胰岛素样生长因子-Ⅰ在新生儿缺氧缺血性脑病时血液中水平变化及意义

为观察胰岛素样生长因子_Ⅰ (IGF_Ⅰ )在新生儿缺氧缺血性脑病 (HIE)急性期和恢复期血液中水平的变化 ,并探讨其在HIE发病机制中的作用 ,用放射免疫分析法 (RIA)测定25例正常对照组、25例HIE患儿急性期、恢复期血清IGF_Ⅰ水平。结果显示HIE急性期、恢复期与正常对照组血清IGF_Ⅰ水平相比差异有显著性(F=41.77 ,P<0.001) ,HIE急性期IGF_Ⅰ水平下降 ,恢复期上升 ;急性期HIE轻、中、重度组间IGF_Ⅰ水平比较差异有显著性 (H=9.16,P<0.05) ,病情越重 ,IGF_Ⅰ水平越低。提示IGF_Ⅰ在HIE的发病机制中具有重要作用 。

胎儿宫内发育迟缓的三维超声脐动脉血流参数及母体血清胰岛素样生长因子-Ⅰ、瘦素水平的变化

目的分析胎儿宫内发育迟缓的三维超声脐动脉血流参数(搏动指数PI、阻力指数RI、收缩峰与舒张末期血流速度比S/D)及血清胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)、瘦素(Leptin)水平的变化。方法选择2021年12月~2022年11月浙江省三门县人民医院95例有胎儿宫内发育迟缓高危因素的孕妇,分别行三维超声检查,采用酶联免疫法(ELISA)检测母体血清IGF-Ⅰ、Leptin水平。根据胎儿宫内发育迟缓的发生情况分为迟缓组42例和正常组47例,分析两组三维超声表现及脐动脉血流参数、母体血清IGF-Ⅰ、Leptin水平。结果胎儿宫内发育迟缓占有胎儿宫内发育迟缓高危因素的孕妇47.19%,其中匀称型、非匀称型分别占69.05%、30.95%;迟缓组超声脐动脉血流RI、S/D均高于正常组,母体血清IGF-Ⅰ、Leptin水平均低于正常组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论临床高度怀疑胎儿宫内发育迟缓时除了采用三维超声进行判断外,还可从母体血清IGF-Ⅰ、Leptin水平的改变中进行初步评估。

血清25-羟基维生素D与胰岛素样生长因子-1水平对桡骨远端骨折内固定术后预后的影响

目的:探讨血清25-羟基维生素D[25-hydroxy vitamin D,25(OH)D]、胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)水平对桡骨远端骨折内固定术后预后的影响。方法:以2020年1月至2022年6月在台州骨伤医院接受同一组医生完成的切开复位钢板螺钉内固定手术治疗的桡骨远端骨折患者为研究对象。收集患者的年龄、性别、致伤原因、骨折AO分型、受伤至手术时间、手术入路、术中复位情况、术后开始锻炼时间、优势手及合并同侧其他骨折等一般资料。随访观察患侧腕关节情况,依据Gartland和Werley腕关节评分标准对患侧腕关节进行评分,≤8分为预后良好,≥9分为预后不良。分别于术前、术后1周、术后4周、术后6周时,采用电化学发光法检测血清25(OH)D水平,采用ELISA法检测血清IGF-1水平。根据术后6个月时患侧腕关节情况将纳入病例分为预后良好组和预后不良组。比较2组患者一般资料和手术前后血清25(OH)D、IGF-1水平,分析影响预后的因素,评价血清25(OH)D、IGF-1水平对预后不良的预测价值。结果:(1)一般结果。共纳入98例患者,预后良好组68例,预后不良组30例。2组患者骨折AO分型的组间差异有统计学意义(χ^(2)=11.575,P=0.003)。(2)血清25(OH)D、IGF-1水平检测结果。术后第4周和术后第6周时,预后不良组血清25(OH)D、IGF-1水平均低于预后良好组[(25.47±6.06)nmol·L^(-1),(16.54±3.92)nmol·L^(-1),t=7.405,P=0.000;(36.42±7.10)nmol·L^(-1),(16.94±3.84)nmol·L^(-1),t=14.117,P=0.000;(292.36±58.64)ng·mL^(-1),(216.45±43.76)ng·mL^(-1),t=6.346,P=0.000;(402.75±66.48)ng·mL^(-1),(228.34±46.59)ng·mL^(-1),t=13.011,P=0.000]。(3)桡骨远端骨折内固定术后预后不良的影响因素分析结果。术后第4周时血清25(OH)D、IGF-1水平是桡骨远端骨折内固定术后预后不良的影响因素(β=-0.172,P=0.001,OR=0.842;β=-0.217,P=0.003,OR=0.805)。(4)血清25(OH)D、IGF-1水平对桡骨远端骨折内固定术后预后不良的预测价值评价结果。术后第4周时血清25(OH)D、IGF-1水平分别预测及二者联合预测桡骨远端骨折内固定术后预后不良的受试者操作特征曲线下面积分别为0.812(P=0.000)、0.785(P=0.000)、0.906(P=0.000),灵敏度分别为67.6%、57.4%、83.8%,特异度分别为80.0%、93.3%、86.7%,2项指标的临界值分别为21.99 nmol·L^(-1)、267.32 ng·mL^(-1)。结论:术后第4周时血清25(OH)D、IGF-1水平对桡骨远端骨折内固定术后预后不良有一定预测价值。

