在多囊卵巢综合征中的作用

胰岛素样因子3(INSL3)既往被称为松弛素样因子,男性主要由睾丸间质细胞分泌,女性主要由卵巢卵泡膜细胞分泌。最近有研究发现,多囊卵巢综合征(PCOS)患者特别是非肥胖的PCOS患者,INSL3浓度较正常人明显升高,这被认为是与黄体生成激素依赖性卵巢高雄激素血症有关。综述INSL3基因及分子结构、受体(新型G蛋白耦联受体LGR8/GREAT)在女性中的生理学作用,INSL3对PCOS患者发生和发展的重要影响。

胰岛素样因子3在邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯诱导隐睾发生过程中的表达分析

目的:研究环境内分泌干扰物邻苯二甲酸二(2-乙已基)酯(Di-(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP)作用于孕鼠后,其胎鼠睾丸组织中胰岛素样因子3(Insulin like factor3,INSL3)mRNA和蛋白质的表达情况;探讨DEHP诱发小鼠隐睾的分子机制.方法:妊娠KM小鼠随机分为3组:正常对照组、玉米油对照组和DEHP实验组.玉米油对照组和DEHP实验组自妊娠12.5d到妊娠18d分别持续经口予以玉米油和DEHP500mg/(kg.d),正常对照组不予灌药.结果:正常对照组和玉米油对照组睾丸组织中INSL3 mRNA和蛋白质的表达均无差异(P>0.05);DEHP实验组INSL3 mRNA的表达量约为对照组的1/3,与对照组相比其差异具有显著性(P<0.05);实验组INSL3蛋白质的表达量约为对照组的1/4,与对照组相比其差异具有显著性(P<0.05).结论:环境内分泌干扰物DEHP下调睾丸间质细胞INSL3 mRNA和蛋白质的表达,影响睾丸引带发育,可能是DEHP诱发隐睾的分子机制之一.

胰岛素样因子3用于青少年精索静脉曲张评估

目的:探讨胰岛素样因子3(INSL-3)应用于青少年精索静脉曲张评估的可行性。方法:将80例青少年精索静脉曲张患者作为阳性组,另外纳入80例健康青少年志愿者作为正常对照组,对比分析两组左侧睾丸体积,睾丸萎缩指数(AI)、血清促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)、睾酮(T)、精液量、精子密度、精子活力(a+b)、正常形态精子率及INSL-3等参数,统计分析阳性组和对照组在INSL-3表达是否存在差异,分析INSL-3与其他检测指标的相关性。结果:和对照组比较,阳性组左侧睾丸体积、睾丸萎缩指数显著偏小(P<0.05)。阳性组血清促卵泡激素(6.21±2.41)IU/L、黄体生成素(6.02±1.47)IU/L、睾酮(7.87±1.66)μg/L显著升高;而精液量(2.86±1.19)mL、精子密度(60.77±35.97)M/mL、精子活力(a+b)(29.14±16.77)%和正常形态精子率(60.31±18.66)%明显降低(P<0.05);INSL-3水平(259.6±30.7)pg/mL明显下降(P<0.01);INSL-3的浓度与精子活力(a+b)和正常形态精子率显著相关(P<0.05)。结论:血清INSL-3水平与青少年精索静脉曲张紧密相关,相比于常规指标与疾病的相关性更强,有望用于青少年精索静脉曲张的诊断和干预。

