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山羊胰岛素样生长因子Ⅰ基因多态性及序列分析 被引量:2
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作者 冯涛 赵有璋 +3 位作者 储明星 张英杰 狄冉 方丽 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期26-31,共6页
采用PCR—SSCP技术检测胰岛素样生长因子Ⅰ(insulin like growth factorⅠ,IGF-Ⅰ)基因外显子在性早熟、高繁殖力品种(济宁青山羊)和性晚熟、中等繁殖力(波尔山羊)以及性晚熟、低繁殖力品种(安哥拉山羊和内蒙古绒山羊)中的单... 采用PCR—SSCP技术检测胰岛素样生长因子Ⅰ(insulin like growth factorⅠ,IGF-Ⅰ)基因外显子在性早熟、高繁殖力品种(济宁青山羊)和性晚熟、中等繁殖力(波尔山羊)以及性晚熟、低繁殖力品种(安哥拉山羊和内蒙古绒山羊)中的单核苷酸多态性,分析该基因对济宁青山羊性早熟和高繁殖力的影响;并对济宁青山羊IGF-Ⅰ基因扩增片段进行克隆测序,拼接出山羊IGF—Ⅰ基因4个外显子序列,将济宁青山羊IGF-Ⅰ基因外显子核苷酸序列和推导的氨基酸序列与绵羊、牛、人、大鼠、小鼠和鸡6个物种的序列进行比较。结果表明,IGF—Ⅰ基因4个外显子在所检测的4个山羊品种中均不存在多态性;这7个物种的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为79.6%-99.3%和77.8%~99.4%:与牛、人等6物种相比,济宁青山羊IGF—Ⅰ基因氨基酸序列不存在特有变化。可见,物种间IGF-Ⅰ基因保守性强,1GF-Ⅰ基因可能不是影响济宁青山羊性早熟和高繁殖力的主效基因。 展开更多
关键词 山羊 胰岛素样生长因子ⅰ基因 PCR—SSCP
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胰岛素样生长因子Ⅰ基因在鹅不同发育时期皮肤及毛囊组织中的表达 被引量:11
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作者 孙永峰 史旭升 +2 位作者 隋玉健 刘少西 高光 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期60-63,68,共5页
以吉林白鹅和籽鹅为试验对象,采用RT-PCR及免疫组织化学技术,检测28,56日龄鹅皮肤组织中IGF-Ⅰ基因表达和定位情况。结果表明:IGF-ⅠmRNA表达于上述两个日龄的皮肤组织中。IGF-Ⅰ特异性免疫染色明显表达于28日龄吉林白鹅和籽鹅胸部皮肤... 以吉林白鹅和籽鹅为试验对象,采用RT-PCR及免疫组织化学技术,检测28,56日龄鹅皮肤组织中IGF-Ⅰ基因表达和定位情况。结果表明:IGF-ⅠmRNA表达于上述两个日龄的皮肤组织中。IGF-Ⅰ特异性免疫染色明显表达于28日龄吉林白鹅和籽鹅胸部皮肤毛根鞘的扁平细胞和复层细胞,腹部皮肤内根鞘、外根鞘及毛小皮。在56日龄2鹅种胸部和腹部皮肤扁平细胞、复层细胞、皮质和髓质中也检测到IGF-Ⅰ蛋白免疫活性。在上述鹅种不同日龄不同组织细胞间IGF-Ⅰ蛋白免疫活性的表达强度明显不同。 展开更多
关键词 胰岛素生长因子 皮肤 毛囊 表达
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胰岛素样生长因子Ⅰ基因在鹅不同发育时期肌肉组织中的表达 被引量:9
3
作者 史旭升 孙永峰 +3 位作者 杨童奥 郝哲 隋玉健 吴伟 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期214-217,共4页
采用RT-PCR方法及免疫组织化学方法,检测胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)基因在28,56日龄鹅肌肉组织中的表达和定位情况。结果表明:IGF-Ⅰ mRNA表达于上述2个日龄鹅胸肌和腿肌组织中,主要表达于肌肉组织的肌细胞,表明IGF-Ⅰ可能对鹅肌肉的... 采用RT-PCR方法及免疫组织化学方法,检测胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)基因在28,56日龄鹅肌肉组织中的表达和定位情况。结果表明:IGF-Ⅰ mRNA表达于上述2个日龄鹅胸肌和腿肌组织中,主要表达于肌肉组织的肌细胞,表明IGF-Ⅰ可能对鹅肌肉的生长发育有促进作用;且在28日龄胸肌肌细胞和腿肌肌细胞中IGF-Ⅰ的特异性免疫染色强度大于56日龄,表明IGF-Ⅰ基因表达具有时空表达性,且在鹅肌肉组织中早期表达高于后期。 展开更多
