胰岛素样生长因子结合蛋白作为衰老相关疾病生物标志物的研究进展

衰老是细胞、组织和器官功能不可逆的衰退过程,与多种衰老相关慢性疾病的发生和发展密切相关。在全球人口老龄化背景下,早期诊断和监测衰老相关疾病,对于实现健康老龄化具有重要意义。胰岛素样生长因子结合蛋白(insulin-like growth factor-binding proteins,IGFBPs)作为重要的分泌蛋白,在调控衰老相关疾病中的作用逐渐被揭示,展现出作为衰老及相关疾病生物标志物的巨大潜力。该文综述了IGFBPs在衰老相关疾病中的临床应用价值和研究进展,旨在为衰老相关疾病的预警、诊断和预后提供新的思路和方法。

三皮消痤汤联合火针对肺经风热证寻常型痤疮患者血清脱氢异雄酮 胰岛素样生长因子-1 白细胞介素-4水平及预后的影响

目的 观察三皮消痤汤联合火针对肺经风热证寻常型痤疮患者血清脱氢异雄酮(DHEA)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、白细胞介素-4(IL-4)水平及预后的影响。方法 选取绍兴文理学院附属医院2022年1月至2023年12月收治的肺经风热证寻常型痤疮患者80例,按照不同治疗方式分为观察组(42例,三皮消痤汤联合火针治疗)和对照组(38例,火针治疗),2组基础治疗方式相同,经过4周治疗后,比较2组疗效、症状消退时间、DHEA、IGF-1、IL-4和不良反应发生率。结果 治疗4周后,观察组总有效41例(98%)较对照组84%高(P<0.05);观察组皮损(皮疹、结节、粉刺、脓疱)消退时间短于对照组(P<0.001);2组治疗后的DHEA、IGF-1与IL-4水平均降低,且观察组低于对照组(P<0.001);观察组不良反应发生率为5%(2例),对照组为11%(4例),2组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 三皮消痤汤和火针联合治疗寻常型痤疮(肺经风热证)效果显著,症状消退时间缩短,且安全性高,不会加重不良反应。

生长激素和胰岛素样生长因子Ⅰ对奶牛乳蛋白合成关键激酶及调节因子mRNA表达量的影响

本试验旨在探讨生长激素(GH)和胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)对体外培养的奶牛乳腺上皮细胞内调控乳蛋白合成的关键激酶及调节因子mRNA表达量的影响。试验对纯化后的荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞进行4种处理,对照组采用无血清生长培养基,试验组在对照组的基础上分别添加GH(100 ng/mL)、IGF-Ⅰ(100 ng/mL)和GH(100 ng/mL)+IGF-Ⅰ(100 ng/mL)。培养24 h后,采用实时定量PCR(RT-qPCR)法测定κ-酪蛋白基因以及调控乳蛋白合成的关键激酶及调节因子的mRNA表达量,并测定生长激素受体(GHR)和胰岛素样生长因子Ⅰ受体(IGF-ⅠR)mRNA表达量。结果表明:体外培养的奶牛乳腺上皮细胞可以表达GHR和IGF-ⅠRmRNA,各试验组均能显著提高κ-酪蛋白(CSN3)mRNA表达量(P<0.05),但未发现GH和IGF-Ⅰ复合存在累积效应;与对照组相比,GH组有提高E74-样转录因子5(ELF5)mRNA表达量的趋势(P<0.10),而IGF-Ⅰ组显著提高了哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和核糖体蛋白S6激酶1(rpS6K1)mRNA表达量(P<0.05),GH+IGF-Ⅰ组未呈现加强作用。结果提示,GH和IGF-Ⅰ可能单独通过影响调控乳蛋白合成的关键激酶及调节因子mRNA表达来调节κ-酪蛋白的合成。

