赖氨肌醇维B_(12)联合复方消化酶对功能性消化不良病儿胃肠动力、营养指标、胰岛素样生长因子Ⅰ水平的作用

目的探讨赖氨肌醇维B_(12)联合复方消化酶对功能性消化不良(FD)病儿胃肠动力、营养指标、胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)水平的影响。方法根据治疗方案不同将2021年2月至2023年2月商丘市第三人民医院收治的84例FD病儿分为两组,各42例。对照组予以复方消化酶治疗,观察组予以赖氨肌醇维B_(12)联合复方消化酶治疗,均治疗4周。观察两组疗效、不良反应及治疗前后胃肠动力学指标、胃肠激素[胃动素、生长抑素(SS)]及5-羟色胺(5-HT)水平、营养指标[前白蛋白(PA)、白蛋白、转铁蛋白(TRF)]、免疫指标[免疫球蛋白(Ig)A、IgG、IgM]及IGF-Ⅰ水平变化。结果观察组总有效率97.62%(41/42)较对照组80.95%(34/42)高(P<0.05);治疗2周、4周后观察组胃窦收缩幅度[治疗2周后:(51.65±5.00)mm比(48.32±3.85)mm]、胃窦收缩频率、餐后3 h胃排空率、餐后3 h肠排空率均高于对照组(P<0.05);治疗2周、4周后观察组胃动素、5-HT水平较对照组升高,SS水平较对照组降低(P<0.05);治疗2周、4周后观察组血清白蛋白[治疗2周后:(39.20±4.13)g/L比(36.68±5.65)g/L]、PA、TRF、IGF-Ⅰ[治疗2周后:(112.57±14.20)μg/L比(76.12±11.58)μg/L]水平高于对照组(P<0.05);治疗2周、4周后观察组IgA、IgG、IgM水平高于对照组(P<0.05);两组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论赖氨肌醇维B_(12)联合复方消化酶能改善FD病儿胃肠动力,调节胃肠道激素水平,改善病儿营养状态,提高机体免疫水平,效果确切。

胰岛素样生长因子Ⅰ基因在鹅不同发育时期皮肤及毛囊组织中的表达

以吉林白鹅和籽鹅为试验对象,采用RT-PCR及免疫组织化学技术,检测28,56日龄鹅皮肤组织中IGF-Ⅰ基因表达和定位情况。结果表明:IGF-ⅠmRNA表达于上述两个日龄的皮肤组织中。IGF-Ⅰ特异性免疫染色明显表达于28日龄吉林白鹅和籽鹅胸部皮肤毛根鞘的扁平细胞和复层细胞,腹部皮肤内根鞘、外根鞘及毛小皮。在56日龄2鹅种胸部和腹部皮肤扁平细胞、复层细胞、皮质和髓质中也检测到IGF-Ⅰ蛋白免疫活性。在上述鹅种不同日龄不同组织细胞间IGF-Ⅰ蛋白免疫活性的表达强度明显不同。

胰岛素样生长因子Ⅰ基因在鹅不同发育时期肌肉组织中的表达

采用RT-PCR方法及免疫组织化学方法,检测胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)基因在28,56日龄鹅肌肉组织中的表达和定位情况。结果表明:IGF-Ⅰ mRNA表达于上述2个日龄鹅胸肌和腿肌组织中,主要表达于肌肉组织的肌细胞,表明IGF-Ⅰ可能对鹅肌肉的生长发育有促进作用;且在28日龄胸肌肌细胞和腿肌肌细胞中IGF-Ⅰ的特异性免疫染色强度大于56日龄,表明IGF-Ⅰ基因表达具有时空表达性,且在鹅肌肉组织中早期表达高于后期。

人胰岛素样生长因子Ⅰ在大肠杆菌中的表达研究

胰岛素样生长因子Ⅰ（ＩＧＦ－Ⅰ）是一种多功能细胞增殖调控因子，它对许多疾病有较好的治疗作用．为了获得大量的ＩＧＦ－Ⅰ产品，在测定了ＩＧＦ－Ⅰ全长序列的基础上，构建了ＩＧＦ－Ⅰ表达载体ｐＢＶＩＧＦ，经热诱导表达后，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明：含有重组表达质粒的菌株可表达出７．６ｋＤ的蛋白．研究了不同菌株对ＩＧＦ－Ⅰ表达的影响．ＩＧＦ－Ⅰ的表达水平可达１５ｍｇ／Ｌ．重组蛋白主要以包涵体形式存在，进行了初步纯化和复性研究，Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹表明重组蛋白具有ＩＧＦ－Ⅰ的抗原性．并初步建立了ＩＧＦ－Ⅰ生物活性测定方法．

