胰腺癌和慢性胰腺炎中基质调控蛋白表达及临床病理意义

【目的】研究胰腺癌和慢性胰腺炎EMMPRIN ,MMP1,MMP9,TIMP1表达及临床意义 ,并探讨其在胰腺癌中表达的相互关系。【方法】5 1例胰腺癌和 10例慢性胰腺炎手术切除标本常规制作石蜡包埋切片 ,上述调控蛋白表达的染色方法均为ABC免疫组化法。【结果】胰腺癌EMMPRIN ,MMP1和MMP9表达阳性率及其评分明显高于慢性胰腺炎 (P <0 .0 1) ,但TIMP1则相反 (P <0 .0 1)。高分化腺癌和无转移癌EMM PRIN、MMP1和MMP9表达阳性率及其评分明显低于低分化腺癌和转移癌 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,TIMP1则相反 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。EMMPRIN、MMP1和MMP9在胰腺癌中表达评分值之间呈密切正相关 (P<0 .0 1) ,但均与TIMP1呈高度负相关 (P <0 .0 1)。【结论】EMMPRIN、MMP1、MMP9和TIMP1表达可反映胰腺癌发生发展、生物学行为、侵袭或转移潜能及预后 ,均为重要生物学标记。EMMPRIN诱导胰腺癌细胞产生MMP1和MMP9;但抑制癌细胞产生TIMP1,同样TIMP1能抑制MMP1和MMP9的活性表达。

急性坏死性胰腺炎临床病理分期和治疗措施

目的探讨急性坏死性胰腺炎（ANP）临床病理分期和治疗措施．方法从1990－12以来，我院对23例ANP病例采用早期手术，切口开放引流，观察胰腺病理形态改变．结果通过对ANP胰腺病理形态改变的观察，将ANP的病理演变过程分为四期：①组织坏死合并急性生理紊乱期：约在术后1wk内，以胰腺坏死、胰外器官损害为主③坏死组织液化继发感染期：发生于术后4d～12d，表现为坏死组织液化感染，体温、血WBC上升，出现全身中毒症状．③胰腺感染坏死脱落及晚期并发症期：术后14d～31d，以全身性细菌性感染及随后的深部霉菌感染或双重感染为特点，并发生胰腺脓肿、胰瘘和MOF等并发症．④胰腺炎恢复期：术后40d以后，胰腺及胰周创面被健康肉芽组织代替，临床表现为严重的全身营养不良．结论治疗以改善微循环、坏死组织清除。

急性胰腺炎不同病理类型基因表达谱差异的研究﹡

目的:联合应用cDNA微阵列和组织微阵列技术并采用计算机辅助处理技术研究正常胰腺组织、MAP、SAP之间基因表达谱,筛选出MAP与正常粘膜以及MAP与SAP之间的差异表达基因。方法:分别抽提正常胰腺组织、MAP和SAP组织的总RNA并纯化mRNA;将各mR-NA逆转录合成以Cy5和Cy3标记的cDNA一链做探针,分别混合后在3张含有4096条双点人类全长基因的芯片上进行杂交。用ScanArray 4000扫描芯片荧光信号图像,用GenePix Pro 3.0软件对扫描图像进行数字化处理和分析。结果3次杂交出现一致性显著异常,表达差异在2倍以上的基因有141条,其中表达上调的74条,表达下调的67条。结论通过基因表达谱差异的比较,提示MAP和SAP在基因水平存在差异,差异2倍以上的141个基因可能与AP的发生和发展以及相关早期炎症的启动和演化有关。

猝死型胰腺炎胰管的病理形态学研究

目的本文旨在探讨猝死型胰腺炎发生猝死的病理学基础．方法应用光镜检查３０例猝死型胰腺炎胰管的病理学改变，另用３０例非胰腺疾患死亡病例的胰腺作对照观察．结果在３０例猝死型胰腺炎中，非炎症性猝死型胰腺炎２９例（９６７％），其中出血坏死型２３例，脂肪坏死型４例，水肿型２例，炎症性猝死型胰腺炎仅见１例．上述类型均出现胰管壁内有胰管存在．对照组３０例，无１例胰管上皮细胞脱落或增生，管腔内未积任何物质，仅见３例胰管壁内有胰管存在．结论胰管结构上的畸异改变，是引起胰腺管道系统遭到破坏，使被激化的蛋白水解酶进入胰腺组织，继之使胰腺组织发生水肿、缺血、出血、坏死的重要原因，也是引起急性胰腺炎猝死的重要原因之一．