胰岛素样生长因子-Ⅰ对人肾小管上皮细胞转分化及胶原合成的作用

目的探讨胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)在人肾小管上皮细胞转分化及胶原合成中的作用。方法将体外培养的人肾小管上皮细胞HK2分为2组(1)对照组;(2)IGF-Ⅰ组培养液中加入终浓度分别为25、50、100、200μg/L的IGF-Ⅰ。用倒置显微镜观察细胞形态变化,以RT-PCR检测HK2细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、胶原Ⅰα和胶原ⅢαmRNA表达的变化。ELISA方法检测培养上清中胶原Ⅰ的浓度。结果IGF-Ⅰ刺激使HK2细胞由椭圆形变为梭形。不同浓度的IGF-Ⅰ作用于HK2细胞48h后,α-SMA、胶原Ⅰα和胶原ⅢαmRNA水平显著升高(P<0.05);ELISA结果显示,100及200μg/LIGF-Ⅰ组中HK2细胞分泌的胶原Ⅰ显著增加(P<0.05)。结论IGF-Ⅰ在体外能够诱导人肾小管上皮细胞转分化,并促进其胶原的合成。

不同浓度胰岛素样生长因子-Ⅰ对体外培养奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白和脂肪合成相关基因表达的影响

应用Real-time PCR方法检测不同浓度(0、1、10和100ng/mL)胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)处理后的体外培养奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白和脂肪合成相关基因mRNA的相对表达量。结果表明,添加不同浓度IGF-Ⅰ对体外培养的奶牛乳腺上皮细胞IGF-Ⅰ受体基因(IGFIR)、IGF-Ⅰ结合蛋白-3基因(IGFBP3)、α-s1-酪蛋白基因(CSN1S1)和κ-酪蛋白基因(CSN3)mRNA的相对表达丰度均无显著影响(P>0.05)。随着IGF-Ⅰ添加浓度的增加,β-酪蛋白基因(CSN2)、乙酰辅酶A羧化酶基因(ACACA)、脂肪酸合成酶基因(FASN)和脂肪酸结合蛋白-3基因(FABP3)mRNA的相对表达丰度显著上调(P<0.05)。提示,IGF-Ⅰ作为一种重要细胞因子参与调节乳腺上皮细胞乳蛋白和乳脂肪相关基因mRNA的表达。

猪胰岛素样生长因子-Ⅰ的克隆及生物信息学分析

为了克隆猪胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-I)以及检测该因子在各组织中的转录水平,分别提取猪13种组织RNA并反转录为cDNA,利用RT-PCR方法扩增IGF-I编码区全长序列,将纯化的片段与pMD18-T载体连接,转化大肠杆菌DH 5α,筛选阳性克隆并测定其序列,利用生物信息学方法分析其序列特征,并与牛等5个物种构建系统进化树。同时采用半定量RT-PCR方法分析IGF-I在猪13种组织中的表达情况。结果显示,猪IGF-I编码区全长462 bp(GenBank登录号:JX827417),编码153个氨基酸。氨基酸二级结构预测表明无规卷曲占的比例最大,为57.52%。氨基酸序列同源性分析表明,与牛、马、羊、鹿、鸡等5个物种的相似性分别为98.0%、97.4%、96.1%、96.1%、83%,多组织半定量RT-PCR研究表明IGF-I mRNA在猪的13个组织中均有表达,其中在肌肉、肝脏、脾脏、卵巢、大肠中表达量较高,其他组织略低。

