细胞衰老与2型糖尿病胰岛B细胞功能障碍的研究进展

细胞衰老指有复制能力的细胞在应激诱导后发生永久性细胞周期阻滞,是人体衰老的重要病理机制。T2DM是一种增龄性疾病,好发于老年人群。细胞衰老与T2DM的发生关系密切:一方面,细胞衰老导致胰岛素抵抗和胰岛B细胞功能障碍;另一方面,糖脂毒性及炎症微环境等又会促进胰岛B细胞衰老和功能障碍。靶向细胞衰老的治疗可降低糖尿病发生风险,在糖尿病及其并发症的防治中具有重要意义。

胰岛B细胞研究新进展

随着众多学者在糖尿病发病学领域的不懈努力和探索，近年在导致胰岛B细胞功能衰竭及死亡的分子机制及遗传学机制等多个方面均取得了突破性进展。在2007年欧洲糖尿病研究学会（EASD）科学年会上，分3个专题对近期胰岛B细胞研究中取得的新发现新进展进行了报道和讨论，本文也将从这3个方面进行评述。

Ⅱ型糖尿病患者中医辨证分型与胰岛B细胞功能关系的研究

108例Ⅱ型糖尿病患者分为3型,气虚、阴虚、气阴两虚中的胰岛素、C—肽分泌状况均表现为曲线峰度后移,3小时后未能降到正常水平,但分泌水平却明显不同。气虚型分泌明显升高或正常;阴虚型分泌明显减低;气阴两虚型分泌减低,而介于前两型之间。说明Ⅱ型糖尿病患者的辨证分型与胰岛B细胞功能有一定的相关性,为中医辨证分型提供了客观依据。

五味子油对2型糖尿病大鼠胰岛B细胞凋亡的影响

目的:研究五味子油对2型糖尿病大鼠胰岛B细胞的保护作用,探讨其降血糖作用及机制。方法:Wistar雄性大鼠,高脂饮食联合小剂量链脲佐菌素(STZ,30mg.kg-1)间隔2次注射建立2型糖尿病大鼠模型,将模型成功大鼠随机分为糖尿病模型组(DM)和五味子油治疗组(DM+SCO),另设正常对照组(CON)和正常五味子油组(CON+SCO)。药物干预6周后,检测各组动物血清空腹血糖(FBG)、空腹血清胰岛素(FINS)水平;大鼠血清丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性;采用RT-PCR法检测大鼠胰腺组织Bcl-2、Bax和Caspase 3mRNA表达水平。结果:与模型组比较,五味子油治疗组大鼠FBG水平明显下降(P<0.05),FINS水平明显升高(P<0.05);五味子油治疗组大鼠血清MDA含量下降(P<0.05),SOD及CAT活性升高(P<0.05);五味子油治疗组大鼠胰腺组织Bcl-2mRNA表达水平升高,Caspase 3mRNA表达水平下降(P<0.05),Bax表达无明显变化,但Bax/bcl-2比值降低。与正常对照组比较,正常五味子油组大鼠上述指标未出现明显改变。结论:五味子油可通过降低脂质过氧化反应副产物,增强抗氧化物酶活力,调节凋亡相关基因,促进血清胰岛素分泌,从而降低血糖。

大鼠海洛因依赖期间胰岛B细胞形态学和功能变化的研究

目的探讨胰岛B细胞在海洛因依赖期间的可能作用。方法应用免疫组织化学SABC法、图像分析法和放射免疫测定法,观察大鼠海洛因依赖期间胰岛B细胞免疫组织化学反应、光密度及血清胰岛素水平的变化。结果与正常组和盐水组比较,海洛因依赖组大鼠B细胞免疫反应明显增强,染色加深,且以24d时最为显著。图像分析结果表明,海洛因依赖组B细胞的平均光密度较正常和盐水组显著降低(P<0.05),以24 d时间组最低。放射免疫测定结果显示,海洛因依赖组大鼠血清胰岛素(Ins)浓度始终高于正常组和盐水组(P<0.05)。结论胰岛B细胞的变化表明,在海洛因依赖期间,大鼠胰岛B细胞胰岛素的合成增多,分泌增强,参与了机体在海洛因依赖期间的调节过程。