胰岛素样生长因子Ⅰ基因在鹅不同发育时期皮肤及毛囊组织中的表达

以吉林白鹅和籽鹅为试验对象,采用RT-PCR及免疫组织化学技术,检测28,56日龄鹅皮肤组织中IGF-Ⅰ基因表达和定位情况。结果表明:IGF-ⅠmRNA表达于上述两个日龄的皮肤组织中。IGF-Ⅰ特异性免疫染色明显表达于28日龄吉林白鹅和籽鹅胸部皮肤毛根鞘的扁平细胞和复层细胞,腹部皮肤内根鞘、外根鞘及毛小皮。在56日龄2鹅种胸部和腹部皮肤扁平细胞、复层细胞、皮质和髓质中也检测到IGF-Ⅰ蛋白免疫活性。在上述鹅种不同日龄不同组织细胞间IGF-Ⅰ蛋白免疫活性的表达强度明显不同。

表皮生长因子和胰岛素样生长因子-Ⅰ对21日龄断奶仔猪胃和小肠发育的作用

选用21日龄断奶长白仔猪3窝(37头),随机分为表皮生长因子、胰岛素样生长因子-Ⅰ、基础日粮、自然哺乳4组,探讨17.86μg d/剂量下的表皮生长因子和胰岛素样生长因子-Ⅰ对21日龄断奶长白仔猪胃和小肠发育的作用。采用H E染色、比色、原位杂交和Western Blot等方法,分别检测了小肠黏膜形态;小肠重量、DNA和RNA含量;胃肠消化酶和小肠双糖酶活性;小肠表皮生长因子受体和胰岛素样生长因子-Ⅰ受体表达;小肠黏膜H SP70蛋白表达。本试验结果表明,该剂量表皮生长因子和胰岛素样生长因子-Ⅰ可促进21日龄断奶长白仔猪小肠黏膜形态的发育,激活胃和小肠消化酶和双糖酶,与其相应的受体结合,改善断奶应激。表皮生长因子和胰岛素样生长因子-Ⅰ具有促进早期断奶仔猪胃和小肠发育的作用。