胎儿宫内发育迟缓的三维超声脐动脉血流参数及母体血清胰岛素样生长因子-Ⅰ、瘦素水平的变化

目的分析胎儿宫内发育迟缓的三维超声脐动脉血流参数(搏动指数PI、阻力指数RI、收缩峰与舒张末期血流速度比S/D)及血清胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)、瘦素(Leptin)水平的变化。方法选择2021年12月~2022年11月浙江省三门县人民医院95例有胎儿宫内发育迟缓高危因素的孕妇,分别行三维超声检查,采用酶联免疫法(ELISA)检测母体血清IGF-Ⅰ、Leptin水平。根据胎儿宫内发育迟缓的发生情况分为迟缓组42例和正常组47例,分析两组三维超声表现及脐动脉血流参数、母体血清IGF-Ⅰ、Leptin水平。结果胎儿宫内发育迟缓占有胎儿宫内发育迟缓高危因素的孕妇47.19%,其中匀称型、非匀称型分别占69.05%、30.95%;迟缓组超声脐动脉血流RI、S/D均高于正常组,母体血清IGF-Ⅰ、Leptin水平均低于正常组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论临床高度怀疑胎儿宫内发育迟缓时除了采用三维超声进行判断外,还可从母体血清IGF-Ⅰ、Leptin水平的改变中进行初步评估。

胰岛素样生长因子-Ⅰ的生物学功能及在畜牧业中的应用前景

下丘脑—GH—IGF—Ⅰ轴是一个重要的体内分泌代谢轴，对生长发育的调控贯穿动物的整个生命过程。自Sallmon和Daughaday首次发现并报道这一与生长激素密切相关的因子以来，人们对胰岛素样生长因子-Ⅰ（IGF—Ⅰ）的研究方兴未艾，不仅对胰岛素生长因子（IGFS），而且对IGF受体（IGFR）、IGF结合蛋白（IGFBP）以及IGFBP酶也越来越关注。而大量研究表明，出生后生长激素（GH）对动物生长的调节作用是由IGF—Ⅰ介导的，体内外试验也证明，IGF—Ⅰ具有促进组织生长和参与组织代谢活动的作用。而重组IGF—Ⅰ生物制品的出现。又为其在疾病诊断和治疗方面的研究开辟更为广阔的空间。

胰岛素样生长因子Ⅰ型受体基因对肝细胞癌生物学行为的影响

目的 研究胰岛素样生长因子 型受体 (IGF- R)对肝细胞癌生物学行为的影响。 方法 应用免疫组化 SP法检测肝细胞癌、癌旁和正常肝组织 IGF- R的表达。构建 IGF- R正、反义基因真核表达载体 ,经脂质体介导转入 SMMC- 772 1肝癌细胞株 ,观测 IGF- R正、反义基因对肝癌细胞生物学行为的影响。 结果 (1)在肝癌组织中 IGF- R呈过度表达(90 .3% ) ,以膜、胞浆混合型表达为主 ,显著高于正常肝组织。肝癌多发结节组高于单发结节组 (P<0 .0 5 )。 (2 ) IGF- R反义基因能明显下调内源性 IGF- R的表达 ,与 772 1细胞、正义细胞有显著性差异 (P<0 .0 1)。 (3)电镜下反义细胞内可见微腺腔、灶性坏死、髓鞘样结构。 4反义细胞 G0 /G1期明显增加 (6 3.9% ) ,S期减少 (19.3% ) ,细胞凋亡增加 (5 .89% ) ,与 772 1细胞、正义细胞有显著性差异 (P<0 .0 1)。 5 .反义细胞不能在软琼脂中生长。 结论 (1) IGF- R高表达与肝癌的发生及侵袭性行为有密切关系。 (2 ) IGF- R反义基因下调 772 1细胞内源性 IGF- R的表达 ,对肝癌细胞的增殖有明显抑制作用。

胰岛素样生长因子-1的检测方法及其应用研究进展

胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1),是一种由70个氨基酸组成的肽类激素。临床研究发现,IGF-1与内分泌疾病、心脑血管疾病、癌症肿瘤、大脑与神经系统相关疾病、皮肤病、肝病等多种疾病都有着十分密切的联系。在新冠肺炎的研究中,IGF-1也扮演了重要角色。因此,可通过准确检测血清中IGF-1含量的变化作为相关疾病的辅助诊断指标之一。目前,临床上针对IGF-1的含量检测方法主要有基于抗原抗体特异性结合的免疫学分析方法和基于质谱技术的分析方法,这些方法具有不同的检测特性,测量准确性也不尽一致。通过对IGF-1的相关研究进展进行综述,总结IGF-1在临床检测应用中的功能作用,讨论其检测方法的特性和应用场景,为进一步提升IGF-1的检测能力提出了建议。