胰岛素样生长因子Ⅱ信使核糖核酸结合蛋白3和上游移码蛋白1对支架内再狭窄的预测价值

目的探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)的胰岛素样生长因子Ⅱ信使核糖核酸(mRNA)结合蛋白3(IMP3)、上游移码蛋白1(UPF1)对急性冠状动脉综合征(ACS)患者行经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后发生支架内再狭窄(ISR)的预测价值。方法选取2021年2月至2023年2月于青岛大学附属医院接受PCI的ACS患者138例,依据冠状动脉造影显示的血管再狭窄情况分为ISR组21例和非ISR组117例。比较2组患者一般临床资料、实验室检查结果、超声心动图数据,检测IMP3、UPF1及VEGF水平。采用多因素logistic回归分析PCI术后支架表面再内皮化的影响因素,用ROC曲线分析VEGF、IMP3及UPF1对ISR的预测价值。结果ISR组患者血清VEGF、IMP3水平低于非ISR组,血清UPF1水平高于非ISR组(P<0.05,P<0.01)。多因素logistic回归分析显示,VEGF(OR=1.095,95%CI:1.034~1.151,P=0.001)、IMP3(OR=3.413,95%CI:1.824~6.381,P=0.014)是PCI术后支架表面再内皮化的保护因素,UPF1(OR=0.252,95%CI:0.047~0.965,P=0.006)是PCI术后支架表面再内皮化的危险因素。Pearson相关性分析显示,IMP3与VEGF呈正相关(r=0.665,P=0.000),UPF1与VEGF呈负相关(r=-0.580,P=0.000)。ROC曲线分析显示,UPF1和IMP3及VEGF联合是预测ISR的最优指标,曲线下面积为0.899(95%CI:0.796~1.000,P=0.000),敏感性为85.71%,特异性为83.33%。结论IMP3可通过促进VEGF表达,抑制ISR的发生;UPF1可抑制VEGF的表达,导致ISR的发生。UPF1和IMP3及VEGF联合可有效预测PCI术后ISR的发生,具有良好的预测价值。

血清B型脑钠肽、胰岛素样生成因子结合蛋白-3水平与非酒精性脂肪肝患者心房颤动的关系

目的探讨非酒精性脂肪肝(NAFLD)患者血清B型脑钠肽(BNP)、胰岛素样生成因子结合蛋白-3(IGFBP-3)水平与心房颤动发生的关系。方法选取105例NAFLD患者纳入观察组,另选取105例健康体检者纳入对照组。收集患者的临床资料,比较2组血清BNP、IGFBP-3水平,分析NAFLD患者发生心房颤动的影响因素,探讨血清BNP、IGFBP-3的交互作用对NAFLD患者心房颤动发生风险的影响,评估血清BNP、IGFBP-3水平对NAFLD患者心房颤动的预测价值。结果观察组血清BNP、IGFBP-3水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者1年内发生心房颤动30例,心房颤动患者的体质量指数(BMI)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、BNP和IGFBP-3水平均高于未发生心房颤动患者,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平低于未发生心房颤动患者,差异有统计学意义(P<0.05);BMI、TC、TG、HDL-C、LDL-C、BNP和IGFBP-3均为NAFLD患者发生心房颤动的影响因素(P<0.05);BNP、IGFBP-3存在交互作用,且NAFLD患者心房颤动发生风险中有50.47%归因于两者交互作用;血清BNP、IGFBP-3联合预测的曲线下面积为0.928,显著大于BNP、IGFBP-3单独预测的曲线下面积0.753、0.821(P<0.05)。结论BNP、IGFBP-3在NAFLD患者血清中的表达水平显著升高,两者联用可有效预测患者心房颤动的发生。

胰岛素样生长因子结合蛋白3在脑梗死模型的表达及Smad信号通路的参与机制

目的 探讨Smad信号通路机制在脑梗死模型大鼠中的作用以及脑组织胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)的表达变化与神经功能的关系。方法 60只健康成年雄性SD大鼠随机分为模型组、假手术组及正常对照组,每组20只,模型组采用线栓法建立脑梗死模型,假手术组仅暴露颈内动脉后直接缝合皮肤,建模成功后1周评估各组大鼠的改良神经功能缺损(mNSS)评分。采用苏木精-伊红染色法检测脑组织病理学变化情况,采用Western blot法对大鼠脑组织中IGFBP-3、Smad2、Smad4蛋白水平进行检测,并采用逆转录聚合酶链反应测定大鼠脑组织中IGFBP-3、Smad2、Smad4 mRNA水平。用Spearman相关性分析IGFBP-3、Smad2、Smad4、P21表达水平之间的相关性。结果 苏木精-伊红染色结果显示,模型组大鼠出现明显脑组织水肿,表现为脑细胞排列紊乱,小胶质细胞数量变多,脑细胞核仁出现模糊,其中脑梗死面积为20.55%。与假手术组和正常对照组比较,模型组大鼠mNSS评分、IGFBP-3、Smad2、Smad4蛋白及mRNA相对表达水平明显升高,P21蛋白及mRNA相对表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01)。Spearman相关性分析显示,模型组大鼠脑组织中IGFBP-3 mRNA表达水平与mNSS评分、Smad2 mRNA、Smad4 mRNA呈显著正相关(r=0.568,r=0.623,r=0.597,P<0.01);IGFBP-3 mRNA表达水平与P21呈显著负相关(r=-0.573,P<0.01)。结论 脑梗死大鼠脑组织IGFBP-3水平显著升高,且IGFBP-3水平与脑梗死大鼠神经功能之间关系密切,其作用机制可能与Smad信号通路有关。