生长激素和胰岛素样生长因子Ⅰ对奶牛乳蛋白合成关键激酶及调节因子mRNA表达量的影响

本试验旨在探讨生长激素(GH)和胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)对体外培养的奶牛乳腺上皮细胞内调控乳蛋白合成的关键激酶及调节因子mRNA表达量的影响。试验对纯化后的荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞进行4种处理,对照组采用无血清生长培养基,试验组在对照组的基础上分别添加GH(100 ng/mL)、IGF-Ⅰ(100 ng/mL)和GH(100 ng/mL)+IGF-Ⅰ(100 ng/mL)。培养24 h后,采用实时定量PCR(RT-qPCR)法测定κ-酪蛋白基因以及调控乳蛋白合成的关键激酶及调节因子的mRNA表达量,并测定生长激素受体(GHR)和胰岛素样生长因子Ⅰ受体(IGF-ⅠR)mRNA表达量。结果表明:体外培养的奶牛乳腺上皮细胞可以表达GHR和IGF-ⅠRmRNA,各试验组均能显著提高κ-酪蛋白(CSN3)mRNA表达量(P<0.05),但未发现GH和IGF-Ⅰ复合存在累积效应;与对照组相比,GH组有提高E74-样转录因子5(ELF5)mRNA表达量的趋势(P<0.10),而IGF-Ⅰ组显著提高了哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和核糖体蛋白S6激酶1(rpS6K1)mRNA表达量(P<0.05),GH+IGF-Ⅰ组未呈现加强作用。结果提示,GH和IGF-Ⅰ可能单独通过影响调控乳蛋白合成的关键激酶及调节因子mRNA表达来调节κ-酪蛋白的合成。

艾灸大鼠天枢、气海穴对结肠成纤维细胞分泌胰岛素样生长因子Ⅰ、转化生长因子β1的调控作用

目的:研究显示,胰岛素样生长因子Ⅰ和转化生长因子β1与溃疡性结肠炎患者肠纤维化的形成关系密切。实验通过艾灸对大鼠结肠成纤维细胞分泌胰岛素样生长因子Ⅰ、转化生长因子β1的影响,探索艾灸防治溃疡性结肠炎肠纤维化机制。方法:实验于2004-05/2005-07在上海中医药大学实验动物室和国家中医药管理局针灸免疫三级实验室完成。①实验材料:SPF级雄性SD大鼠75只,体质量200g左右。②实验分组及处理:采用免疫学方法加局部刺激制备溃疡性结肠炎大鼠模型,随机将大鼠分为正常组、模型组、隔药灸组、温和灸组和西药组。隔药灸组、温和灸组选取天枢、气海穴分别进行隔药灸、温和灸治疗,西药组柳氮磺胺吡啶溶液灌胃治疗,模型组和正常组仅固定不做治疗。治疗结束后麻醉下处死大鼠,剖取结肠组织,分离并培养结肠成纤维细胞。③实验评估:用酶联免疫吸附法检测各组大鼠成纤维细胞上清液中胰岛素样生长因子Ⅰ、转化生长因子β1含量。结果:每组取8只进入结果分析。①造模大鼠结肠黏膜缺损,溃疡形成,胶原纤维增生,Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原纤维排列紊乱,数量增多;肉芽组织、纤维组织增生。②模型组大鼠结肠成纤维细胞大量分泌转化生长因子β1、胰岛素样生长因子Ⅰ;与模型组比较,隔药饼灸、温和灸组大鼠转化生长因子β1分泌量减少(P<0.05,P<0.01),隔药饼灸、温和灸和西药组大鼠胰岛素样生长因子Ⅰ分泌量减少(P均<0.01)。结论:艾灸大鼠天枢、气海穴能抑制大鼠结肠成纤维细胞分泌促细胞外基质细胞因子胰岛素样生长因子Ⅰ、转化生长因子β1,减少细胞外基质的积聚,达到防治肠纤维化的作用。