血清25-羟基维生素D与胰岛素样生长因子-1水平对桡骨远端骨折内固定术后预后的影响

目的:探讨血清25-羟基维生素D[25-hydroxy vitamin D,25(OH)D]、胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)水平对桡骨远端骨折内固定术后预后的影响。方法:以2020年1月至2022年6月在台州骨伤医院接受同一组医生完成的切开复位钢板螺钉内固定手术治疗的桡骨远端骨折患者为研究对象。收集患者的年龄、性别、致伤原因、骨折AO分型、受伤至手术时间、手术入路、术中复位情况、术后开始锻炼时间、优势手及合并同侧其他骨折等一般资料。随访观察患侧腕关节情况,依据Gartland和Werley腕关节评分标准对患侧腕关节进行评分,≤8分为预后良好,≥9分为预后不良。分别于术前、术后1周、术后4周、术后6周时,采用电化学发光法检测血清25(OH)D水平,采用ELISA法检测血清IGF-1水平。根据术后6个月时患侧腕关节情况将纳入病例分为预后良好组和预后不良组。比较2组患者一般资料和手术前后血清25(OH)D、IGF-1水平,分析影响预后的因素,评价血清25(OH)D、IGF-1水平对预后不良的预测价值。结果:(1)一般结果。共纳入98例患者,预后良好组68例,预后不良组30例。2组患者骨折AO分型的组间差异有统计学意义(χ^(2)=11.575,P=0.003)。(2)血清25(OH)D、IGF-1水平检测结果。术后第4周和术后第6周时,预后不良组血清25(OH)D、IGF-1水平均低于预后良好组[(25.47±6.06)nmol·L^(-1),(16.54±3.92)nmol·L^(-1),t=7.405,P=0.000;(36.42±7.10)nmol·L^(-1),(16.94±3.84)nmol·L^(-1),t=14.117,P=0.000;(292.36±58.64)ng·mL^(-1),(216.45±43.76)ng·mL^(-1),t=6.346,P=0.000;(402.75±66.48)ng·mL^(-1),(228.34±46.59)ng·mL^(-1),t=13.011,P=0.000]。(3)桡骨远端骨折内固定术后预后不良的影响因素分析结果。术后第4周时血清25(OH)D、IGF-1水平是桡骨远端骨折内固定术后预后不良的影响因素(β=-0.172,P=0.001,OR=0.842;β=-0.217,P=0.003,OR=0.805)。(4)血清25(OH)D、IGF-1水平对桡骨远端骨折内固定术后预后不良的预测价值评价结果。术后第4周时血清25(OH)D、IGF-1水平分别预测及二者联合预测桡骨远端骨折内固定术后预后不良的受试者操作特征曲线下面积分别为0.812(P=0.000)、0.785(P=0.000)、0.906(P=0.000),灵敏度分别为67.6%、57.4%、83.8%,特异度分别为80.0%、93.3%、86.7%,2项指标的临界值分别为21.99 nmol·L^(-1)、267.32 ng·mL^(-1)。结论:术后第4周时血清25(OH)D、IGF-1水平对桡骨远端骨折内固定术后预后不良有一定预测价值。

