脂联素通过A20/NLRP3/caspase-1途径抑制脂多糖诱导的小胶质细胞炎症反应

目的探讨脂联素(adiponectin,APN)抑制脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小胶质细胞炎症反应的机制。方法以未干预组作为对照,外源性APN干预1 h后LPS刺激小胶质细胞复制小胶质细胞炎症模型,将细胞分为对照组、APN组、LPS组和LPS+APN组。分别采用q-PCR和ELISA法检测各组细胞中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)mRNA的表达和分泌水平;Western blotting检测各组细胞核因子-κB调节蛋白3(tumor necrosis factorα-induced protein 3,TNFAIP3/A20)、含NLR家族PYRIN域蛋白3(NOD-,LRR-and pyrin domain-containing 3,NLRP3)和胱冬肽酶-1(caspase-1)的表达。采用基因沉默技术敲除小胶质细胞A20后,APN干预,再次通过Western blotting检测各组细胞A20、NLRP3和caspase-1的表达。结果APN干预后,LPS+APN组细胞TNF-α和IL-1β的mRNA转录水平(P=0.018;P=0.009)和分泌量(P=0.0001;P=0.0001)较LPS组明显降低,并且A20蛋白表达明显增加、NLRP3和caspase-1蛋白表达降低(P=0.001;P=0.003;P=0.006)。敲除小胶质细胞A20可以逆转APN对NLRP3和caspase-1的下调作用(P=0.012;P=0.024)。结论APN对LPS诱导的小胶质细胞炎症反应有抑制作用,其作用可能是通过A20抑制NLRP3和caspase-1表达来实现的。

芍药苷对急性脑梗死大鼠小胶质细胞激活调节的神经元焦亡的作用

目的研究芍药苷对急性脑梗死(ACI)大鼠神经元焦亡的影响。方法36只SD大鼠随机分为3组,假手术组、脑缺血组、芍药苷组(10mg·kg^(-1)),每组12只。中动脉急性脑缺血造模前连续给药1w,再灌注24h后检测神经功能,取脑组织用于免疫荧光、免疫组化及免疫印迹检测。结果急性脑缺血-再灌注成功造成大鼠神经功能损伤,缺血区梗死显著;脑中小胶质细胞激活显著,神经元焦亡明显;炎性小体(NLRP3)活化增加,胱冬肽酶-1(Caspase-1)与白细胞介素-1β(IL-1β)表达上调;与脑缺血组相比,芍药苷组大鼠神经功能评分显著降低(P<0.05),脑梗死面积显著减少(P<0.05),Iba1表达显著下调(P<0.05)且神经元状态显著改善(P<0.05);此外,芍药苷组NLRP3、Caspase-1与IL-1β表达显著减少(P<0.05)。结论芍药苷通过抑制NLRP3与Caspase-1活化,减少小胶质细胞激活,抑制神经元焦亡,改善ACI介导的神经功能损伤。

NLRP3炎性小体与小鼠间质性膀胱炎的相关性研究

目的通过建立小鼠间质性膀胱炎(IC)模型,探讨Nod样受体蛋白3(NLRP3)炎性体在IC中的作用和机制,进而为IC的治疗寻求新靶点。方法 C57BL/6J小鼠40只,随机分成4组:空白对照组(生理盐水注射)10只,IC模型组(腹腔注射环磷酰胺,150mg/kg,24h后观察各项指标)10只,BHB对照组(每12h注射NLRP3炎性小体抑制剂BHB,125mg/kg,3次,第3次注射BHB2h后腹腔注射环磷酰胺150mg/kg)10只,IC治疗组(IC+NLRP3抑制剂处理)10只。HE染色观察病理学特征,RT-PCR和Western blot检测间质性膀胱炎小鼠膀胱中NLRP3,caspase-1和IL-1β表达及其激活情况。结果环磷酰胺注射诱导NLRP3,caspase-1和IL-1β表达增加和活化。间质性膀胱炎小鼠膀胱体积增大、充血水肿,膀胱湿重显著增加,粘膜层细胞破坏,粘膜下层明显增厚,炎症细胞浸润增多,而BHB预处理的小鼠上述情况明显好转。结论 NLRP3炎症小体与间质性膀胱炎密切相关,可能为IC临床治疗的重要干预靶点。