降钙素原和C-反应蛋白预测和鉴别大鼠急性胰腺炎并感染的研究

目的探讨血浆降钙素原(PCT)及C-反应蛋白(CRP)对早期预测急性胰腺炎并感染的价值。方法80只SD大鼠随机分为(1)急性胰腺炎并感染组(I组,n=20);(2)急性胰腺炎对照组(C组,n=40),根据成模后腹腔有感染再分为C1和C2组;(3)假手术对照组(S组,n=20),采集成模前(0h)及成模后12,24h及48h时点血液和48h时点胰腺及肝脏组织,用ELISA法检测血浆CRP的浓度,WesternBlot检测血浆和肝脏PCT水平结果⑴B组大鼠腹腔均发生感染,C1组中16例腹腔发生感染,C2组20例未发生感染。⑵B组和C1组血浆CRP水平呈持续上升趋势,在成模后48h均显著高于C2组。⑶B组和C1组血浆及肝脏组织内于成模后48h均能检到较高水平的PCT,且明显高于C2组及S组。结论PCT对急性胰腺炎早期感染具有一定的预测作用;联合血浆CRP检测有助于鉴别胰腺炎是否合并感染。肝脏组织可能是PCT的一个重要合成部位。

氯化钆对急性坏死性胰腺炎肺泡巨噬细胞分泌炎症介质的影响

目的探讨氯化钆(Gdcl3)对急性坏死性胰腺炎(ANP)肺泡巨噬细胞(AM)分泌炎症介质的影响。方法90只成年SD大鼠随机分为正常对照组(C组)、ANP组、Gdcl3处理正常对照组(C+Gdcl3组)、ANPGdcl3预处理组、ANPGdcl3治疗组。每组18只。各组大鼠均经支气管肺泡灌洗获取肺泡巨噬细胞,行支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量、肺组织髓过氧化物酶(MPO)水平、AM分泌肿瘤坏死因子α(TNF-a)和一氧化氮(NO)水平分析;行血气分析,检测肺湿/干重比值,并行肺组织病理学检查。结果C+Gdcl3组各指标与正常对照组相比差异无显著性(P>0.05)。ANPGdcl3预处理组和ANPGdcl3治疗组除动脉血氧分压外各项指标显著高于正常对照组,差异有显著性(P<0.05),但与ANP组相比有降低,差异有显著性(P<0.05)。结论氯化钆可抑制ANP大鼠AM分泌炎症介质,并减轻ANP所致的肺损伤。

热休克蛋白27在大鼠急性胰腺炎中的表达及其对细胞间连接的影响

目的探讨热休克蛋白27(HSP27)在轻型急性胰腺炎(MAP)及重症急性胰腺炎(SAP)大鼠模型中的表达及其对腺泡细胞间连接的影响。方法雄性Wistar大鼠90只,随机分3组:A组为SAP组,B组为MAP组,C组为对照组。3组动物于成模后1,3,8h分批处死。检测血清淀粉酶(SAM),计算胰腺系数;Western-blot半定量分析HSP27蛋白和磷酸化蛋白含量;RT-PCR半定量分析HSP27 mRNA表达;透射电镜观察细胞间连接的变化。结果A,B组SAM水平升高,但B组明显低于A组(P<0.05);A组胰腺系数迅速升高并持续增长,间质水肿严重(P<0.05),细胞间连接损伤;B组间质水肿比A组轻(P<0.05),细胞连接比较稳定;A,B两组HSP27蛋白及其mRNA表达均显著高于对照组(P<0.05),B组明显高于A组(P<0.05);B组HSP27磷酸化蛋白(Ser78)含量显著高于对照组和A组(P<0.05),A组与对照组比较无明显差异(P>0.05)。结论细胞间连接破坏是急性胰腺炎的共同特征,但SAP损伤更严重,可能与细胞间连接调控因子HSP27及其磷酸化表达相对下降。提示HSP在AP发生、发展中具有重要作用。