胰岛素样生长因子Ⅰ基因在鹅不同发育时期皮肤及毛囊组织中的表达

以吉林白鹅和籽鹅为试验对象,采用RT-PCR及免疫组织化学技术,检测28,56日龄鹅皮肤组织中IGF-Ⅰ基因表达和定位情况。结果表明:IGF-ⅠmRNA表达于上述两个日龄的皮肤组织中。IGF-Ⅰ特异性免疫染色明显表达于28日龄吉林白鹅和籽鹅胸部皮肤毛根鞘的扁平细胞和复层细胞,腹部皮肤内根鞘、外根鞘及毛小皮。在56日龄2鹅种胸部和腹部皮肤扁平细胞、复层细胞、皮质和髓质中也检测到IGF-Ⅰ蛋白免疫活性。在上述鹅种不同日龄不同组织细胞间IGF-Ⅰ蛋白免疫活性的表达强度明显不同。

草鱼胰岛素样生长因子-Ⅰ基因在大肠杆菌中的表达

为构建草鱼 (Ctenopharyngodonidellus )胰岛素样生长因子 Ⅰ (IGF Ⅰ )大肠杆菌表达质粒 ,对已克隆到的草鱼IGF Ⅰ基因进行改造 .改造后的基因去除了原cDNA的信号肽和E区序列 ,并在基因的两端分别加入起始密码子和终止密码子 .将改造后的编码草鱼IGF Ⅰ成熟肽基因亚克隆到pBV 2 2 0中 ,构建成表达质粒pBVgIGF7.转化大肠杆菌 (Escherichiacoli)进行表达 .SDS PAGE显示 ,含重组表达质粒的菌株经热诱导后表达出一约 7 5kD的特异蛋白 .表达量占菌体总蛋白的2 0 0 3% ,表达产物主要以包涵体形式存在 .重组蛋白经纯化和复性后 ,采用MTT法测定其对草鱼吻端成纤维细胞PSF和草鱼卵巢细胞CO的促增殖作用 .结果表明 ,所获得的重组草鱼IGF

表皮生长因子和胰岛素样生长因子-Ⅰ对21日龄断奶仔猪胃和小肠发育的作用

选用21日龄断奶长白仔猪3窝(37头),随机分为表皮生长因子、胰岛素样生长因子-Ⅰ、基础日粮、自然哺乳4组,探讨17.86μg d/剂量下的表皮生长因子和胰岛素样生长因子-Ⅰ对21日龄断奶长白仔猪胃和小肠发育的作用。采用H E染色、比色、原位杂交和Western Blot等方法,分别检测了小肠黏膜形态;小肠重量、DNA和RNA含量;胃肠消化酶和小肠双糖酶活性;小肠表皮生长因子受体和胰岛素样生长因子-Ⅰ受体表达;小肠黏膜H SP70蛋白表达。本试验结果表明,该剂量表皮生长因子和胰岛素样生长因子-Ⅰ可促进21日龄断奶长白仔猪小肠黏膜形态的发育,激活胃和小肠消化酶和双糖酶,与其相应的受体结合,改善断奶应激。表皮生长因子和胰岛素样生长因子-Ⅰ具有促进早期断奶仔猪胃和小肠发育的作用。

胰岛素样生长因子-Ⅰ促进体外组织工程软骨形成

目的 探讨胰岛素样生长因子 - (IGF- )体外促进以透明质酸 (HA)为支架材料的组织工程软骨形成的能力。 方法 分离培养人关节软骨细胞 ,分为 3组 :1IGF- 组 :HA支架材料 +软骨细胞 +IGF- ;2细胞组 :HA支架材料 +软骨细胞 ;3对照组 :单纯 HA支架材料。各组在 DMEM中培养 ,3、6周停止培养 ,取组织块通过 HE染色判断培养组织的形态 ,采用甲苯胺蓝染色、 型胶原免疫组织化学及 、 型胶原 RT- PCR判断体外组织形成软骨的能力。 结果 IGF- 组和细胞组在第 6周均能形成典型的软骨组织陷窝 ,细胞组的陷窝数量明显低于 IGF- 组 ;对照组不能形成软骨组织。 型胶原免疫组织化学示 IGF- 组阳性表达强于细胞组 ;RT- PCR示 IGF- 组的 型前胶原量明显高于细胞组 (P<0 .0 5 ) ,而 型前胶原的表达量明显低于细胞组 (P<0 .0 5 ) ,差异具有统计学意义。 结论 IGF- 能促进体外构建的组织工程软骨形成 ,并提高其质量。