体外诱导小鼠胎肝间充质干细胞向胰岛B样细胞分化的研究

目的:体外分离和定向诱导小鼠胎肝间充质干细胞向胰岛B样细胞分化。方法:无菌条件下从正常C57BL／6J胎鼠肝中分离出间充质干细胞,体外培养传3代后用高浓度葡萄糖培养基以及碱性纤维生长因子(basic fihroblast growth factor,bFGF)和尼克酰胺诱导分化,观察胎肝间充质干细胞诱导前后形态变化;用RT-PCR检测细胞诱导前后胰十二指肠同源异型基因盒1(pancreatic duodenal homeobox-1,PDX-1)、胰岛素原1(proinsulin-1,INS-1)、葡萄糖转运子2(glucose transporter-2,GLUT-2)表达情况;胰岛素免疫细胞化学染色鉴定诱导后细胞胰岛素的表达;在形成胰岛样细胞簇后,用双硫腙做胰岛B细胞特异性染色。结果:RT-PCR显示诱导5 d后PDX-1、INS-1、GLUT-2均有表达,而诱导前的细胞则没有检测到表达;胰岛素免疫细胞化学表明细胞簇内的细胞胰岛素染色强阳性;细胞簇双硫腙染色阳性(每个T-25培养瓶有80-120个)。结论:从胎肝中分离出的间充质干细胞在体外可以定向诱导分化为胰岛B样细胞。

瑞格列奈在胰岛B细胞功能检测中的应用价值

目的 探讨瑞格列奈在胰岛 B细胞功能检测中的应用价值。 方法 对 31例 2型糖尿病患者先行常规口服葡萄糖耐量 -胰岛素释放试验 (OG- IRT,常规法 ) ,次日或第 3日在做 OG- IRT前加服 2 m g瑞格列奈片改良法。测定血清胰岛素并计算曲线下面积。 结果 瑞格列奈试验血清胰岛素水平及曲线下面积为 92 .2 1± 70 .6 9mu/ (h· L ) ,显著高于常规法 3.77± 34.91mu/ (h· L ) ,(P<0 .0 0 1) ;改良法胰岛素曲线下面积最少净增 2 9.6 3% ,最大增加 45 3.6 6 % ,中位数为 95 .2 4%。胰岛素曲线下面积增加值与 BMI呈正相关 ,与空腹血糖呈负相关。 结论 瑞格列奈试验比常规 OG- IRT能更好地反映胰岛 B细胞的储备功能。

2型糖尿病患者体表指标与代谢综合征及胰岛B细胞功能的关系

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者体表指标(AI)与代谢综合征(MS)的相关指标及胰岛B细胞功能的相互关系。方法 450名2型糖尿病住院患者,测量各项体表指标和代谢综合征相关指标,计算出胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),分析T2DM患者体表指标与MS的各项指标以及胰岛B细胞功能的关系。结果 1)2型糖尿病患者随着MS危险因素的增多,体表指标均显著升高。2)2型糖尿病伴MS者与不伴MS者相比,体表指标明显升高。3)偏相关分析显示,2型糖尿病患者的体表指标与HOMA-IR显著相关,与空腹胰岛素(FIns)、C肽(CPT)均无明显相关。结论 1)2型糖尿病患者中肥胖仍是MS发生、发展的关键因素。2)2型糖尿病人群的AI与胰岛素抵抗密切相关。

微囊化胰岛B细胞系体外生长和分泌功能的研究

目的 :研究海藻酸钠 多聚赖氨酸 海澡酸钠 (APA)微囊化胰岛B细胞系BTC6 F7的生长和分泌规律 ,探索其作为生物人工胰岛的可能性。方法 :以微囊静电液滴发生器制作APA微囊化BTC6 F7细胞 ,体外培养并定期测定微囊化细胞的生长和胰岛素分泌。结果 :在实验观察的 90d内 ,BTC6 F7细胞可在微囊内以细胞团的形式生长、存活。囊内细胞总数随培养时间的延长而增加 ,但细胞活率呈下降趋势 ,胰岛素分泌与囊内活细胞数的变化规律一致 ,最初呈上升趋势 ,然后较长时间维持在相对恒定的水平。结论 :本研究所制备的APA微囊化胰岛B细胞可在较长时间内保持生长、存活和分泌功能 ,为进一步发展生物型人工胰岛奠定了基础 。

短期胰岛素强化治疗对初诊2型糖尿病患者的胰岛B细胞功能及胰岛素抵抗的影响

目的:探讨短期胰岛素强化治疗对初诊2型糖尿病(T2DM)患者的胰岛B细胞功能及胰岛素抵抗的影响。方法:采用自身前后对照,对58例初诊T2DM患者接受4周的胰岛素强化治疗,观察治疗前后空腹血糖(FPG)及餐后2h血糖(2hPG)、胰岛素分泌指数(Homa-B)、胰岛素敏感指数(ISI)、胰岛素抵抗指数(Homa-IR)、标准馒头餐试验中30及120min内C肽曲线下面积(AUCcp30、AUCcp120)。结果:治疗4周后,FPG、2hPG明显下降,ISI及Homa-B明显上升,Homa-IR明显下降(P<0.05)。反映葡萄糖刺激的胰岛素分泌第一时相变化及总量的AUCcp30、AUCcp120均明显升高(P<0.05)。结论:短期胰岛素强化治疗有快速稳定血糖和显著改善胰岛B细胞分泌功能的作用,同时对胰岛素抵抗也有一定的改善。