脐血瘦素、胰岛素样生长因子-Ⅰ与胎儿生长发育

目的揭示脐血瘦素及胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)与胎儿生长发育的关系,探讨其在胎儿生长发育方面的相互作用及临床意义。方法采用放射免疫法测定86例新生儿脐血瘦素、IGF-Ⅰ水平,根据胎龄及出生体重百分位数的关系分为:小于胎龄儿(SGA)组16例、适于胎龄儿(AGA)组41例及大于胎龄儿(LGA)组29例。同时测量新生儿的出生体重、身长、头围、足长、胎盘重量并计算体质指数(BMI)。结果①脐血瘦素水平SGA组与AGA组间差异有统计学意义(P<0.05);脐血IGF-Ⅰ水平AGA与LGA组间差异有统计学意义(P<0.05)。②脐血瘦素及IGF-Ⅰ水平分别与新生儿出生体重、身长、头围、足长、BMI及胎盘重量呈显著正相关(P<0.01),脐血瘦素与IGF-Ⅰ水平亦呈显著正相关(P<0.01)。③脐血瘦素水平与新生儿性别及分娩方式间差异均无统计学意义(P>0.05);脐血IGF-Ⅰ水平与新生儿性别差异无统计学意义(P>0.05),与新生儿分娩方式差异有统计学意义(P<0.05)。结论脐血瘦素、IGF-Ⅰ在调节胎儿生长发育方面起着重要作用,参与胎儿的生长发育过程,可作为评价胎儿生长发育及营养状态的临床指标之一。脐血瘦素、IGF-Ⅰ水平异常可能是引起胎儿宫内生长迟缓和巨大儿发生的原因之一。

胰岛素样生长因子-Ⅰ促进体外组织工程软骨形成

目的 探讨胰岛素样生长因子 - (IGF- )体外促进以透明质酸 (HA)为支架材料的组织工程软骨形成的能力。 方法 分离培养人关节软骨细胞 ,分为 3组 :1IGF- 组 :HA支架材料 +软骨细胞 +IGF- ;2细胞组 :HA支架材料 +软骨细胞 ;3对照组 :单纯 HA支架材料。各组在 DMEM中培养 ,3、6周停止培养 ,取组织块通过 HE染色判断培养组织的形态 ,采用甲苯胺蓝染色、 型胶原免疫组织化学及 、 型胶原 RT- PCR判断体外组织形成软骨的能力。 结果 IGF- 组和细胞组在第 6周均能形成典型的软骨组织陷窝 ,细胞组的陷窝数量明显低于 IGF- 组 ;对照组不能形成软骨组织。 型胶原免疫组织化学示 IGF- 组阳性表达强于细胞组 ;RT- PCR示 IGF- 组的 型前胶原量明显高于细胞组 (P<0 .0 5 ) ,而 型前胶原的表达量明显低于细胞组 (P<0 .0 5 ) ,差异具有统计学意义。 结论 IGF- 能促进体外构建的组织工程软骨形成 ,并提高其质量。

草鱼胰岛素样生长因子-Ⅰ基因在大肠杆菌中的表达

为构建草鱼 (Ctenopharyngodonidellus )胰岛素样生长因子 Ⅰ (IGF Ⅰ )大肠杆菌表达质粒 ,对已克隆到的草鱼IGF Ⅰ基因进行改造 .改造后的基因去除了原cDNA的信号肽和E区序列 ,并在基因的两端分别加入起始密码子和终止密码子 .将改造后的编码草鱼IGF Ⅰ成熟肽基因亚克隆到pBV 2 2 0中 ,构建成表达质粒pBVgIGF7.转化大肠杆菌 (Escherichiacoli)进行表达 .SDS PAGE显示 ,含重组表达质粒的菌株经热诱导后表达出一约 7 5kD的特异蛋白 .表达量占菌体总蛋白的2 0 0 3% ,表达产物主要以包涵体形式存在 .重组蛋白经纯化和复性后 ,采用MTT法测定其对草鱼吻端成纤维细胞PSF和草鱼卵巢细胞CO的促增殖作用 .结果表明 ,所获得的重组草鱼IGF