胰岛素样生长因子-Ⅰ促进体外组织工程软骨形成

目的 探讨胰岛素样生长因子 - (IGF- )体外促进以透明质酸 (HA)为支架材料的组织工程软骨形成的能力。 方法 分离培养人关节软骨细胞 ,分为 3组 :1IGF- 组 :HA支架材料 +软骨细胞 +IGF- ;2细胞组 :HA支架材料 +软骨细胞 ;3对照组 :单纯 HA支架材料。各组在 DMEM中培养 ,3、6周停止培养 ,取组织块通过 HE染色判断培养组织的形态 ,采用甲苯胺蓝染色、 型胶原免疫组织化学及 、 型胶原 RT- PCR判断体外组织形成软骨的能力。 结果 IGF- 组和细胞组在第 6周均能形成典型的软骨组织陷窝 ,细胞组的陷窝数量明显低于 IGF- 组 ;对照组不能形成软骨组织。 型胶原免疫组织化学示 IGF- 组阳性表达强于细胞组 ;RT- PCR示 IGF- 组的 型前胶原量明显高于细胞组 (P<0 .0 5 ) ,而 型前胶原的表达量明显低于细胞组 (P<0 .0 5 ) ,差异具有统计学意义。 结论 IGF- 能促进体外构建的组织工程软骨形成 ,并提高其质量。

脐血瘦素、胰岛素样生长因子-Ⅰ与胎儿生长发育

目的揭示脐血瘦素及胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)与胎儿生长发育的关系,探讨其在胎儿生长发育方面的相互作用及临床意义。方法采用放射免疫法测定86例新生儿脐血瘦素、IGF-Ⅰ水平,根据胎龄及出生体重百分位数的关系分为:小于胎龄儿(SGA)组16例、适于胎龄儿(AGA)组41例及大于胎龄儿(LGA)组29例。同时测量新生儿的出生体重、身长、头围、足长、胎盘重量并计算体质指数(BMI)。结果①脐血瘦素水平SGA组与AGA组间差异有统计学意义(P<0.05);脐血IGF-Ⅰ水平AGA与LGA组间差异有统计学意义(P<0.05)。②脐血瘦素及IGF-Ⅰ水平分别与新生儿出生体重、身长、头围、足长、BMI及胎盘重量呈显著正相关(P<0.01),脐血瘦素与IGF-Ⅰ水平亦呈显著正相关(P<0.01)。③脐血瘦素水平与新生儿性别及分娩方式间差异均无统计学意义(P>0.05);脐血IGF-Ⅰ水平与新生儿性别差异无统计学意义(P>0.05),与新生儿分娩方式差异有统计学意义(P<0.05)。结论脐血瘦素、IGF-Ⅰ在调节胎儿生长发育方面起着重要作用,参与胎儿的生长发育过程,可作为评价胎儿生长发育及营养状态的临床指标之一。脐血瘦素、IGF-Ⅰ水平异常可能是引起胎儿宫内生长迟缓和巨大儿发生的原因之一。

胰岛素样生长因子Ⅰ基因在鹅不同发育时期肌肉组织中的表达

采用RT-PCR方法及免疫组织化学方法,检测胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)基因在28,56日龄鹅肌肉组织中的表达和定位情况。结果表明:IGF-Ⅰ mRNA表达于上述2个日龄鹅胸肌和腿肌组织中,主要表达于肌肉组织的肌细胞,表明IGF-Ⅰ可能对鹅肌肉的生长发育有促进作用;且在28日龄胸肌肌细胞和腿肌肌细胞中IGF-Ⅰ的特异性免疫染色强度大于56日龄,表明IGF-Ⅰ基因表达具有时空表达性,且在鹅肌肉组织中早期表达高于后期。

草鱼胰岛素样生长因子-Ⅰ基因在大肠杆菌中的表达

为构建草鱼 (Ctenopharyngodonidellus )胰岛素样生长因子 Ⅰ (IGF Ⅰ )大肠杆菌表达质粒 ,对已克隆到的草鱼IGF Ⅰ基因进行改造 .改造后的基因去除了原cDNA的信号肽和E区序列 ,并在基因的两端分别加入起始密码子和终止密码子 .将改造后的编码草鱼IGF Ⅰ成熟肽基因亚克隆到pBV 2 2 0中 ,构建成表达质粒pBVgIGF7.转化大肠杆菌 (Escherichiacoli)进行表达 .SDS PAGE显示 ,含重组表达质粒的菌株经热诱导后表达出一约 7 5kD的特异蛋白 .表达量占菌体总蛋白的2 0 0 3% ,表达产物主要以包涵体形式存在 .重组蛋白经纯化和复性后 ,采用MTT法测定其对草鱼吻端成纤维细胞PSF和草鱼卵巢细胞CO的促增殖作用 .结果表明 ,所获得的重组草鱼IGF