脐血瘦素、胰岛素样生长因子-Ⅰ与胎儿生长发育

目的揭示脐血瘦素及胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)与胎儿生长发育的关系,探讨其在胎儿生长发育方面的相互作用及临床意义。方法采用放射免疫法测定86例新生儿脐血瘦素、IGF-Ⅰ水平,根据胎龄及出生体重百分位数的关系分为:小于胎龄儿(SGA)组16例、适于胎龄儿(AGA)组41例及大于胎龄儿(LGA)组29例。同时测量新生儿的出生体重、身长、头围、足长、胎盘重量并计算体质指数(BMI)。结果①脐血瘦素水平SGA组与AGA组间差异有统计学意义(P<0.05);脐血IGF-Ⅰ水平AGA与LGA组间差异有统计学意义(P<0.05)。②脐血瘦素及IGF-Ⅰ水平分别与新生儿出生体重、身长、头围、足长、BMI及胎盘重量呈显著正相关(P<0.01),脐血瘦素与IGF-Ⅰ水平亦呈显著正相关(P<0.01)。③脐血瘦素水平与新生儿性别及分娩方式间差异均无统计学意义(P>0.05);脐血IGF-Ⅰ水平与新生儿性别差异无统计学意义(P>0.05),与新生儿分娩方式差异有统计学意义(P<0.05)。结论脐血瘦素、IGF-Ⅰ在调节胎儿生长发育方面起着重要作用,参与胎儿的生长发育过程,可作为评价胎儿生长发育及营养状态的临床指标之一。脐血瘦素、IGF-Ⅰ水平异常可能是引起胎儿宫内生长迟缓和巨大儿发生的原因之一。

胰岛素样生长因子Ⅰ基因在鹅不同发育时期肌肉组织中的表达

采用RT-PCR方法及免疫组织化学方法,检测胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)基因在28,56日龄鹅肌肉组织中的表达和定位情况。结果表明:IGF-Ⅰ mRNA表达于上述2个日龄鹅胸肌和腿肌组织中,主要表达于肌肉组织的肌细胞,表明IGF-Ⅰ可能对鹅肌肉的生长发育有促进作用;且在28日龄胸肌肌细胞和腿肌肌细胞中IGF-Ⅰ的特异性免疫染色强度大于56日龄,表明IGF-Ⅰ基因表达具有时空表达性,且在鹅肌肉组织中早期表达高于后期。

重组人胰岛素样生长因子I对大鼠成骨细胞增殖、凋亡及I型胶原蛋白合成的影响

目的 观察胰岛素样生长因子Ⅰ（IGF-Ⅰ）对体外培养的大鼠成骨细胞的增殖、凋亡及Ⅰ型胶原蛋白合成的影响，探讨IGF-Ⅰ对骨代谢影响的可能机制。方法 不同浓度rhIGF-Ⅰ刺激体外培养的大鼠成骨细胞，采用噻唑蓝（MTT）法测定细胞增殖能力；肿瘤坏死因子α（TNF-α单独或与rhIGF-Ⅰ共同刺激成骨细胞，流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率；rhIGF-Ⅰ刺激成骨细胞，免疫细胞化学结合计算机图像分析系统检测Ⅰ型胶原蛋白的表达。结果 一定浓度IGF-Ⅰ能明显增加成骨细胞数量（P〈0．05），在0．1～100ng／ml这种作用与IGF-Ⅰ的浓度呈正相关；TNF-α在0．1～100ng/ml浓度范围内呈剂量依赖性地促进成骨细胞凋亡（P〈0．05），并使S期细胞减少（P〈0．05），而IGF-Ⅰ能抑制，TNF-α对成骨细胞的促凋亡作用（P〈0．05）；经IGF-Ⅰ的刺激，成骨细胞Ⅰ型胶原蛋白的表达明显高于对照组（P〈0．05）。结论 IGF-Ⅰ对大鼠成骨细胞有明显的促增殖作用，在0．1～100ng/ml之间呈浓度依赖性，IGF-Ⅰ能抑制，TNF-α诱导的大鼠成骨细胞凋亡，IGF-Ⅰ能促进大鼠成骨细胞Ⅰ型胶原蛋白的合成。