表皮生长因子和胰岛素样生长因子-Ⅰ对21日龄断奶仔猪胃和小肠发育的作用

选用21日龄断奶长白仔猪3窝(37头),随机分为表皮生长因子、胰岛素样生长因子-Ⅰ、基础日粮、自然哺乳4组,探讨17.86μg d/剂量下的表皮生长因子和胰岛素样生长因子-Ⅰ对21日龄断奶长白仔猪胃和小肠发育的作用。采用H E染色、比色、原位杂交和Western Blot等方法,分别检测了小肠黏膜形态;小肠重量、DNA和RNA含量;胃肠消化酶和小肠双糖酶活性;小肠表皮生长因子受体和胰岛素样生长因子-Ⅰ受体表达;小肠黏膜H SP70蛋白表达。本试验结果表明,该剂量表皮生长因子和胰岛素样生长因子-Ⅰ可促进21日龄断奶长白仔猪小肠黏膜形态的发育,激活胃和小肠消化酶和双糖酶,与其相应的受体结合,改善断奶应激。表皮生长因子和胰岛素样生长因子-Ⅰ具有促进早期断奶仔猪胃和小肠发育的作用。

大鼠股骨骨折合并脑损伤骨折愈合过程中胰岛素样生长因子Ⅰ在血清和骨痂中的表达

目的:观察胰岛素样生长因子Ⅰ在大鼠血清和骨痂中的表达,及其对骨折合并脑损伤骨折愈合的作用。方法:实验于2005-01/09在华北煤炭医学院附属医院骨科实验室完成。12周雄性Sprague-Dawley大鼠64只,随机数字法分成4组,正常对照组、脑损伤组、单纯骨折组、骨折合并脑损伤组。建立大鼠脑损伤和股骨骨折模型。分别于2周和3周取材,每个时间点每组8只,拍骨折股骨X射线片,采用酶联免疫吸附法测血清中胰岛素样生长因子Ⅰ的浓度,取骨折端上下5mm组织作组织形态学染色(苏木精-伊红染色)和SP法免疫组织化学染色,观测骨折愈合情况和胰岛素样生长因子Ⅰ的表达。结果:①血清中胰岛素样生长因子Ⅰ浓度:同一时间点单纯脑损伤组和骨折合并脑损伤组均高于正常对照组和单纯骨折组,单纯脑损伤组和骨折合并脑损伤组相似,正常对照组和单纯骨折组相似d脑损伤组和骨折合并脑损伤组2周时高于3周时,正常对照组在2周和3周时比较差异无统计学意义,单纯骨折组在2周和3周时比较差异无统计学意义[2周正常对照组、脑损伤组、单纯骨折组、骨折合并脑损伤组、3周正常对照组、脑损伤组、单纯骨折组、骨折合并脑损伤组分别为(414.74±81.32),(579.98±73.30),(397.37±70.68),(569.95±65.13),(350.07±41.10),(433.37±53.78),(328.13±49.27),(454.26±93.26)μg/L]。②免疫组织化学分析骨折端组织平均阳性细胞百分数:骨折合并脑损伤组均高于单纯骨折组,单纯骨折组2周与3周时比较差异无统计学意义,骨折合并脑损伤组2周与3周时比较差异无统计学意义[2周单纯骨折组、骨折合并脑损伤组、3周单纯骨折组、骨折合并脑损伤组分别为(0.776±0.057),(0.853±0.044),(0.780±0.051),(0.851±0.039)]。结论:脑损伤对骨折愈合有促进作用,胰岛素样生长因子Ⅰ可能是脑损伤促进骨折愈合的原因。

大鼠胰岛素样生长因子Ⅰ基因的克隆及表达

以大鼠染色体DNA为模板 ,PCR分别扩增胰岛素样生长因子Ⅰ (IGF Ⅰ )基因外显子 2编码区和外显子 3编码区 ,并使外显子 2编码区的 3′端与外显子 3编码区的 5′端有相同的 4 0个碱基。采用外显子拼接法 ,以两种扩增产物为模板再次进行PCR ,得到 2 10bp的大鼠IGF Ⅰ基因全编码序列。将此序列克隆入pUC18质粒进一步构建表达型重组质粒pGEX IGF Ⅰ ,并在大肠杆菌DH5α中进行诱导表达。表达产物经SDS PAGE分析及Westernblot检测 ,并经体外实验证明其具有刺激细胞增殖的生物活性。