关键词 胰岛素生长因子 肌肉 表达
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大鼠胰岛素样生长因子Ⅰ基因的克隆及表达 被引量:5
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作者 梁东春 郭刚 +1 位作者 左爱军 张镜宇 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第12期1063-1067,共5页
以大鼠染色体DNA为模板 ,PCR分别扩增胰岛素样生长因子Ⅰ (IGF Ⅰ )基因外显子 2编码区和外显子 3编码区 ,并使外显子 2编码区的 3′端与外显子 3编码区的 5′端有相同的 4 0个碱基。采用外显子拼接法 ,以两种扩增产物为模板再次进行PC... 以大鼠染色体DNA为模板 ,PCR分别扩增胰岛素样生长因子Ⅰ (IGF Ⅰ )基因外显子 2编码区和外显子 3编码区 ,并使外显子 2编码区的 3′端与外显子 3编码区的 5′端有相同的 4 0个碱基。采用外显子拼接法 ,以两种扩增产物为模板再次进行PCR ,得到 2 10bp的大鼠IGF Ⅰ基因全编码序列。将此序列克隆入pUC18质粒进一步构建表达型重组质粒pGEX IGF Ⅰ ,并在大肠杆菌DH5α中进行诱导表达。表达产物经SDS PAGE分析及Westernblot检测 ,并经体外实验证明其具有刺激细胞增殖的生物活性。 展开更多
关键词 大鼠 胰岛素生长因子 外显子拼接 基因克隆 表达
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人胰岛素样生长因子Ⅰ基因对兔关节软骨细胞的有效转染及表达 被引量:2
5
作者 刘瑞平 范卫民 +1 位作者 高共鸣 马益民 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期596-598,共3页
目的研究人胰岛素样生长因子Ⅰ(hIGF-Ⅰ)基因构建的真核表达载体质粒对兔关节软骨细胞的有效转染和表达。方法将hIGF-Ⅰ基因构建在pcDNA3.1质粒上,经FuGENE6介导转入兔关节软骨细胞;设未转hIGF-Ⅰ基因软骨细胞作对照。转染后第3天用RT-... 目的研究人胰岛素样生长因子Ⅰ(hIGF-Ⅰ)基因构建的真核表达载体质粒对兔关节软骨细胞的有效转染和表达。方法将hIGF-Ⅰ基因构建在pcDNA3.1质粒上,经FuGENE6介导转入兔关节软骨细胞;设未转hIGF-Ⅰ基因软骨细胞作对照。转染后第3天用RT-PCR技术检测hIGF-Ⅰ、Ⅱ型胶原和聚合素在mRNA水平的表达,用细胞爬片免疫组织化学和Westernblot测定hIGF-Ⅰ在蛋白水平的表达。结果RT-PCR显示hIGF-Ⅰ在转染组中琼脂糖电泳318bp处见到相应的目的条带,而对照组未出现目的条带;Ⅱ型胶原和聚合素在转染和对照组中以β-actin为参照半定量检测分别增加到1.3倍和1.4倍(P<0.05)。免疫组织化学显示转染组细胞爬片有hIGF-Ⅰ表达的棕黄色颗粒,对照组胞浆中未见棕黄色颗粒,转染组胞浆中出现大量的Ⅱ型胶原棕黄色颗粒。Westernblot显示转染组细胞在7.6KDa标记处有hIGF-Ⅰ的蛋白条带出现对照组则没有。结论FuGENE6介导的重组hIGF-Ⅰ基因真核表达载体质粒可有效转染兔关节软骨细胞,在mRNA和蛋白水平上有效表达hIGF-Ⅰ及Ⅱ型胶原,表达的hIGF-Ⅰ能在mRNA水平上增加Ⅱ型胶原和聚合素的合成,保持软骨细胞表型的稳定。 展开更多
关键词 胰岛素生长因子 关节软骨细胞
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转胰岛素样生长因子Ⅰ基因促细胞增殖作用的研究
6
作者 梁东春 张欣 +1 位作者 孙书军 张镜宇 《天津医药》 CAS 北大核心 2004年第11期677-678,i001,共3页
目的:研究转胰岛素样生长因子1(IGF-1)基因对细胞增殖的影响。方法:构建含IGF-1信号肽及成熟肽全部编码序列的重组报告基因载体pTracer-IGF-1,脂质体法将该重组质粒转染入体外培养的C2C12小鼠成肌细胞。以杀稻瘟毒素(blasticidin)筛选... 目的:研究转胰岛素样生长因子1(IGF-1)基因对细胞增殖的影响。方法:构建含IGF-1信号肽及成熟肽全部编码序列的重组报告基因载体pTracer-IGF-1,脂质体法将该重组质粒转染入体外培养的C2C12小鼠成肌细胞。以杀稻瘟毒素(blasticidin)筛选出稳定转染的细胞并进行克隆化,3H-TdR法检测细胞增殖率。结果:与对照组相比,转IGF-1基因细胞的增殖速率明显增加,其培养基亦可显著促进细胞的增殖。结论:所转染的IGF-1基因可在受体细胞内稳定的表达,合成的IGF-1可被分泌至培养基中,在局部发挥促细胞增殖作用。 展开更多