0~6岁儿童血锌、25-羟基维生素D、胰岛素样生长因子结合蛋白-3的水平及临床意义

目的 探究0~6岁儿童血中锌、25-羟基维生素D[25-(OH)D]、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)的水平及临床意义。方法 选取2018年4月至2020年4月贵港市人民医院0~6岁儿童80例,其中21例发育缓慢患儿作为缓慢组,59例健康正常儿童作为对照组。比较2组血锌水平、25-(OH)D水平、IGFBP-3水平、骨密度、身高、体重,采用相关性分析它们的关系;多因素回归分析发育迟缓的相关影响因素。结果 缓慢组较对照组血锌[(59.79±12.33)μmol·L^(-1)比(72.09±15.47)μmol·L^(-1)]、25-(OH)D[(26.68±8.56)ng·mL^(-1)比(34.99±10.02)ng·mL^(-1)]、IGFBP-3[(0.60±0.19)ng·mL^(-1)比(0.99±0.30)ng·mL^(-1)]、身高[(81.25±8.49)cm比(103.85±11.26)cm]、体重[(11.97±3.67)kg比(16.51±5.43)kg]均更低(均P<0.05),骨密度不足者占比更高(100.00%比20.34%,P<0.05);血锌、25-(OH)D、IGFBP-3水平与儿童骨密度分级呈负相关(r=-0.515、-0.888、-0.449,均P<0.05),与身高(r=0.633、0.582、0.794)、体重(r=0.517、0.499、0.815)均呈正相关(均P<0.05);血锌(OR=0.376)、25-(OH)D(OR=0.438)、IGFBP-3水平(OR=0.735)、骨密度分级[OR=1.155(轻度不足)、1.522(中度不足)、2.374(重度不足)]均为儿童发育迟缓的影响因素(均P<0.05)。结论 0~6岁发育迟缓儿童血中锌、25-(OH)D、IGFBP-3水平均较低,且三者与患儿的骨密度呈负相关,与体重和身高呈正相关,均是影响发育迟缓的危险因素。

胰岛素样生长因子-1和胰岛素样生长因子结合蛋白-3在国内特发性矮小症儿童重组人生长激素治疗前后的变化——基于CiteSpace的可视化分析

目的基于文献计量学角度探讨血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)水平在国内特发性矮小症儿童(ISS)应用重组人生长激素(rhGH)治疗前后的变化.方法以中国知网、万方、维普作为数据来源,检索IGF-1、IGFBP-3水平在国内ISS应用rhGH治疗前后变化的文献,以已发表文献作为分析对象,采用CiteSpace软件从文献年度分布、关键词、作者和机构分布方面进行可视化分析.结果纳入文献58篇,发表文献呈逐年上升趋势.关键词是生长激素、身高、骨代谢、生长速度等.作者之间网络图谱的密度仅为0.0235,研究机构之间网络图谱的密度仅为0.0106.结论血清IGF-1、IGFBP-3水平在国内ISS应用rhGH治疗前后变化的文献日趋增多,且将血清IGF-1、IGFBP-3作为rhGH联合中西医、营养支持和运动干预等方案的观察和预测指标,各大科研机构和顶尖学者之间应开展进一步合作.