环氧合酶-2在重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织中表达的实验研究

目的 研究环氧合酶 -2 (COX 2 )在重症急性胰腺炎 (SAP)大鼠胰腺组织中的表达 ,探讨其在SAP发病中的机制。方法 健康成年雄性SD大鼠 40只随机分成重症急性胰腺炎组 (SAP ,n =2 0 )和正常对照组 (NC ,n =2 0 )。术后 12h两组各处死 10只大鼠 ,检测腹水量 ,血清淀粉酶活性、肿瘤坏死因子 -α(TNF α)浓度 ,血浆TXB2 和 6 keto PGF1α浓度及胰腺组织中COX 2的表达 ,光镜观察胰腺的病理变化 ,并进行评分。两组其余 10只大鼠观察 2 4h及 72h存活率。结果 SAP组 12h大鼠胰腺组织中COX 2蛋白表达为强阳性 ,而NC组中无COX 2的表达。血清淀粉酶活性、TNF α浓度 ,血浆TXB2 和 6 keto PGF1α浓度均显著高于NC组 (P <0 .0 1) ,SAP组腹水量生成显著增加 (P<0 .0 1)。光镜病理评分显示 ,SAP水肿、炎症、出血和坏死评分均较NC组有明显升高 (P <0 .0 5 )。SAP组大鼠 2 4h死亡率为 10 0 % ,NC组死亡率 2 4h为 0 ,48h为 10 .0 %。结论 重症急性胰腺炎时有COX 2的高表达和前列腺素 (PGs)升高 ,提示COX 2可能通过促进PGs升高而在SAP发病中起重要作用。

胰腺肿块性炎性病变的临床病理特征

目的探讨胰腺肿块性炎性病变的临床病理特征。方法回顾性分析肿块性慢性胰腺炎37例的临床资料。符合慢性胰腺炎临床诊断标准者为A组,共17例。行Whipple或胰体部分切除5例,各类内引流术12例。缺乏A组特点、曾拟诊为胰腺癌者为B组,共20例。行Whipple手术4例,胆肠内引流术16例。结果A组除见胰腺局部质硬的肿块外,全部胰腺质硬者占88.2%;病理见胰腺纤维化瘢痕及少量炎细胞浸润,并有腺泡萎缩、减少,有残余胰岛及导管扩张或局灶钙盐沉积。B组中95.0%仅见胰腺局部质硬肿块,病理见胰腺纤维组织增生伴有不同程度的慢性炎细胞浸润。33例随访1～12年,均未发现胰腺癌变。结论胰腺局灶性慢性炎症病变具有假瘤性胰腺炎的特点,行胆管空肠吻合术是有效的治疗方法。

急性胰腺炎早期C反应蛋白测定对其分型及预后的临床价值

【目的】分析急性胰腺炎(AP)患者发病早期血清C反应蛋白(CRP)水平与胰腺CT分级及各种影响临床预后因素之间的相关性,探讨AP早期血清CRP对其分型及预后的临床价值。【方法】入选病例43例,发病在12h内,经临床、血清淀粉酶、CT确诊为AP。采用免疫散射比浊法测定患者血清中CRP浓度,7d后评估AP的分型。根据CRP水平将患者分为两组:CRP≤3mg/dL(Ⅰ组)和CRP>3mg/dL(Ⅱ组)。对两组患者CRP与胰腺CT分级及各种影响AP预后的临床指标如血钙、血脂、血糖、血气分析等的相互关系进行分析。【结果】Ⅱ组AP影响预后的各临床指标与Ⅰ组比较发病例数明显增高,差异有显著性(P<0.05),同时CT分级C级以上的重症AP发生率明显高于Ⅰ组,差异有显著性(P<0.05)。【结论】AP发病早期CRP水平测定对早期预测病情,判断患者病情轻重及预后、指导临床治疗有重要的参考价值。

胰腺癌和慢性胰腺炎趋化因子的表达及其意义

目的 目的探讨胰腺癌和慢性胰腺炎组织中白细胞介素8 (IL 8 )、单核细胞趋化蛋白1(MCP 1 )和巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP 1α)的表达及其生物学意义,并探讨三者在胰腺癌中表达的相互关系。方法 采用ABC免疫组织化学法检测5 1例胰腺癌和1 0例慢性胰腺炎手术切除标本的上述各项指标。结果 胰腺癌IL 8,MCP 1和MIP 1α表达阳性率及其评分明显高于慢性胰腺炎(P< 0. 0 1 )。高分化腺癌的IL 8显著高于低分化腺癌(P < 0. 0 5 );未转移癌三者阳性率及评分明显低于伴转移病例(P< 0. 0 5或P < 0. 0 1 )。结论 IL 8,MCP 1,MIP 1α三者表达均为反映胰腺癌发生发展、生物学行为、转移发生及其预后的重要化学趋化因子;三者可能存在着相互影响和共同调控的作用途径。

