急性呼吸窘迫综合征患者血清α1-抗胰凝乳蛋白酶和α1-抗胰蛋白酶表达水平及临床意义

目的 探究血清α1-抗胰凝乳蛋白酶(alpha-1-antichymotrypsin,AACT)和α1-抗胰蛋白酶(alpha-1-antitrypsin,AAT)在急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)患者中的表达情况及二者的临床意义。方法选取2019年1月~2022年12月四川绵阳四〇四医院收治的84例ARDS患者作为疾病组,另选取同时期在四川绵阳四〇四医院进行体检的84例健康人作为对照组。采用酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检查血清AACT和AAT表达水平。采用Kaplan-Meier法分析ARDS患者血清AACT和AAT表达与预后的关系。采用COX回归分析ARDS患者预后影响因素。采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析血清AACT和AAT表达对ARDS患者预后的预测价值。结果 疾病组血清AACT(14.02±2.87ng/ml),AAT(4.76±1.19g/L)表达水平均高于对照组(9.56±2.11ng/ml,2.92±0.24g/L),差异具有统计学意义(t=11.475,13.892,均P <0.05)。ARDS患者中AACT与AAT高表达组生存率[40.00%(18/45),39.02%(16/41)]分别低于AACT与AAT低表达组生存率[84.62%(33/39),81.40%(35/43)],差异具有统计学意义(χ^(2)=17.436,15.797,均P <0.001)。并发下呼吸道感染(HR=3.188,P=0.013)、使用血管活性物质(HR=2.656,P=0.045)、免疫抑制药物(HR=6.118,P=0.001)、发病至治疗时长(HR=5.202,P=0.005)、急性生理与慢性健康评分Ⅱ(acute physiology and chronic health score Ⅱ,APACHE Ⅱ)(HR=5.368,P=0.003)、血清AACT(HR=3.976,P=0.009)和AAT(HR=4.773,P=0.008)水平均为ARDS患者30天死亡的危险因素,氧合指数(oxygenation index,OI)(HR=0.402,P=0.007)、有创机械通气时间(HR=0.461,P=0.013)为保护因素(P <0.05)。血清AACT与AAT联合预测ARDS患者预后不良的ROC曲线下面积(area under the curve,AUC)(95%CI)为0.920(0.841~0.968),高于血清AACT与AAT单独预测[0.778(0.675~0.862),0.793(0.691~0.874)],差异有统计学意义(Z=2.456,2.466,均P <0.05)。结论 ARDS患者血清AACT与AAT水平均升高,二者均与患者30天生存预后密切相关,二者均对ARDS患者预后具有一定预测价值,且二者联合的预测价值更高。

Bt抗性和敏感棉铃虫幼虫中肠类胰蛋白酶和类胰凝乳蛋白酶基因克隆及半定量测定

克隆了Bt-Cry1Ac抗性和敏感棉铃虫幼虫中肠类胰蛋白酶和类胰凝乳蛋白酶基因,并进行了半定量RT-PCR测定.定量结果显示,类胰蛋白酶和类胰凝乳蛋白酶在不同龄期棉铃虫中肠表达量存在差异,其中在5龄棉铃虫体内转录水平最高,3龄棉铃虫次之,而在4龄棉铃虫中肠内转录水平最低.此外,相同龄期的抗性品系棉铃虫体内的类胰蛋白酶和类胰凝乳蛋白酶转录水平明显高于敏感品系棉铃虫.中肠类胰蛋白酶和类胰凝乳蛋白酶的mRNA表达量的升高,可能与抗性棉铃虫对Bt杀虫蛋白的抗性演化有关.

无胰蛋白酶抑制剂大豆新品种中豆28号的选育及栽培技术研究

中豆２８号是采用未变性聚丙烯酞胺凝胶电泳（Ｎａｔｉｖｅ－ＰＡＧＥ）技术，对杂种后代胰蛋白酶抑制剂缺失检测进行多年辅助选择育成。其突出特点是早熟、高产、稳产、优质、抗病、综合性状优异。

胰蛋白酶与胰腺疾病

胰蛋白酶为胰腺独有的肽链内切酶。急性胰腺炎时血清免疫反应性胰蛋白酶浓度显著升高,且与病情严重程度相关,放射免疫分析法测定血清免疫反应性胰蛋白酶诊断急性胰腺炎其敏感情和特异性皆较测定血清淀粉酶为优;重度慢性胰腺炎、胰岛素依赖性糖尿病患者血清胰蛋白酶浓度减低;胰腺癌患者血清胰蛋白酶值变化不一;囊性纤维化患者血清胰蛋白酶值出生时升高,后随年龄增加而渐降低,2岁后常低于正常水平。