胰岛素样生长因子结合蛋白-3与妊娠相关疾病的研究进展

胰岛素样生长因子(IGF)主要在肝细胞中生成,参与多个信号通路的调节,在调节细胞生长、分化、凋亡等方面至关重要,与糖尿病、肝硬化、恶性肿瘤等疾病的发生发展相关。胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)通过对IGF-1的双向调节而发挥作用,妊娠中晚期血清IGFBP-3水平升高可能与妊娠糖尿病发生有关,母体血清及脐血中IGFBP-3的水平与新生儿出生体质量呈正相关,IGFBP-3水平降低与流产相关。此外,低IGF-1或IGFBP-3与子痫前期的发病机制有关。深入研究IGFBP-3与妊娠相关疾病的关系及其可能的作用机制,可为进一步指导妊娠相关疾病的治疗提供新思路。

巨噬细胞抑制因子-1、胰岛素样生长因子结合蛋白3、糖类抗原19-9检测对胰腺癌患者预后的预测价值

目的探讨糖类抗原19-9(CA19-9)、胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)、巨噬细胞抑制因子-1(MIC-1)检测对胰腺癌患者预后的预测价值。方法选取82例胰腺癌患者作为观察组,另选取81例健康体检志愿者作为对照组。对比两组受试者MIC-1、IGFBP3、CA19-9水平,分析胰腺癌患者预后的影响因素和MIC-1、IGFBP3、CA19-9单独及联合检测对胰腺癌患者预后的预测价值。结果观察组患者MIC-1、IGFBP3、CA19-9水平均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。82例胰腺癌患者根据预后情况分为好转组61例与预后不良组21例,好转组与预后不良组患者分化程度、临床分期、淋巴结转移情况及MIC-1、IGFBP3、CA19-9水平比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。分化程度为低分化、临床分期为Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移、MIC-1≥500 pg/ml、IGFBP3≥40 U/ml、CA19-9≥40 U/ml均为胰腺癌患者预后不良的独立危险因素(P﹤0.05)。MIC-1、IGFBP3、CA19-9联合检测预测胰腺癌患者预后的灵敏度和特异度分别为87.4%、71.9%,曲线下面积为0.816(95%CI:0.715~0.917),高于MIC-1、IGFBP3、CA19-9单独检测。结论MIC-1、IGFBP3、CA19-9水平升高均与胰腺癌患者预后不良密切相关,三者在胰腺癌患者预后预测中有较高的使用价值。

己烯雌酚和胰岛素样因子3对睾丸引带细胞中富含亮氨酸的G蛋白耦联受体8 mRNA和蛋白表达水平的影响

目的探讨不同水平的己烯雌酚(DES)和胰岛素样因子3(INSL3)对体外培养的睾丸引带细胞中富含亮氨酸的G蛋白耦联受体8(LGR8)mRNA和蛋白表达的影响。方法将3日龄的雄性昆明小鼠的睾丸引带组织解剖取出,并进行细胞培养。传代后,随机分为正常对照组及实验组(不同浓度DES组:A^E组,不同浓度INSL3组:Ⅰ~Ⅳ组)共11组。其中,实验组加入的DES浓度分别是3.7×10-2mmol.L-1、3.7×10-3mmol.L-1、3.7×10-4mmol.L-1、3.7×10-5mmol.L-1和二甲基亚砜溶剂对照组;INSL3的浓度分别为3.3×10-3μmol.L-1、3.3×10-4μmol.L-1、3.3×10-5μmol.L-1及3.3×10-6μmol.L-1。加药持续作用48 h后,应用反转录PCR和流式细胞术分析睾丸引带细胞中LGR8 mRNA及其蛋白的表达情况。结果 A组和Ⅳ组LGR8的mRNA及蛋白水平显著高于正常对照组(P<0.01);与正常对照组相比,B、C、D组LGR8 mRNA及其蛋白表达均显著下降(Pa<0.05),而E组及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组LGR8 mRNA和其蛋白的表达差异均无统计学意义(Pa>0.05)。结论高剂量的DES和极低剂量的INSL3均能上调睾丸引带细胞中LGR8 mRNA及其蛋白表达水平,推测DES和INSL3可能通过LGR8作用途径来影响睾丸引带的发育。

邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯致胎鼠隐睾发生过程中胰岛素样因子3的表达分析

目的:探讨环境内分泌干扰物邻苯二甲酸二(2-乙基已基)酯[Di-(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP]诱发胎鼠隐睾的分子机制。方法:妊娠昆明小鼠随机分为3组,每组15只:DEHP实验组(A组)、玉米油(溶剂)对照组(B组)和正常对照组(C组)。A组和B组自妊娠12.5￣18.5d分别持续经口每天给予DEHP(500mg/kg)或玉米油,C组不予灌药。结果:B组和C组睾丸组织中胰岛素样因子3(INSL3)mRNA和蛋白质的表达均无差异(P>0.05);A组INSL3mRNA的表达量约为B或C组的1/3,INSL3蛋白质的表达量约为B或C组的1/4,与B或C组比其差异显著(P<0.05)。A组睾丸引带发育不良,睾丸位置异常。结论:环境内分泌干扰物DEHP下调睾丸间质细胞INSL3基因的表达,影响睾丸引带发育,可能是DEHP诱发隐睾的分子机制之一。

苯并(a)芘对大鼠睾丸胰岛素样因子3基因表达的影响

目的观察青春期大鼠苯并(a)芘(BaP)亚慢性染毒对睾丸间质细胞功能标志物胰岛素样因子3(Insl3)mRNA表达水平的影响。方法72只青春期健康雄性SD大鼠随机分为溶剂对照组(玉米油)、1、5 mg/kg BaP染毒组,每组24只。隔日染毒,等体积灌胃,连续染毒90 d。分别于染毒后30、60和90 d,每组各随机选取8只大鼠处死。取睾丸、附睾、心、肝、脾、肾称重并计算脏器系数,放免法检测血清睾酮含量,实时荧光定量PCR法检测睾丸Insl3 mRNA表达差异。结果60dBaP各染毒组以及90d5mg/kg组附睾系数显著低于对照组(P<0.05);染毒30d5mg/kg组肝脏系数显著大于对照组(P<0.05),90 d时显著小于对照组(P<0.05);血清睾酮水平30 d和60 d 5 mg/kg染毒组明显高于对照组(P<0.05),90 d 5 mg/kg组明显低于1 mg/kg组(P<0.05);BaP处理组睾丸Insl3 mRNA表达水平各时相点比对照组显著下调(P<0.01),染毒60 d比30 d显著下调(P<0.05),尤其是5 mg/kg组(P<0.01)。结论青春期大鼠BaP亚慢性暴露可以干扰血清睾酮及睾丸Insl3基因表达水平,对附睾、肝脏可能有潜在毒性。

不同性激素对大鼠睾丸下降的影响及其与胰岛素样因子3mRNA表达的关系

目的观察苯甲酸雌二醇(E2)、人绒毛膜促性腺激素(hCG)、促黄体激素释放激素(LHRH)对大鼠睾丸下降的影响及其与胰岛素样因子3(INSL3)表达的关系。方法将刚出生的40只SD雄性大鼠分成4组。每组10只,在生后29 d内分别给每组每天注射生理盐水、E_2、hCG+E_2、LHRH+E_2。第30天从睾丸组织抽提RNA,通过RT-PCR分析INSL3的表达。结果(1)第30天生理盐水组睾丸下降率100%(20/20),E_2组为0%(0/20),hCG+E_2组为85%(17/20),LHRH+E_2组为70%(14/20)。后两组之间差别无统计学意义(P=0．45)。(2)各组睾丸重量差异有统计学意义(F=56．67,P＜0．01),最轻的是E_2组。(3)E_2损害了睾丸生精细胞,然而hCG、LHRH能改善上述情况。(4)E_2组没有INSL3 mRNA的表达,而其他组均有正常表达。结论E_2能抑制大鼠睾丸的下降,而hCG、LHRH能促使大鼠睾丸的下降,其机制可能与INSL3 mRNA的表达有关。