艾灸大鼠天枢、气海穴对结肠成纤维细胞分泌胰岛素样生长因子Ⅰ、转化生长因子β1的调控作用

目的:研究显示,胰岛素样生长因子Ⅰ和转化生长因子β1与溃疡性结肠炎患者肠纤维化的形成关系密切。实验通过艾灸对大鼠结肠成纤维细胞分泌胰岛素样生长因子Ⅰ、转化生长因子β1的影响,探索艾灸防治溃疡性结肠炎肠纤维化机制。方法:实验于2004-05/2005-07在上海中医药大学实验动物室和国家中医药管理局针灸免疫三级实验室完成。①实验材料:SPF级雄性SD大鼠75只,体质量200g左右。②实验分组及处理:采用免疫学方法加局部刺激制备溃疡性结肠炎大鼠模型,随机将大鼠分为正常组、模型组、隔药灸组、温和灸组和西药组。隔药灸组、温和灸组选取天枢、气海穴分别进行隔药灸、温和灸治疗,西药组柳氮磺胺吡啶溶液灌胃治疗,模型组和正常组仅固定不做治疗。治疗结束后麻醉下处死大鼠,剖取结肠组织,分离并培养结肠成纤维细胞。③实验评估:用酶联免疫吸附法检测各组大鼠成纤维细胞上清液中胰岛素样生长因子Ⅰ、转化生长因子β1含量。结果:每组取8只进入结果分析。①造模大鼠结肠黏膜缺损,溃疡形成,胶原纤维增生,Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原纤维排列紊乱,数量增多;肉芽组织、纤维组织增生。②模型组大鼠结肠成纤维细胞大量分泌转化生长因子β1、胰岛素样生长因子Ⅰ;与模型组比较,隔药饼灸、温和灸组大鼠转化生长因子β1分泌量减少(P<0.05,P<0.01),隔药饼灸、温和灸和西药组大鼠胰岛素样生长因子Ⅰ分泌量减少(P均<0.01)。结论:艾灸大鼠天枢、气海穴能抑制大鼠结肠成纤维细胞分泌促细胞外基质细胞因子胰岛素样生长因子Ⅰ、转化生长因子β1,减少细胞外基质的积聚,达到防治肠纤维化的作用。

人胰岛素样生长因子Ⅰ在大肠杆菌中的表达研究

胰岛素样生长因子Ⅰ（ＩＧＦ－Ⅰ）是一种多功能细胞增殖调控因子，它对许多疾病有较好的治疗作用．为了获得大量的ＩＧＦ－Ⅰ产品，在测定了ＩＧＦ－Ⅰ全长序列的基础上，构建了ＩＧＦ－Ⅰ表达载体ｐＢＶＩＧＦ，经热诱导表达后，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明：含有重组表达质粒的菌株可表达出７．６ｋＤ的蛋白．研究了不同菌株对ＩＧＦ－Ⅰ表达的影响．ＩＧＦ－Ⅰ的表达水平可达１５ｍｇ／Ｌ．重组蛋白主要以包涵体形式存在，进行了初步纯化和复性研究，Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹表明重组蛋白具有ＩＧＦ－Ⅰ的抗原性．并初步建立了ＩＧＦ－Ⅰ生物活性测定方法．