关键词 IGF-1 细胞增殖 报告基因 胰岛素生长因子 转染 克隆化 ^3H-TDR 信号肽 受体细胞 成肌细胞
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携带人胰岛素样生长因子Ⅰ基因的重组腺病毒体外转导培养关节软骨细胞 被引量:6
7
作者 江海良 夏青 +2 位作者 魏振 黄爽 贾静 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2008年第24期4611-4614,共4页
目的:胰岛素样生长因子Ⅰ通常被认为是软骨生长和稳定中最关键的生长因子之一,可以促进软骨细胞合成Ⅱ型胶原和蛋白多糖。应用携带人胰岛素样生长因子Ⅰ基因的重组腺病毒(Adenovirus-human insulin like growth factor-I transgene cons... 目的:胰岛素样生长因子Ⅰ通常被认为是软骨生长和稳定中最关键的生长因子之一,可以促进软骨细胞合成Ⅱ型胶原和蛋白多糖。应用携带人胰岛素样生长因子Ⅰ基因的重组腺病毒(Adenovirus-human insulin like growth factor-I transgene construct,Ad-hIGF-Ⅰ)体外转导培养关节软骨细胞,探讨其在体外促进软骨细胞外基质成分生成的能力。方法:实验于2005-01/2007-04在大连医科大学附属四院骨科实验室完成。分离培养3周龄兔膝关节及股骨头软骨细胞,将受测细胞随机分为转导组与未转导组,以500感染复数的Ad-hIGF-I转导第1代软骨细胞,转导组中的第1,3,5,7代细胞分别为转导后48h,3周,7周和9周的软骨细胞。采用样本碱水解法、阿利新蓝法和酶联免疫吸附方法检测转导组和未转导组的第1,3,5,7代细胞羟脯氨酸、糖胺多糖、胰岛素样生长因子Ⅰ蛋白浓度。结果:①倒置显微镜观察,转导组兔关节软骨细胞生长增殖稳定,至第7代仍旧以三角形、梭形及纺锤形细胞为主,偶见长梭形和树根形细胞,且轮廓清晰,透亮度大,折光性强;而未转导组细胞培养至第4代时即已出现长梭形细胞,自第5代细胞形态几乎全部变成长梭形。②随着培养时间延长和传代次数增加,软骨细胞上清液中胰岛素样生长因子Ⅰ蛋白、羟脯氨酸和糖胺多糖浓度的逐渐降低,转导组软骨细胞均高于同代未转导组细胞(P<0.05)。结论:携带人胰岛素样生长因子Ⅰ基因的重组腺病毒体外转导的关节软骨细胞,可以稳定产生内源性的胰岛素样生长因子Ⅰ,并进而促进软骨细胞分泌Ⅱ型胶原和蛋白多糖。 展开更多
关键词 胰岛素生长因子 转导 细胞培养:软骨细胞 软骨组织工程
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胰岛素样生长因子2结合蛋白2基因多态性与妊娠期糖尿病的关系
8
作者 孙丹华 杨元元 《中南医学科学杂志》 CAS 2024年第2期286-288,共3页
目的分析胰岛素样生长因子2结合蛋白2(IGF2BP2)基因多态性与妊娠期糖尿病(GDM)的关系。方法选择GDM患者84例为GDM组,另选取同期健康孕妇84例为对照组,收集两组一般资料。实时聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性法检测IGF2BP2基因rs440... 目的分析胰岛素样生长因子2结合蛋白2(IGF2BP2)基因多态性与妊娠期糖尿病(GDM)的关系。方法选择GDM患者84例为GDM组,另选取同期健康孕妇84例为对照组,收集两组一般资料。实时聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性法检测IGF2BP2基因rs4402960位点、rs1470579位点和rs11705701位点的多态性。结果GDM组总胆固醇、空腹血糖和空腹胰岛素高于对照组(P<0.05)。与对照组比较,GDM组IGF2BP2基因rs4402960位点GG基因型较少,TT基因型较多,等位基因T频率较高,等位基因G频率较低(P<0.05);rs11705701位点等位基因A频率较低,等位基因G频率较高(P<0.05);而其他基因型和基因频率两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论IGF2BP2基因多态性与GDM发生有关,可通过基因多态性结果评估和筛选GDM高风险人群,以提高对GDM控制。 展开更多
关键词 胰岛素生长因子2结合蛋白2 基因多态性 妊娠期糖尿病