艾灸大鼠天枢、气海穴对结肠成纤维细胞分泌胰岛素样生长因子Ⅰ、转化生长因子β1的调控作用

目的:研究显示,胰岛素样生长因子Ⅰ和转化生长因子β1与溃疡性结肠炎患者肠纤维化的形成关系密切。实验通过艾灸对大鼠结肠成纤维细胞分泌胰岛素样生长因子Ⅰ、转化生长因子β1的影响,探索艾灸防治溃疡性结肠炎肠纤维化机制。方法:实验于2004-05/2005-07在上海中医药大学实验动物室和国家中医药管理局针灸免疫三级实验室完成。①实验材料:SPF级雄性SD大鼠75只,体质量200g左右。②实验分组及处理:采用免疫学方法加局部刺激制备溃疡性结肠炎大鼠模型,随机将大鼠分为正常组、模型组、隔药灸组、温和灸组和西药组。隔药灸组、温和灸组选取天枢、气海穴分别进行隔药灸、温和灸治疗,西药组柳氮磺胺吡啶溶液灌胃治疗,模型组和正常组仅固定不做治疗。治疗结束后麻醉下处死大鼠,剖取结肠组织,分离并培养结肠成纤维细胞。③实验评估:用酶联免疫吸附法检测各组大鼠成纤维细胞上清液中胰岛素样生长因子Ⅰ、转化生长因子β1含量。结果:每组取8只进入结果分析。①造模大鼠结肠黏膜缺损,溃疡形成,胶原纤维增生,Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原纤维排列紊乱,数量增多;肉芽组织、纤维组织增生。②模型组大鼠结肠成纤维细胞大量分泌转化生长因子β1、胰岛素样生长因子Ⅰ;与模型组比较,隔药饼灸、温和灸组大鼠转化生长因子β1分泌量减少(P<0.05,P<0.01),隔药饼灸、温和灸和西药组大鼠胰岛素样生长因子Ⅰ分泌量减少(P均<0.01)。结论:艾灸大鼠天枢、气海穴能抑制大鼠结肠成纤维细胞分泌促细胞外基质细胞因子胰岛素样生长因子Ⅰ、转化生长因子β1,减少细胞外基质的积聚,达到防治肠纤维化的作用。

人胰岛素样生长因子Ⅰ在大肠杆菌中的表达研究

胰岛素样生长因子Ⅰ（ＩＧＦ－Ⅰ）是一种多功能细胞增殖调控因子，它对许多疾病有较好的治疗作用．为了获得大量的ＩＧＦ－Ⅰ产品，在测定了ＩＧＦ－Ⅰ全长序列的基础上，构建了ＩＧＦ－Ⅰ表达载体ｐＢＶＩＧＦ，经热诱导表达后，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明：含有重组表达质粒的菌株可表达出７．６ｋＤ的蛋白．研究了不同菌株对ＩＧＦ－Ⅰ表达的影响．ＩＧＦ－Ⅰ的表达水平可达１５ｍｇ／Ｌ．重组蛋白主要以包涵体形式存在，进行了初步纯化和复性研究，Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹表明重组蛋白具有ＩＧＦ－Ⅰ的抗原性．并初步建立了ＩＧＦ－Ⅰ生物活性测定方法．