生长激素和胰岛素样生长因子Ⅰ对奶牛乳蛋白合成关键激酶及调节因子mRNA表达量的影响

本试验旨在探讨生长激素(GH)和胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)对体外培养的奶牛乳腺上皮细胞内调控乳蛋白合成的关键激酶及调节因子mRNA表达量的影响。试验对纯化后的荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞进行4种处理,对照组采用无血清生长培养基,试验组在对照组的基础上分别添加GH(100 ng/mL)、IGF-Ⅰ(100 ng/mL)和GH(100 ng/mL)+IGF-Ⅰ(100 ng/mL)。培养24 h后,采用实时定量PCR(RT-qPCR)法测定κ-酪蛋白基因以及调控乳蛋白合成的关键激酶及调节因子的mRNA表达量,并测定生长激素受体(GHR)和胰岛素样生长因子Ⅰ受体(IGF-ⅠR)mRNA表达量。结果表明:体外培养的奶牛乳腺上皮细胞可以表达GHR和IGF-ⅠRmRNA,各试验组均能显著提高κ-酪蛋白(CSN3)mRNA表达量(P<0.05),但未发现GH和IGF-Ⅰ复合存在累积效应;与对照组相比,GH组有提高E74-样转录因子5(ELF5)mRNA表达量的趋势(P<0.10),而IGF-Ⅰ组显著提高了哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和核糖体蛋白S6激酶1(rpS6K1)mRNA表达量(P<0.05),GH+IGF-Ⅰ组未呈现加强作用。结果提示,GH和IGF-Ⅰ可能单独通过影响调控乳蛋白合成的关键激酶及调节因子mRNA表达来调节κ-酪蛋白的合成。

丹参对兔骨性关节炎关节软骨白介素-1β、白介素-6和胰岛素样生长因子-Ⅰ表达的影响

目的:探讨丹参对兔骨性关节炎(OA)模型关节软骨退变的保护作用及其机制。方法:将24只大白兔随机分成2组,即对照组和实验组,每组12只。所有兔通过手术建立右膝关节OA动物模型,对照组的所有兔的右膝关节腔内注射生理盐水0.5ml/kg,实验组所有兔的右膝关节腔内注射丹参注射液0.5ml/kg,手术完毕后当天就注射1次,以后每4天注射1次。在动物OA模型建立后的第10周,将兔处死,收集右侧股骨内侧髁标本,用光学显微镜和透射式电子显微镜观察关节软骨形态学结构改变,用免疫组化技术检测关节软骨组织中IL-1β、IL-6和IGF-Ⅰ蛋白的表达。结果:实验组兔的关节软骨破坏程度明显轻于对照组(P<0.05)。IL-1β、IL-6和IGF-Ⅰ蛋白阳性免疫反应物主要定位于细胞浆,为粗细较为一致的淡红色颗粒。实验组IL-1β蛋白阳性染色强度明显低于对照组(P<0.05)。实验组IL-6和IGF-Ⅰ蛋白阳性染色强度明显高于对照组(P<0.05)。结论:丹参能调节OA关节软骨组织中IL-1β、IL-6和IGF-Ⅰ蛋白的异常表达,对关节软骨具有保护作用。

谷胱甘肽对育肥羊生长性能及生长激素/胰岛素样生长因子-Ⅰ轴调控作用的研究

本文旨在研究谷胱甘肽(glutathione,GSH)对育肥羊生长性能及生长激素/胰岛素样生长因子-Ⅰ(GH/IGF-Ⅰ)轴的影响。试验采用单因素随机区组设计,将12只3月龄东北细毛羊与德国肉用美利奴羊杂交一代育肥羊分为3组,每组4个重复,每组羊公母各占1/2。对照组饲喂基础日粮,试验组1和试验组2分别在基础日粮的基础上添加500和800 mg/kg的GSH,试验期为60 d。测定谷胱甘肽对育肥羊生长性能和血清中GH和IGF-Ⅰ浓度及组织中IGF-Ⅰ mRNA表达量的影响。结果表明:日粮中添加GSH显著提高了试验组育肥羊的日增重(P<0.05),显著降低了试验组育肥羊的料重比(P<0.05),但对育肥羊的日采食量无显著影响(P>0.05);试验20、40和60 d时,试验组育肥羊血清中的生长激素(GH)和胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)水平显著高于对照组(P<0.05);与对照组相比,试验组育肥羊肝脏和背最长肌中IGF-Ⅰ mRNA的表达量有所提高,当GSH添加量达到800 mg/kg时,育肥羊背最长肌中IGF-Ⅰ mRNA的表达量显著高于对照组(P<0.05)。因此,本试验初步得出,日粮中添加GSH促进了肝脏IGF-Ⅰ的分泌,提高了肌肉中IGF-Ⅰ mRNA的表达量,提高血清中GH与IGF-Ⅰ浓度,从而促进了育肥羊的生长。