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三皮消痤汤联合火针对肺经风热证寻常型痤疮患者血清脱氢异雄酮 胰岛素样生长因子-1 白细胞介素-4水平及预后的影响
9
作者 付双杏 张宝军 +2 位作者 周蜜 方晓波 王章善 《中国药物与临床》 CAS 2024年第14期885-889,共5页
目的 观察三皮消痤汤联合火针对肺经风热证寻常型痤疮患者血清脱氢异雄酮(DHEA)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、白细胞介素-4(IL-4)水平及预后的影响。方法 选取绍兴文理学院附属医院2022年1月至2023年12月收治的肺经风热证寻常型痤疮患... 目的 观察三皮消痤汤联合火针对肺经风热证寻常型痤疮患者血清脱氢异雄酮(DHEA)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、白细胞介素-4(IL-4)水平及预后的影响。方法 选取绍兴文理学院附属医院2022年1月至2023年12月收治的肺经风热证寻常型痤疮患者80例,按照不同治疗方式分为观察组(42例,三皮消痤汤联合火针治疗)和对照组(38例,火针治疗),2组基础治疗方式相同,经过4周治疗后,比较2组疗效、症状消退时间、DHEA、IGF-1、IL-4和不良反应发生率。结果 治疗4周后,观察组总有效41例(98%)较对照组84%高(P<0.05);观察组皮损(皮疹、结节、粉刺、脓疱)消退时间短于对照组(P<0.001);2组治疗后的DHEA、IGF-1与IL-4水平均降低,且观察组低于对照组(P<0.001);观察组不良反应发生率为5%(2例),对照组为11%(4例),2组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 三皮消痤汤和火针联合治疗寻常型痤疮(肺经风热证)效果显著,症状消退时间缩短,且安全性高,不会加重不良反应。 展开更多
关键词 三皮消痤汤 火针疗法 寻常痤疮 白细胞介素-4 胰岛素生长因子 预后
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不同蛋白质源饲料中添加α-酮戊二酸对杂交鲟幼鱼肝脏谷氨酰胺含量、抗氧化能力及生长激素、胰岛素样生长因子-Ⅰ基因表达的影响 被引量:5
10
作者 王连生 徐奇友 +1 位作者 陈迪 郑荣宁 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期3917-3924,共8页
本试验旨在研究不同蛋白质源饲料中添加α-酮戊二酸对杂交鲟(Acipenser schrenckii♀×Acipenser baeri)幼鱼肝脏谷氨酰胺(Gln)含量、抗氧化能力及生长激素(GH)、胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)基因表达的影响。分别以大豆浓缩蛋白和... 本试验旨在研究不同蛋白质源饲料中添加α-酮戊二酸对杂交鲟(Acipenser schrenckii♀×Acipenser baeri)幼鱼肝脏谷氨酰胺(Gln)含量、抗氧化能力及生长激素(GH)、胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)基因表达的影响。分别以大豆浓缩蛋白和大豆浓缩蛋白+鱼粉为蛋白质源,设2个α-酮戊二酸(AKG)添加量(0和1%),配制4种试验饲料。选取平均体重为(7.65±0.04)g的杂交鲟幼鱼500尾,随机分为4组,每组5个重复,每个重复25尾,养殖周期为8周。结果表明:饲料中添加1%AKG显著提高肝脏Gln含量和谷氨酰氨合成酶(GS)活性(P<0.05),对肝脏碱性磷酸酶(ALP)活性无显著影响(P>0.05)。蛋白质源对肝脏Gln含量、GS活性和ALP活性无显著影响(P>0.05),且蛋白质源和AKG添加量对肝脏Gln含量、GS活性和ALP活性无显著交互作用(P>0.05)。饲料中添加1%AKG显著降低肝脏丙二醛(MDA)含量,显著提高肝脏还原型谷胱甘肽(GSH)含量(P<0.05)。与大豆浓缩蛋白+鱼粉作为蛋白质源相比,大豆浓缩蛋白作为蛋白质源显著提高肝脏GSH含量(P<0.05)。蛋白质源和AKG添加量对肝脏超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性均无显著影响(P>0.05),且蛋白质源和AKG添加量对肝脏各抗氧化指标无显著交互作用(P>0.05)。饲料中添加1%AKG显著提高肝脏GH、IGF-Ⅰ基因的相对表达量(P<0.05)。与大豆浓缩蛋白+鱼粉作为蛋白质源相比,大豆浓缩蛋白作为蛋白质源显著提高肝脏IGF-Ⅰ和GH基因的相对表达量(P<0.05)。蛋白质源和AKG添加量对肝脏GH、IGF-Ⅰ基因的相对表达量无显著交互作用(P>0.05)。综上所述,杂交鲟幼鱼饲料中添加1%AKG可以通过提高肝脏中GS的活性进而提高Gln的含量,通过提高肝脏中GSH的含量进而降低MDA的含量,并可提高肝脏中生长相关基因GH、IGF-Ⅰ的表达。 展开更多