尿激酶区域动脉灌注对重症急性胰腺炎大鼠胰腺微循环的影响

目的探讨尿激酶区域动脉灌注(LAI)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠微循环的影响。方法将1 2 0只大鼠随机分成4组,每组4 0只。A组为假手术组(S组);B组为SAP组;C组为SAP尿激酶LAI组;D组为SAP生理盐水LAI组(对照组)。以激光多普勒检测大鼠胰腺血流量,以伊文思蓝(Evans B lue)漏出率检测胰腺微循环血管的通透性,同时观察胰腺病理变化。结果(1)胰腺血流量(PBF):A组1 h和3 h的胰腺PBF高于其他3组,差异有显著性(均P<0.0 5);B组1 h和3 h的PBF与D组差异无显著性;C组1 h和3 h的PBF明显高于B组和D组(P<0.0 5)。(2)EB漏出率:B,C,D组胰腺组织EB的漏出率显著高于A组(均P<0.0 5),但B,C,D组之间无统计学差异(均P>0.0 5)。(3)胰腺组织病理评分:术后1,3 h时,C组评分明显高于A组(P<0.0 5),但明显低于B,D组(均P<0.0 5),B,D组之间无明显差异(P>0.0 5)。结论尿激酶LAI能改善SAP大鼠胰腺微循环,但不能完全阻止SAP的病理演变。

急性胰腺炎大鼠血浆C肽、胰岛素、胰高糖素的变化及其意义

目的观察急性胰腺炎大鼠血中C肽(CP)、胰岛素(INS)、胰高糖素(GG)和血糖水平,以揭示胰岛内分泌细胞的功能变化。方法将120只大鼠随机平均分为A组(急性胰腺炎)和B组(假手术对照组),每组60只。用放射免疫分析法测定大鼠血中CP,INS和GG水平,同时测定血糖值。大鼠剖腹后肉眼观察胰腺形态学变化,取胰腺标本行组织病理学检查。结果制模9h后病理检查示A组大鼠均表现为重型急性胰腺炎。A组CP于术后9h,INS于术后15h和GG于术后12h开始明显高于对照组(P<0.01,P<0.05,P<0.05)。结论(1)急性胰腺炎时大鼠血中CP和INS水平可反映胰岛B细胞功能受损;CP能更准确、更及时地反映胰岛B细胞受损程度,并与病理学变化同步。(2)GG水平可反映胰岛A细胞功能;急性胰腺炎时A细胞可能比B细胞更易于受到破坏。

急性胰腺炎大鼠脾脏核因子κB表达的意义

目的探讨脾脏在急性胰腺炎(AP)发病中作用。方法实验大鼠随机分成4组:假手术组,脾切除组,AP组,脾切除+AP组。制模后3,6,12h分批处死动物,取材待检。光镜下观察胰腺组织病理改变并进行病理学评分。采用免疫组织化学方法检测大鼠脾脏NF-κB(nuclear factor-κB)p65活化表达水平。结果脾切除+AP组6,12h胰腺病理学评分均低于AP组(6h:7.83±0.753 vs 9.67±1.211;12h:9.67±0.816 vs 13±0.894)(P<0.01);AP大鼠模型中脾脏NF-κBp65活化阳性表达3h即明显(46.967±1.148),6h最强(56.333±1.588),12h表达减弱(36.900±0.756),与假手术组(3.400±0.800)差异均有显著性。结论脾脏可以明显促进炎症介质的产生和释放,在AP发病中起重要作用。

攻下清热活血中药对重症胰腺炎大鼠胰腺组织NF-κB表达的影响

目的:观察攻下清热活血中药对重症胰腺炎大鼠胰腺组织NF-κB表达的影响。方法:3.5%牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射建立大鼠模型,造模结束后,分别以不同剂量的攻下清热活血中药灌胃治疗,以奥曲肽皮下注射为对照,均每8小时1次,共3次。取胰腺组织HE染色观察大鼠胰腺组织学改变,免疫组化检测胰腺组织中NF-κBp65的表达。结果:模型组大鼠胰腺组织病理评分明显高于正常对照组(P<0.01);应用大、小剂量中药治疗后大鼠胰腺组织病理评分较模型组明显下降(P<0.01)。模型组大鼠胰腺组织NF-κBp65表达明显高于正常对照组(P<0.01);应用中药大剂量治疗后大鼠胰腺组织NF-κBp65表达较模型组明显下降(P<0.05)。结论:攻下清热活血中药能明显改善重症胰腺炎大鼠胰腺组织的病理学改变,抑制大鼠胰腺组织的NF-κBp65表达可能是其作用机理之一。