鹅胰岛素样生长因子-Ⅰ基因的克隆及其mRNA在组织中的表达量变化

利用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)克隆了黑龙江籽鹅IGF-Ⅰ基因,并检测了生长期间该基因mRNA在各组织中的表达量变化。结果表明,鹅IGF-Ⅰ基因与鸡、鸭IGF-Ⅰ基因的同源性分别为97.6%、99.3%;鹅肝组织中IGF-ⅠmRNA的表达水平在30日龄和60日龄较高,而30日龄的表达量极显著高于22、28日龄鹅胚和1日龄籽鹅,显著高于10日龄雏鹅;30日龄雏鹅IGF-ⅠmRNA在肝、卵巢、胸肌、肺、脾、腿肌、垂体、肌胃、肾、心等组织中都有表达,其中肝、卵巢、胸肌、肺的表达量较高。

脂联素、瘦素及胰岛素样生长因子-Ⅰ在胎儿生长发育中的作用

目的探讨脂联素、瘦素及胰岛素样生长因子-Ⅰ（IGF—Ⅰ）在胎儿生长发育中的作用。方法选择2006年10月-2007年10月在本院产科出生的新生儿86例。胎龄31—42周；男57例，女29例。根据不同出生体质量分为小于胎龄儿（SGA）组（16例），适于胎龄儿（AGA）组（41例）及大于胎龄儿（LGA）组（29例）。胎儿娩出后立即断脐留脐血20mL，采用放射免疫分析法测定血清脂联素、瘦素及IGF—Ⅰ水平，同时检测其血脂水平，测量新生儿生长参数，计算体质量指数（BMI）。结果1．新生儿脐血瘦素、脂联素及IGF—Ⅰ水平无显著性别差异。2．脐血瘦素水平在SGA、AGA、LGA3组间有显著差异（P〈0．001），LGA组显著高于AGA及SAG组（P〈10．01，0．001）；脐血瘦素水平与体质量、胎龄、头围、身长、足长及胎盘质量均呈显著正相关（Pa〈0．01）。3．脐血脂联素水平与出生体质量、头围、足长、BMI水平均呈显著正相关（Pa〈0．05）。脐血脂联素水平在SGA、AGA、LGA3组间有显著差异（P〈0．001），LGA组高于AGA及SAG组（Pa〈0．01）。4．LGA组脐血IGF—Ⅰ水平显著高于AGA及SAG组，3组间有明显差异（P〈0．001）；脐血IGF—Ⅰ水平与体质量、头围、身长、足长及胎盘质量均呈显著正相关（Pa〈0．01）。5．脐血瘦素与脂联素、IGF—Ⅰ水平呈显著正相关（Pa〈0．01），脐血脂联素与IGF—Ⅰ水平无明显相关关系（P〉0．05）。6．SGA、AGA、LGA3组血脂水平比较无显著差异（Pa〉0．05）。脐血IGF—Ⅰ水平与三酰甘油水平呈明显负相关（P〈0．05），脐血脂联素、瘦素水平与血脂各指标间均无明显相关性（Pa〉0．05）。结论瘦素与脂联素、IGF-Ⅰ在胎儿宫内生长和发育过程中起重要的调节作用，可作为评价胎儿生长发育及营养状态的临床指标之一。