关键词 杂交鲟幼鱼 Α-酮戊二酸 谷氨酰胺 抗氧化 生长激素基因 胰岛素生长因子-基因
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投喂时间影响大菱鲆幼鱼的生长及类胰岛素样生长因子-Ⅰ基因的表达 被引量:4
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作者 王艺超 郑珂珂 +1 位作者 徐后国 梁萌青 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期387-392,共6页
本试验旨在研究投喂时间对大菱鲆幼鱼生长和类胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)基因表达的影响。试验设3个组,分别于早上(06:00)、中午(12:00)、傍晚(18:00)3个不同的时间点投喂大菱鲆幼鱼[初始平均体重为(8.95±0.13)g],每个组3个重复... 本试验旨在研究投喂时间对大菱鲆幼鱼生长和类胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)基因表达的影响。试验设3个组,分别于早上(06:00)、中午(12:00)、傍晚(18:00)3个不同的时间点投喂大菱鲆幼鱼[初始平均体重为(8.95±0.13)g],每个组3个重复,每个重复25尾。养殖试验周期为45 d。结果表明:06:00投喂组大菱鲆幼鱼的增重率和特定生长率显著高于其他2组(P<0.05),3个投喂组间大菱鲆幼鱼的摄食率无显著差异(P>0.05),但06:00投喂组与12:00投喂组的饲料效率显著高于18:00投喂组(P<0.05);06:00投喂组大菱鲆幼鱼肝脏中IG F-ⅠmRNA相对表达量显著高于12:00和18:00投喂组(P<0.05),而投喂时间对大菱鲆幼鱼脑中IGF-ⅠmRNA相对表达量无显著影响(P>0.05)。综上,建议体重8 g左右的大菱鲆幼鱼的投喂时间为06:00。 展开更多
关键词 大菱鲆幼鱼 投喂时间 生长 胰岛素生长因子-基因表达
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草鱼胰岛素样生长因子-Ⅰ基因克隆及序列分析 被引量:10
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作者 白俊杰 叶星 +3 位作者 李英华 李新辉 简清 罗建仁 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期1-4,共4页
采用逆转录 -聚合酶链式反应 (RT PCR)方法 ,从草鱼肝脏的总RNA中扩增出胰岛素样生长因子 I(IGF I)基因序列 ,定向克隆至质粒pUC18。测定了该基因序列 ,推导其编码的蛋白质序列。克隆的cDNA序列编码包括B、C、A、D和E五个区域的 117个... 采用逆转录 -聚合酶链式反应 (RT PCR)方法 ,从草鱼肝脏的总RNA中扩增出胰岛素样生长因子 I(IGF I)基因序列 ,定向克隆至质粒pUC18。测定了该基因序列 ,推导其编码的蛋白质序列。克隆的cDNA序列编码包括B、C、A、D和E五个区域的 117个氨基酸。与鲤IGF I成熟肽比较 ,核酸序列和氨基酸序列的同源性分别为 93.8%和 97.1%。E区域分析结果表明 ,所克隆的草鱼IGF I序列属于IGF IEa 展开更多
关键词 草鱼 胰岛素生长因子 基因克隆 序列分析 RT-PCR
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草鱼胰岛素样生长因子-Ⅰ基因在大肠杆菌中的表达 被引量:10
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作者 叶星 白俊杰 +4 位作者 简清 李新辉 李英华 李凯彬 罗建仁 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期725-732,共8页