丹参对兔骨性关节炎关节软骨白介素-1β、白介素-6和胰岛素样生长因子-Ⅰ表达的影响

目的:探讨丹参对兔骨性关节炎(OA)模型关节软骨退变的保护作用及其机制。方法:将24只大白兔随机分成2组,即对照组和实验组,每组12只。所有兔通过手术建立右膝关节OA动物模型,对照组的所有兔的右膝关节腔内注射生理盐水0.5ml/kg,实验组所有兔的右膝关节腔内注射丹参注射液0.5ml/kg,手术完毕后当天就注射1次,以后每4天注射1次。在动物OA模型建立后的第10周,将兔处死,收集右侧股骨内侧髁标本,用光学显微镜和透射式电子显微镜观察关节软骨形态学结构改变,用免疫组化技术检测关节软骨组织中IL-1β、IL-6和IGF-Ⅰ蛋白的表达。结果:实验组兔的关节软骨破坏程度明显轻于对照组(P<0.05)。IL-1β、IL-6和IGF-Ⅰ蛋白阳性免疫反应物主要定位于细胞浆,为粗细较为一致的淡红色颗粒。实验组IL-1β蛋白阳性染色强度明显低于对照组(P<0.05)。实验组IL-6和IGF-Ⅰ蛋白阳性染色强度明显高于对照组(P<0.05)。结论:丹参能调节OA关节软骨组织中IL-1β、IL-6和IGF-Ⅰ蛋白的异常表达,对关节软骨具有保护作用。

胰岛素样生长因子Ⅰ、胰岛素样生长因子Ⅰ受体在大肠癌中的表达及其意义

目的检测胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)、胰岛素样生长因子Ⅰ受体(IGF-ⅠR)蛋白在大肠癌中的表达,并分析与临床病理学因素的关系,探讨两者在大肠癌发病机制中的相互作用及与患者预后的关系。方法选取不同类型的大肠癌组织48例(试验组),其中男性25例,女性23例;年龄34～78岁,平均年龄53岁。任意选癌旁5cm以上的正常组织24例(正常对照组)。采用SABC法检测IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR的表达。结果在48例大肠癌组织中,IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR的阳性表达率分别为64.58%、58.33%,均显著高于癌旁正常组织中的16.67%、16.67%。IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR在大肠癌组织中的表达与肿瘤的浸润程度、淋巴结转移、Dukes’分期有关,而与其他的病理因素及患者5年生存情况无关。IGF-Ⅰ和IGF-ⅠR在大肠癌组织中的表达呈明显相关性。结论IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR可能相互协同作用参与大肠癌的浸润、转移,可作为反映大肠癌进展的重要生物学指标,但IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR阳性表达与大肠癌患者的预后无明显相关性。

谷胱甘肽对育肥羊生长性能及生长激素/胰岛素样生长因子-Ⅰ轴调控作用的研究

本文旨在研究谷胱甘肽(glutathione,GSH)对育肥羊生长性能及生长激素/胰岛素样生长因子-Ⅰ(GH/IGF-Ⅰ)轴的影响。试验采用单因素随机区组设计,将12只3月龄东北细毛羊与德国肉用美利奴羊杂交一代育肥羊分为3组,每组4个重复,每组羊公母各占1/2。对照组饲喂基础日粮,试验组1和试验组2分别在基础日粮的基础上添加500和800 mg/kg的GSH,试验期为60 d。测定谷胱甘肽对育肥羊生长性能和血清中GH和IGF-Ⅰ浓度及组织中IGF-Ⅰ mRNA表达量的影响。结果表明:日粮中添加GSH显著提高了试验组育肥羊的日增重(P<0.05),显著降低了试验组育肥羊的料重比(P<0.05),但对育肥羊的日采食量无显著影响(P>0.05);试验20、40和60 d时,试验组育肥羊血清中的生长激素(GH)和胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)水平显著高于对照组(P<0.05);与对照组相比,试验组育肥羊肝脏和背最长肌中IGF-Ⅰ mRNA的表达量有所提高,当GSH添加量达到800 mg/kg时,育肥羊背最长肌中IGF-Ⅰ mRNA的表达量显著高于对照组(P<0.05)。因此,本试验初步得出,日粮中添加GSH促进了肝脏IGF-Ⅰ的分泌,提高了肌肉中IGF-Ⅰ mRNA的表达量,提高血清中GH与IGF-Ⅰ浓度,从而促进了育肥羊的生长。