青葙皂苷对小鼠心肌梗死的保护作用及机制研究

目的研究青葙皂苷对小鼠心肌梗死的保护作用,并探讨其作用机制。方法将100只C57/B6小鼠随机分为正常对照组(5%西黄蓍胶溶液)、模型对照组(5%西黄蓍胶溶液)、青葙皂苷小剂量(10mg·kg^-1·d^-1)、中剂量组(30mg·kg^-1·d^-1)和大剂量组(90mg·kg^-1·d^-1)。除正常对照组外其他4组小鼠均结扎冠状动脉左前降支建立心肌梗死模型。各组C57/B6小鼠造模前1周开始给药,造模后继续给药4周,采用Vevo2100系统检查小鼠心功能,酶联免疫吸附法测定血清白细胞介素(IL)-1β、IL-18、心肌肌钙蛋白T(cT-nT)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)和乳酸脱氢酶(LDH)水平,心脏切片经2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色后测定心脏梗死面积,Western blot检测心肌组织核转录因子-κBp65(NF-κBp65)、隐热蛋白(NLRP3)、凋亡相关点样蛋白(ASC)和Caspase-1p45蛋白的表达。结果(1)青葙皂苷可呈剂量依赖性降低心肌梗死小鼠左室收缩末期内径(LVESD)和左室舒张末期内径(LVEDD),升高左室射血分数(LVEF)和左室短轴缩短率(LVFS),差异均有统计学意义(P<0.05);(2)青葙皂苷可呈剂量依赖性降低心肌梗死小鼠血清cT-nT、CK-MB和LDH水平(P<0.05);(3)青葙皂苷可呈剂量依赖性降低心肌梗死小鼠血清IL-1β和IL-18水平(P<0.05);(4)青葙皂苷可呈剂量依赖性抑制心肌梗死小鼠的心肌梗死面积(P<0.05);(5)青葙皂苷可呈剂量依赖性抑制心肌梗死小鼠心肌NF-κBp65、NLRP3、ASC和Caspase-1 p45蛋白表达(P<0.05)。结论青葙皂苷对心肌梗死具有保护作用,其作用可能与其调控NLRP3/ASC/Caspase-1信号通路有关。

炎性小体在脑梗死病程中的作用

脑梗死(cerebral infarction,CI)是一种高致残及致死率的缺血性脑血管疾病,炎症反应在其发生和发展中起到了关键的作用。炎性小体是由胞浆内模式识别受体(pattern recognition receptor,PRRs)参与装配的多蛋白复合物,是固有免疫系统的重要组成部分之一。脑梗死的炎症反应由多种分子通过复杂途径进行调节,炎性小体在其中扮演重要角色。炎性小体和白细胞介素(interleukin,IL)-1可随细胞死亡释放到胞外,发挥传递炎症信号和引发炎症反应的作用,因此有必要就炎性小体在脑梗死病程中的作用进行总结与分析。

右美托咪定对老年腹腔镜胆囊切除术患者术后认知功能影响

目的探讨右美托咪定对老年腹腔镜胆囊切除术患者术后认知功能的影响。方法选取安徽省第二人民医院自2018年6月至2021年4月收治的124例拟行腹腔镜胆囊切除手术的老年患者为研究对象。随机将患者分为A组和B组,每组各62例。B组采用右美托咪定辅助麻醉;A组给予等容量生理盐水。比较两组患者术后1、3、7 d的认知功能障碍(POCD)发生率。比较两组患者术前及术后1、3、7 d的血清白细胞介素(IL)-1β、IL-18及单个核细胞(PBMCs)中NOD样受体蛋白3(NLRP3)mRNA、胱冬肽酶-1(Caspase-1)mRNA的表达情况。结果B组术后1、3、7 d的POCD发生率均低于A组,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者术后1、3、7 d的IL-1β、IL-18水平均高于术前1 d,但B组低于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者术后1、3、7 d的NLRP3 mRNA、Caspase-1 mRNA表达均高于术前1 d,且A组高于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论右美托咪定可下调NLRP3 mRNA、Caspase-1 mRNA表达,抑制NLRP3/Caspase-1通路,降低血清IL-1β、IL-18水平,降低老年腹腔镜胆囊切除手术患者POCD发生风险。