为构建草鱼 (Ctenopharyngodonidellus )胰岛素样生长因子 Ⅰ (IGF Ⅰ )大肠杆菌表达质粒 ,对已克隆到的草鱼IGF Ⅰ基因进行改造 .改造后的基因去除了原cDNA的信号肽和E区序列 ,并在基因的两端分别加入起始密码子和终止密码子 .将改造... 为构建草鱼 (Ctenopharyngodonidellus )胰岛素样生长因子 Ⅰ (IGF Ⅰ )大肠杆菌表达质粒 ,对已克隆到的草鱼IGF Ⅰ基因进行改造 .改造后的基因去除了原cDNA的信号肽和E区序列 ,并在基因的两端分别加入起始密码子和终止密码子 .将改造后的编码草鱼IGF Ⅰ成熟肽基因亚克隆到pBV 2 2 0中 ,构建成表达质粒pBVgIGF7.转化大肠杆菌 (Escherichiacoli)进行表达 .SDS PAGE显示 ,含重组表达质粒的菌株经热诱导后表达出一约 7 5kD的特异蛋白 .表达量占菌体总蛋白的2 0 0 3% ,表达产物主要以包涵体形式存在 .重组蛋白经纯化和复性后 ,采用MTT法测定其对草鱼吻端成纤维细胞PSF和草鱼卵巢细胞CO的促增殖作用 .结果表明 ,所获得的重组草鱼IGF 展开更多
关键词 草鱼 胰岛素生长因子- 大肠杆菌 表达 生物活性
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团头鲂胰岛素样生长因子-Ⅰ基因克隆与分析 被引量:6
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作者 白俊杰 劳海华 +2 位作者 叶星 李英华 罗建仁 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期502-506,共5页
胰岛素样生长因子 Ⅰ (IGF Ⅰ )是一单链多肽。在脊椎动物中 ,IGF Ⅰ通过介导生长激素达到促进生长的作用。为研究鲤科鱼类IGF Ⅰ的结构功能及在水产养殖中的潜在应用前景 ,采用逆转录 -聚合酶链式反应 (RT PCR)方法 ,从团头鲂 (Megalo... 胰岛素样生长因子 Ⅰ (IGF Ⅰ )是一单链多肽。在脊椎动物中 ,IGF Ⅰ通过介导生长激素达到促进生长的作用。为研究鲤科鱼类IGF Ⅰ的结构功能及在水产养殖中的潜在应用前景 ,采用逆转录 -聚合酶链式反应 (RT PCR)方法 ,从团头鲂 (Megalobramaamblycephala)肝脏的总RNA中扩增出IGF ⅠcDNA。测定了该基因序列 ,推导其编码的蛋白质序列。克隆的cDNA序列编码包括信号肽和B、C、A、D、E 6个区域的 16 1个氨基酸。E区域分析结果表明所克隆的团头鲂IGF Ⅰ序列属于IGF ⅠEa - 2亚型。 展开更多
关键词 团头鲂 胰岛素生长因子- 基因克隆
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胰岛素样生长因子Ⅰ基因治疗对糖尿病大鼠血糖调节的研究 被引量:7
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作者 段宇 周红文 +1 位作者 汪承亚 陈家伟 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期468-469,共2页
本研究以基因治疗的方法 ,将胰岛素样生长因子Ⅰ (IGF Ⅰ )基因导入实验性糖尿病 (DM)大鼠体内 ,使IGF Ⅰ在动物模型体内得到高效表达 ,DM大鼠血糖显著降低 ,血IGF
关键词 胰岛素生长因子 IGF- 基因治疗 糖尿病大鼠 血糖调节 体内 DM 高效表达
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鹅胰岛素样生长因子-Ⅰ基因的克隆及其mRNA在组织中的表达量变化 被引量:12
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作者 肖翠红 李馨 +2 位作者 佟春玉 颜国华 刘国君 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期216-219,共4页
利用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)克隆了黑龙江籽鹅IGF-Ⅰ基因,并检测了生长期间该基因mRNA在各组织中的表达量变化。结果表明,鹅IGF-Ⅰ基因与鸡、鸭IGF-Ⅰ基因的同源性分别为97.6%、99.3%;鹅肝组织中IGF-ⅠmRNA的表达水平在30日龄... 利用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)克隆了黑龙江籽鹅IGF-Ⅰ基因,并检测了生长期间该基因mRNA在各组织中的表达量变化。结果表明,鹅IGF-Ⅰ基因与鸡、鸭IGF-Ⅰ基因的同源性分别为97.6%、99.3%;鹅肝组织中IGF-ⅠmRNA的表达水平在30日龄和60日龄较高,而30日龄的表达量极显著高于22、28日龄鹅胚和1日龄籽鹅,显著高于10日龄雏鹅;30日龄雏鹅IGF-ⅠmRNA在肝、卵巢、胸肌、肺、脾、腿肌、垂体、肌胃、肾、心等组织中都有表达,其中肝、卵巢、胸肌、肺的表达量较高。 展开更多