脑损伤后大鼠胰岛B、D细胞和血糖含量的变化

脑损伤后高血糖现象愈来愈受到人们的重视。Sarrat提出海马与胰岛之间存在密切的关系。但脑损伤后大鼠胰岛B、D细胞的变化尚未见报道。本实验通过脑损伤大鼠模型，观察脑损伤后大鼠胰岛B、D细胞的变化，旨在探讨脑损伤对胰岛B、D细胞分泌的影响。……

西格列汀改善2型糖尿病患者胰岛B细胞功能的Meta分析

目的:系统评价西格列汀改善2型糖尿病患者胰岛B细胞功能的效果,为临床提供循证参考。方法:计算机检索Pub Med、Cochrane图书馆、EMBase、中国期刊全文数据库、万方数据库、中文科技期刊数据库和中国生物医学文献数据库,收集西格列汀单药或联合常规方案(试验组)对比安慰剂单用或联合常规方案(对照组)治疗2型糖尿病的随机对照试验(RCT),由两位研究者根据纳入与排除标准独立筛选文献、提取资料,按照Cochrane系统评价员手册5.1.0评价纳入研究的方法学质量后,采用Rev Man 5.3统计软件进行Meta分析。结果:纳入了5项RCT,合计1 253例患者。Meta分析结果显示,试验组患者胰岛B细胞功能指数(Homa-B)变化值[西格列汀单药治疗组:MD=9.21,95%CI(4.16,14.25),P<0.001;联合用药组:MD=7.24,95%CI(0.80,13.68),P=0.03]和胰岛素抵抗指数(Homa-IR)变化值[西格列汀单药治疗组:MD=-0.40,95%CI(-0.44,-0.36),P<0.001;联合用药组:MD=-0.35,95%CI(-0.63,-0.07),P=0.02]均显著优于对照组,差异均有统计学意义。结论:西格列汀在改善胰岛B细胞功能及胰岛素抵抗方面有一定效果。

甲状腺功能亢进症患者的胰岛素抵抗及胰岛B细胞功能状态——附28例分析

目的:观察和分析甲状腺功能亢进症(甲亢)患者的胰岛素抵抗情况及胰岛B细胞功能状态。方法:对28例甲亢患者(甲亢组)行葡萄糖耐量试验检查,测定甲亢组及20名正常人(对照组)的血糖、胰岛素值,并计算2组胰岛素抵抗指数、胰岛B细胞功能指数、胰岛素敏感指数。比较2组的上述指标。结果:甲亢组糖耐量正常4例,糖耐量减低14例,糖尿病10例。甲亢组的胰岛素抵抗指数(自然对数值为0.92±0.27)高于对照组(自然对数值为0.64±0.21);甲亢组的胰岛素敏感指数(自然对数值为-2.93±0.21)低于对照组(自然对数值为-1.57±0.38);甲亢组的胰岛B细胞功能指数(自然对数值为3.84±0.48)低于对照组(自然对数值为4.73±0.39),上述指标2组比较差异均有统计学意义(均为P<0.01)。结论:甲亢患者大部分存在糖代谢异常,对胰岛素敏感性较低,存在胰岛素抵抗现象,胰岛B细胞功能低下。

不同治疗方法对初发2型糖尿病胰岛B细胞功能的影响

目的观察不同治疗方法对初发2型糖尿病胰岛B细胞功能的影响。方法60例新诊断的2型糖尿病患者随机分为A、B两组。在饮食运动治疗的基础上A组给予胰岛素强化治疗,B组给予口服磺脲类药物治疗,疗程2个月。比较两组治疗前后空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2 h PG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素分泌指数(HOMA-IS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、体质量指数(BMI)及静脉注射精氨酸0、2、3、4、5 min时血糖(PG)及C肽(CP)变化。结果两组治疗后FPG、2 h PG、HbA1c、HOMA-IR较治疗前降低(P均<0.01);HOMA-IS及精氨酸刺激后CP分泌较治疗前明显升高(P均<0.01)。治疗后A组HOMA-IR较B组明显降低(P<0.05),A组HOMA-IS及CP峰值较B组明显升高(P均<0.05)。结论胰岛素强化治疗与口服磺脲类药物治疗均能改善新诊断2型糖尿病的胰岛B细胞功能,但胰岛素强化治疗效果更好。