他克莫司对重症急性胰腺炎大鼠肺损伤的治疗作用

目的观察他克莫司(Tacrolimus,FK506)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肺损伤的潜在治疗作用并探究其机制。方法健康雌性SD大鼠54只,随机分为对照组(C组)、SAP组(S组)、SAP+Tacrolimus治疗组(ST组)。检测3组大鼠术后3,6,12h血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)及基质金属蛋白酶9(MMP-9)水平、支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白含量、肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性,并计算存活率,观察肺组织及胰腺组织的病理变化。结果S组血清TNF-α及MMP-9水平和BALF蛋白含量及肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性均较对照组显著升高(P<0.01);与S组比较,ST组12h后上述指标均明显降低[TNF-α:(171.31±19.58)vs(243.17±26.19);MMP-9:(1658.32±27.49)vs(2987.34±34.53);MPO:(2.75±0.22)vs(11.27±0.49);BALF:(631.58±57.25)vs(1987.39±158.34)](均P<0.01),ST组存活率高于S组(P<0.01)。组织病理切片提示S组胰腺、肺组织损伤随病情进展而逐渐加重;ST组较S组减较。结论Tacrolimus可有效降低SAP大鼠肺损伤的严重程度,能提高其存活率,对SAP有一定的治疗作用。其机制可能与减少肺脏的毛细血管渗透性、抑制中性粒细胞(PMN)释放MPO和MMP-9及抑制TNF-α等炎症介质的释放有关。

胆胰液与肠道隔离对大鼠血浆脑肠肽及胰腺组织学变化影响的研究

目的 探索胆汁或 /和胰液与肠道隔离对大鼠血浆脑肠肽含量和胰腺炎症变化程度的影响。方法 观察对比胆胰管结扎组 (A组 )及胆胰管加胆总管结扎组 (B组 )、胆胰管结扎加胆总管结扎及胆汁内引流组 (C组 )、胆总管结扎组 (D组 )和对照组 (E组 )血浆胆囊收缩素八肽 (CCK OP)及生长抑素 (SS OP)在不同时点的含量及胰腺组织学变化。结果 A ,B ,C ,D组血浆CCK OP及SS OP在术后 3h明显高于E组 (P <0 0 5) ;A ,B组明显高于C ,D组 (P <0 0 5)。A ,B组之间及C ,D组之间无明显差异 (P >0 0 5)。术后 6h及 2 4h ,A ,B ,C ,D组血浆CCK OP及SS OP含量均降至正常值。A ,B组血浆淀粉酶含量在各个时点均明显高于正常值 (P <0 .0 5)。A ,B组间无明显差异 (P >0 0 5)。C组血淀粉酶高于D ,E组 (P <0 .0 5) ,但明显低于A ,B组 (P <0 .0 5)。D ,E组血浆淀粉酶均无明显升高。A ,B组胰腺呈明显水肿及渗出 ,胰腺炎症记分明显高于C ,D ,E组 (P <0 0 5) ,A ,B组之间无明显差异 (P <0 0 5)。C组胰腺轻度肿胀 ,但无炎症变化。结论 胆汁和胰腺同时与肠道隔离后血浆CCK OP及SS OP升高幅度明显大于单纯胆汁或胰液与肠道的隔离 ,并可致胰腺炎症改变 ;胆汁是否返流至胰管与胰腺的炎症变化程度无明显关系。

硫酸软骨素对ANP大鼠胰腺细胞氧化应激损伤及细胞间连接的影响

目的探讨硫酸软骨素(CS)预处理对大鼠急性坏死性胰腺炎(ANP)及其组织氧化应激损伤的影响。方法雄性W istar大鼠9 0只随机分3组:A组为ANP组;B组为CS组;C组为假手术组。3组动物于术后3 0m in,1 h,3 h,6 h,1 2 h分批处死。检测血清淀粉酶(SAM)、计算胰腺系数、胰腺组织中MDA、GSH、SOD和ATP含量。透射电镜观察细胞间连接的变化。在激光共聚焦显微镜下观察E-cadherin在细胞内分布、定位的变化。W estern-blot进行E-cadherin蛋白半定量检测。结果A,B组SAM水平升高,但B组明显低于A组。A组胰腺组织中GSH,SOD,ATP明显下降(P<0.0 1),MDA明显升高(P<0.0 1)。B组GSH,SOD,ATP下降幅度较小,MDA升高幅度小,与A组差异均有显著性(均P<0.0 5)。A组胰腺系数迅速升高并持续增长(P<0.0 1);细胞间连接损伤;E-cadher-in弥漫分布于胞浆内,其蛋白含量持续下降(P<0.0 5),与B,C组比较,均有显著性差异。结论在实验性ANP早期,胰腺组织中内源性抗氧化物质显著下降,脂质过氧化增加,能量耗竭,使细胞间连接复合体损伤从而引起胰腺水肿。CS可明显减轻ANP大鼠胰腺细胞氧化应激损伤及能量耗竭,缓解E-cadherin的降解,稳定细胞连接从而减轻胰腺水肿。