肝脏卵圆细胞分选与向胰岛β细胞分化研究现状

肝脏卵圆细胞是具有多向分化潜能的干细胞,可转化为胰岛β细胞,为糖尿病的治疗带来了新的希望。目前对于肝脏卵圆细胞的分选主要有Percoll密度梯度离心法、流式细胞技术结合免疫荧光标记单克隆技术(FACS)、免疫磁珠分选技术(MACS)等。分选得到的肝脏卵圆细胞通过一系列转录因子的介导作用可转化为胰岛β细胞,主要的转录因子包括胰腺十二指肠同源盒基因-1(Pdx1)、神经元素3(Ngn3)、神经元分化因子(NeuroD)等,本文从肝脏卵圆细胞的分选和分化等方面对肝脏卵圆细胞向胰岛β细胞分化的研究现状作一综述。

血清微小核糖核酸-374b与2型糖尿病的相关性研究

2型糖尿病（T2DM）是一种严重危害人类健康的疾病，其确切发病机制目前尚未完全明确。微小核糖核酸（miRNAs）是一类长约22个核苷酸、具有调控功能的非编码单链小核糖核酸分子，在转录水平之后调控靶基因的表达。有研究发现，人血清中有比较稳定表达的多种miRNAs，且在T2DM患者血清中发现了许多明显差异表达的miRNAs。循环血miRNAs具有含量丰富、稳定性强、易检测、疾病特异性等多种特点，其中miR-374b在糖尿病的发生发展中起重要作用，但miR-374b在T2DM中的表达情况及其对T2DM发生发展过程中潜在的分子机制尚不明确。

Toll样受体4在脓毒症大鼠胰岛中的表达

目的 研究Toll样受体4（TLR4）在脓毒症大鼠胰岛中的表达变化及其对血糖的影响.方法 SPF级SD雄性大鼠腹腔内注射脂多糖（LPS）5 mg/kg,间隔3h注射第2次,制备脓毒症模型.大鼠被随机（随机数字法）分为正常对照组（n=5）、LPS组（n=5）、抗TLR4抗体组（n=5）和抗TLR4抗体＋LPS组（n=5）,分别采用RT-PCR法、Western-blot法和免疫组化法检测大鼠胰岛TLR4的表达.大鼠给药处理6h后行葡萄糖静脉试验（IVGTT）测定静脉全血葡萄糖和胰岛素水平,计算胰岛素、血糖曲线下面积（AUC）.结果 正常组大鼠胰岛细胞有TIR4表达,LPS处理大鼠6h后胰岛组织中TLR4蛋白和mRNA的表达升高,与对照组比较差异具有统计学意义（P＜0.01）,注射抗TLR4抗体预处理后用LPS刺激,LPS诱导的TLR4蛋白及mRNA水平的升高均被抑制（P＜0.01）.LPS处理后与正常对照组比较,大鼠IVGTT 10、30、60、120 min血糖明显升高,30、60、120 min胰岛素分泌降低（P＜0.01）.抗TLR4抗体干预后能降低30 ～ 120min血糖的升高,改善LPS对胰岛素分泌的抑制（P＜0.01）.结论 脓毒症大鼠胰岛细胞TLR4表达升高,LPS-TLR4系统可能是应激性高血糖的发生机制.

基于胞内cAMP浓度测定融合蛋白GGH活性的改良方法

目的:改良一种基于胞内cAMP浓度变化,用于融合蛋白GGH生物学活性测定的方法。方法:根据融合蛋白GGH是GLP-1类似物,能促进胰岛β细胞增殖,产生胞内第二信使cAMP的原理,利用酶联免疫法测定胞内cAMP的含量。结果:Exenatide或融合蛋白GGH刺激大鼠β胰岛素瘤细胞RIN m5f后,选用100nmol/L IBMX作为cAMP保护剂,用DPBS为药物稀释剂,采用液氮—100℃反复冻融2次裂解细胞,最后用酶联免疫法可稳定的测定上清液中cAMP含量。结论:成功改良了融合蛋白GGH体外高通量生物学活性测定方法。运用此方法可快速鉴定融合蛋白GGH及其它GLP-1类似物的生物活性。