关键词 胰岛素生长因子- 半定量反转录聚合酶链反应
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转人类胰岛素样生长因子-Ⅰ基因成肌细胞对骨骼肌急性钝挫伤后Ⅱb型肌球蛋白重链及波形蛋白mRNA表达的影响 被引量:6
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作者 卫宏图 陈世益 +3 位作者 李云霞 陈疾忤 张鹏 李宏云 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期268-272,共5页
目的:观察转人类胰岛素样生长因子-Ⅰ(HumanInsulin -likeGrowthFactor-Ⅰ,hIGF -Ⅰ)基因成肌细胞回输小鼠骨骼肌钝挫伤局部后,对小鼠骨骼肌愈合过程中Ⅱb型肌球蛋白重链(MyosinHeavyChain -Ⅱb ,MHC -Ⅱb)及波形蛋白(Vimentin)mRNA表... 目的:观察转人类胰岛素样生长因子-Ⅰ(HumanInsulin -likeGrowthFactor-Ⅰ,hIGF -Ⅰ)基因成肌细胞回输小鼠骨骼肌钝挫伤局部后,对小鼠骨骼肌愈合过程中Ⅱb型肌球蛋白重链(MyosinHeavyChain -Ⅱb ,MHC -Ⅱb)及波形蛋白(Vimentin)mRNA表达的影响。方法:将90只7~12周雄性C3H小鼠右下肢腓肠肌中段内侧实施急性钝挫伤后,随机分为自然愈合组、单纯成肌细胞注射组和转基因成肌细胞注射组。挫伤后第3天,对单纯成肌细胞注射组、转基因成肌细胞注射组损伤局部分别注射等量单纯成肌细胞和转基因成肌细胞,并于损伤后第1、5、10、2 0、30天取材。检测不同时间点MHC -Ⅱb和VimentinmRNA表达水平,观察比较各组骨骼肌修复情况。结果:(1)在急性骨骼肌钝挫伤修复期,3组小鼠骨骼肌MHC -ⅡbmRNA均明显升高,第2 0天达到峰值。转基因成肌细胞注射组MHC -ⅡbmRNA表达水平最高,其次为单纯成肌细胞注射组。(2 )急性骨骼肌钝挫伤修复过程中,转基因成肌细胞注射组VimentinmRNA的表达水平始终在3组中表达最低。结论:急性骨骼肌钝挫伤修复过程中,注射转基因成肌细胞能提高损伤后MHC -IIbmR NA表达水平,促进肌纤维的增生,加速骨骼肌愈合进程。同时,损伤局部注射转hIGF -Ⅰ基因的成肌细胞后,使得损伤局部VimentinmRNA表达低于另两组。 展开更多
关键词 转人类胰岛素生长因子-1 Ⅱb型肌球蛋白重链 波形蛋白 成肌细胞 修复 胰岛素生长因子- 基因成肌细胞 骨骼肌钝挫伤 肌球蛋白重链 MRNA表达
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不同浓度胰岛素样生长因子-Ⅰ对体外培养奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白和脂肪合成相关基因表达的影响 被引量:6
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作者 王皓宇 秦彤 +3 位作者 郝海生 杜卫华 赵学明 朱化彬 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第7期1-5,共5页
应用Real-time PCR方法检测不同浓度(0、1、10和100ng/mL)胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)处理后的体外培养奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白和脂肪合成相关基因mRNA的相对表达量。结果表明,添加不同浓度IGF-Ⅰ对体外培养的奶牛乳腺上皮细胞IGF-Ⅰ... 应用Real-time PCR方法检测不同浓度(0、1、10和100ng/mL)胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)处理后的体外培养奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白和脂肪合成相关基因mRNA的相对表达量。结果表明,添加不同浓度IGF-Ⅰ对体外培养的奶牛乳腺上皮细胞IGF-Ⅰ受体基因(IGFIR)、IGF-Ⅰ结合蛋白-3基因(IGFBP3)、α-s1-酪蛋白基因(CSN1S1)和κ-酪蛋白基因(CSN3)mRNA的相对表达丰度均无显著影响(P>0.05)。随着IGF-Ⅰ添加浓度的增加,β-酪蛋白基因(CSN2)、乙酰辅酶A羧化酶基因(ACACA)、脂肪酸合成酶基因(FASN)和脂肪酸结合蛋白-3基因(FABP3)mRNA的相对表达丰度显著上调(P<0.05)。提示,IGF-Ⅰ作为一种重要细胞因子参与调节乳腺上皮细胞乳蛋白和乳脂肪相关基因mRNA的表达。 展开更多