脂联素、瘦素及胰岛素样生长因子-Ⅰ在胎儿生长发育中的作用

目的探讨脂联素、瘦素及胰岛素样生长因子-Ⅰ（IGF—Ⅰ）在胎儿生长发育中的作用。方法选择2006年10月-2007年10月在本院产科出生的新生儿86例。胎龄31—42周；男57例，女29例。根据不同出生体质量分为小于胎龄儿（SGA）组（16例），适于胎龄儿（AGA）组（41例）及大于胎龄儿（LGA）组（29例）。胎儿娩出后立即断脐留脐血20mL，采用放射免疫分析法测定血清脂联素、瘦素及IGF—Ⅰ水平，同时检测其血脂水平，测量新生儿生长参数，计算体质量指数（BMI）。结果1．新生儿脐血瘦素、脂联素及IGF—Ⅰ水平无显著性别差异。2．脐血瘦素水平在SGA、AGA、LGA3组间有显著差异（P〈0．001），LGA组显著高于AGA及SAG组（P〈10．01，0．001）；脐血瘦素水平与体质量、胎龄、头围、身长、足长及胎盘质量均呈显著正相关（Pa〈0．01）。3．脐血脂联素水平与出生体质量、头围、足长、BMI水平均呈显著正相关（Pa〈0．05）。脐血脂联素水平在SGA、AGA、LGA3组间有显著差异（P〈0．001），LGA组高于AGA及SAG组（Pa〈0．01）。4．LGA组脐血IGF—Ⅰ水平显著高于AGA及SAG组，3组间有明显差异（P〈0．001）；脐血IGF—Ⅰ水平与体质量、头围、身长、足长及胎盘质量均呈显著正相关（Pa〈0．01）。5．脐血瘦素与脂联素、IGF—Ⅰ水平呈显著正相关（Pa〈0．01），脐血脂联素与IGF—Ⅰ水平无明显相关关系（P〉0．05）。6．SGA、AGA、LGA3组血脂水平比较无显著差异（Pa〉0．05）。脐血IGF—Ⅰ水平与三酰甘油水平呈明显负相关（P〈0．05），脐血脂联素、瘦素水平与血脂各指标间均无明显相关性（Pa〉0．05）。结论瘦素与脂联素、IGF-Ⅰ在胎儿宫内生长和发育过程中起重要的调节作用，可作为评价胎儿生长发育及营养状态的临床指标之一。

鹅胰岛素样生长因子-Ⅰ基因的克隆及其mRNA在组织中的表达量变化

利用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)克隆了黑龙江籽鹅IGF-Ⅰ基因,并检测了生长期间该基因mRNA在各组织中的表达量变化。结果表明,鹅IGF-Ⅰ基因与鸡、鸭IGF-Ⅰ基因的同源性分别为97.6%、99.3%;鹅肝组织中IGF-ⅠmRNA的表达水平在30日龄和60日龄较高,而30日龄的表达量极显著高于22、28日龄鹅胚和1日龄籽鹅,显著高于10日龄雏鹅;30日龄雏鹅IGF-ⅠmRNA在肝、卵巢、胸肌、肺、脾、腿肌、垂体、肌胃、肾、心等组织中都有表达,其中肝、卵巢、胸肌、肺的表达量较高。

团头鲂胰岛素样生长因子-Ⅰ基因克隆与分析

胰岛素样生长因子 Ⅰ (IGF Ⅰ )是一单链多肽。在脊椎动物中 ,IGF Ⅰ通过介导生长激素达到促进生长的作用。为研究鲤科鱼类IGF Ⅰ的结构功能及在水产养殖中的潜在应用前景 ,采用逆转录 -聚合酶链式反应 (RT PCR)方法 ,从团头鲂 (Megalobramaamblycephala)肝脏的总RNA中扩增出IGF ⅠcDNA。测定了该基因序列 ,推导其编码的蛋白质序列。克隆的cDNA序列编码包括信号肽和B、C、A、D、E 6个区域的 16 1个氨基酸。E区域分析结果表明所克隆的团头鲂IGF Ⅰ序列属于IGF ⅠEa - 2亚型。