自噬对维持胰岛B细胞正常功能的作用

胰岛B细胞数量减少及分泌胰岛素能力下降是2型糖尿病发病的主要机制之一。新近的研究显示,自噬在保护胰岛B细胞以及维持胰岛B细胞结构、数量、分泌能力、内环境的稳定等方面有重要的作用。自噬已是近年来的研究热点,在肿瘤、神经、衰老等领域研究广泛,但在胰岛B细胞方面的研究起步较晚,相关报道也较少。本文就自噬的概念及自噬在维持胰岛B细胞正常功能方面的作用等作一综述。

膜联蛋白A1对小鼠胰岛B细胞的调控作用

目的探讨膜联蛋白A1(annexin A1,ANXA1)与胰岛B细胞株MIN6细胞增殖的关系。方法应用不同葡萄糖浓度(5.5mmol/L,11.1 mmol/L,16.7 mmol/L,25 mmol/L,33.3 mmol/L)刺激小鼠胰岛B细胞株MIN6细胞,通过CCK-8检测细胞增殖活性的变化,Western blot方法检测ANXA1蛋白的表达变化。经si RNA抑制MIN6细胞ANXA1表达后,分别采用流式细胞仪及Western blot方法观察细胞周期及细胞周期相关蛋白的变化。结果葡萄糖诱导的MIN6细胞增殖活性具有浓度依赖性,在葡萄糖浓度≤25 mmol/L时细胞增殖活性随葡萄糖浓度的增加而增加,葡萄糖浓度33.3 mmol/L时细胞增殖活性较25 mmol/L时下降。Anxa1蛋白表达与细胞增殖活性趋势相同。MIN6细胞转染Anxa1 si RNA后增殖活性下降,S期及G2/M期细胞明显减少,同时细胞周期相关蛋白(Cyclin D1、Cyclin E和CDK2)表达也明显下降。结论 Anxa1可正向调控细胞周期相关蛋白Cyclin D1、Cyclin E和CDK2的表达,进而影响MIN6细胞增殖活性。

血清瘦素水平与胰岛B细胞功能 胰岛素抵抗的关系──附114例检测分析

目的:探讨外周血瘦素(leptin)水平与胰岛B细胞功能、胰岛素抵抗性(insulinresistance,IR)的关系。方法:检测45名正常糖耐量者、33例糖耐量减低者及36例新诊断的2型糖尿病患者的空腹血清瘦素水平,用30分钟特异胰岛素增值与血糖增值的比值(△SI30/△G30)评估胰岛B细胞初期时相胰岛素分泌功能,并应用稳态模型评估法(homeostasismodelassessment,HOMA)评估胰岛B细胞功能(HOMA-B)和胰岛素抵抗性(HOMA-IR),分析不同糖耐量者瘦素水平与胰岛B细胞功能、胰岛素抵抗性的关系。结果:不同糖耐量者的瘦素水平比较无统计学差异;瘦素与性别和体重指数在3组中均呈正相关(r=0.348～0.661,均为P<0.01);瘦素与△SI30/△G30、HOMA-B和HOMA-IR只在2型糖尿病组呈正相关(r=0.321～0.348,均为P<0.05)。结论:不同糖耐量者的血瘦素水平比较无统计学差异;不同糖耐量者的血瘦素水平均与性别和体重指数呈正相关;仅2型糖尿病患者的血瘦素水平与胰岛B细胞功能和胰岛素抵抗性呈正相关。

氨基胍与川芎嗪对糖尿病大鼠胰岛B细胞的保护作用

目的探讨氨基胍与川芎嗪对糖尿病大鼠胰岛B细胞的保护作用。方法应用链尿佐菌素(STZ)制作糖尿病大鼠模型,分为正常对照组、糖尿病未治疗组、川芎嗪治疗组、氨基胍治疗组和氨基胍联合川芎嗪治疗组,于第12周取胰尾组织行免疫组织化学观察。结果氨基胍治疗组、氨基胍和川芎嗪联合治疗组中胰岛B细胞免疫阳性染色的面积及细胞数量明显增加,与糖尿病未治疗组比较差异有显著意义(P<0.05);但川芎嗪治疗组与糖尿病未治疗组比较差异无显著意义(P>0.05)。结论氨基胍和川芎嗪对糖尿病胰岛B细胞具有保护作用,其中氨基胍起主要作用,两者相互协同。