关键词 胰岛素生长因子- 乳腺上皮细胞 实时荧光定量PCR 基因表达
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绒山羊表达红色荧光及转胰岛素样生长因子Ⅰ基因体细胞核移植胚胎的制备 被引量:4
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作者 郭旭东 杨东山 +6 位作者 奥旭东 吴侠 李光鹏 王玲玲 宝明涛 雪莲 旭日干 《中国科学(C辑)》 CSCD 北大核心 2008年第12期1152-1159,共8页
利用含有红色荧光和Neor基因双选择标记的IGF1毛囊特异表达载体pCDsR-KI转染绒山羊胎儿成纤维细胞,经G418筛选获得具有红色荧光的IGF1转基因细胞.核移植操作前,通过比较卵母细胞体外成熟培养不同时间的成熟率以及核与极体的距离,确定20... 利用含有红色荧光和Neor基因双选择标记的IGF1毛囊特异表达载体pCDsR-KI转染绒山羊胎儿成纤维细胞,经G418筛选获得具有红色荧光的IGF1转基因细胞.核移植操作前,通过比较卵母细胞体外成熟培养不同时间的成熟率以及核与极体的距离,确定20h为绒山羊卵母细胞的最佳成熟时间.比较了不同激活方法和培养体系对孤雌胚激活效率和孤雌胚早期发育的影响,结果表明:IA23187+6-DMAP组的激活效率和囊胚率(88.7%&21.6%)均稍高于乙醇+6-DMAP组(86.4%&20.4%),但二组相应数据之间差异均不显著(P〉0.05),选择前者作为转基因核移植胚的激活方案;SOFaa和CR1aa两种体外培养体系中,孤雌胚卵裂率(86.8%vs83.9%)和囊胚率(23.1%vs17.2%)均差异不显著(P〉0.05),选择结果较好的SOFaa组.比较了不同电融合参数的融合效果,结果表明:190V/mm处理组结果(62.4%)显著高于130V/mm(32.8%)和200V/mm(42.9%)组(P〈0.05).通过T-SCNT获得转基因重构胚胎203枚,48h卵裂率为79.3%(161/203),第7~9天囊胚发育率为15.3%(31/203).所得到的31枚囊胚中,较强表达红色荧光蛋白的囊胚数为17枚(阳性率为54.8%).随机挑选两枚红色荧光囊胚以PCR法进行鉴定,结果全部为转基因阳性.以上结果显示:(i)表达载体的红色荧光蛋白和Neor基因可以正常表达可获取转基因细胞和阳性转基因胚胎;(ii)所制备转基因囊胚仍有部分不表达红色荧光蛋白,说明即使选择转基因阳性细胞进行核移植所得囊胚也并非全部为转基因阳性,在囊胚期进一步筛选是必要的;(iii)通过TSCNT操作及优化,成功获得了表达红色荧光并同时转有IGF1基因的绒山羊胚胎,为绒山羊的转基因研究提供基础数据. 展开更多
关键词 绒山羊 胰岛素生长因子 毛囊 胎儿成纤维细胞 基因 体细胞核移植
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胰岛素样生长因子Ⅰ基因在正常及糖尿病鼠眼组织中的表达 被引量:10
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作者 刘世全 朱秀安 《中华眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第4期291-295,共5页
用原位杂交技术对正常及糖尿病大鼠眼组织的胰岛素样生长因子Ⅰ基因(insulin-likegrowthfactor-Ⅰ,IGF-Ⅰ)进行了研究。IGF-Ⅰ基因在眼组织的表达呈区域性,视网膜内核层及神经节细胞表达最强;脉... 用原位杂交技术对正常及糖尿病大鼠眼组织的胰岛素样生长因子Ⅰ基因(insulin-likegrowthfactor-Ⅰ,IGF-Ⅰ)进行了研究。IGF-Ⅰ基因在眼组织的表达呈区域性,视网膜内核层及神经节细胞表达最强;脉络膜、视网膜色素上皮细胞及外核层次之;巩膜最弱,角膜未见表达信号。糖尿病眼组织IGF-Ⅰ基因表达显著增强(P<0.05或P≤0.01)。结果表明:整个眼球组织形成了一个IGF-Ⅰ旁分泌、自分泌作用系统;糖尿病眼组织IGF-Ⅰ基因高表达预示IGF-Ⅰ可诱发并加速糖尿病视网膜病变的发生发展。 展开更多
关键词 胰岛素生长因子 基因 糖尿病性视网膜病
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