胰岛素样生长因子Ⅰ对豚鼠巩膜成纤维细胞增殖的影响

目的：研究表明，体内一定浓度的生长因子是保证眼球正常发育的必要条件，过少或过量都会引起巩膜的异常改变。实验拟进一步验证胰岛素样生长因子Ⅰ对体外培养的豚鼠巩膜成纤维细胞生长的影响。方法：实验于2006-09／2007—03在郑州大学基础医学院省肿瘤病理学重点实验室完成。①实验材料：出生3d内3色豚鼠后部巩膜组织由郑州大学基础医学院动物实验中心提供；实验用胰岛素样生长因子Ⅰ为Sigma公司产品。②实验过程及评估：采用器官组织块培养法获取原代巩膜成纤维细胞，选取传3，4代的豚鼠巩膜成纤维细胞用于实验；采用倒置相差显微镜下观察细胞形态并采用免疫化学染色法进行细胞鉴定；应用四甲基偶氮唑盐比色法和流式细胞仪分析技术，观察不同质量浓度胰岛素样生长因子Ⅰ（0．1，0．5，5，10，50μg／L）对体外培养的豚鼠巩膜成纤维细胞增殖和细胞生长周期的影响。结果：①巩膜成纤维细胞鉴定：倒置相差显微镜下观察，细胞透亮呈梭形，在细胞密度较低时细胞排列成网状，密度较高时呈束状；波形蛋白染色阳性。胞浆内可见棕黄色阳性反应产物，证实所培养的细胞为巩膜成纤维细胞。②体外培养的豚鼠巩膜成纤维细胞增殖和细胞生长周期：0．5，5，10μg／L的胰岛素样生长因子Ⅰ能促进豚鼠巩膜成纤维细胞增殖，呈剂量依赖性（F=84．510，P=0．000〈0．05），最佳质量浓度为10μg／L。流式细胞仪结果显示，胰岛素样生长因子Ⅰ处理48h后，与对照组比较，巩膜成纤维细胞GO—G1期百分比降低（78．2％下到64．5％，P〈0．05），而S期百分比显著升高（10．4％上升到16．4％，P〈0．05），增殖指数百分比增高（27.8％增高到56．5％，P〈0．05）。结论：在一定浓度范围内外源性胰岛素样生长因子Ⅰ可以促进体外培养的豚鼠巩膜成纤维细胞增殖。

七氟烷对老年大鼠认知功能及海马CA1区胰岛素样生长因子Ⅰ表达的影响

目的探讨不同剂量七氟烷对老年大鼠认知功能及海马CA1区胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)表达的影响。方法选取12月龄SD大鼠40只,雌雄不限,随机分为5组(n=8):对照组(A组)吸入空气,B、C组吸入1.5%七氟烷2 h,D、E组吸入3.0%七氟烷2h。B、D组1d后进行认知功能测试,C、E组7d后进行认知功能测试。所有大鼠在实验结束后行Y型迷宫测试,认知功能测试完毕后立即处死大鼠,取海马组织,左侧海马用RT-PCR方法测定CA1区IGF-ⅠmRNA的表达,右侧海马用免疫组织化学法检测IGF-Ⅰ蛋白的表达。结果与对照组相比,高浓度七氟烷1 d组(D组)认知功能下降,IGF-Ⅰ蛋白和IGF-ⅠmRNA表达明显减少,其他七氟烷组与对照组相比认知功能无明显变化,IGF-Ⅰ蛋白和IGF-ⅠmRNA表达的差异无统计学意义(P>0.05)。结论高浓度七氟烷可在短时期内降低老年大鼠认知功能,可能与海马CA1区IGF-Ⅰ含量降低有关,内源性IGF-Ⅰ的表达减少可能在老年大鼠认知功能障碍的发生、发展过程中起到重要作用。