胰岛素样生长因子-Ⅰ活化组织工程骨修复骨缺损的实验研究

目的探讨胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)对羟基磷灰石(HA)及自体红骨髓(ABM)复合物成骨诱导活性的作用。方法在36只兔桡骨中1/3上制造骨缺损模型后,按随机数字表法分为4组,每组9只,空白组缺损不做任何处理,HA/ABM组、IGF-Ⅰ活化HA组、IGF-Ⅰ活化HA/ABM组组织工程骨分别植入骨缺损处。术后于不同时间点分别行血清碱性磷酸酶(ALP)活性测定、扫描电镜检测评价成骨情况。结果①血清ALP活性:2、4、8、12周时,IGF-Ⅰ/HA/ABM组血清ALP活性显著高于其他各组(P<0.05),且其他组间比较有统计学意义(P<0.05)。②扫描电镜结果:12周时,IGF-Ⅰ/HA/ABM组仅见少量材料,骨缺损区被成熟板层状骨组织充填,材料与正常骨质间已分不清界限,骨缺损大部分修复,其成骨作用明显优于各组。结论 IGF-Ⅰ对以HA为支架材料组织工程骨的成骨诱导作用明显增强。

团头鲂胰岛素样生长因子-Ⅰ基因克隆与分析

胰岛素样生长因子 Ⅰ (IGF Ⅰ )是一单链多肽。在脊椎动物中 ,IGF Ⅰ通过介导生长激素达到促进生长的作用。为研究鲤科鱼类IGF Ⅰ的结构功能及在水产养殖中的潜在应用前景 ,采用逆转录 -聚合酶链式反应 (RT PCR)方法 ,从团头鲂 (Megalobramaamblycephala)肝脏的总RNA中扩增出IGF ⅠcDNA。测定了该基因序列 ,推导其编码的蛋白质序列。克隆的cDNA序列编码包括信号肽和B、C、A、D、E 6个区域的 16 1个氨基酸。E区域分析结果表明所克隆的团头鲂IGF Ⅰ序列属于IGF ⅠEa - 2亚型。

胰岛素样生长因子-Ⅰ对人肾小管上皮细胞转分化及胶原合成的作用

目的探讨胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)在人肾小管上皮细胞转分化及胶原合成中的作用。方法将体外培养的人肾小管上皮细胞HK2分为2组(1)对照组;(2)IGF-Ⅰ组培养液中加入终浓度分别为25、50、100、200μg/L的IGF-Ⅰ。用倒置显微镜观察细胞形态变化,以RT-PCR检测HK2细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、胶原Ⅰα和胶原ⅢαmRNA表达的变化。ELISA方法检测培养上清中胶原Ⅰ的浓度。结果IGF-Ⅰ刺激使HK2细胞由椭圆形变为梭形。不同浓度的IGF-Ⅰ作用于HK2细胞48h后,α-SMA、胶原Ⅰα和胶原ⅢαmRNA水平显著升高(P<0.05);ELISA结果显示,100及200μg/LIGF-Ⅰ组中HK2细胞分泌的胶原Ⅰ显著增加(P<0.05)。结论IGF-Ⅰ在体外能够诱导人肾小管上皮细胞转分化,并促进其胶原的合成。

胰岛素样生长因子-Ⅰ对软骨细胞凋亡的抑制

目的:探讨胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)对软骨细胞增殖及白细胞介素-1(IL-1)诱导软骨细胞凋亡的影响,揭示其抗损伤作用机制,为关节软骨损伤治疗提供理论依据。方法:分离培养人胚胎关节软骨细胞,采用四氮甲基唑蓝(MTT)法测定不同含量软骨细胞增殖活性的变化,利用光镜、电镜、DNA电泳及流式细胞仪测定作为凋亡检测指标。结果:IGF-Ⅰ呈剂量依赖式促软骨细胞增殖,当IGF-Ⅰ含量达50μg/L时,促软骨细胞增殖作用达最大值。IL-1组光镜、电镜下可见典型的细胞凋亡形态学改变,琼脂糖凝胶电泳示特征性的DNA梯状条带,IGF-Ⅰ处理组未见明显凋亡征象。流式细胞仪检测发现,IGF-Ⅰ处理后软骨细胞凋亡率显著降低。结论:IGF-Ⅰ能促进软骨细胞增殖,对IL-1诱导的软骨细胞凋亡具有保护作用。