鱼精蛋白对人结肠肥大细胞IgE依赖性与非依赖性类胰蛋白酶释放的调节

目的 :探讨鱼精蛋白对人结肠肥大细胞IgE依赖性与非依赖性类胰蛋白酶释放的调节。方法 :人结肠组织经酶消化后 ,细胞成分用全HBSS重新悬浮。激发过程在LP4 试管中、 37°C条件下完成。用酶联免疫吸附试验方法测定类胰蛋白酶水平。结果 :促分泌剂抗IgE抗体和离子载体钙 (CI)均可明显刺激人结肠肥大细胞类胰蛋白酶的释放。鱼精蛋白浓度在<10 μg mL时可以剂量依赖性的方式抑制抗IgE抗体和CI诱导的类胰蛋白酶释放 ,但是 ,浓度为 10 0 μg mL时 ,作用则相反。在 37°C条件下同结肠细胞预培养 2 0min ,1μg mL的鱼精蛋白可明显抑制抗IgE抗体和CI诱导的类胰蛋白酶释放 ,而 10 μg mL的鱼精蛋白则起相反的作用。结论 :小剂量鱼精蛋白可以抑制肥大细胞IgE依赖性与非依赖性类胰蛋白酶的释放 。

胰蛋白胨对HCV基因工程抗原的稳定作用

在间接ELISA法检测HCV抗体过程中,当HCV基因工程抗原通过包被过程固相化后,用两种不同的封闭液分别封闭聚苯乙烯微孔酶标板,比较封闭后的酶标板在37℃放置3d和6d后的相对稳定性数据.结果表明:在封闭液中使用胰蛋白胨可显著提高基因工程抗原的稳定性.

新型胰蛋白胨葡萄糖培养基用于透析用水细菌检测的临床适用性多中心研究

目的明确一种新型胰蛋白胨葡萄糖(tryptone glucose extract agar,TGEA)培养基用于透析用水细菌检测的临床适用性。方法分别在4家血液透析中心的水处理系统出水口、回水口、血液透析机(进水软管连接到透析机的位置)及稀释后的透析液等4个点取样,使用TGEA涂布法(20℃,168h)、TGEA薄膜过滤法(20℃,168h)和营养琼脂培养基(37℃,48h)作为对照培养基,以新型TGEA培养基(20℃,168h)作为验证培养基,进行细菌培养并在培养结束后进行细菌菌落计数。结果 TGEA涂布法、TGEA薄膜法和验证培养基的Log10(菌落计数)3者间无显著性差异,均高于营养琼脂培养基(F=3.346,P=0.025);菌落检出率TGEA涂布法、薄膜法和验证培养基均高于营养琼脂培养基,但多组间比较未见显著性差异(χ~2=4.267,P=0.234);Bland-Altman分析显示验证培养基与TGEA涂布法和薄膜法的一致性好;验证培养基与TGEA涂布法和薄膜法菌落计数比值在0.5~1.5范围内。结论新型胰蛋白胨葡萄糖培养基与经典TGEA涂布法和TGEA薄膜过滤法一致性好,操作简便,全过程可在常规环境下完成,具有良好的临床适用性。

牛胰蛋白酶制备工艺的改进及其对基因工程人胰岛素前体的酶切作用

目的对牛胰蛋白酶制备工艺进行改进,制备高纯度牛胰蛋白酶,并对其酶切基因工程人胰岛素前体的作用进行考察。方法采用粗制后先色谱分离再活化的方法对传统工艺进行改进,对传统工艺制备样品和改进工艺制备样品中的胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的比活力进行测定和比较;进一步采用这2种样品对基因工程人胰岛素前体进行酶切,对酶切作用进行比较。结果传统工艺制备样品中胰蛋白酶比活力为212.5 U·mg-1,胰凝乳蛋白酶比活力为20.4 U·mg-1;而改进工艺样品中胰蛋白酶比活力为240.4 U·mg-1,胰凝乳蛋白酶比活力为0.14 U·mg-1。传统工艺制备样品酶切基因工程人胰岛素前体目标产物纯度质量分数为16.3%,改进工艺制备样品酶切基因工程人胰岛素前体目标产物纯度质量分数为32.2%。结论粗制后先进行SP色谱可实现胰蛋白酶原和胰凝乳蛋白酶原较好的分离,该方法适合于高纯度胰蛋白酶的制备,制备的胰蛋白酶适合作为工具酶进行基因工程人胰岛素前体的酶切。