邻苯二甲酸二丁酯与邻苯二甲酸单丁酯对睾丸间质细胞睾酮水平和胰岛素样因子3表达的影响

目的观察邻苯二甲酸二丁酯（dibutyl phthalate，DBP）、邻苯二甲酸单丁酯（monobutyl phthalate，MBP）对小鼠睾丸间质瘤细胞（MA-10）中胰岛素样因子3（insulin．1ikefactor3，INSL3）mRNA及蛋白的表达量和细胞睾酮分泌水平的影响。方法以小鼠睾丸间质瘤细胞（MA-10）为模型，经过DBP、MBP直接染毒后，采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定细胞培养基上清中睾酮的含量，采用荧光定量PCR测定细胞中INSL3mRNA的表达，采用蛋白免疫印迹法（western blot）测定INSL3蛋白的表达水平。结果与对照组比较，MA-10细胞睾酮合成量在低染毒剂量（10^-9～10^-6mol／L）时均表现出刺激效应，睾酮含量增加；在高染毒剂量（10^-3mol／L）时表现抑制效应，随着染毒时间的延长，睾酮水平逐渐降低。荧光定量PCR以及Western blot测定结果显示，DBP在10^-6、10^4mol／L染毒时，INSL3mRNA及蛋白表达水平较对照组降低，差异有统计学意义（P〈0．05）；随着MBP染毒剂量的增加，INSL3mRNA及蛋白表达水平呈现下降趋势，但MBP在10^-7mol／L时，与对照组相比，对MA-10细胞中INSL3蛋白表达表现出刺激作用。结论DBP、MBP染毒对MA-10细胞睾酮分泌表现出高剂量抑制、低剂量刺激的双向效应；DBP、MBP染毒可抑制MA-10细胞中INSL3mRNA和蛋白的表达。

DEHP诱导的隐睾鼠胰岛素样因子3基因CpG岛甲基化状态研究

目的研究胰岛素样因子3（insulin-like factor3，INSL3）基因在邻苯二甲酸二已酯（DEHP）致小鼠隐睾中DNA甲基化的状态。方法运用“MethPrimer”软件对INSL3基因进行分析，预测CpG岛，通过甲基化特异性PCR（methylation-specific PCR，MS-PCR）检测INSL3基因CpG岛的甲基化状况，并应用RT—PCR检测INSL3基因在正常组与实验组睾丸组织中的表达情况。结果实验组INSL3基因第一外显子区存在CpG岛甲基化；实验组INSL3基因mRNA表达显著下降。结论INSL3基因第一外显子区CpG岛的异常甲基化导致INSIB在隐睾鼠睾丸中表达降低，可能与隐睾的发生密切相关。

胰岛素样因子3对体外培养的小鼠睾丸引带细胞增殖和收缩活性的影响

目的探讨胰岛素样因子3(INSL3)对体外培养的小鼠睾丸引带细胞增殖和收缩活性的影响。方法手术放大镜解剖出3日龄雄性昆明小鼠的睾丸引带组织,进行原代细胞培养后传代。将传代细胞随机分为正常对照组和实验组,实验组加入INSL3,浓度分别为3.3×10-3μmol.L-1、3.3×10-4μmol.L-1、3.3×10-5μmol.L-1及3.3×10-6μmol.L-1,分别持续作用12 h、24 h、48 h,利用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测其细胞增殖情况;细胞免疫荧光和流式细胞术检测其细胞纤维状肌动蛋白(F-actin)的结构变化及表达情况。结果不同浓度INSL3作用后的不同时间点,检测细胞增殖和收缩活性的相关指标,结果均存在时间-剂量效应,且差异有统计学意义(P<0.05)。正常对照组及各实验组细胞均呈持续性增殖,24 h后增殖更明显。与正常对照组比较,INSL3可刺激睾丸引带细胞骨架重塑,细胞周边肌动蛋白丝带增多,胞质中微丝F-actin明显粗大、变长,细胞中F-actin表达量增加。各实验组中以3.3×10-3μmol.L-1组变化尤其明显。结论 INSL3对睾丸引带细胞增殖和收缩活性有直接促进作用,可能参与睾丸引带发育甚或睾丸下降过程的调节。