胃蛋白酶-胰蛋白酶两步体外消化法评定豆粕粉碎粒度

选用1.0、1.5、2.0、2.5和3.0 mm筛孔孔径的筛片粉碎得到粒度为432、505、637、717、805μm的豆粕,然后制成粉状配合饲料和颗粒饲料。对豆粕及不同粒度基础配制的粉状配合饲料和颗粒料分别进行胃蛋白酶-胰酶体外模拟酶解法测定消化率。试验结果表明:随着筛片孔径从1.0 mm扩大到3.0 mm,豆粕粉碎样品的粒度也从432μm增大到805μm,筛孔孔径与粒度间具有线性关系(P<0.01);选用浓度为70mg/mL胃蛋白酶和16 mg/mL胰蛋白酶进行体外模拟消化,随豆粕粒度的增加,豆粕、粉状配合饲料、颗粒料体外干物质(DM)、粗蛋白质(CP)消化率均随豆粕粉碎粒度的增加均呈现降低。豆粕和颗粒料的体外消化率随豆粕粉碎粒度减小呈线性提高(P<0.01),但粉状配合饲料消化率随豆粕粉碎粒度的变化未出现明显的线性规律(P=0.443、P=0.113)。505μm组和637μm组均可得到较高的消化率,但考虑到加工成本问题,637μm可作为豆粕在仔鸡颗粒料最适粉碎粒度,即2.0 mm为制作仔鸡颗粒料的粉碎机筛片最佳筛孔孔径。

改良胰蛋白胨大豆肉汤培养基的应用效果

评估GB 4789.11-2014《食品安全国家标准食品微生物检验β型溶血性链球菌检验》中改良胰蛋白胨大豆肉汤培养基的质量。选取国内三家(标记为A、B、C)和国外一家(标记为D)培养基生产商的胰蛋白胨大豆肉汤培养基(商品化脱水合成培养基)和相应添加剂,使用目标菌(乙型溶血性链球菌FSCC225016)和非目标菌(大肠埃希氏菌ATCC25922),依据GB4789.28-2013《食品安全国家标准食品微生物检验培养基和试剂的质量要求》中选择性增菌培养基的定性测试方法进行质量评估。同时不加添加剂进行试验。国内A、B和C三家改良胰蛋白胨大豆肉汤培养基中目标菌浊度值均为0,非目标菌浊度值为0;未加试剂的培养基目标菌浊度值均为0,非目标菌浊度值为0。国外D改良胰蛋白胨大豆肉汤培养基中目标菌浊度值为2,非目标菌浊度值为0;未加试剂的培养基目标菌浊度值为2,非目标菌浊度值为1。国内A、B、C三家的改良胰蛋白胨大豆肉汤培养基质量评估证明是胰蛋白胨大豆肉汤培养基(不加添加剂)基础成分的问题;国产胰蛋白胨大豆肉汤培养基质量有待提高。

α_1-抗胰糜蛋白酶和α_1-抗胰蛋白酶对肝癌的诊断价值

对２０例原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）组织蜡块进行连续切片，采用ＡＢＣ免疫组化技术，检测α１－ＡＣ、α１－ＡＴ在癌组织表达情况。结果显示此二项标志物在肝癌组织的表达阳性率分别达到８５％和８０％，对照组正常肝组织仅为２０％，说明α１－ＡＣ、α１－ＡＴ同ＡＦＰ一样可作为肝癌辅助诊断标志物。

胰蛋白胨辅助合成TiO2及其光催化性能

为通过绿色合成途径制备高结晶度且高比表面积的TiO_2光催化剂,以胰蛋白胨为模板,采用溶胶凝胶法制备了具有多孔结构的TiO_2粉体.用X射线衍射仪、激光粒度仪、N_2-吸脱附、透射电镜、紫外可见漫反射、激光共聚焦显微镜和热重等技术对样品进行表征,并通过对活性艳蓝KN-R的紫外光催化降解效果评价样品的光催化性能.结果表明,煅烧法去除胰蛋白胨模板后,得到具有多孔结构的锐钛矿相TiO_2,比表面积为156.338 m^2/g,光照120 min后降解率达到93.22%,样品结晶度及活性艳蓝KN-R的光催化降解效果均得到提高.

肝活检病理学诊断α-1抗胰蛋白酶缺乏症1例

患者,男性,47岁,河南籍人,主因＂目黄、尿黄,伴间断咳嗽、气短2个月余＂入院。患者于2个月前因咳嗽、气短,在当地医院检查诊断为＂胸腔积液＂,给予抗生素（具体药名不详）治疗4d稍有好转,后出现目黄、尿黄,就诊于另一所医院检查肝功能异常,TBil 137.0μmol/L.

分离猪糜、胰蛋白酶

从牛胰中提取制得的糜蛋白酶和胰蛋白酶,1980年已被收载入美、英药典中,在医药上用于治疗各种炎症,炎性水肿,血肿,炎性粘连,血栓,溃疡,祛痰等疾病,其应用日益广泛。从猪胰中提取糜蛋白酶和胰蛋白酶的制备方法,在实验室曾有报导,但还未在生产上得到应用。去年,我们试用 CM 纤维素从猪胰中直接提取分离出糜蛋白酶和胰蛋白酶。

利用绿鳍马面鲀纯排骨制成的国产胰蛋白胨

本品以绿鳍马面鲀Cantherines modlestus (Gunther)加工剔除出的非食用部分——排骨为原料,经酶水解、精制、干燥而成。与英国OXOID用胰酶水解干酪素制得的L_(42)胰蛋白胨,从一般理化分析,氨基酸(包括色氨酸)含量测定,微生物学应用方面进行了对比,并阐述了分析、试验方法、分析结果与应用效果。

一种提取胰蛋白酶及胰凝乳蛋白酶的简单方法

胰蛋白酶及胰凝乳蛋白酶都是用途较为广泛的生化物质,广泛存在于动物的胰脏中。这些酶在治疗静脉炎及蛇伤等方面有独特功效;在清疮、眼科手术等中有特殊作用。同时,在化工、科研等方面也有较广泛的应用。本文介绍一种直接从动物胰脏中提取胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的简单方法。

从猪胰残渣中提取胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶

我国目前生产胰岛素普遍采用酸醇法,用该法提取胰岛素理论和实验都证实,胰蛋白酶原除了少部分被提入胰岛素的酸醇液中之外,大部仍残留在胰渣中,因此完全可以用胰渣制取结晶胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶。根据本文作者实验结果,每5千克胰渣中可提得0.

磺胺甲基异噁唑作配基的高效亲和色谱分离胰凝乳蛋白酶和胰蛋白酶

用磺胺甲基异噁唑作配基、大孔硅胶为基质的高效亲和色谱分离纯化胰凝乳蛋白酶及胰蛋白酶。20多种蛋白质和酶在该柱上无特异性吸附。磺胺甲基异噁唑在硅胶上的键合量为4．3mg／g；该亲和填料对胰凝乳蛋白酶吸附量为9．6mg／g；两者之间的亲和解离常数K1／M为1×103mol／L。

α_1－抗胰糜蛋白酶和α_1－抗胰蛋白酶对肝癌的诊断价值

α_１－抗胰糜蛋白酶和α_１－抗胰蛋白酶对肝癌的诊断价值董恒，林莹原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）在全世界约占恶性肿瘤的４％，居男性恶性肿瘤第七位，女性第九位，在我国居恶性肿瘤第三位。亚临床期病人五年生存率为１９．５％，有临床表现就诊者仅为１．７％［１］。故肝...

记忆与学习的脑化学研究 Ⅱ.海马内注射胰蛋白酶与胰凝乳蛋白酶对大白鼠暗箱迴避模式记忆的影响

本实验选择了胰凝乳蛋白酶与胰蛋白酶,它们同属水解酶,能够内切蛋白质与肽类底物的某些键位。26只刚成年的雄性大鼠分作三组:生理盐水/不巩固组(NS/NC)、胰蛋白酶/不巩固组(T/NC)与胰凝乳蛋白酶/不巩固组(CT/NC)。 实验结果表明,双侧海马内注射(AP_2L_2H_4与AP_4L_3H_5)胰凝乳蛋白酶与胰蛋白酶后,对暗箱廻避(DBA)模式记忆有不同的影响。胰蛋白酶注射后,该记忆保持明显降低,而胰凝乳蛋白酶注射后仍可巩固。所用的实验剂量大致为半致死剂量的三分之一。